UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYO

FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE CIENCIAS BÁSICAS
ASIGNATURA DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

PRÁCTICA Nº 07

RECONOCIMIENTO DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

I. GENERALIDADES
Las enzimas generalmente son sustancias de naturaleza proteica que catalizan reacciones
bioquímicas. En estas reacciones, las enzimas
actúan sobre unas moléculas denominadas
sustratos, las cuales se convierten en diferentes
moléculas, los productos. Casi todos los procesos
metabólicos en las células necesitan enzimas. A las
reacciones mediadas por enzimas se las denomina
reacciones enzimáticas. No todos los catalizadores
bioquímicos son proteínas, pues algunas moléculas
de ARN son capaces de catalizar reacciones (como
el fragmento 16S de los ribosomas en el que reside
la actividad peptidil transferasa).
Las enzimas funcionan disminuyendo la energía de activación de una reacción, de forma que
se acelera sustancialmente la tasa de reacción. Las enzimas no alteran el balance energético de las
reacciones en que intervienen, ni modifican, por lo
tanto, el equilibrio de la reacción, pero consiguen
acelerar el proceso incluso millones de veces. Una
reacción que se produce bajo el control de una
enzima, o de un catalizador en general, alcanza el
equilibrio mucho más deprisa que la correspondiente
reacción no catalizada.
Las enzimas son extremadamente selectivas
con sus sustratos. La especificidad de las enzimas
depende de las características del sitio o centro
activo; es decir, la región de la enzima donde esta
se une al substrato antes de que ocurran las
transformaciones del substrato. El conjunto de
enzimas sintetizadas en una célula determina el
metabolismo que ocurre en cada célula. A su vez,
esta síntesis depende de la regulación de la
expresión génica.
La actividad de algunas enzimas depende solamente de su estructura como proteínas,
mientras que otras necesitan, además uno o más componentes no proteicos, llamados cofactores. El
cofactor puede ser un ion metálico (Cu++, Zn++, Co+
+
), o bien una molécula orgánica. Esta puede unirse
químicamente al enzima, denominándose, en este
caso grupo prostético, o puede interaccionar
débilmente durante el proceso de catálisis y se
llamará coenzima (la mayor parte de coenzimas son
vitaminas).
El complejo apoenzima-cofactor
catalíticamente activo recibe el nombre de
holoenzima. Cuando se separa el cofactor, la
proteína restante llamada apoenzima es inactiva
catalíticamente. Muchas enzimas se almacenan en la

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célula en estado inactivo (proenzima o zimógeno) debido a que pueden actuar y atacar la sustancia
misma de la célula.
Dentro de las diferentes enzimas que se forman en los seres vivos, encontramos a las enzimas
antioxidantes denominadas catalasas. La participación de las catalazas en la catálisis son importantes
para la vida, estas ayudan a descomponer el peróxido de hidrógeno (un agente oxidante poderoso y
dañino) en oxígeno y agua, previniendo la acumulación de burbujas de dióxido de carbono en la
sangre. La catalasa es una enzima muy
potente, una molécula de catalasa
puede descomponer millones de
moléculas de peróxido de hidrógeno en
oxígeno y agua. El peróxido de
hidrógeno es uno de los productos del
metabolismo celular en diversos
organismos, pero dada su potencial
toxicidad, es transformado enseguida
por la enzima catalasa. Además, la
catalasa cumple una función protectora
contra determinados microorganismos
patógenos, sobre todo anaerobios. Las
bacterias anaerobias, mueren al estar
en contacto con oxígeno, es por esta
razón que el oxígeno producido por esta
enzima tiene efecto bactericida sobre
estos microorganismos.

RECONOCIMIENTO DE CATALAZAS EN TEJIDOS ANIMALES Y

VEGETALES Y EL EFECTO DE LA TEMPERATURA, ÁCIDOS Y
ALCALIS SOBRE SU ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

II. COMPETENCIAS
 Determina la presencia de catalasas por su acción enzimática en tejidos animales y vegetales.
 Comprueba el efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática en diferentes tejidos biológicos.
 Demuestra cómo influye el cambio de pH (ácido y alcalino) en la actividad enzimática en diferentes
tejidos biológicos.
 Valora la importancia de las enzimas en la realización de los procesos biológicos y la alteración de su
actividad funcional cuando se exponen a factores físicos y químicos.
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1. MATERIALES Y EQUIPOS
1.1 MATERIALES Y MUESTRAS
MATERIAL INDIVIDUAL: (Bajo responsabilidad de los estudiantes)

 Un marcador de tinta indeleble

 Gorro
 Mandil
 Guantes
 Mascarilla
 Gotero
 Jeringa de 5ml desechable
 Una capsula de ENZIMATIC O FRUTENZIMA (capsulas que lo encuentras en cualquier botica)

MATERIAL GRUPAL: (Bajo responsabilidad de los estudiantes)

 Paños limpiadores
 Bisturí u hoja de afeitar
 Una caja de Fósforo
 Trozos frescos de hígado, corazón, papa, zanahoria, manzana.
 Chancador de ajos , pequeño
 Cuchillo pequeño

MATERIAL QUE ENCONTRARÁS EN EL LABORATORIO:
 Reactivos: Peróxido de hidrógeno (agua oxigenada), agua destilada.
 Material de metal: Gradilla para tubos de ensayo, cuchillo pequeño.
 Material biológico: Reactivos: Peróxido de hidrógeno (agua oxigenada).
 Material de metal: Gradilla para tubos de ensayo, cuchillo pequeño.
 Material de vidrio: Tubos de ensayo, mortero.
 Goteros
 Agua destilada
 Mechero de alcohol
 Escobilla lava tubos
 Detergente
 Frasco lavador
 Alcohol
 Lanceta estéril
 Materiales de disección: tijera, pinza, estilete.
 Solución salina fisiológica esteril.

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EXPERIMENTO 01
RECONOCIMIENTO DE CATALAZAS EN TEJIDOS VEGETALES Y ANIMALES

I. PROCEDIMIENTO
1. Coger 04 tubos de ensayo limpios y enumérelos del 1 al Nº
5. de Muestra cantidad
2. Proceder según la tabla adjunta: Tubo
1 Hígado 2g
3. Agregar 3 cc de peróxido de hidrogeno a cada uno de triturado
los tubos.
3 Papa 2g
4. Agite cada uno de los tubos y observe el desprendimiento triturada
de burbujas de oxígeno en ellos 4 Zanahoria 2g
triturada
5. Compare y ordene los tubos en forma decreciente, según
5 Manzana 2g
la actividad de burbujeo.
triturada
6. Esquematice, compare los resultados de los 5 tubos,
analice y explique la experiencia.

EXPERIMENTO 02
EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LAS
CATALAZAS

II. PROCEDIMIENTO
1. Coger 04 tubos de ensayo limpios y enumérelos del 1 al 5. Nº
de Muestra cantidad
2. Proceder según la tabla adjunta: Tubo
3. Agregar 3 cc de agua destilada a cada uno de los 1 Hígado 2g
tubos. triturado
3 Papa 2g
4. Hervir el contenido de cada uno de los tubos durante triturada
5 minutos y deje enfriar. 4 Zanahoria 2g
5. Retire el agua de cada una de las muestras triturada
5 Manzana 2g
6. Agregue 3 cc. de peróxido en cada uno de los tubos triturada
7. Agite cada uno de los tubos y observe si hay actividad enzimática en las muestras analizadas.
8. Esquematice, analice y explique la experiencia.

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EXPERIMENTO 03
EFECTO DEL PH (ÁCIDO Y ALCALINO) SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LAS
CATALAZAS

II. PROCEDIMIENTO
1. Coger 04 tubos de
ensayo limpios y Nº Nº
enumérelos del 1 de Muestra cantidad de Muestra cantidad
al 5. Tubo Tubo
1 Hígado 2g 1 Hígado 2g
2. Proceder según triturado triturado
la tabla adjunta: 3 Papa 2g 3 Papa 2g
3. Agregar 3 cc. de triturada triturada
ácido 4 Zanahoria 2g 4 Zanahoria 2g
clorhídrico al 10 triturada triturada
% a cada uno de 5 Manzana 2g 5 Manzana 2g
los tubos y triturada triturada
dejar actuar por espacio de 5 minutos.
4. Retirar el ácido clorhídrico de cada uno de los tubos.
5. Agregar 3 cc. de peróxido de hidrógeno en cada uno de los tubos y agitar.
6. Observe en cada uno de los tubos si hay actividad enzimática.
7. Esquematice, analice y explique la experiencia.
8. Repita la experiencia utilizando hidróxido de sodio al 10% en lugar del ácido clorhídrico.
9. Esquematice, analice y explique la experiencia.

EXPERIMENTO 04 Nº
de Muestra cantidad
RECONOCIMIENTO DE ENZIMAS DIGESTIVAS Tubo
COMERCIALES EN TEJIDOS VEGETALES Y 1
Hígado 2g
triturado
ANIMALES
3 Papa 2g
triturada
II. PROCEDIMIENTO 4 Zanahoria 2g
1. Coger 04 tubos de ensayo limpios y enumérelos del 1 al 5. triturada
5 Manzana 2g
2. Proceder según la tabla adjunta: triturada
3. Agregar 3 cc. Disueltas de enzimas comerciales (enzimatic o frutenzima) a cada uno de los
tubos y dejar actuar por espacio de 15 minutos.
4. Agregar 3 cc. de peróxido de hidrógeno en cada uno de los tubos y agitar.
5. Observe en cada uno de los tubos si hay actividad enzimática.
6. Esquematice, analice y explique la experiencia.
7. Repita la experiencia utilizando hidróxido de sodio al 10% en lugar del ácido clorhídrico.

Esquematice, analice y explique la experiencia

CUESTIONARIO

1. ¿Qué diferencia hay entre una coenzima y un grupo prostético?

2. ¿Qué son los peroxisomas y cuál es su función en las células?
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3. Explique que es la acatalasia o enfermedad de Takahara

4. ¿Cual es el principio activo de la frutenzima y del enzimatic (contenido,
descripción , indicaciones terapéuticas, contraindicaciones, etc?