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MICROBIOLOGÍA EN ALIMENTOS
TEMA:
Metabolismo Catabólico de los Lípidos
PROFESORA:
MSc. María Fernanda Morales Romo Leroux
INTEGRANTES:
FECHA DE ENTREGA:
30/08/2017
TÉRMINO:
2017 - 2018
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Índice:
INTRODUCCIÓN................................................................................................................3
INVESTIGACIÓN................................................................................................................4
CONCLUSIONES............................................................................................................. 35
BIBLIOGRAFÍA................................................................................................................. 40
ANEXOS…………………………………………………………………………………………………...... 41
REUNIONES……………………………………………………………………………………………....….43
2
INTRODUCCIÓN
Todos los seres vivos están compuestos por biomoléculas a las que podemos encontrar en
forma de carbohidratos, lípidos, proteínas, ácidos nucleicos. Los lípidos son biomoléculas
compuestas principalmente por carbono, hidrógeno y oxígeno, aunque también pueden
contener otros elementos como nitrógeno, azufre y fósforo. Tienen como característica principal
que son moléculas hidrofóbicas, sin embargo, existen lípidos de naturaleza anfipática es decir
aquellos que tienen una porción hidrofóbica y otra hidrofílica.
En el presente trabajo mostraremos una investigación acerca del metabolismo en lípidos el cual
está ampliamente relacionado con la degradación de los triacilglicéridos, llevando a cabo
reacciones catabólicas para la posterior degradación de moléculas complejas en moléculas
más sencillas siendo a la vez reacciones exergónicas de las cuales se obtiene gran cantidad de
energía. Y también reacciones anabólicas para la posterior síntesis de moléculas complejas,
las cuales requerirán energía.
3
INVESTIGACIÓN
3.1 MECANISMO METABÓLICO MICROBIANO PARA LA
UTILIZACIÓN DE LÍPIDOS PRESENTES EN UN MEDIO
DE
CULTIVO
DESCRIPCIÓN:
Las bacterias toman los lípidos para su metabolismo del medio externo, es decir los que
están presentes en un medio de cultivo determinado, no sin antes descomponerlos en sus
monómeros constituyentes que son los ácidos grasos y glicerol, gracias a la acción de
una lipasa, que rompe los enlaces esteres entre los ya mencionados constituyentes.
Químicamente hablando los lípidos tienen una gran subdivisión, pero dentro de las más
importantes están las grasas neutras, las cuales a su vez son acilglicéridos, dentro de los
cuales están los triglicéridos. Estos están conformados por ésteres del glicerol y ácidos
grasos. Los microorganismos utilizan los triglicéridos después de la hidrólisis del enlace
éster llevada a cabo por enzimas extracelulares llamadas lipasas, y esta reacción
ocasiona la formación de glicerol y ácidos grasos, estos productos pueden atravesar la
membrana bacteriana y así ser utilizados como recursos.
En primer lugar se debe dar una ruptura de los enlaces principales de las grasas para que
los productos puedan atravesar la membrana bacterial y así ser utilizados como recursos.
De esta ruptura se originan el glicerol y los ácidos grasos.
La distribución de ácidos grasos en las posiciones C-1 y C-2 del glicerol en los fosfolípidos
está en constante flujo, debido a la degradación de los fosfolípidos y a la remodelación
continua de los fosfolípidos que se sucede cuando estas moléculas están en la
membrana.
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HIDRÓLISIS CATALÍTICA:
Las grasas, específicamente los triglicéridos, son ésteres que se forman en la reacción de
glicerol y ácidos grasos. Como de este modo los microorganismos no pueden utilizarlas
para nutrirse, excreta una enzima llamada lipasa. Esta enzima no es muy selectiva e
hidroliza el enlace éster. Esta reacción libera glicerol y ácidos grasos sin diferenciar el
largo de la cadena y se produce a nivel extracelular.
Por otra parte los fosfolípidos son hidrolizados por otras enzimas específicas llamadas
fosfolipasas, que son específicas para sus sustratos en diferentes posiciones en los
fosfolípidos, y se les asigna una letra según el enlace éster que rompen. Las fosfolipasas
A y B liberan ácidos grasos, pero las fosfolipasas C y D rompen enlaces éster del fosfato
y, en consecuencia son un tipo de enzima muy diferente. El resultado de la acción de una
lipasa es la liberación de ácidos grasos y glicerol.
Los ácidos grasos y glicerol son atacados tanto anaeróbica como aeróbicamente por
diferentes microorganismos que contengan en su sistema enzimático la llamada lipasa.
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Una vez roto el enlace éster, los ácidos grasos libres pueden ser degradados para obtener
carbono, energía o ambas cosas, o bien ser reutilizados en la biosíntesis de diversos
lípidos, incluso de la clase a la que pertenecían antes de su liberación. Pero en este
trabajo nos enfocaremos solo en las reacciones a nivel catabólico.
Como dijimos anteriormente lo que obtenemos al final de la ruptura de los enlaces esteres
son los ácidos grasos y el glicerol. Los dos tienen destinos muy diferentes, el primero
sufre una beta oxidación y el segundo pasa directamente a la segunda etapa de la
glucólisis, pero con una previa transformación a D-Gliceraldehido 3 fosfato.
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ACTIVACIÓN DE LOS ÁCIDOS GRASOS
La reacción de tioesterasa da como resultado la liberación de ácidos grasos, pero las
modificaciones siguientes de esos ácidos grasos, y su incorporación a los lípidos de
membrana, requieren un paso de activación, donde se convierten en tioésteres de la
coenzima A (formas activas de alta energía del grupo acilo) en una reacción dependiente
de ATP y catalizada por la acil-CoA sintetasa.
El ácido graso se une a la coenzima A (CoASH), reacción que consume dos enlaces de
alta energía del ATP.
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La pirofosfatasa es tan eficaz desde el punto de vista catalítico, que las concentraciones
intracelulares del pirofosfato son inferiores a 10^-6 M. por tanto, la acción combinada de la
acil-CoA sintetasa y de la pirofosfatasa asegura que el cambio estándar de energía libre
sea muy negativo, lo cual favorece la síntesis del éster de coenzima A del ácido graso.
Cada una de las distintas enzimas son específicas para determinada longitud de la
cadena de ácidos grasos: corta(C<6), mediana (de C6 a C12), larga (>C12) o muy larga
(>C16). El mecanismo de la reacción de activación es igual que el de la síntesis de la
acetil-CoA a partir de acetato y CoA.
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Destino del Glicerol
El glicerol es absorbido como tal y rápidamente sufre las siguientes transformaciones:
9
Transporte de Acil-CoA graso al interior de las mitocondrias.
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La carnitina se encarga de llevar los grupos acilo al interior de la matriz mitoncondrial por
medio del siguiente mecanismo.
1. La enzima carnitina
palmitoiltransferasa I (CPTI) de la
membrana mitocondrial externa
elimina la coenzima A de la
molécula de acil-CoA y, a la vez,
la une a la carnitina situada en el
espacio intermembrana, originado
acilcarnitina; el CoA queda libre
en el citosol para poder activar
otro ácido graso.
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3. La carnitina se devuelve al espacio intermembrana por la proteína transportadora y
reacciona con otro acil-CoA, repitiéndose el ciclo.
El Acetil CoA formado de la β-oxidacion, es oxidado hasta CO 2 y H2O a través del ciclo de
Krebs y la fosforilación oxidativa.
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3.2 RUTA METABÓLICA O RUTAS METABÓLICAS USADAS
POR LOS MICROORGANISMOS PARA LA PRODUCCIÓN DE
ENERGÍA A PARTIR DE LÍPIDOS.
DESCRIPCIÓN:
El primer paso es la oxidación del ácido graso por la Acil-CoA deshidrogenasa. Se forma
el doble enlace trans- , a través de la des-hidrogenación u oxidación dependiente del FAD
cuyo resultado es la formación de Acil-CoA, α-β insaturada.
El siguiente paso es la hidratación del enlace entre C-2 y C-3. Esta reacción es estéreo-
específica, formando solo el isómero L. Formando así el L-3-Hidroxiacil-CoA
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3er Paso.- Oxidación por NAD+ (nicotinamida adenina Dinucleótido)
El tercer paso es la oxidación del L-3-hidroxiacil CoA por el NAD+, lo que convierte el
grupo hidroxilo (–OH) en un grupo cetona (=O).
Ruptura del enlace C - C en una reacción de tiólisis catalizada por la -cetoacil-CoA tiolasa
(a menudo llamada solamente tiolasa) para formar acetil-CoA y un nuevo Acil-CoA con
dos átomos de carbono menos que el original.
La mayor parte de los ácidos grasos tienen una cantidad par de átomos de carbono. Los
ácidos grasos de cadena impar son sintetizados por bacterias y algunos otros
organismos.
Estos ácidos de cadena impar se oxidan con la misma secuencia de reacciones que los
ácidos grasos de cadena par, pero el producto de la escisión tiolítica final es Propionil-CoA
(CoA con un grupo acilo con C3), y no acetil-CoA (CoA con un grupo acilo con C2). La
primera reacción es catalizada por la Propionil-CoA carboxilasa, enzima dependiente de la
biotina que incorpora el bicarbonato a la Propionil-CoA para producir la D-metilmalonil-
CoA. La metilmalonil-CoA racemasa cataliza la conversión de la D-metilmalonil-CoA en su
isómero L. Por último, la metilmalonil-CoA mutasa cataliza la formación del Succinil-CoA.
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v
Para la oxidación de los ácidos grasos insaturados se requieren dos enzimas además de
las necesarias regularmente para la oxidación de los ácidos grasos saturados. La
oxidación de la coenzima A derivada del linoleato (18:2 cis, cis-9,12-octadecadienoato).
Como todos los ácidos grasos poliinsaturados, el linoleoíl- CoA tiene dobles enlaces, tanto
en los carbonos impares como en pares (sus dobles enlaces están separados por un
grupo metileno). Los ácidos grasos no saturados son sustratos normales para las enzimas
de la ruta de la b-oxidación, hasta que un doble enlace en carbono impar de la cadena
acortada del ácido graso interfiere con la catálisis. En este ejemplo, tres rondas de la b-
oxidación convierten el linoleoíl-CoA en la molécula con C12 de 12:2 cis, cis-3,6-
dienoílCoA (paso 1). Esta molécula tiene un doble enlace cis-3,4, y no el doble enlace
trans-2,3 normal que se produciría durante la b-oxidación de los ácidos grasos saturados.
El intermedio cis-3,4 no es un sustrato para la 2-enoíl-CoA hidratasa, ya que la enzima
normal de la b-oxidación es específica para la Acil-CoA trans, y además el doble enlace
está en mala posición para la hidratación.
El doble enlace inadecuado se arregla, de 3 a 2 para producir la molécula con C12 12:2
trans, cis-2,6-dienoíl CoA en una reacción catalizada por la 3 ,2 -enoíl-CoA isomerasa
(paso 2). Este producto puede volver a entrar a la ruta de la b-oxidación, y se puede
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completar otra ronda de la b-oxidación, dando la molécula con C10 10:1 cis-4 -Acil-CoA
(paso 3). La primera enzima de la ruta de la b-oxidación, la Acil-CoA deshidrogenasa,
actúa sobre este compuesto y produce la molécula con C10 10:2 trans, cis-2,4-dienoíl-
CoA. Este dieno, estabilizado por resonancia, resiste la hidratación. La 2,4-dienoíl-CoA
reductasa cataliza la reacción, dependiente de NADPH, del dieno (paso 5) para producir
una molécula con C10 y un solo doble enlace (10:1 trans-3 -enoíl CoA). Este producto
(como el sustrato en el paso 2) actúa sobre la 3, 2 -enoíl-CoA isomerasa para producir un
compuesto que continúa en la ruta de la b-oxidación. Nótese que la isomerasa puede
convertir los dobles enlaces, tanto el cis-3 como el trans-3, y formar el compuesto
intermedio trans-2. La oxidación de un ácido graso mono-insaturado con un enlace cis-3 y
trans-3 al mismo tiempo en un carbono con número impar (por ejemplo, oleato) requiere la
actividad de la isomerasa, pero no la reductasa, además de las enzimas de la b-oxidación.
El oleoíl (18:1 cis-3) CoA pasa por tres ciclos de la b-oxidación y forma tres moléculas de
acetil-CoA y el éster de CoA del ácido (12:1 cis-3). Entonces, la 3, 2 -Enoil-CoA isomerasa
cataliza la conversión de la Acil-CoA de 12 carbonos en una trans-2 Acil-CoA de 12
carbonos, que puede tener la b-oxidación.
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17
BALANCE DE ENERGÍA NETA DE LA Β-OXIDACIÓN
Usando como ejemplo el ácido mirístico se explicará el balance para aclarar confusiones.
Como el grupo acetil del acetil CoA tiene dos carbonos, dividimos el número de carbonos
del ácido graso original entre 2.
Sigamos con el ácido mirístico: primero debe activarse a miristil-CoA, esto requiere de 1
molécula de ATP, pero como esta es hidrolizada a AMP + 2 (P), energéticamente se
considera que se necesitan 2 ATP. Luego entra en la β-oxidación:
1ra vuelta:
2da. Vuelta:
18
3ra vuelta
4ta vuelta
Produce un acil CoA de 6 carbonos y un acetil CoA + NAD H.H+ + FADH2
5ta vuelta
6ta vuelta
Pero el acil CoA de 2 carbonos es un acetil CoA, así que no hacen falta más vueltas.
7 acetil CoA
6 NADH.H+
6 FADH2.
Ahora multiplicamos el número de NAD H.H+ y de FADH2 por el número de ATP que cada
uno rinde.
Siguiendo nuestra convención de que cada NAD H.H+ rinde 3 ATP en la cadena
respiratoria y cada FADH2 rinde 2 ATP, entonces tenemos:
6 NAD H.H+ x 3 = 18
6 FADH2 x 2 = 12
Total 30
19
Ese es el rendimiento energético de la β-oxidación del ácido mirístico (14 Carbonos) pero
recordemos que también se produjeron 7 acetil CoA que cuando sean oxidadas hasta CO 2
y agua en el ciclo de Krebs también producirán ATP.
Si la pregunta fuera:
¿Cuantos ATP se obtienen en la β-oxidación de un ácido graso de 14 carbonos?
Asumiendo que cada NADH.H+ rinde 3 ATP en la cadena respiratoria y cada FADH2 rinde
2 ATP, en la β-oxidación de ese ácido graso se obtendrían 29 ATP + 7 acetil CoA
susceptibles de rendir más ATP cuando entren al Ciclo de Krebs.
Total:
20
Ejemplo
# acetil CoA:
12 carbonos ácido graso/2 = 6 acetil CoA
# vueltas en β-oxidación:
# ATP en β-oxidación:
5 (#vueltas) x 5 = 25
Hemos discutido como los ácidos grasos de cadena impar, en el último round de la β-
oxidación en lugar de liberar dos unidades de Acetil CoA, liberan una unidad de Acetil CoA
y otra de Propionil CoA.
Durante la β-oxidación se liberan tres unidades de Acetil CoA (dos carbonos cada una):
C-C-C-C-C-C-C C-C-C/C-C/C-C
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Durante la β-oxidación se liberan dos unidades de acetil CoA y una unidad de Propionil
CoA (dos unidades de dos carbonos y una de tres carbonos)
Mientras los Acetil CoA son oxidados en el Ciclo de Krebs, la Propionil CoA es utilizada
en la formación de Succinil CoA, proceso que consume 1 ATP (-1ATP). Éste Succinil CoA
puede incorporarse al Ciclo de Krebs y generar Oxalacetato, el cual se unirá a Acetil CoA
para formar Citrato siguiendo las reacciones del Ciclo, en cuyo caso los átomos de
carbono de la Propionil CoA experimentarían un destino anaplerotico (ser usados en el
Ciclo de Krebs pero sin ser consumidos), o podrían de hecho, ser oxidados totalmente
hasta CO2, siguiendo la siguiente secuencia de reacciones:
Succinil CoA + GDP + (P) ⟶ Succinato + CoA + GTP (equivale a 1 ATP) Succinato + FAD ⟶ Fumarato + FADH2 (Genera 2 ATP en la
Cadena Respiratoria) Fumarato + H2O ⟶ Malato
Pero ahora el Malato difunde desde la matriz a través de la membrana interna y bajo la
acción de la reacción de la enzima malica citoplasmática es descarboxilado a Piruvato
(producción de un CO2). Este Piruvato puede difundir de nuevo al interior de la
mitocondria y experimentar las reacciones de la piruvato deshidrogenasa para ser
descarboxilado (producción de otro CO 2) y formar Acetil CoA, cuyo grupo acetilo será
oxidado en el Ciclo de Krebs produciendo otros dos CO 2. Como puede verse, a través de
esta secuencia de reacciones es posible la oxidación total de los tres carbonos originales
del propionato a 3 moléculas de CO2 (Para evitar confusiones, hay 4 descarboxilaciones,
pero uno de esos CO2 no proviene originalmente del Propionil CoA, sino del proceso de
carboxilación en la conversión de Propionil CoA a succinil CoA).
Succinil CoA + GDP + (P) ⟶ Succinato + CoA + GTP (equivale a 1 ATP) Succinato + FAD ⟶ Fumarato + FADH2 (Genera 2 ATP en la
Cadena Respiratoria) Fumarato + H2O ⟶ Malato
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En el citoplasma: Malato + NADP+ ⟶ Piruvato + NADPH.H+ + CO2 (no consideraremos este cofactor reducido
porque el NADPH.H es una fuente de equivalentes de reducción para reacciones sintéticas y no una fuente de
energía).
Diferencias
En comparación, la oxidación completa de tres moléculas de glucosa (18 carbonos ⟶ 18
C02) sólo rinde 3 x 36 = 108 ATP.
Esa mayor cantidad de ATP por carbono refleja la diferencia en el estado de reducción de
los carbonos de los ácidos grasos (principalmente — CH2 -) respecto al de los carbonos
de los carbohidratos (sobre todo CHOH). Los carbonos de los ácidos grasos se
encuentran en un estado de reducción más pronunciado y, por tanto, generan más
energía al oxidarse.
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3.3 A NIVEL DE PROCARIOTES Y EUCARIOTES MICROBIANOS
DONDE SE LLEVAN A CABO ESTAS RUTAS.
En una primera etapa, para que puedan pasar al interior de la célula son separados en
sus respectivos monómeros por medio de las lipasas que rompen los enlaces ésteres que
los mantienen juntos. Esto ocurre en un medio extracelular; luego de esto es que vienen
las respectivas rutas.
Las diferentes rutas para usar a los lípidos como recurso de energía se llevan a cabo en
la matriz mitocondrial en los eucariotes y en el caso de los procariotes en la membrana
citoplasmática.
EUCARIOTAS
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3.4 CONDICIONES ENDÓGENAS Y EXÓGENAS PARA QUE LOS
MICROORGANISMOS LLEVAN A CABO ESTAS RUTAS.
CONDICIONES ENDÓGENAS
El potencial de hidrogeno para que se dé a cabo las rutas metabólicas deben ser de
6.8±0.2, próximo a su neutralidad para que los fenómenos vitales puedan desarrollarse
con normalidad en los medios de cultivos realizados.
CONDICIONES EXÓGENAS
Temperatura:
Oxígeno
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3.5 COMPRUEBE EXPERIMENTALMENTE EL USO DE LÍPIDOS
COMO RECURSO DE ENERGÍA POR PARTE DE LOS
MICROORGANISMOS EN AGAR BAIRD PARKER Y
AGAR MANTEQUILLA, Y A QUE CONCLUSIÓN
USTEDES LLEGARÍAN PARA CARACTERIZAR
BIOQUÍMICAMENTE A LOS MICROORGANISMOS
QUE ESCOGIERON COMO ENSAYO.
Forma de actuación
Este medio de cultivo contiene cloruro de litio y telurito para la inhibición de la flora
acompañante en tanto que el piruvato y la glicocola actúan favoreciendo selectivamente el
crecimiento de Staphylococcus.
Sobre el medio de cultivo, opaco por su contenido en yema de huevo, las colonias de
Estafilococos muestran dos características diagnosticas por lipólisis y proteólisis, se
producen halos y anillos característicos y, debido a la reducción de telurito a teluro se
desarrolla una colonia negra.
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Composición (gramos/litro)
INGREDIENTES FUNCION
Peptona de caseína 10.0 g Es una buena fuente de nitrógeno. Altos
contenido en triptófano.
Actúa como fuente de carbono, es de alto
Extracto de carne 5.0 g valor nutricional.
La emulsión de yema de huevo contiene lípidos, los cuales sirven como recurso de
energía, mientras el telurito se reduce a teluro presentando colonias negras.
Preparación de la muestra
Para la preparación de la muestra se medirá 90 ml de agua de peptona previamente
preparada y esterilizada y se agregara 1l g de la muestra a inocular, en este caso fue
queso adquirido del mercado de sauces 9 de la ciudad de Guayaquil.
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Preparación del Agar
Enfriar a 45-50 ºC
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Inoculación
1.- Limpiar el mesón con alcohol.
2.- Teniendo todos los materiales importantes como son mechero de alcohol y algodón
con alcohol procedemos a flamear la pipeta, luego flameamos el matraz y tomamos con
la pipeta una muestra.
5.- Colocar las cajas Petri en la incubadora a una temperatura entre 35 – 37°C, por un
lapso de 24 hasta 48 horas. Luego de 48 observar los cambios efectuados, es decir, el
crecimiento de colonias bacterianas.
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BAIRD PARKER: RESULTADO
PRUEBA DE LA CATALASA
Esta prueba tiene por finalidad detectar la presencia de la enzima catalasa, cuya función
es descomponer el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. Las bacterias que
sintetizan catalasa hidrolizan el peróxido de hidrogeno en agua y oxigeno gaseoso que se
libera en forma de burbujas. El desprendimiento de burbujas procedentes del oxígeno
indica que la prueba es positiva.
ANÁLISIS
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Adicionalmente se realizó la prueba de la catalasa, la cual dio como resultado positivo al
agregar el agua oxigenada. Lo que significa que el S. aureus si es capaz de sintetizar esta
enzima.
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2.- Agar Mantequilla
Es un medio de cultivo rico en lípidos especialmente triacilglicéridos, en el cual como su
nombre lo indica lleva mantequilla, que precisamente es la que le proporciona la fuente
lipídica al medio. Este es comúnmente utilizado para exámenes bacteriológicos de
comida, agua, leche y otros productos lácteos. Está compuesto como dijimos por
mantequilla y por AGAR PCA, que es un medio no selectivo gracias a su composición que
presentamos a continuación.
INGREDIENTES FUNCION
Indicador:
El medio como tal no contiene ningún inhibidor o indicador, pero después de la
inoculación y de la incubación se le agrega el indicador rojo de metilo, el cual en medios
ácidos permanece rojo y en medios básicos se pone amarillo. Este pH varía dentro de un
rango de 4.4 (ácido) – 6.3 (básico). Esto es indispensable para poder determinar la
existencia del microorganismo utilizado en la experimentación, que a su vez nos llevara a
comprobar si se dieron o no las rutas metabólicas discutidas a lo largo de este trabajo.
Procedimiento e inoculación
1. Se prepara el AGAR PCA colocando 2,4 g del AGAR en 100 ml de agua destilada.
2. Se calienta el AGAR y se lo hierve durante el tiempo que sea necesario para que se
disuelva completamente, luego se lo esteriliza en la autoclave a 121 ° C durante 15
minutos.
10. Cuando ya esté incubada y hayan pasado las horas previstas se procede a agregar
el indicador rojo de metilo alrededor de las colonias vistas.
ANÁLISIS
Con el agar de mantequilla, se observó a las 48
horas aproximadamente, que existió la formación
de colonias color blancas casi grisáceas.. Estas
colonias nos indican que existió una hidrólisis de
los lípidos formando ácidos grasos y glicerol. Al
producirse estos ácidos grasos estos hacen que
el pH del medio se acidifique y así al agregarle el
rojo de metilo que tiene un pH de viraje de entre
4,4 y 6,8 tomara el color rojo característico al
haber un pH bajo.
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34
CONCLUSIONES GTI:
Las diferentes rutas metabólicas para usar a los lípidos como recurso de energía
son llevadas a cabo en la matriz mitocondrial en los eucariotas y en el caso de
los procariotas en la membrana citoplasmática.
Las bacterias usan a los lípidos que se encuentran en el medio de cultivo como
recurso energético, pero primero a estos lípidos habrá que descomponerlos en
sus monómeros (glicerol y los ácidos grasos) ya que solo de esta forma podrán
atravesar la membrana bacteriana, cabe recalcar que tanto las eucariotas como
las procariotas usan a los lípidos como recurso energético.
Para que ocurra la Beta-oxidación es necesario que el ácido graso dentro del
citosol se active. El ácido graso se une a una Coenzima-A más la presencia de
dos moléculas de ATP para forma Acil Co-A, AMP y PPi. Esta reacción es
catalizada por la enzima Acil- Coenzima A sintetasa. La activacion de acidos
grasos y la formacion de acil-CoA es necesaria para el siguiente paso de
transporte mitocondrial.
Si el ácido graso inicial es saturado impar la beta oxidación se dará sin ningún
cambio hasta llegar a su último ciclo, cuando en la tiólisis forme como
producto el Propionil-CoA en vez de Acetil-CoA debido a los tres carbonos
restantes,este cambio causará que de la beta oxidación de como producto
Succinil-CoA (molécula usada dentro del ciclo de Krebs).
El agar Baird Parker es un medio de cultivo selectivo el cual sirve para facilitar
el desarrollo de Staphylococcus Aureus, al momento de la observación de la
experimentación se observó en los medios inoculados que las bacterias
empezaron a crecer debido a la formación de colonias las cuales presentaban
una coloración negra debido a la reducción de teluro a partir del telurito y
también presento un halo transparente alrededor de cada colonia debido a la
acción de la lecitinasa en la yema de huevo, descomponiéndola en ácidos
grasos los que usara como energía. Al momento de la realización del reporte
microbiológico este fue imposible de hacerlo debido a la gran carga microbiana
en los medios de cultivos, las colonias formadas en el Baird Parker fueron muy
numerosas para ser contadas porque cada punto que representaba una unidad
formadora de colonia tenía muchas decenas más a su alrededor que eran muy
pequeñas para su contabilización.
Entre los hongos se utilizó como variable, fuente de carbono, para el estudio de
su influencia, en la producción de lipasas; donde los mejores productores
fueron las cepas de A. niger y A. fumigatus. La producción de lipasa fue
superior en cultivos donde se empleó lípidos respecto a los que se usó almidón
o glicerol como fuente de carbono, esto se debe a que su presencia en el medio
de cultivo no favorece la síntesis de la enzima debido a que pueden presentar
un efecto inhibitorio.
Para caracterizar los extractos solubles de las lipasas producidas por A. niger y
A. fumigatus, se determinó la influencia de la temperatura y el pH sobre la
actividad enzimática. Para analizar la influencia de la temperatura, el pH se
mantuvo constante y para analizar el pH, la temperatura se mantuvo constante.
Donde se comprobó que a cierto rango de temperatura la enzima logra su
mayor actividad y al sobrepasar este rango, ocurre una inactivación de la
enzima ocasionando su descenso, de manera similar ocurre con el pH, al
sobrepasar el pH máximo la actividad de la lipasa decae bruscamente.
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Bibliografía GTI:
Coca Janny, Hernández Odette, Berrio Rachel, Martínez Sonia. Díaz Ernesto,
Dustet Julio (2001). Producción y caracterización de las lipasas de Aspergillus
niger y A. fumigatus, 1-5.
Lodish, Harvey; Arnold, Berk; Paul, Matsudaira; Chris A., Kaiser; Monty,
Krieger; Matthew P. Scott; Lawrence, Zipursky; y James, Darnell. Biología
celular y molecular. Quinta Edición. Editorial Médica Panamericana, Buenos
Aires, Argentina. 2005. Páginas: 69-70
ANEXOS
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REUNIONES
PRIMERA REUNION
Lunes 24 de julio 2017
Reunión para distribuir los temas del GTI
SEGUNDA REUNION
Martes 1 de agosto del 2017
Reunión en el laboratorio para preparación de los agares e inoculación
TERCERA REUNION
Jueves 3 de agosto del 2017
Reunión para ir a ver resultados
CUARTA REUNION
VIERNES 25 DE AGOSTO DEL 2017
Última reunión para discutir el tema y simulacro de exposición
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