METODOS DE ESTUDIO DE LA ANATOMIA PATOLOGICA

BIOPSIA:

bios (vida) opsia (observar)

Procedimiento por medio del cual se obtiene un fragmento de tejido de un ser

vivo, con el objetivo de someterlo a un estudio microscópico y establecer
un diagnóstico.

Importancia:

Sirve para hacer diagnóstico, para indicar tratamiento, para definer pronóstico,
evolución y extension de una lesion.

Tipos de biopsias:

1.- Incisional: se toma un fragmento de la lesion.

2.- Excisional: se toma toda la esión.

3.- Aspiración: mediante un trocar o aguja se aspira tejido de la lesion. Biopsia

por Aspiración por Aguja Fina (BAAF).

4.- Congelación o transoperatoria: se toma un fragmento de la lesion durante

la operación y se da diagnóstico en menos de media hora y se informa positiva,
negativa o esperar cortes por parafina si se tiene duda en el diagnóstico. Se
utiliza el criostato mediante la fijación física de la muestra por congelación.

5.- Postoperatoria: se realize estudio por parafina de la lesion.

En los hospitales funcionan los Comités de Tejidos o Comités de Evaluación de

Intervenciones Quirúrgicas, en ellos se analizan y discuten las operaciones
realizadas y los resultados de las biopsias de las mismas, es importante la
boleta que debe llenar el médico con los datos del paciente y enviarla con la
muestra de tejido al servicio de Anatomía Patológica.

CITOLOGÍA

Muestra de exudados, secreciones o líquidos de cualquier parte del organismo

donde hay células aisaladas o en grupos.

 Sirve para el estudio de las neoplasias (orgánica) y se da positiva, negativa o

sospechosa.
 Estudio hormonal o functional.
 Estudio genético.
NECROPSIA:
nekros (cadaver) opsia (observar)

Estudio de un cadaver mediante la observación cuidadosa, incluyendo la

apertura de sus cavidades y el exámen de todos su órganos. Se llena el
protocolo de autopsia con todos los datos de la misma y la descripción de los
hallazgos efectuados en todos os órganos y cavidades.

Tipos de necropsias:

1.- Clínica (toda muerte natural, infarto, neoplasias, neumonía, etc)

2.- Médico legal o forense(a toda muerte violenta: accidente, caida, quemado,
ahogado, etc)

Objetivos de la necropsia:

1.- Determinar la causa de muerte.

2.- Rectificar los certificados de defunción.

3.- Efectuar estudios estadísticos.

4.- Elaborar política de salud.

5.- Docencia.

6.- Fines jurídicos.

En los hospitales existen también los Comités de análisis de la Mortalidad

hospitalaria, en los cuales se discuten los expedientes clínicos, las conductas
tomadas con los diferentes pacientes, los complementarios, tratamientos
indicados y los resultados de las necropsias.

TECNICA HISTOPATOLOGICA Y CITOLOGICA:

1.- Descripción de la muestra, toma de fragmentos y numeración de la misma

en el pase de biopsia, donde son recibidas las mismas que llegan identificadas
y fijadas en formol.

2.- Fijación de la muestra en formol al 10% por 24 horas o más.

3.- Deshidratación: alcohol 70, 80, 95, absoluto (Se utiliza el alcohol en grados
ascendentes en el procesador automático donde se colocan las muestras en
bolsas de gasa) (Fig. No 1)

4.- Aclaramiento: xilol, 1-4 vasos (En el procesador automático) (Fig. No 1)

5.- Impregnación en parafina de 56 grados: Los dos últimos vasos del
procesador automático

6.- Inclusión en parafina: confección de bloques de parafina donde se colocan

los tejidos y se identifican con su número correspondiente. (Fig. No 2)

7.- Tallado de los bloques de parafina y colocados en hielo para endurecerlos.

8.- Corte de los bloques de parafina en micrótomos verticales y/o horizontales.

(Fig. No 3)

9.- Obtención de las secciones de tejido de 5 a 10 micras que son colocadas en

Baño de María.

10.- Se colocan las secciones de tejido en las láminas cubreobjetos,

previamente impregnadas las mismas de albúmina o clara de huevo e
identificadas con el número correspondiente colocado con lápiz diamante.

11.- Se desparafinan las láminas en la estufa antes de la coloración.

12.- Coloración en el siguiente orden: xilol, alcohol en grados descendentes,

agua, hematoxilina que colorea el núcleo y da reacción basófila de color azul-
violeta, agua, alcohol-ácido, agua, secar, eosina que colorea el citoplasma, da
reacción acidófila de color rosado, alcohol en grado ascendente (1-4), xilol (1-
4). (Fig. No 4)

13.- Montaje: utilizar bálsamo de Canada y colocar el cubreobjeto en cada

lámina.

14.- Rotular las láminas con el número colocado en cartulina.

HISTOQUÍMICA, INMUNOCITOQUÍMICA:

Relacionada con la actividad química de las células y los tejidos. Por ejemplo la
presencia de ciertos colores en las células que indican que ha ocurrido una
reacción química específica, además que la densidad del color dentro de las
células puede servir como índice de la intensidad de la reacción. Los métodos
histoquímicos han sido particularmente exitosos para el estudio de enzimas y
sustancias catalíticas que controlan y dirigen muchas de las actividades
celulares. Mucho del conocimiento sobre las enzimas se ha obtenido al
remover las mismas en las células que las originan, no ha sido hasta el
advenimiento de la Histoquímica que los anatomistas han podido ver a través
del microscopio cuales células portan enzimas específicas o medir como se
activan esas enzimas en las células bajo diferentes condiciones.

La Inmunocitoquímica es una de las ramas de la Histoquímica que ha recibido

una considerable atención recientemente. A nivel del microscopio de luz, las
técnicas de anticuerpos fluorescentes son un método sensible para la
localización de polisacáridos específicos y proteínas. La base de esta técnica
es que el organismo reacciona con sustancias proteicas extrañas, los
antígenos y elabora sustancias específicas, los anticuerpos, los cuales se
combinan e inactivan los antígenos. Las moléculas de los colorantes
fluorescentes están vinculados químicamente a las moléculas de los
anticuerpos y los sitios de sus reacciones con los antígenos pueden ser
visualizados con el microscopio ultravioleta. Este método ha sido utilizado para
identificar las proteínas hormonales, la localización intracelular de varias
enzimas y los sitios de proteínas contráctiles como la miosina. Este método
permite al investigador localizar el sitio preciso de la reacción antígeno-
anticuerpo.

HISTOAUTORADIOGRAFÍA:

Es una técnica importante de la Histoquímica relacionada con el uso de los

isótopos radiactivos de varios elementos químicos que están presentes en las
células y los tejidos. Los elementos o compuestos marcados con isótopos
radiactivos son administrados a materiales vivos, permitiendo que el
investigador siga la vía que toman las sustancias a través de los tejidos. El
grado de concentración y dilución de los elementos dentro de los
constituyentes específicos celulares puede estimarse por medio de las
radiaciones emitidas de dichos tejidos. La técnica de marcar compuestos con
isótopos radiactivos hace posible el estudio de la distribución y concentración
de los isótopos en secciones de tejidos similares a aquellos estudiados en el
microscopio de rutina. Este estudio, conocido como autoradiografía se
complementa poniendo en contacto las secciones del tejido radiactivo con
películas fotográficas y emulsiones que son sensitivas a la radiación.

MICROSCOPIO ULTRAVIOLETA:

Este sistema permite incrementar la resolución el doble de un microscopio

ordinario (0.1µ). La luz Ultravioleta se emplea en el microscopio fluorescente.
La fluorescencia puede ocurrir naturalmente en la muestra o puede resultar de
la introducción de un colorante fluorescente unido a un componente específico
de la muestra. Esto es útil en el estudio de la Inmunocitoquímica.

MICROSCOPIO ELECTRÓNICO:

El límite de resolución de este microscopio es aproximadamente 2 Ángstrom.

Permite observar las células y las estructuras de los tejidos más allá de lo que
se ve con el microscopio de luz. Las estructuras más pequeñas que las
macromoléculas individuales pueden ser observadas ahora y se les llama
estructuras finas o mejor ultraestructura.

Los científicos utilizan este microscopio en diversos campos de la

investigación, incluyendo Medicina, Biología, Química, Metalúrgica,
Entomología y Física. Desde la introducción del microscopio electrónico en el
año 1930, este ha revolucionado el estudio de las estructuras microscópicas y
las superficies.
Los microscopios electrónicos han resultado una poderosa herramienta
científica para a la investigación de la estructura básica de la materia,
específicamente en el campo de la Biología y de la ciencia de los transistores.
Mediante estos microscopios se han tomado fotos extraordinarias de las
“caras” de los insectos, formas de microorganismos y la estructura superficial
de nuevas moléculas de aleaciones de alta tecnología y otras sustancias. Ellos
resultan de gran importancia para la Patología Clínica de los centros médicos.

CULTIVO DE TEJIDOS:

Esta es otra técnica del siglo XX en la investigación anatómica, la cual se

relaciona con el cultivo de células y tejidos de organismos complejos fuera del
organismo vivo. Esta técnica permite el aislamiento de unidades vivas,
mediante las cuales el investigador puede observar directamente los procesos
de crecimiento, multiplicación y diferenciación celular. El cultivo de tejido ha
añadido una nueva dimensión a la ciencia anatómica.