UNIDAD 1: TEMA 2. BIOTECNOLOGIA DE LAS FERMENTACIONES.

TEMA 3
SISTEMAS DE FERMENTACION, TEMA 4 BIOTECNOLOGIA ENZIMATICA

BIOTECNOLOGIA

PRESENTADO POR

MÓNICA JOHANA GARCIA SALAZAR

CODIGO

1.113.673.423

PRESENTADO A

IVAN ANDRES GONZALES

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

UNAD 2018
 ACTIVIDAD

1. CUESTIONARIO LABORATORIO 1

1) Qué fases de crecimiento puede diferenciar en la gráfica?

R//

 Fase de latencia, fase de aceleración positiva, fase exponencial,

fase de aceleración negativa, fase estacionaria muerte.

2) Explique el comportamiento de la gráfica, desde el punto de vista

metabólico.

R//

 Fase de latencia: es el periodo de tiempo durante el que el inoculo

se adapta a las condiciones del medio fresco sobre el que se ha
sembrado. Se trata de un periodo de ajuste metabólico, su duración
depende de varios factores; tamaño de inoculo, estado fisiológico
del inoculo, medio del cultivo del que procede el inoculo.
 Fase de crecimiento exponencial: se produce un crecimiento
balanceado no restringido durante unas pocas generaciones
(normalmente menos de 10) el tiempo de generación (G) es
característico para cada especie o cepa, en cada medio concreto. El
valor del tiempo de generación (G) depende: de composición del
medio, temperatura, PH, osmolaridad, etc.
 Fase de aceleración negativa: de crecimiento desequilibrado, dado
por la competencia del alimento.
 Fase estacionaria: se caracteriza porque el coeficiente neto de
crecimiento se hace nulo (-0) para aún existe crecimiento, lo que
ocurre es que el crecimiento bruto se equilibra con las muertes
celulares. En este periodo se agotan nutrientes especiales y se
acumulan sustancias de desecho, incluso el PH del medio empieza a
hacerse inadecuado para el crecimiento celular.
 Fase de muerte exponencial: se da muerte y lisis masiva,
exponencia de cultivo. Se debe a agotamiento de reservas de
 energía. Algunas veces las células aparecen grandes, hinchadas,
distorsionadas (formas fantasmas ghost)

3) En el gráfico es posible observar todas las fases de crecimiento?

Explique su respuesta

R//
Si, se logra identificar las 5 fases del crecimiento microbiano;
analizar cómo crecen los cultivos bacterianos es crucial para poder
trabajar con estos microorganismos.

4) Investigue otros métodos con los cuales se puede determinar la

curva de crecimiento.

R//

METODOS PARA EL CONTEO DE MICROORGANISMOS

VIABLES

CUENTA EN PLACA  Vaciado en placa

 Extendido en placa
 Asa calibrada
 Miles y mirsa
 Filtración
NUMERO MAS PROBABLE
(NMP)

METODOS PARA EL CONTEO DE MICROORGANISMOS

TOTALES
RECUENTO MICROSCOPICO  Cuenta de breed
 Cámara Neubauer
 Cámara de Prettof
Hausser
TURBIDIMETRIA

5) Cuál es la aplicación industrial de conocer la curva de crecimiento de

un microorganismo?

R//
El conocimiento de la evolución del cultivo a inocular permite
observar cómo va desarrollándose el microorganismo, como va
 consumiendo el sustrato, como se va acumulando el producto a
partir de la fermentación, cuánto tiempo se demora en
desarrollar el producto y cuánto tiempo se demora el
microorganismo en morir. Teniendo estos datos la industria
puede realizar una proyección de la formulación para la realización
de los productos

6) Qué entiende por absorbancia?

R//
Se trata de la medida que refleja cómo impacta la radiación cuando
atraviesa un elemento.
Ella depende de la concentración y el grosor de la muestra, refleja la
cantidad de energía que pasa por un elemento en una cierta unidad
de tiempo.

7) Porqué es necesario utilizar una solución blanco, cada vez que se

hace una nueva lectura en el espectrofotómetro.

R//
La solución transmite o absorbe la luz que detecta y la referencia en
la solución blanca; se cambia para que los datos sean verídicos.

8) Que es lo que mide realmente el espectrofotómetro y cómo se

relaciona estos con las fases de crecimiento microbiano?

R//
Mide la cantidad de “luz” transmitida y/o absorbida a través de la
solución en la celda y la compara con la que se transmite o absorbe
a través de una solución de referencia o blanco.

2. Calcular el valor de g (tiempo de generación) y de k (velocidad de

crecimiento) en el que se inoculó un medio con 3x103 células/ml de E. coli y
que después de un periodo de latencia de una hora creció
exponencialmente durante 8 horas, alcanzando una población de 8.4 x 109
células/ ml

R//
 𝟖.𝟒𝒙𝟏𝟎𝟗 −𝟑𝒙𝟏𝟎𝟑
G=
𝟖𝒉−𝟏𝒉
G= 1.199
3. Comprare y señale las diferencias entre metabolitos secundarios y
primarios derivados del metabolismo de los microorganismos y dé dos
ejemplos de cada uno de ellos y sus posibles aplicaciones industriales.
R//
METABOLITOS PRIMARIOS
Productos del metabolismo primario
Indispensables para la vida del
organismo
Son producidos como productos únicos
Intervienen como productos finales o
como intermediarios en las diferentes
rutas metabólicas (anab /catab):
indispensables para la vida del
organismo
Ampliamente distribuidos en plantas y
microorganismos; son universales
Carbohidratos, aminoácidos, proteínas,
lípidos, vitaminas, glucósidos, ácidos
nucleicos, etc.
METABOLITOS SECUNDARIOS
Productos del metabolismo especial.
Biosintetizadas a partir del
metabolismo primario
Importantes para la sobrevivencia y la
interacción del organismo con el
entorno
Generalmente se producen como
mezclas de productos químicamente
relacionados
No intervienen en el metabolismo
primario. No indispensables para la vida
del organismo (sin funciones
metabólicas directas aparentes)
Distribución taxonómica restringida (a
veces característico de una familia, de
un género, de una especie, de un grupo
subespecifico
ej alcaloides, terpenos, flavonoides,
esteroides, camarinas, etc.
4. De acuerdo a la ova sobre fermentación. Determine por medio de un
esquema las etapas de un proceso de biotecnología de las fermentaciones
para la obtención de un producto a nivel industrial y explique cada uno de
los pasos.

R//
 PROCESO

 Tratamiento con lejía al 1.6% a 2% a una T de 21-24ºC por 4 a 7

horas  eliminación del amargo
 Maceración y lavado - eliminación total de la lejía
 Colocación en tanques con salmuera de salina de 7 a 8%
 De ser necesario inoculación de L. plantarum
 Fermentación por 6 a 10 meses
 Producto final: ph de 3.8 a 4.0 y 1% de ácido láctico
 Envasado y consumo.

5. Estudie la ova sobre fermentación, que se encuentra en el entorno de

conocimiento de la unidad uno. Realice un esquema de un biofermentador
básico, describa sus partes y su funcionamiento
R//

FUNCIONAMIENTO:

 MANOMETRO: es un instrumento de medición para la presión de fluidos

contenidos en recipientes cerrados.
se distinguen de dos tipos de manómetros, según se empleen para medir la
presión de líquidos y gases.
 MOTOR: Es la parte sistemática de una máquina capaz de hacer funcionar
el sistema, transformando algún tipo de energía (eléctrica, de combustibles
fósiles, etc.)
 AGITADOR: es parte de una unidad de proceso destinada a garantizar la
homogeneidad de un medio (en términos de homogeneización de los
componentes del medio y/o de la temperatura.
 AIREADOR: los utilizados en los estanques de fermentación aeróbica, son
de tipo radial con motor eléctrico externo al fermentador.
 SALIDA DE AGUA: Es una parte del fermentador por donde el agua fría o
en calor sale del sistema para ser desechada.
  DEFLECTOR: son láminas unidas a la pared del tanque por medio de
corchetes, que se encargan de reducir los vórtices del líquido y por lo tanto
mejoran la mezcla en el fluido.
 CAMISA: Se entiende como una capa que hay dentro del fermentador, que
generalmente es de acero inoxidable. Los fermentadores de camisa
húmeda son aislados los cuales disponen entre el fermentador interior y la
aislación de un tercer aro que forma una camisa de agua para refrigeración.
 SALIDA DE GAS: es la parte del fermentador por donde el oxígeno u otro
gas tiene su salida
 AGUA DE REFRIGERACION: utilizada para mantener el sistema de
fermentación a una temperatura estable. Pasa constantemente por todo el
sistema regulando la temperatura
 CARGA: es por donde se suministra tanto el sustrato como el
microorganismo al sistema de fermentación
 AIRE ESTERIL: es el aire que no contiene ningún tipo de microorganismo
ni contaminante. Sale por la parte baja del fermentador

6. De acuerdo a la Ova sobre fermentación realice un cuadro comparativo

donde diferencie los tipos de fermentación industrial (bath, fed-bath,
discontinua) y de un ejemplo de producción de cada uno de ellos.

R//

BATCH O DISCONTINUA ALIMENTADO O FED CONTINUO O

BATCH QUIMIOSTATO
Sistema cerrado una mejora del proceso Sistema abierto
cerrado discontinuo es la
fermentación alimentada
A lo largo de toda la En los procesos La solución nutritiva
fermentación no se añade alimentados, los sustratosestéril se añade
nada, excepto oxígeno se añaden continuamente al
(en forma de aire), un escalonadamente a biorreactor y una cantidad
agente antiespumante y medida que progresa la equivalente de solución
ácidos o bases para fermentación utilizada de los nutrientes,
controlar el ph con los microorganismos.
Cuando se ha alcanzado A formación de muchos Opera por periodos
el nivel deseado de metabolitos secundarios largos; tiempos muertos
reacción, se vacía el está sometida a represión bajos
reactor, se limpia y el catabólica (efecto
proceso se repite glucosa)
En los procesos Los elementos cítricos de El medio nutriente es
comerciales la la solución de nutrientes inoculado con el cultivo
fermentación se añaden en pequeñas microbiano al entrar al
frecuentemente se concentraciones al reactor y los organismos
interrumpe al final de la principio de la llevan a cabo su actividad
fase logarítmica fermentación y continúan a medida que el líquido
(metabolitos primarios) o añadiéndose a pequeñas fluye a través del sistema
antes de que comience la dosis durante la fase de y salen del sistema junto
fase de muerte producción con el medio
(metabolitos secundarios)
Dificultan de controlar la Útil en procesos en los Los organismos pueden
velocidad de crecimiento, que el crecimiento celular separarse de la corriente
excepto variando la y/o la formación del que lleva al producto y
composición del medio o producto son sensibles a reciclarse para inocular el
las condiciones de la concentración del líquido de alimentación
proceso sustrato limitante
Alta demanda de oxígeno Se emplea cuando se alto costo por alta calidad
puede generar una requieren evitar de equipos y accesorios-
limitación debido a una fenómenos de inhibición requiere gran reservorio
insuficiente capacidad del por sustrato y se requiere para almacenamiento de
reactor para transferir o2 alcanzar una alta medio o suministro
al medio concentración de continuado de sustrato
biomasa
Inconvenientes Limitar la el cultivo se
para remover demanda de mantiene con
el calor o2 del cultivo coeficientes
de crecimiento
constante,
crecimiento
balanceado,
composición
celular
constante.

PONENCIA CIENTIFICA

HIPOTESIS 1

Las variaciones en la actividad enzimática se debe a las diferencias en las

concentraciones de almidón en las fuentes de carbono
Según un estudio realizado en la determinación de la concentración de alfa y beta
amilasas comerciales en la producción de etanol a partir de almidones de cebada
empleada (saccharomyces cerevisiae" el cual para reducir costo de producción
busca alternativas eficaces reduciendo el uso de la cebada malteada# debido a
ello utilizan en los procesos enzimas amilo líticas comerciales multifect AA23L (&
amilasa" y multifect AA21L almidón llevado a cabo por encimas de la cebada
malteada# por el empleo de enzimas comerciales de microorganismos amilo líticos
para la degradación total o parcial del almidón contenidos en los granos de
cebada. Teniendo en cuenta lo anterior puesto se evidencia la importancia Que
tiene el contar con una buena concentración de almidones para poder degradarlo
en algunos procesos el poder alcanzar una degradación del almidón es bastante
difíciles requiere de otras enzimas Que tengas características similares como es
degradar el almidón

Se evidencia que la cepa A en la cuantificación de biomasa, tiene un

comportamiento menor respecto a las dos sepas igualmente analizadas lo que se
concluye que dicha cepa presenta menos cantidad de almidón

¿Cuál de los microorganismos es mas efectivo?

GENERALIDADES

Las amilasas con enzimas que degradan el almidón y tienen numerosas

aplicaciones biotecnológicas, un ejemplo de ello es la producción de jarabes, que
contienen oligasacáridos como maltosa y glucosa, la composición precisa de los
productos finales pueden ser controlados en los procesos fermentativos (palmer,
1975). La degradación enzimática del almidón por acción de la amilasa a escala
industrial, ha sido practicada por muchos años y ha reemplazado
considerablemente los procesos tradicionales de cálisis ácida. En usa, cerca del
75% de los jarabes y dextrosa sólida son ahora producidos por procesos
enzimáticos, es decir una nueva tecnología se ha acentuado en el área de la
degradación del almidon por efecto de las amilasas, y entre ellas se tiene amilasa,
amiloglucosidasa y pulunanasa principalmente, que son producidas por bacterias y
hongos. Éstas enzimas actúan sobre el almidon hidrolizando enlaces glicosídicos.

Las propiedades y mecanismos de acción de las amilasas dependen del origen de

las enzimas, todas ellas son endo enzimas.

Incuestionablemente las amilasas esta ampliamente en plantas y microorganismos

.
 BIBLIOGRAFIA

http://sisbib.unmsm.edu.pe/bibvirtualdata/tesis/salud/vargas_as/antec_fund_
cientif.pdf

https://es.slideshare.net/luisbryang/partes-de-un-fermentador

http://quimicapetroupch.blogspot.com/2012/05/biorreactor.html

file:///C:/Users/Familia/Downloads/Tutorial%201_Biotecnolog%C3%ADa%20d
e%20las%20enzimas.pdf

http://campus07.unad.edu.co/ecbti42/mod/page/view.php?id=793

https://es.scribd.com/doc/7354774/Productos-de-Fermentacion

https://www.mpfn.gob.pe/escuela/contenido/actividades/docs/2325_dia_2.tou
lmin_o.j.simpson_puno.pdf

https://addi.ehu.es/bitstream/handle/10810/14292/4-
%20Cap%C3%ADtulo%20I.%20Las%20enzimas.pdf?sequence=4