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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO

GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

PERÍODO ACADÉMICO: ABRIL – AGOSTO 2018

DOCENTE: Mgs. IVÁN PEÑAFIEL MÉNDEZ

ASIGNATURA: TÉCNICAS HISTOLÓGICAS

SEMESTRE: TERCERO

FECHA DE LA PRÁCTICA: NÚMERO DE LA PRÁCTICA

19 de julio del 2018

HORA: 17:00 – 20:00 horas DURACIÓN: 3 HORAS

GRUPO N° 2

NOMBRE DEL ALUMNO ROMERO COLCHA ERIKA ESTHEFANÍA

TITULO DE LA UNIDAD: Procesamiento de Tejidos. Micrótomo de rotación partes y manejo. Técnica de cortes
errores en microtomía; Problemas y soluciones, pesca y desparafinización.

TEMA DE LA PRÁCTICA: MICROTOMÍA: PARTES, MANEJO, TÉCNICA DE CORTE, PESCA (BAÑO DE


FLOTACIÓN), NORMAS DE BIOSEGURIDAD.

OBJETIVO GENERAL: Conocer el micrótomo y cada una de sus partes, que es si lo forman para obtener cortes
muy pequeños.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
Aprender las partes y el manejo correcto del Micrótomo de Rotación

Desarrollar cortes de tejidos incluidos en bloque de parafina.

Realizar el baño de flotación y la pesca de la muestra de tejido cortada con el Micrótomo


FUNDAMENTO TEÓRICO O CONTENIDO CIENTÍFICO:

- MICROTOMÍA

La Microtomía es la disciplina que se ocupa de la obtención de finos cortes seriados a partir de tejidos incluidos en
bloques de parafina para su posterior estudio a microscopía óptica y/o electrónica, lo que la convierte en uno de los
pilares básicos de las técnicas procedimentales de Anatomía Patológica. El micrótomo (o micrótomo) es un aparato
mecánico que permite la obtención de secciones de tejido de espesor micrométrico que pueden ser empleadas
posteriormente para su estudio al microscopio. Los micrótomos poseen cuchillas de metal y mecanismos para
regular el grosor de los cortes y el avance de la muestra que se coloca en él. Se utilizan para estudiar secciones de
tejidos potencialmente patológicos de los que se pretende obtener un diagnóstico.

- COMPONENTES DE UN MICROTOMO
Aunque pueden variar de unos modelos a otros, los componentes fundamentales de un micrótomo son:

● Portabloques: en el que apoyamos el casete con la muestra. Avanza de forma discontinua sobre una
cuchilla gracias a un mecanismo regulable de cremallera. Propiamente se denomina portabloques al
dispositivo donde colocamos el material tisular sumergido en algún medio de inclusión, generalmente
parafina. Los actuales portabloques llevan un sistema de pinzas que se adaptan a cualquier tipo de base o
molde. A su vez, el portabloques lleva un sistema de orientación que permite conseguir la posición en
paralelo entre el bloque y la cuchilla.
● Portacuchillas: consiste en un dispositivo de fijación basado en una pinza que sujeta y orienta
adecuadamente la cuchilla. Esta pinza permite variar el ángulo de inclinación de la cuchilla, así como su
grado de aproximación al portabloques.
● Mecanismo de avance del portabloques sobre la cuchilla: sistema mecánico o electrónico que
proporciona cortes sucesivos de tejido a partir del bloque. Actualmente se consiguen cortes de hasta 1
● Base: sirve para sustentar el micrótomo a la mesa.
● Caja: también llamada carcasa, aloja el mecanismo de engranajes de precisión y el mecanismo para
seleccionar el espesor de la sección.
● Manivela: está situada a la derecha del aparato; consiste en un volante con una manilla y un freno. En el
volante hay una flecha pintada que indica la dirección en la que se debe mover la manivela.
● Freno: es un tornillo que, accionándolo hacia afuera y/o girándolo sobre sí mismo un cuarto de vuelta,
libera la manivela.
● Manivela de recuperación: está situada a la izquierda del micrótomo. Una vez utilizado el micrótomo es
conveniente hacerle volver a la posición de inicio. Para ello se acciona la manivela en sentido anti horario
hasta que la base del brazo portabloques esté cercano a la caja de engranajes

- EXTENSIÓN Y ADHESIÓN DE LOS CORTES AL PORTAOBJETOS

Los cortes obtenidos, aislados o en forma de cintas, generalmente se presentan arrugados y muestran una área menor
que la que poseen en la inclusión, por lo que es necesario extenderlos y luego adherirlos a las láminas portaobjetos
(esto facilita su manipulación posterior). Los cortes se extienden al depositarlos sobre la superficie del líquido
entendedor contenido en un recipiente denominado “baño de flotación” (éste mantiene la temperatura entre 40o a
45o C). Las secciones se depositan en el líquido procurando que la superficie brillante (aquella correspondiente al
filo de la navaja) se ponga en contacto con el líquido caliente. En caso que ciertas arrugas persistan, se emplean unas
pinzas finas o un pincel de pelo de camello, para ejercer una ligera tracción entre los extremos de los cortes y así
desarrugarlos totalmente.

Las secciones se extienden aisladas o formando cintas, estas se recogen y adhieren al portaobjetos de la misma
forma; en el caso que se requiera recoger los cortes aislados, extendidos previamente como una cinta, deben
separarse utilizando las mismas pinzas finas o agujas de disección. Recogidos los cortes, éstos aún se pueden
orientar aprovechando de la capa de líquido que queda entre el portaobjetos y los cortes. Posteriormente las láminas
se apoyan en forma oblicua para que escurra el líquido sobrante y luego se colocan horizontalmente dentro de una
estufa o encima de una plancha caliente ( a 50o C aproximadamente). Después de unas 3 a 4 horas, el líquido se
habrá evaporado totalmente y la sustancia adhesiva unirá firmemente el corte al portaobjetos.

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS MUESTRA


- MICRÓTOMO DE ROTACIÓN - FRAGMENTOS DE ÓRGANOS HUMANOS
- PINZAS EN PARAFINA (BLOQUES O TACOS)
- PORTAOBJETOS
- BROCHA
- PAPEL.ABSORBENTE
PROCEDIMIENTO:
El micrótomo se suministra con una cuchilla biplana en cuña, de fácil mantenimiento y gran polivalencia cuando la
dureza de los tejidos oscila notablemente, y con un dispositivo para cuchillas desechables. Para cortar no trabaje con
la misma zona del filo de la cuchilla que ha sido utilizada para el desbaste. Seleccione el espesor de corte deseado (en
micras) mediante el mando correspondiente, teniendo en cuenta que las secciones de un tejido incluido en parafina
son difícilmente realizables con un espesor inferior a 5 μm. Tire del sistema de bloqueo del volante manual para
liberar el volante. Para cortar, gire el volante manual de forma uniforme y a velocidad constante en el sentido de las
agujas del reloj. Recoja los cortes obtenidos y para realizar el procedimiento de pesca.

TÉCNICA
Coloque el porta-muestras en el punto más alto; para ello gire el volante manual y bloquéelo mediante el dispositivo
de seguridad situado en su parte inferior. Coloque el bloque de parafina en el porta-muestras y sujételo firmemente
con el tornillo de sujeción de la muestra. Gire la palanca de bloqueo en sentido contrario a las agujas de reloj y utilice
los tornillos de orientación de la muestra para orientar la superficie del bloque de parafina de modo que quede
perfectamente paralelo a la superficie de corte de la cuchilla. Después vuelva a girar la palanca para fijar la posición.
Con mucho cuidado inserte la cuchilla en el porta-cuchillas. Sujéte firmemente mediante los tornillos de sujeción de
la cuchilla. Ajuste el ángulo de corte de la cuchilla; para ello, afloje el tornillo de fijación del ángulo de corte y a
continuación coloque la cuchilla según el ángulo deseado (ver escala mediante la palanca de giro.Vuelva a ajustar el
tornillo de fijación. Ajuste la posición del porta-cuchillas; para ello, gire hacia la derecha la palanca de bloqueo de
avance manual y ajuste manualmente la posición del porta-cuchillas aproxime a la muestra. Después vuelva a girar la
palanca para bloquearlo. Mediante el mando de avance macro ajuste la posición final.
GRÁFICOS Y RESULTADOS: (Dibujos, imágenes, cálculos de resultados obtenidos en la práctica)

OBSERVACIONES
- En la práctica se utilizó un micrótomo de rotación
- Las cuchillas para el corte son dos la primera para el desbaste del bloque y la segunda para el corte definitivo
- Se emplea el uso de pinzas para sostener los cortes de tejido para ser llevados al bañó de flotación
- Es necesario una brocha para realizar la limpieza del micrótomo después de cada corte
EVIDENCIAS FOTOGRÁFICAS Y VIDEO
VER ANEXOS

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:

CONCLUSIONES

- Se aprendió que el micrótomo es un equipo de fácil uso que permite la obtención de secciones de tejido
en micras que pueden ser empleadas posteriormente para su estudio al microscopio. Los micrótomos poseen
cuchillas de metal y mecanismos para regular el grosor de los cortes y el avance de la muestra que se coloca
en él. Se utilizan para estudiar secciones de tejidos potencialmente patológicos de los que se pretende
obtener un diagnóstico.

- Se desarrolló la confección de los cortes de bloques de parafina el cual consta de seis maniobras:
1. Retallado y enfriado del bloque.
2. Fijación del portabloques.
3. Orientación del bloque.
4. Orientación de la cuchilla del micrótomo.
5. Selección del espesor del corte.
6. Realización de las secciones.

- Se realizó el baño de flotación y la pesca del tejido el cual consiste en llevar el corte de tejido hasta un baño
con agua a una temperatura de entre 45 y 50ºC donde, gracias a las fuerzas de tensión superficial que se
generan en la lámina de parafina y tejido al hacerla flotar sobre el líquido, se eliminan posibles pliegues. Y
la pesca consiste en la adherencia del tejido al portaobjetos.

RECOMENDACIONES

- La persona que trabaja en el área de microtomía debe contar con el equipo de seguridad personal :
respirador, bata desechable, botas y convertir de cabello
- Es muy importante hacer una revisión del equipo antes de su utilización y si encontráramos algún falló
reportarlo.
- Antes de realizar el corte de los bloque de parafina con la muestra ya se debe tener listo el baño de flotación.
- En cuanto más agudo y rectilíneo sea el filo, más finos y con menos mellas saldrán los cortes; por otro lado,
la cuchilla debe incidir sobre la pieza formando un ángulo de entre 25 y 30º.
CUESTIONARIO

1. CITE LOS DIFERENTES MICRÓTOMOS Y SUS CARACTERÍSTICAS


El micrótomo es un equipo mecánico de precisión que se utiliza para realizar cortes en tejidos que
han sido objeto de inclusión en parafina, siendo las secciones conseguidas de espesor
micrométrico lo suficientemente delgadas para permitir su examen por el microscopio.
Normalmente los micrótomos modernos permiten cortes de un espesor de 0,1 hasta 100 µm. A
modo comparativo: El cabello humano tiene un espesor entre 50 y 70 µm. (Nahita, 2008-2009)
En los laboratorios se pueden clasificar los micrótomos en diferentes categorías, y cada una de
éstas, estará enfocada a la necesidad específica que se quiera cubrir:

1. Micrótomos semiautomáticos
2. Micrótomos automáticos
3. Criostatos o Micrótomo de congelación
4. Ultra micrótomo
5. Micrótomo de deslizamiento
6. Micrótomo de oscilación
7. Micrótomo de rotación Universal
8. Micrótomos rotatorios
9. Micrótomos rotatorios manuales

- Micrótomo semiautomático

Los micrótomos semiautomáticos están diseñados para el corte automatizado y motorizado de


muestras. Es ideal para los laboratorios de análisis de rutina y de investigación en histología, así
como para el control de calidad en industrias. Ofrece un diseño nuevo e innovador el cual es fácil
de operar y mantener, cuenta con un sistema de seguridad el volante puede ser bloqueado en
cualquier posición de esa manera se obtiene un corte de alta calidad y precisión. Cuenta con
pantalla de LCD en la cual se puede verificar el ajuste y el grosor del corte, entre otras cosas
.
-Operación: SemiAutomatica
-Tablero digital programable de LCD
-4 Velocidad del corte: 50mm/s, 100mm/s, 140mm/s, 180mm/s
-Cuenta con una función especial de retracción de la muestra que evita el daño debido al desgaste
entre la muestra y la parte de atrás de la cuchilla, alargando la vida de ésta.
-Sistema de alarma de seguridad
-Rango de espesor del corte: 0- 100 μm
-Valores de corte:
0 - 10 μm incrementos de 1 μm,
10 - 20 μm incrementos de 2 μm
20 - 50 μm incrementos de 5 μm
50 - 100 μm incrementos de 10 μm
-Interruptor de manera arbitraria entre la sección y el recorte
-Selección amplia: 0-500 μm
-Desplazamiento Horizontal de la muestra: 28 mm
-Desplazamiento Vertical de la muestra: 60 mm
-Máxima sección de corte: 50 × 45 mm
-Retracción de la muestra: 12 μm
-Precisión: ± 5 %
-Voltajes: 110/115V 50/60Hz
-Dimensiones del equipo: 520mm x 450mm x 300mm

- Micrótomos automáticos

El micrótomo automático está diseñado para el corte de muestras en parafina, es fácil de operar,
por lo tanto, permite al usuario poder hacer otras tareas mientras se encuentra en operación. Es
ideal para aplicaciones en laboratorios de análisis y de investigación en histología, así como para
el control de calidad en industria.Este equipo cuenta con pantalla de LCD en la cual se puede
verificar el ajuste y el grosor del corte, entre otras cosas.

-Operación: automática y manual intercambiable.


-Tablero digital programable de LCD
-4 velocidades de corte: 50mm/s, 100mm/s, 140mm/s, 180mm/s.
-Sistema de alarma para el límite de almacenaje horizontal y vertical.
-Rango de espesor del corte: 0.5- 100 μm
Valores de corte:
• 0.5-2 μm incrementos de 0.5 μm
• 2-10 μm incrementos de 1 μm
• 10-20 μm incrementos de 2 μm
• 20-100 μm incrementos de 5 μm
-Interruptor de manera arbitraria entre la sección y el recorte
-Selección amplia de 0.5-999um
-Desplazamiento horizontal de la muestra: 20 mm
-Desplazamiento vertical de la muestra: 60 mm
-Precisión: ± 10%
-Velocidad del avance y retroceso motorizado: 1 mm/s
-Orientación de la muestra: Ejes X y Y 8 °, 360 ° del eje Z
-Todo tipo de pinza modelo se pueden cambiar arbitrariamente
-Voltajes: 110/115V 50/60Hz
-Dimensiones del equipo: 500mm x 320mm x 500mm
-Peso del equipo: 35 Kg.

- Criostatos o Micrótomo de congelación


Garantizan el procesamiento eficaz de las muestras, facilitando a su vez cortes rápidos, seguros y
reproducibles. Las espaciosas cámaras crióstáticas tipo "opentop", todas construidas en acero
inoxidable, permiten un trabajo cómodo y ofrecen amplio espacio para el almacenamiento se
muestras. Todos los criostatos disponen de bloque de congelación rápida que puede representar
hasta 10 platinas porta muestras a la vez.
-Micrótomo de alta precisión con avance de la muestra a través de motor paso a paso.
-Corte motorizado.
-Nuevo sistema estable de fijación de muestras.
-Platinas portamuestras planas, de mayor estabilidad.
-Diseño del bloque de congelación rápida.
-Sistema de refrigeración de la muestra.
-Seguridad del usuario
-Desinfección UVC.
-Portacuchillas CE para cuchillas desechables.
-Micrótomo encapsulado, protegido contra desechos y formación de escarcha.
-Sistema de extracción de desechos Leica (opcional).
-Criocámara espaciosa con cantos redondeados tanto en su exterior como en su interior.
-Desinfección a través de UVC a cualquier hora y temperatura.
-Zonas de trabajo bien organizadas.
-Micrótomo encapsulado, anti-escarcha.
-Sistema de extracción de desechos Leica, con sistema de filtros imperceptibles y de fácil
acceso.
-Símbolos de control fáciles de reconocer
-Parámetros de manejo visibles en todo momento.

- Ultramicrótomo

Con los Ultramicrótomo se preparan muestras para los microscopios electrónicos de transmisión.
Debido a que los preparados deben ser extremadamente finos, estos micrótomos disponen de
cuchillas especiales y de un avance muy fino, que frecuentemente es accionado por dilatación
térmica. El uso de estos micrótomos permite un grosor de 10 a 500 nm.
-Avanzada tecnología de ultramicrotomía.
-Posee un panel de control con pantalla táctil o teclado.
-Permiten una alineación más rápida y segura de la zona de la cuchilla y la muestra.
- Los movimientos programables de corte y de la cuchilla facilitan el desbaste.
-Es posible desbastar la muestra hasta alcanzar un nivel predeterminado en la cara del bloque, lo
que resulta ideal para estudios morfométricos.
-Tiene tres fuentes de luz LED independientes, integradas y con control de brillo proporcionan
una iluminación excelente en caso de que se necesite luz superior, luz posterior o la
transiluminación de la muestra.

- Micrótomo de Deslizamiento

Estos micrótomos se componen de un sujeta-muestras fijo y una cuchilla que está fijada sobre
una corredera. Para garantizar un corte estable, normalmente las correderas de los micrótomos
suelen pesar bastante. Durante el corte se presiona la cuchilla a través de la muestra. Los
micrótomos de deslizamiento permiten cortes con un espesor de 1 a 60 µm.

- Micrótomos de rotación universal

El micrótomo de rotación universal está diseñado para las aplicaciones de rutina y se destaca por
diversas innovaciones y mejoras técnicas, entre otros un nuevo sistema de movimiento del
volante que implica mayor precisión en el corte. El micrótomo de rotación universal cuenta con
un seguro que puede ser activado en cualquier posición, evitando vibraciones y errores, por lo
que garantiza una calidad óptima de corte. Cuenta con una rotación de la muestra de 180º y no
necesita lubricación y mantenimiento constante, pues el volante se puede bloquear en cualquier
posición, y el mango se puede bloquear en la posición más alta, lo que suele ser muy seguro para
cambiar la hoja o la muestra.

-Operación: Manual
-Rango de espesor del corte: 0- 60 μm
-Valores de corte:
• 0 - 2 μm incrementos de 0.5μm
• 2 - 10 μm incrementos de 1 μm
• 10 - 20 μm incrementos de 2 μm
• 20 - 60 μm incrementos de 5 μm
-Interruptor de manera arbitraria entre la sección y recorte
-Máxima sección de corte: 50 × 45 mm
-Desplazamiento horizontal de la muestra: 28 mm
-Desplazamiento vertical de la muestra: 60 mm
-Precisión: ± 5 %
-Dimensiones del equipo: 300mm x 570mm x 270mm

- Micrótomos rotatorio manual

El micrótomo rotatorio manual esta operado de modo manual y es ideal para realizar cortes finos
de muestras de diferentes grados de grosor. Está diseñado para aplicaciones de rutina, así como
para prácticas de investigaciones, biológicas, médicas e industriales. Estos micrótomos cuentan
con gran calidad a un bajo costo y tienen un sistema de alarma. (quiminet, 2011)

-Operación: Manual
-Rango de espesor del corte: 0- 25 μm
-Corte mínimo: 1 μm
-Máxima sección de corte: 40 × 30 mm
-Desplazamiento horizontal de la muestra: 35 mm
-Desplazamiento vertical de la muestra: 46 mm
-Dimensiones del equipo: 335mm x 350mm x 300 mm
-Peso del equipo: 26 Kg

- Micrótomos Láser

Los micrótomos laser usan un láser especial para el corte. Destacan por su fuerte enfoque y sus
muy cortas duraciones de impulso. Esto permite cortar de forma muy fina las pruebas sin causar
daño térmico al material de prueba. Estos micrótomos permiten preparar muestras con un grosor
de entre 10 y 100 µm. (pce-iberica.es, s.f.)

- Micrótomo para parafina con mecanismo de deslizamiento.

Tanto el micrótomo de rotación como el de deslizamiento tienen ventajas e inconvenientes. La


principal ventaja del de rotación es su precisión, la posibilidad de obtener secciones seriadas con
facilidad y la automatización del proceso de corte mediante motores eléctricos. Los micrótomos
de deslizamiento son más sencillos mecánicamente y su disposición permite cortar bloques más
grandes o bloques de celoidina, aunque están cayendo en deshuso. La superficie del portaobjetos
donde se colocan las tiras de cortes ha de estar previamente tratada para que nuestro tejido quede
adherido durante el procesamiento posterior. Para ello los portaobjetos se recubren con
soluciones de gelatina, albúmina, u otras sustancias y se dejan secar, de manera que hacen de
adhesivo entre el cristal y nuestro tejido. (mmegias, 2014)
- Vibratomo
Ciertos tejidos no es posible cortarlos a mano alzada debido a su dureza o su resistencia. El
Vibratomo es un dispositivo que es una alternativa para preparar cortes en fresco relativamente
frescos "aserrando" los tejidos con una cuchilla de acero vibradora para producir cortes de un
grosor uniforme. El movimiento de aserado de la cuchilla facilita el corte tejidos extremadamente
blandos o (a la inversa) resistentes. Así como en los cortes a mano alzada, el uso de una cuchilla
nueva, con filo afilado es de vital importancia para hacer buenos cortes. Dos movimientos
automáticos de la cuchilla (lateralmente rápido y de avance lento) rebanan la muestra
uniformemente. (wesapiens.org, s.f.)

- Micrótomo de mano

El Micrótomo de Mano o de Ranvier es un instrumento mecánico que simplifica la obtención de


cortes histológicos, para la preparación de muestras microscópicas. La elevación controlada de la
inclusión, facilita el corte en finas capas mediante una navaja histológica o de barbero. El
Micrótomo Bresser, en acero inoxidable dispone de una platina de vidrio y una pinza interior que
facilita la sujeción de la inclusión.Al girar el tornillo micrométrico de la base, la inclusión
contenida en el interior del cilindro, se eleva gradualmente. Desplazando la cuchilla de una
navaja histológica o de barbero (no incluida) sobre la platina de vidrio, se cortan finas láminas de
lo que se ha hecho sobresalir, lográndose cortes de unas 10 micras aprox. (interempresas.net, s.f.)

- Micrótomo rotatorio

Diseñado para el corte motorizado de muestras incluidas en parafina y en resin, el Leica RM2255
admite un amplio espectro de aplicaciones; en laboratorios de investigación y de rutina, en
histología y en control de calidad de materiales para la industria. Su concepto de diseño "dos en
uno", que permite el seccionador motorizado y manual, ofrece cortes reproducibles de alta
calidad.

2. CARACTERÍSTICAS DE DIFERENTES CUCHILLAS PARA MICRÓTOMO


CUCHILLAS DE MICROTOMO

Las cuchillas de micrótomo se fabrican en acero inoxidable y actualmente son desechables;


podemos encontrarnos cuatro tipos de diseño:

a. Bicóncava: se utiliza para cortar bloques de parafina en el micrótomo de balanceo y en el


de rotación; su principal inconveniente es que vibran demasiado, pero si el tejido es
blando se consiguen cortes excelentes.
b. Plano-cóncava: también denominadas A y B según sea mayor o menor la concavidad de
la cara no aplanada. La A se emplea para cortar bloques de parafina en el micrótomo de
deslizamiento mientras que la B se utiliza sobre tejidos incluidos en celoidina.
c. Biplana con faceta: se emplean para cortar los tejidos congelados en micrótomos de gas
carbónico, o bien cuando trabajamos con un tejido muy duro
d. Biplana: también llamada en cuña o de tipo C, se utilizan para cortar bloques de parafina
en micrótomos Minot o tejidos congelados en el criostato. Es un tipo de cuchilla
polivalente, por lo que se puede utilizar para casi cualquier tipo de tejido, razón por la
cual se impone como la más frecuente en la práctica.

3. INVESTIGAR SOBRE PROBLEMAS EN LA TÉCNICA DE CORTE


4. INVESTIGAR SOBRE SOLUCIONES A PROBLEMAS EN LA TÉCNICA DE CORTE
5. ENUNCIAR LA TEMPERATURA CORRECTA DE UN BAÑO DE FLOTACIÓN Y SUSTANCIA
QUE AYUDA A UNA BUENA ADHERENCIA DEL TEJIDO.
Los cortes obtenidos, aislados o en forma de cintas, generalmente se presentan arrugados y
muestran una área menor que la que poseen en la inclusión, por lo que es necesario extenderlos y
luego adherirlos a las láminas portaobjetos (esto facilita su manipulación posterior). Los cortes
se extienden al depositarlos sobre la superficie del líquido entendedor contenido en un recipiente
denominado “baño de flotación” (éste mantiene la temperatura entre 40o a 45o C). Las secciones
se depositan en el líquido procurando que la superficie brillante (aquella correspondiente al filo
de la navaja) se ponga en contacto con el líquido caliente. En caso que ciertas arrugas persistan,
se emplean unas pinzas finas o un pincel de pelo de camello, para ejercer una ligera tracción
entre los extremos de los cortes y así desarrugarlos totalmente.
Las secciones se extienden aisladas o formando cintas, estas se recogen y adhieren al
portaobjetos de la misma forma; en el caso que se requiera recoger los cortes aislados,
extendidos previamente como una cinta, deben separarse utilizando las mismas pinzas finas o
agujas de disección. Para garantizar una mejor adhesión de los cortes a los portaobjetos, se
recomienda incorporar sustancias adherentes al líquido entendedor o, en ciertos casos, al
portaobjetos. Estas sustancias suelen emplearse de dos maneras:

● Extensión previa de la sustancia adherente a una de las superficies de la lámina


portaobjetos, por ejemplo, la albúmina de Mayer, constituida por partes iguales de
glicerina y clara de huevo, a la mezcla se le añaden algunos cristales de timol como
ingrediente conservante. La mezcla se filtra y se guarda en refrigeración. Se le utiliza
extendiendo una gota de la mezcla en el portaobjetos y se deja secar. Los cortes se
recogen cuidadosamente sumergiendo, por debajo de ellos, el portaobjetos en forma
oblicua. Otra sustancia adherente que se emplea de la misma manera es la poli- L-lysina
(solución de 25 miligramos de la sustancia en 25 ml de agua destilada). Una gota de la
solución se extiende en el portaobjetos y éstos se secan a 50o - 55o C. durante toda la
noche y está lista para su uso.
● Al líquido de flotación se le añaden sustancias adherentes. Uno de los procedimientos
más sencillos es el que consiste en disolver, en el agua ya caliente del baño de flotación
(dos litros) 0.5 g de gelatina. En otros casos se emplea una solución que posee los
ingredientes siguientes:

- agua destilada --------------------------------- 1,000 ml


- bicromato de potasio--------------------------0.2 gramos
- gelatina -----------------------------------------0.2 gramos
El agua destilada se calienta a 60o C para disolver en ella la gelatina y el bicromato de
potasio, sucesivamente. Se filtra y está lista para su uso. Este líquido previamente filtrado
se puede utilizar varias veces. (Se recomienda guardarlo en el refrigerador).

Recogidos los cortes, éstos aún se pueden orientar aprovechando de la capa de líquido que queda
entre el portaobjetos y los cortes. Posteriormente las láminas se apoyan en forma oblicua para
que escurra el líquido sobrante y luego se colocan horizontalmente dentro de una estufa o encima
de una plancha caliente ( a 50o C aproximadamente). Después de unas 3 a 4 horas, el líquido se
habrá evaporado totalmente y la sustancia adhesiva unirá firmemente el corte al portaobjetos.

BIBLIOGRAFÍA:
1. Medidores, A. (2018). Micrótomos. Recuperado de: https://www.pce-iberica.es/instrumentos-de-
medida/instrumentos-laboratorios/equipos-laboratorios/microtomos.htm
2. (2018). Recuperado de: http://www.farmaceuticosmundi.org/farmamundi/descargas/pdf/histologia.pdf
3. El-Microtomo.pdf. (2018). Disponible en: https://es.scribd.com/document/362109756/El-Microtomo-pdf
Mgs. Ximena Robalino Flores Mgs. Iván Peñafiel Méndez Lic. Franklin Ramos

DIRECTOR DE CARRERA DOCENTE RESPONSABLE DEL LABORATORIO