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Instituto Tecnológico De CD Guzmán

Microbiología
Ingeniería Ambiental
Juan Carlos Jiménez Del Toro

Investigación
"Estreptococos beta hemolítico”

David Alejandro Montes Patricio


Julio Cesar Torres Peña

Unidad 3
Cuarto semestre
Instituto Tecnológico De CD Guzmán

Introducción

Es un grupo de bacterias formado por cocos gram -positivos pertenecientes


al filo firmicutes1 y al grupo de las bacterias ácido lácticas. Estas bacterias
crecen en cadenas o pares, donde cada división celular ocurre a lo largo de
un eje.

El estreptococo es un tipo de bacteria. Hay dos tipos, grupo A y grupo B.


El estreptococo del grupo A causa:
• Infección en la garganta: Una garganta irritada y adolorida. Sus
amígdalas pueden estar hinchadas y tener manchas blancas
• Escarlatina: Una enfermedad que ocurre después de la faringitis
estreptocócica. Provoca una erupción roja en el cuerpo
• Impétigo: Una infección en la piel
• Síndrome del shock tóxico
• Celulitis y fascitis necrotizante (enfermedad necrotizante)
El estreptococo del grupo B puede causar infecciones de la sangre,
neumonía y meningitis en los recién nacidos. Una prueba durante el
embarazo puede indicar si la tiene. Si es así, antibióticos vía intravenosa
durante el parto pueden salvar la vida de su bebé.
Los adultos también pueden contraer infecciones por estreptococos del
grupo B, especialmente si son mayores o si tienen problemas de salud. El
estreptococo grupo B puede causar en adultos infecciones del tracto
urinario, la sangre y la piel; y neumonía.
Para tratar las infecciones por estreptococos se utilizan antibióticos.
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Estreptococos beta hemolítico

Estreptococos
El estreptococo beta hemolítico es un tipo de estreptococo, un género de bacterias
esféricas que se caracterizan por ser bacterias del ácido láctico. Se dividen en
varios grupos que causan diferentes enfermedades y puede ser tratado de
diferentes maneras.

Desarrollo
Estas bacterias crecen en cadenas o pares, donde cada división celular ocurre a lo
largo de un eje, los glóbulos rojos se rompen para crear áreas transparentes que
rodean las colonias de bacterias para crear los estreptococos beta-hemolíticos.

La serotipificación de Lancefield, que se basa en la existencia de ciertos hidratos


de carbono que residen en la pared celular, denota que los estreptococos son
beta-hemolíticos.

Grupos
Los dos grupos más comunes de estreptococo beta hemolítico son A y B. El grupo
A de estreptococo beta-hemolítico es responsable de la faringitis estreptocócica, la
fiebre reumática y la escarlatina, mientras que el Grupo B está asociado a la
neumonía y la meningitis.

Grupo A
S. pyogenes (también conocido como GAS) es el agente causal en las infecciones
estreptocócicas del Grupo A, incluyendo faringitis estreptocócica ("amigdalitis"),
fiebre reumática aguda, fiebre escarlata, glomerulonefritis aguda y fascitis
necrotizante. Si la amigdalitis no es tratada, puede desarrollarse fiebre reumática,
una enfermedad que afecta las articulaciones y las válvulas cardiacas.

La infección por Estreptococo Grupo A es diagnosticada generalmente con una


prueba rápida de estreptococos o mediante cultivo.

El método comúmente empleado en los laboratorios clínicos para la identificación


presuntiva en cultivos de Streptococcus Beta-hemolítico del grupo A es la prueba
de susceptibiidad a la bacitracina o Taxo A.
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Grupo B
S. agalactiae, o GBS, causa neumonía y meningitis en neonatos y en las personas
más jóvenes, con bacteriemia sistémica ocasional. Estos también pueden
colonizar los intestinos y el tracto reproductor femenino, incrementando el riesgo
de ruptura prematura de membranas y la transmisión al infante.

Reproducción – Crecimiento
 Bacterias de forma esférica (cocos)

 Gram positivos y de más de 2 micras de diámetro.

 Crecimiento en cadena o como diplococos.

 Aerobios y anaerobios facultativos.

 Crecen y producen beta-hemolisis en agar sangre.

 Son catalasa negativos (diferencia con los stafilococcus que son catalasa
positivos).

 Hay cepas capsuladas.


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Curva de crecimiento
La información se presenta en cuadros de asociación, con frecuencias absolutas,
porcentajes de los diferentes resultados obtenidos en los cultivos realizados en el
laboratorio para las tres cepas investigadas. se aplicaron pruebas no paramétrica
para establecer la significación estadística de las diferencias en el crecimiento de
las tres cepas Streptococcus, a través de sus medidas de absorbancia, de la
distribución del Halo de Inhibición de crecimiento bacteriano, así como la
capacidad bactericida de diluciones del aceite esencial de Matricaria recutita sobre
tres cepas liofilizadas deStreptococcus en diferentes medios de cultivos y
unidades de tiempo.

Fue calculado el porcentaje de resultados negativos en cuanto al número de


diluciones efectuadas en los dos medios de cultivos y en los tiempos de los
mismos. También se obtuvo el promedio del Halo de Inhibición considerando las
nueves diluciones experimentadas para el cultivo de las tres cepas.

Con relación al objetivo especifico número uno, el cual expresa: Establecer la


curva de crecimiento de las Cepas Tipo Liofilizada 656, 659, y 660
de Streptococcus bajo condiciones normales de pH, temperatura y medios de
cultivos seleccionados.

Gráfico No. 1
Curva crecimiento bacteriano en función de absorbancia vs. horas
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Tabla N° 1
Capacidad Bactericida de Diluciones del Aceite Esencial de Matricaria
recutita sobre tres cepas liofilizadas de Streptococcus en diferentes medios de
cultivos a 24 y 48 horas.

- Ausencia de crecimiento bacteriano


+ Crecimiento bacteriano

TABLA N° 2
Halo de inhibición en placas de Agar de Müller-Hinton con discos impregnados en
diluciones de aceite esencial de Matricaria recutitaen cultivos de cepas liofilizada
de Streptococcus.
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Método de cuantificación

Población en estudio: Este estudio fue llevado a cabo en 650 niños de los Centros
Abiertos de la Ilustre Municipalidad de Santiago de Chile (350 varones y 300
mujeres) con edades entre 2 y 6 años.

Cada grupo fue sometido a un examen clínico oral, donde se evaluó la historia de
caries de acuerdo a los estándares OMS12 a través del coed (dientes cariados
obturados y exfoliados).

Los resultados fueron registrados en una ficha clínica precodificada, incluyendo


datos clínicos, microbiológicos, bioquímicos y serológicos.

Estudio microbiológico: Los niveles basales de se determinaron en muestras de


saliva (0,5-1 ml) obtenidas dos horas después del desayuno (sin cepillado dental
previo). La secreción salival fue estimulada por la masticación de un trozo de
parafina sólida (0,9 gramos) durante dos minutos.

Método cuantitativo: Las muestras de saliva (0,5-1 ml) fueron colectadas en un


tubo de vidrio con la ayuda de un embudo de vidrio y guardada por una hora a 0°C
para el análisis microbiológico13.

Posteriormente fueron agitadas por un mezclador (Max Mix II type 37600 Mixer),
durante 60 s. Luego, 100 µL de saliva fueron agregados a 900 µL de una solución
tampón de fosfato de 0,2 M (pH 7,4).

La solución resultante fue nuevamente homogeneizada por sonicación durante 2


min a 37°C y un volumen de 100 µL fue sembrado en una placa de Petri con agar
TYCSB14.

Se incubaron utilizando un sistema de anaerobiosis (jarras Gas-Pack) con una


mezcla de 95% N2, 5% CO2, durante 48 h a 37°C.

Las colonias fueron contabilizadas de acuerdo al método descrito por Westergreen


y Krasse12. Se construyeron 4 rangos de colonias según cuartiles (3,0-4,9; 5,0-
5,5; 5,6-6,0; 6,1-7,5. Log UFC/ml saliva Streptococci mutans) para hacer
comparables estos recuentos con los rangos del método semi-cuantitativo.

Método semi-cuantitativo: Las muestras de saliva fueron obtenidas desde el


vestíbulo labial inferior por medio de una espátula de plástico e inoculadas en
caldo TYCSB selectivo para Streptococci mutans, y rojo neutro. Posteriormente se
incubaron por 48 h a 37°C, en condiciones aeróbicas.
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Las colonias adherentes de Streptococci mutans fueron observadas por


transiluminación en un lente de magnificación de Spencer.

Cada muestra fue asignada de uno a cuatro rangos: 0: <104; 1: 104 ≤105; 2: 105
≤106 y 3: ≥106 UFC/mL saliva15.

Estudio bioquímico: Para identificar colonias, a través del análisis bioquímico, dos
de estas colonias fueron incubadas por 18 h en un medio de cultivo líquido Todd
Hewitt, y las bacterias desarrolladas fueron centrifugadas a 5.000 rpm por 5 min.

El material obtenido fue diluido en una solución tampón de fosfato (pH 7,4) a una
concentración N°5 de MacFarland (1,5 x 109 CFU/mL)16. Esta suspensión fue
usada para identificar biotipos de Streptococci mutans a través del siguiente
micrométodo:

En un rectángulo de vidrio de 11,5 x 8 cm, dividido en 48 pocillos de 0,8 cm de


diámetro cada uno, fueron colocadas separadamente 30 µL de diferentes
azúcares, a una concentración del 1%, diluidos en caldo de thioglycolato sin
dextrosa y sin indicador de pH (manitol, sorbitol, sacarosa, melibiosa, rafinosa y
almidón). Para determinar la sensibilidad a la bacitracina se utilizaron 0,2 unidades
de bacitracina/ml, arginina y esculina17,18. El rectángulo de vidrio fue colocado en
una caja plástica estéril y cultivada en una cámara de cultivo celular durante 18 h.

Estudio serológico: El antisuero fue preparado en conejos hembras inmunizadas


con S mutans (Ingbritt, serotipo c) o S sobrinus (OMZ 176 serotipo d), de acuerdo
a la técnica de inmunodifusión doble descrita por Ouchterlony19,20.

Análisis estadístico: Los resultados fueron analizados usando la prueba de


ANOVA, considerándose significativos aquellos valores que presentaron un p
<0,05 y "t" de Student para datos no pareados, utilizando 2 colas y estimando
como significativos aquellos valores con un p <0,05.

Para correlacionar el número de caries con la cuantificación salival de Streptococci


mutans se utilizó el método del valor predictivo, dado por la sensibilidad y la
especificidad de la prueba
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Factores que afectan su crecimiento


Como en la mayoría de los microorganismos, las factores son parecidos, a menos
de que su patología sea un poco más fuerte que la de otros.
pH Neutrófilos: Acidófilos, Alcalófilos: 6.0 a 8.0 3.0 10.5
Oxigeno: Aerobios estrictos Facultativos Anaerobios estrictos Requieren
específicamente oxígeno como aceptor de Electrones, requieren una sustancia
diferente al oxígeno como aceptor de electrones capaces de vivir aerobia o
anaeróbicamente
Actividad de agua: La concentración de solutos presentes en el agua, hacen que
esta esté más o menos disponible para ser utilizada por los microorganismos 1,00
0,95 0,980 0,950 0,900 0,850 0,800 0,750 0,700 Streptococcus Cocos Gram
positivos.
Temperatura óptimas <15oC Termófilas Óptima >55oC
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Conclusión
La estreptococos no son un virus mutado, si no que ya viven dentro de nuestro
organismos pero como un microorganismo sano, se da la mutación a partir de sus
diferentes tipos, de los cuales desencadenan diferentes microorganismos nocivos
para la salud, la mayoría de ellos se detectan después del paso del tiempo o hasta
que la enfermedad ya está avanzada, pero existe cura entre los mismos y sus
diferentes tipos, en la actualidad no es tanto problema erradicarlo, pero si es
problema que la enfermedad se puede contraer de una manera muy fácil, hay que
mantener las medidas de higiene y seguridad ante este microorganismo que
puede llegar a ser grave si no se trata como debería de ser.
Al igual vimos sus comportamientos durante el paso del tiempo por medio de las
curvas de crecimiento, dato interesante y sus síntomas en caso de que llegue a
surgir, nos gustaría como equipo el poder manejar algún día una colonia sobre
este microorganismo y conocer más a detalle cómo es que progresa, crece, se
reproduce y sus colonias o desarrollo.
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Bibliografía

http://www.losmicrobios.com.ar/microbios/?page_id=1262
CARTILLAS DE MICROBIOLOGÍA (1999) – CÁTEDRA DE MICROBIOLOGÍA –
UNT.

MIMS – PLAYFAIR – ROITT – WAKELING – WILLIAMS MOSBY / DOYMA


LIBROS PRIMERA EDICIÓN EN ESPAÑOL DE LA PRIMERA EDICIÓN EN
INGLES.COPYRIGHT (c) 1995.

FARRERAS – ROZMAN – Medicina Interna.

https://www.dodot.es/embarazo/embarazo-saludable/articulo/que-es-el-
estreptococo-del-grupo-b-como-se-contrae
http://carefirst.staywellsolutionsonline.com/RelatedItems/167,beta_hemolytic_strep
_culture_genital_ES
https://es.wikipedia.org/wiki/Streptococcus
https://www.ortodoncia.ws/publicaciones/2009/art-1/
https://es.slideshare.net/yerasleo/factores-que-afectan-el-crecimiento-de-
microorganismos

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