AGAR CON EOSINA Y AZUL DE METILENO

 La eosina es un indicador de pH y, por tanto, de la presencia de fermentación.

 El azul de metileno es un compuesto que inhibe el crecimiento de bacterias Gram
positivas y ciertos grupos de Gram negativas

El Agar con Eosina y Azul de Metileno es una combinación del medio de Levine y el de
Holt-Harris y Teague, contiene una mezcla de peptonas según Levine y presenta dos
carbohidratos lactosa y sacarosa.
Este medio de cultivo permite una diferenciación muy clara entre las colonias de
organismos fermentadores de lactosa y aquellos que no la fermentan; el contenido de eosina
y azul de metileno inhiben en cierto grado organismos Gram positivos. La presencia de
sacarosa permite para algunos miembros del grupo coliforme fermentarla con más facilidad
que la lactosa. Las colonias lactosa positiva son azules a moradas con brillo metálico o
poseen centros oscuros con periferias transparentes incoloras y las que son negativas en
lactosa o sacarosa, se observan incoloras o rosa pálido transparentes.
MODO DE USO: Sembrar el medio de cultivo con la muestra de ensayo por estría
cruzada. Incubar 24 – 48 h a 35ºC. Es un medio ligeramente selectivo y diferencial para el
aislamiento de microorganismos entéricos a partir de diversas muestras.

Es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y

escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia
Enterobacteriaceae.

PREPARACION: Rehidratar 36 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15

minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto
para disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121ºC ( 15 lbs de presión) durante
15 minutos. Enfriar aproximadamente a 45ºC. Vaciar en cajas de Petri estériles. Conservar
a temperatura ambiente.

 Presentación de 500 g
 Es un medio ligeramente selectivo y diferencial para el aislamiento de microorganismos
entéricos a partir de diversas muestras
 FÓRMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA: Agar 13.5, Lactosa
5.0, Azul de metileno 0.065, Peptona especial 10.0, Eosina Y 0.4, Fosfato dipotásico
2.0, Sacarosa 5.0 (pH 7.2 ± 0.2).
 CRECIMIENTO POR MICROORGANISMO: Escherichia coli–Colonias azul a
moradas, con brillo metálico azul verdoso, Enterococcus faecalis–Inhibición
parcial, Salmonella typhimurium–Colonias incoloras y/o transparentes, Shigella
flexneri–Colonias incoloras y/o transparentes, Staphylococcus aureus–Crecimiento
parcialmente inhibido o colonias puntiformes (1), Candida albicans–Colonias plumosas,
rosa pálido atípicas.

Bacterias gram positivas y bacterias Gram positivas

Bacterias gram positivas

En microbiología, se denominan bacterias grampositivas, o bacterias Gram-positivas,

aquellas bacterias que se tiñen de azul oscuro o violeta por la tinción de Gram.1 Esta
característica química está íntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular, por lo
que refleja un tipo natural de organización bacteriana. Son uno de los principales grupos
de bacterias, y cuando se tratan como taxón se utiliza también el nombre
de Posibacteria.2 Las restantes son las bacterias gramnegativos.
La envoltura celular de las bacterias grampositivas comprende la membrana
citoplasmática y una pared celular compuesta por una gruesa capa de peptidoglucano, que
rodea a la anterior. La pared celular se une a la membrana citoplasmática mediante
moléculas de ácido lipoteicoico. La capa de peptidoglicano confiere una gran resistencia a
estas bacterias y es la responsable de retener el tinte durante la tinción de Gram. A
diferencia de las bacterias grampositivas, las gramnegativas presentan una segunda
membrana lipídica externa a la pared celular.

Bacterias gram negativas

En microbiología, se denominan bacterias gramnegativas aquellas que no se tiñen

de azul oscuro o de violeta por la tinción de Gram, y lo hacen de un color rosado tenue: de
ahí el nombre de "gramnegativas" o también "Gram-negativas".1Esta característica está
íntimamente ligada a la estructura didérmica dada por la envoltura celular, pues presenta
doble membrana celular (una externa y la otra citoplasmática), lo que refleja un tipo natural
de organización bacteriana. Son uno de los principales supergrupos de bacterias, y cuando
se tratan como taxón se utiliza también el nombre de Negibacteria2 o Didermata. Las
restantes son las bacterias grampositivas.
Las bacterias gramnegativas presentan dos membranas lipídicas entre las que se localiza
una fina pared celular de peptidoglicano, mientras que las bacterias grampositivas presentan
sólo una membrana lipídica y la pared de peptidoglicano es mucho más gruesa. Al ser la
pared fina, no retiene el colorante durante la tinción de Gram.

Bacterias gram positiva Bacterias gram negativa

Bacillus subtilis Planctomycetes

Streptococcus mutans Xylella fastidiosa

Bacillus megaterium Micrococcus luteus

Mycobacterium smegmatis Acidobacteria

Bacillus thuringiensis Serratia marcescens

Lactobacillus rhamnosus Morganella morganii

Búlgaros Alcaligenes faecalis

Mycobacterium bovis Aquificae

Lactobacillus casei Enterobacter aerogenes

Enterococcus faecium Fibrobacteres

Streptococcus thermophilus Acinetobacter baumannii

Lactobacillus plantarum Enterobacter cloacae

Ureaplasma parvum Stenotrophomonas maltophilia

Bacillus coagulans Klebsiella oxytoca

Lactobacillus gasseri Citrobacter freundii

Staphylococcus haemolyticus Vibrio parahaemolyticus

Bifidobacterium longum Agrobacterium tumefaciens

Mycobacterium chimaera Yersinia enterocolitica

Lactococcus lactis citrobacter koseri

 Pseudomonas fluorescens
Streptococcus anginosus
Aphanizomenon flos-aquae
Staphylococcus lugdunensis
Pseudomonas putida
Streptococcus mitis
Escherichia coli
Clostridium butyricum
Helicobacter pylori
Streptococcus salivarius
Neisseria gonorrhoeae
Bifidobacterium animalis
Pseudomonas aeruginosa
Bacillus clausii
Neisseria meningitidis
Bifidobacterium bifidum
Haemophilus influenzae
Staphylococcus aureus
Salmonella typhimurium
Streptococcus pneumoniae
Moraxella catarrhalis
Gardnerella vaginalis
Klebsiella pneumoniae
Staphylococcus epidermidis
Borrelia burgdorferi
Enterococcus faecalis
Chlamydia trachomatis
Bacillus cereus
Treponema pallidum
Streptococcus pyogenes
Proteus mirabilis
Lactobacillus acidophilus
Yersinia pestis
Ureaplasma urealyticum
Chlamydophila pneumoniae
Clostridium botulinum
Vibrio cholerae
Clostridium perfringens
Campylobacter jejuni
Staphylococcus saprophyticus
Bordetella pertussis
Mycobacterium leprae
Vibrio vulnificus
Mycobacterium tuberculosis
Propionibacterium acnes
Listeria monocytogenes
 Legionella pneumophila
Mycoplasma pneumoniae
Proteus vulgaris
Streptococcus agalactiae
Bacteroides fragilis
Clostridium difficile
Pasteurella multocida
Bacillus anthracis
Bartonella henselae
Clostridium tetani
Coxiella burnetii
Mycoplasma genitalium
Haemophilus ducreyi
Corynebacterium diphtheriae
Aeromonas hydrophila
Mycoplasma hominis
Francisella tularensis
Staphylococcus hominis