J Fr. Ophtalmol.

, 2008; 31, 4, 387-395 ARTICLE ORIGINAL

© 2008. Elsevier Masson SAS. Tous droits réservés

Effet de la corticothérapie sur la production

des interleukines 8, 12 et du monoxyde d’azote
au cours des uvéites Behçet et idiopathique
H. Belguendouz (1), D. Messaoudene (1), D. Hartani (2), L. Chachoua (3), M.L. Ahmedi (1),
K. Lahmar-Belguendouz (1), O. Lahlou-Boukoffa (4), C. Touil-Boukoffa (1)

(1) Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire. Faculté des Sciences Biologiques. USTHB Bab Ezzouar, Alger, Algérie.
(2) Clinique Ophtalmologique, CHU Mustapha, Alger, Algérie.
(3) Service d’Ophtalmologie, CHU Naffissa Hamoud, Alger, Algérie.
(4) Service d’Ophtalmologie, CHU Ibn Rochd, Annaba, Algérie.
Correspondance : H. Belguendouz, Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, USTHB, El Alia, BP32, 16100, Alger, Algérie.
E-mail : houdabelbi@yahoo.fr
Reçu le 9 juillet 2007. Accepté le 30 janvier 2008.

Effect of corticotherapy on interleukin-8 and -12 and nitric oxide production INTRODUCTION
during Behçet and idiopathic uveitis

H. Belguendouz, D. Messaoudene, D. Hartani, L. Chachoua, M.L. Ahmedi, K. Lahmar- L’uvéite est une inflammation pouvant
Belguendouz, O. Lahlou-Boukoffa, C. Touil-Boukoffa atteindre toutes les structures intra-
J. Fr. Ophtalmol., 2008; 31, 4: 387-395
oculaires [1]. D’étiologie très diverse,
l’uvéite peut être d’origine infectieuse, 387
Objectives: To investigate the effect of corticotherapy on IL-8, IL-12, and nitric oxide (NO)
inflammatoire, parasitaire, virale ou
production during idiopathic and Behçet active uveitis.
Methods: Peripheral venous blood was drawn from 70 patients with active uveitis before and
médicamenteuse [2, 3]. Elle reste ce-
during corticotherapy (32 with Behçet uveitis and 38 with idiopathic uveitis) and from 30 controls. pendant idiopathique dans près de
Plasma was collected and peripheral blood mononuclear cells were separated immediately and 60 % des cas [1]. La thérapie de
cultured with or without Concanavaline A. IL-8 and IL-12 levels in plasma and culture super- l’uvéite dépend de son étiologie. En ef-
natants were measured by specific enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Nitric oxide fet, les uvéites d’origine infectieuse
levels were evaluated using a modified Griess method. sont traitées par des molécules dirigées
Results: Before therapy, the two groups of patients showed highly significant elevation of IL-8,
IL-12, and NO levels compared to control subjects. During therapy, IL-8 and nitric oxide levels
contre l’agent pathogène. En revan-
were significantly lower in active idiopathic and Behçet active uveitis both in vivo and in vitro. che, les uvéites d’origine inflamma-
This effect was correlated with therapy duration. In contrast, while significant reduction of IL- toire sont traitées par corticothérapie,
12 levels was observed both in vivo and in vitro in idiopathic active uveitis during therapy, this per os ou en bolus et/ou par des im-
effect was observed in vitro in Behçet active uveitis but not in vivo. munosuppresseurs [1, 4, 5].
Conclusion: Our results suggest that IL-8, IL-12, and NO are involved in the physiopathological L’uvéite peut être isolée ou asso-
mechanisms of idiopathic and Behçet uveitis. These three molecules showed different degrees
of sensitivity to the inhibitory effect of corticoids, reflecting their different regulation by cor-
ciée à des manifestations systémi-
ticotherapy during active phases of the two diseases. According to our study, IL-8 can serve ques. Ainsi, l’uvéite est une des plus
as a marker of inflammatory responses, while IL-12 should be used as a marker of the specific sérieuses expressions du syndrome
immune responses during active uveitis. de Behçet. Cette maladie, fréquente
Key-words: IL-8, IL-12, nitric oxide, idiopathic uveitis, Behçet uveitis. dans le bassin méditerranéen et dont
l’étiologie reste incertaine, est carac-
Effet de la corticothérapie sur la production des interleukines 8, 12 et du térisée par une vascularite multi-
monoxyde d’azote au cours des uvéites Behçet et idiopathique systémique chronique. Ses signes
Objectifs : Notre travail porte sur l’étude de l’effet de la corticothérapie sur la production des majeurs sont une aphtose buccale,
interleukines 8, 12 et du monoxyde d’azote (NO) au cours des uvéites Behçet et idiopathique. une ulcération génitale, une uvéite
Méthodes : Le sang périphérique veineux a été obtenu à partir de 38 patients atteints d’uvéite antérieure et/ou postérieure et des
idiopathique active, de 32 patients atteints d’uvéite Behçet active avant et pendant la cortico- lésions cutanées. L’inflammation ocu-
thérapie et de 30 sujets sains. Après la collecte du plasma, les cellules mononucléées du sang laire est généralement bilatérale. La
périphérique ont été séparées immédiatement et mises en culture en présence ou en absence
vascularite rétinienne occlusive re-
de phytohémagglutinine A (PHA). Les concentrations des interleukines 8 et 12 (IL-8 et IL-12)
ont été mesurées dans le plasma et les surnageants de culture par dosage immuno-enzyma- trouvée chez 30 à 40 % des patients
tique spécifique (ELISA sandwich). Les taux du NO sont estimés par une méthode de Griess conduit à la cécité 10 à 20 % des cas
modifiée. [6].
 H. Belguendouz et coll. J. Fr. Ophtalmol.

Résultats : Avant thérapie, les deux catégories de patients ont montré, in vivo et in vitro, une augmentation très significative des taux des IL-8,
IL-12 et du NO chez les patients atteints d’uvéite idiopathique et Behçet par comparaison aux sujets sains. Les taux de l’IL-8 et du NO ont montré
une diminution significative, in vivo et in vitro, suite à l’administration des corticoïdes aux deux catégories de patients. De même, in vitro, l’IL-12
a montré une diminution significative après administration des corticoïdes au cours des deux pathologies. À l’inverse, les taux plasmatiques d’IL-
12 ont significativement diminué au cours de l’uvéite idiopathique. Cet effet n’a pas été observé chez les patients atteints d’uvéite Behçet.
Conclusion : Nos résultats suggèrent l’implication des cytokines : IL-8 et IL-12 et du monoxyde d’azote dans les mécanismes physiopathologiques
des uvéites idiopathique et Behçet. Chacune de ces molécules a montré une sensibilité spécifique à l’action des glucocorticoïdes reflétant des voies
de régulations différentes sous l’action de la corticothérapie au cours des deux pathologies. Notre étude indique dans sa globalité que l’IL-8 pourrait
servir de marqueur inflammatoire. À l’inverse, l’IL-12 constituerait un marqueur de la réponse immunitaire spécifique des phases aiguës des uvéites.

Mots-clés : L-8, IL-12, monoxyde d’azote, uvéite idiopathique, uvéite Behçet.

Durant l’uvéite, de nombreux types cellulaires infil-
trants ou résidents peuvent participer à l’initiation et à
l’exacerbation de la réponse inflammatoire locale et sys-
témique. La composition de l’infiltrat cellulaire varie
selon l’étiologie de l’uvéite. Elle reste cependant hété-
rogène et comporte tous les types cellulaires [7, 8]. Les
cellules impliquées dans la réponse immunitaire peu-
vent agir directement ou par le biais de médiateurs so-
lubles tels que les cytokines et les anticorps. En effet,
certaines études ont montré une augmentation de la
production de nombreuses cytokines telles que l’IL-2,
L’IL-6, l’IL-8, l’IL-12 et le TNF-α [9-11]. Les taux des im-
munoglobulines dirigées contre les protéines oculaires
sont également élevés au cours des uvéites [12-14].
Dans une étude antérieure, notre équipe a pu mettre
en évidence l’augmentation de la production de NO as-
388 sociée à un profil mixte Th1/Th2 chez des patients at-
teints de la maladie de Behçet et présentant une uvéite
active [15]. D’autres travaux ont révélé la présence de
quantités significatives de NO dans les larmes des pa-
tients atteints de cette affection [16].
L’IL-8 est une chémokine intervenant principalement
dans l’activation et le chimiotactisme des neutrophiles
[17]. Sa production est augmentée durant les processus
inflammatoires. Elle est impliquée dans l’immunité
innée et adaptative et représente un marqueur de l’in-
flammation [18]. L’IL-12 intervient durant l’immunité
innée et adaptative. Elle est caractérisée par sa capacité
d’activation des différentes populations de lymphocytes
T CD4+, CD8+ et des cellules NK. Elle agit dans l’orien-
tation de la réponse immunitaire vers un profil Th1 en
induisant la production de l’IFNγ. Le NO apparaît
comme une molécule agissant dans la phase effectrice,
mais également dans la régulation des réponses cellu-
laires à travers la nitrosylation des résidus tyrosine de
nombreuses protéines cellulaires impliquées dans le mé-
tabolisme ainsi que dans la chaîne respiratoire [19]. Il
est généralement synthétisé par la NOS2 (NO Synthase
inductible) au cours des réponses immunitaires sous
l’action essentielle de l’IFNγ.
À l’heure actuelle, l’action des glucocorticoïdes sur le
système immunitaire a été clairement établie sur mo-
dèle expérimental animal et sur système cellulaire in
vitro ; plusieurs lignées ont été utilisées : les cellules mo-
nonucléées du sang périphérique de donneurs humains
sains [20], les cellules et les lignées fibroblastiques pul-
monaires humaines CV-1 et A549 [21, 22]. À travers
ces études, il a été rapporté un effet inhibiteur des glu-
cocorticoïdes sur les réponses inflammatoires [23, 24].
Toutefois, il apparaît, et selon les pathologies, que cer-
tains sujets sont parfois réfractaires à ce type de théra-
pie [25, 26]. De plus, peu d’études ont porté sur l’effet
de la corticothérapie sur l’expression des immunomo-
dulateurs (cytokines, NO) chez les patients en général
et chez les patients atteints d’uvéites en particulier. À
cet effet, trois molécules ont été testées et choisies pour
leur action non négligeable dans les processus inflam-
matoires : l’IL-8, marqueur de l’inflammation, l’IL-12,
marqueur de la voie Th1 et le NO, marqueur commun
de l’inflammation et de la réponse spécifique.
MATÉRIEL ET MÉTHODES
Population
Notre étude a porté sur 38 patients atteints d’uvéite
idiopathique et 32 patients atteints d’uvéite de type
Behçet (tableau I). Ces patients ont été hospitalisés aux
services d’Ophtalmologie de trois centres hospitalo-
universitaires d’Alger (CHU Mustapha Bacha, CHU Nef-
fissa Hamoud, CHU Bab El Oued). Le diagnostic de
l’uvéite idiopathique a été posé suite à l’absence de ma-
nifestations extra ophtalmiques et des résultats négatifs
des tests complémentaires effectués. Le diagnostic de
la maladie de Behçet a été établi selon les critères du
groupe international sur la maladie de Behçet ISGBD
[27]. Les patients ont été mis sous méthylprednisolone
en bolus à 10 mg/kg/jour. Les patients traités par
d’autres molécules (colchicine, cyclophosphamide) ont
été exclus de l’étude. Les sujets sains (n = 30), recrutés
au centre de transfusion sanguine, ont été sélectionnés
parmi les donneurs volontaires après anamnèse rigou-
reuse et examens sérologiques négatifs.
Préparation et culture des cellules mononucléées
du sang périphérique
Le sang veineux périphérique des patients et des sujets
sains a été prélevé dans des tubes héparinés (0,5 mg/ml)
puis acheminé immédiatement au laboratoire à + 4 °C.
Après une dilution v/v du sang avec du RPMI 1640
Vol. 31, n° 4, 2008 Effet de la corticothérapie sur la réponse immune au cours des uvéites Behçet et idiopathique
Tableau I
Caractéristiques des patients et des sujets sains.
Diagnostic Nombre Sexe Âge Type d’uvéite
a
(M/F) (année) Bilatérale Panuvéite
Sujets 28,32
sains 30 17/13 – –
[19 ; 34]
Uvéite 25,23
Behçet 32 26/4 30/32 25/32
[15 ; 38]
Uvéite 26,63
idio- 38 10/28
[21 ; 45]
26/38 18/38
pathique
(a) Les valeurs représentent les moyennes d’âge. Entre crochets appa-
raissent les valeurs maximale et minimale.
(Sigma, Saint Louis, USA), les cellules mononucléées du
sang périphérique (PBMC) ont été préparées par gra-
dient de densité sur de l’histopaque (d = 1,077) (Sigma,
Saint Louis, USA). Après une centrifugation à 750 × g
(2 800 tours/minute), les cellules ont été récupérées à
partir de l’interface plasma/histopaque et lavées deux
fois avec du tampon phosphate salin (PBS pH 7,2).
Après une centrifugation à 400 × g (1 500 tours/mi-
nute), les PBMC ont été suspendues dans du RPMI 1640
à 5 % de sérum de veau fœtal (Sigma, Saint Louis,
USA). La viabilité cellulaire a été estimée par le test d’ex-
clusion du bleu Trypan (viabilité ≥ 98,5 %). Par la suite,
les PBMC ont été mises en culture à une concentration
finale de 106 cellules/ml dans des microplaques de
culture contenant le milieu de culture — RPMI 1640
(Sigma) avec 10 % de sérum de veau fœtal (Sigma),
100 U/ml de pénicilline, 100 μg/ml de streptomycine et
4 mM de L-glutamine (Sigma) — en présence ou en ab-
sence de 10 μg/ml de phytohémagglutinine. Les cultures
ont été incubées pendant 24 heures à 37 °C dans une
atmosphère humide à 5 % de CO2. À la fin de la
culture, celles-ci ont été centrifugées à 800 × g
(3 000 tours/minute) et les surnageants ont été récupé-
rées et conservés à – 80 °C.
Dosage des interleukines 8 et 12
Les taux des interleukines 8 et 12 ont été mesurés par
dosage immuno-enzymatique (technique de l’ELISA
sandwich) en utilisant des Kits spécifiques à chaque cy-
tokine. La technique est basée sur la double capture de
l’antigène par deux anticorps spécifiques. La révélation
de la réaction est faite à l’aide d’un anticorps couplé à
une enzyme qui transforme son substrat en produit co-
loré. Le dosage a été effectué selon les recommanda-
tions des producteurs (pour l’interleukine 8, Biotrak,
Amersham Biosciences, G.B. et pour l’IL-12, Immuno-
tech, Coulter-Beckman, France). Les seuils de détection
étaient inférieurs à 2 pg/ml pour l’IL-8 et à 4 pg/ml pour
l’IL-12.
Dosage du monoxyde d’azote
Le monoxyde d’azote étant une molécule très instable,
l’estimation de sa production a été réalisée par le do-
sage de ses métabolites physiologiquement stables : les
nitrites et les nitrates. Ce dosage a été effectué par la
méthode de Griess modifiée. On a additionné 50 μl
d’échantillon (plasma ou surnageant de culture) à 25 μl
de PBS pH 7,2 et 25 μl d’une suspension bactérienne
de Pseudomonas oleovarans ATCC 8062, nitrate réduc-
tase+. Après une incubation à 37 °C pendant 90 minutes,
les préparations ont été centrifugées à 800 × g
(3 000 tours/minute), et les surnageants ont été re-
cueillis. Par la suite, les nitrites totaux ont été mesurés
par le dosage colorimétrique de Griess. En bref, 50 μl
de la préparation ont été additionné de 50 μl du réactif
de Griess et de 400 μl d’eau distillée. Après 20 minutes
d’incubation, l’intensité de la coloration a été mesurée
à 543 nm [15].
Étude statistique des données
La comparaison des différentes populations a été effec-
tuée par le test U de Mann-Whitney. La corrélation a
été calculée par le test de Spearman. Les différences 389
entre les groupes ont été considérées comme significa-
tives lorsque p < 0,05.
RÉSULTATS
Production de l’IL-8 au cours
des uvéites idiopathique et de type Behçet
L’étude de la production de l’IL-8 a montré une aug-
mentation significative des taux de l’IL-8 chez les deux
catégories de patients in vivo et in vitro. L’administration
des glucocorticoïdes a induit une diminution significative
de la production de l’IL-8 chez les deux catégories de
patients (p < 0,01) (fig. 1).
Production in vivo
Les taux plasmatiques de l’IL-8 ont montré une aug-
mentation significative (p < 0,001) chez les deux caté-
gories de patients par rapport aux sujets sains
(tableau II). Les patients atteints d’uvéite idiopathique
produisent des taux d’IL-8 supérieurs à ceux des sujets
sains et à ceux des patients atteints d’uvéite de type
Behçet (fig. 1a).
Les patients en cours de thérapie ont montré une
diminution significative de la production de l’IL-8 pour
les deux groupes (p < 0,01). Nous notons cependant un
effet plus significatif chez les patients atteints d’uvéite
idiopathique. En effet, chez ces derniers, les taux sériques
 H. Belguendouz et coll. J. Fr. Ophtalmol.

Tableau II
Concentrations plasmatiques d’IL-8, de NO et d’IL-12 chez les patients atteints d’uvéite Behçet ou idiopathique, avec ou sans thérapie, et chez les sujets sains.

Biomoléculesa Thérapie Catégorie des sujets

Uvéite idiopathique Uvéite Behçet Sujets sains
IL-8 (pg/ml) À la fin 12,66 ± 6
5,76 ± 3,63 –
En cours 174,68 ± 57
Aucune ou début 936,51 ± 186,41 207,1 ± 130,51 0±2
NO (μM) À la fin 79,58 ± 37,83
224,29 ± 50,61 –
En cours 195,83 ± 73,74
Aucune ou début 451 ± 25,88 374 ± 71,59 110,66 ± 49,18
IL-12 (pg/ml) En cours ou à la fin 69,49 ± 17,29 266,75 ± 113,96 –
Sans thérapie 255,25 ± 48,13 143 ± 36,21 4,8 ± 3,3
(a) : Les différentes concentrations sont exprimées en moyennes ± écart type.

diminuent proportionnellement avec la durée de théra-
pie (fig. 1a).
Production in vitro
Les profils de production de l’IL-8 obtenus in vitro dans
les surnageants de culture des PBMC chez les deux ca-
tégories de patients sont similaires à ceux obtenus in
390 vivo (fig. 1b). En effet, chez les patients sans thérapie,
la production de l’IL-8 est significativement augmentée
dans les deux modèles pathologiques étudiés en compa-
raison aux sujets sains. Nous avons noté une augmen-
tation très significative chez les patients atteints d’uvéite
idiopathique. La présence de la PHA à 10 μg/ml a induit
une augmentation significative (p < 0,05) de la produc-
tion de l’IL-8 chez les patients atteints d’uvéite idiopa-
thique et d’uvéite Behçet. Contrairement aux résultats
obtenus avec les cultures sans PHA, les teneurs en IL-8
des surnageants de cultures des PBMC des patients
atteints d’uvéite Behçet après stimulation sont supé-
rieures à celles des autres patients (fig. 1b).
En cours de thérapie, une diminution significative des
concentrations de l’IL-8 en corrélation avec la durée de
thérapie a été observée chez les deux catégories de pa-
tients avec un effet plus prononcé chez les patients at-
teints d’uvéite Behçet (fig. 1b). Les résultats obtenus
après la stimulation à la PHA montrent des différences
importantes entre les deux modèles pathologiques. En
effet, chez les patients atteints d’uvéite idiopathique, la
stimulation des PBMC induit une augmentation signifi-
cative des concentrations d’IL-8 dans les surnageants de
cultures de patients avec ou sans thérapie. En revanche,
chez les patients atteints d’uvéite Behçet, la stimulation

a b

Figure 1 : (a) Concentrations sériques de l’IL-8 dans les sérums des patients atteints d’uvéite Behçet ou idiopathique avec ou sans thérapie et chez
les sujets sains. (b) Effet de la thérapie sur la production de l’IL-8 in vitro par les PBMC des patients atteints d’uvéite Behçet ou idiopathique avec
ou sans induction. (SS : sujets sains ; UB : uvéite Behçet ; UI : uvéite idiopathique ; +GC : sous corticothérapie ; Thérapie : + + : en fin, + : en cours,
– : sans ou au début. * : différence significative comparée aux sujets sains).
Vol. 31, n° 4, 2008 Effet de la corticothérapie sur la réponse immune au cours des uvéites Behçet et idiopathique
des cellules induit une diminution significative des
concentrations de l’IL-8 chez les patients sous thérapie.
Nous avons observé que chez les patients sans thérapie,
l’action de la PHA augmentait significativement la pro-
duction de l’IL-8.
Production du NO au cours des uvéites
idiopathique et Behçet
L’étude de la production du NO a montré une augmen-
tation significative (p < 0,01) de ses taux chez les deux
catégories de patients in vivo et in vitro. Les profils ob-
tenus in vivo sont semblables à ceux de l’IL-8 chez les
deux catégories de patients. Cependant, les résultats
obtenus in vitro montrent des différences dans la ré-
ponse cellulaire avec ou sans induction avec la PHA chez
les sujets atteints d’uvéite Behçet ou idiopathique.
Production in vivo
Les taux plasmatiques de NO ont montré une augmen-
tation significative chez les deux catégories de patients
en comparaison avec les sujets sains (p < 0,05). Toute-
fois, nous n’avons pas noté de différence significative
entre les deux pathologies considérées (tableau II).
L’administration des corticoïdes aux patients réduit si-
gnificativement les taux de NO (p < 0,05). Nous notons
cependant un effet plus important chez les patients at-
teints d’uvéite idiopathique avec un profil identique à
celui de l’IL-8 (fig. 2a).
Production in vitro
La production de NO in vitro a montré un profil général
différent de celui de la production de l’IL-8. De plus, la
PHA a induit des réponses cellulaires différentes
(fig. 2b).
Les PBMC des patients ont produit des taux significa-
tivement plus élevés que ceux des sujets sains avec une
production significativement plus importante chez les
patients atteints d’uvéite idiopathique. Contrairement à
l’IL-8, une augmentation significative du NO est obser-
vée chez les patients et chez les sujets sains après sti-
mulation des cultures par la PHA (fig. 2b).
Après administration de la thérapie, nous notons une
diminution des taux de NO dans les deux cas (fig. 2b).
Bien que les patients atteints de l’uvéite idiopathique
aient un profil de production de NO identique à ceux
obtenus avec l’IL-8, ceux atteints d’uvéite Behçet mon-
trent une sensibilité plus faible à la thérapie. En effet,
nous avons noté que la réduction de la production du
NO n’est significative qu’en présence de PHA (fig. 2b).
Production de l’IL-12 au cours des uvéites
idiopathique et Behçet
Production in vivo
Les taux plasmatiques d’IL-12 chez les deux catégories
de patients à leur admission ont présenté une augmen-
tation significative (p < 0,05) comparés à ceux des sujets
sains. Nous n’avons pas observé de différence significa-
tive entre les pathologies (tableau II).
Nous avons noté que les concentrations de l’IL-12 des
patients sont toujours significativement supérieures à
celles des sujets contrôles et ce, en dépit de l’adminis-
tration des corticoïdes (p < 0,05). Toutefois, seuls les
patients atteints d’uvéite idiopathique répondent à la
thérapie avec une diminution significative des taux d’IL-12
(fig. 3a).
Production in vitro
Le profil de production de l’IL-12 in vitro montre d’im-
portantes différences entre les deux pathologies consi-
dérées. En effet, le profil de production de l’IL-12 chez
les patients atteints d’uvéite idiopathique, identique à
celui obtenu in vivo, est similaire à celui de l’IL-8 et du
NO avec ou sans thérapie. À l’inverse, le profil de pro-
duction de l’IL-12 chez les patients atteints d’uvéite
Behçet diffère de celui obtenu in vivo. La stimulation de
cellules en culture par la PHA à 10 μg/ml induit des ré-
ponses très hétérogènes en fonction de la durée de la
thérapie.
Contrairement aux résultats obtenus in vivo, les taux
de l’IL-12 retrouvés dans les surnageants de culture ont
diminué de façon proportionnelle à la durée d’adminis-
tration des corticoïdes. De même, il apparaît que seuls
les patients en cours de thérapie montrent une aug- 391
mentation significative des taux d’IL-12 après la stimu-
lation des PBMC par la PHA à 10 μg/ml (fig. 3b).
DISCUSSION
Cette étude porte sur l’uvéite idiopathique, pathologie
isolée spécifique d’organe, et l’uvéite de type Behçet,
une des manifestations d’une pathologie systémique.
Nos résultats ont montré une augmentation significa-
tive in vivo et in vitro des taux de l’IL-8, de l’IL-12 et du
NO chez les deux catégories de patients.
L’IL-8 est une chémokine intervenant principalement
dans l’activation et le chimiotactisme des neutrophiles
[17]. Sa production est augmentée durant les processus
inflammatoires. Elle est impliquée dans l’immunité
innée et adaptative et représente un marqueur de l’in-
flammation [28]. L’augmentation de la production de
l’IL-8 que nous avons observée chez les patients reflé-
terait le statut inflammatoire caractéristique des deux
pathologies. En effet, l’uvéite, par définition inflamma-
tion de l’uvée, est caractérisée par une infiltration cel-
lulaire au niveau des différentes structures oculaires
[29]. Cette infiltration est composée en grande partie
par des polynucléaires neutrophiles [29, 30]. D’autre
part, l’uvéite est caractérisée également par une activa-
tion des neutrophiles et par une production importante
des anions superoxydes [31, 32]. Ces différents phéno-
mènes pourraient être dus en partie à l’augmentation
 H. Belguendouz et coll. J. Fr. Ophtalmol.

2a 2b
3a 3b

392

Figure 2 : (a) Concentrations sériques de NO dans les sérums des patients atteints d’uvéite Behçet ou idiopathique et chez les sujets sains. (b) Effet
de la thérapie sur la production du NO in vitro par les de PBMC des patients atteints d’uvéite Behçet ou idiopathique avec ou sans induction. (SS :
sujets sains ; UB : uvéite Behçet ; UI : uvéite idiopathique ; +GC : sous corticothérapie ; Thérapie : ++ : en fin, + : en cours, – : sans ou au début. * :
différence significative comparée aux sujets sains).
Figure 3 : (a) Concentrations sériques de l’IL-12 chez les patients atteints d’uvéite Behçet ou idiopathique avec ou sans thérapie et chez les sujets
sains. (b) Effet de la thérapie sur la production de l’IL-12 in vitro par les de PBMC des patients atteints d’uvéite Behçet ou idiopathique avec ou sans
induction. (SS : sujets sains ; UB : uvéite Behçet ; UI : uvéite idiopathique ; +GC : sous corticothérapie ; Thérapie : ++ : en fin, + : en cours, – : sans
ou au début. * : différence significative comparée aux sujets sains).

des taux de l’IL-8. Par ailleurs, l’augmentation des taux
de l’IL-8 a été observée au cours de nombreuses patho-
logies systémiques à caractère inflammatoire [33]. La
production de l’IL-8 est plus importante chez les
patients atteints d’uvéite idiopathique que chez les
patients atteints d’uvéite de type Behçet. Ces résultats
indiqueraient un état inflammatoire plus exacerbé
durant les phases actives de l’uvéite idiopathique que
durant l’uvéite de type Behçet.
Nous avons observé une augmentation significative
des taux sériques de l’IL-12 dans les deux pathologies.
Cette cytokine intervient également durant l’immunité
innée (inflammation) et adaptative (spécifique). Elle est
cependant caractérisée par ses capacités d’activer les
différentes populations de lymphocytes T-CD4+ et T-CD8+,
les cellules NK et d’orienter la réponse immune vers un
profil Th1 en induisant la production de l’IFN-γ. Ce profil
de production a été observé lors de travaux antérieurs
au sein de l’équipe, mais également par plusieurs
auteurs [15, 34, 35].
La production du NO chez les patients atteints
d’uvéite de type Behçet ou d’uvéite idiopathique a
également montré une augmentation significative en
comparaison avec les sujets sains. Le NO est une molé-
cule qui intervient dans la phase effectrice, mais peut
également intervenir dans la régulation des réponses
cellulaires [19, 36]. Le NO est généralement synthétisé
par la NOS2 au cours des réponses immunes. Cette der-
nière est induite par de nombreuses cytokines produites
durant les réponses inflammatoires telles que l’IFNγ,
l’IL-6 et le TNF-α. L’IFN-γ est un marqueur de la réponse
Th1 et sa production est induite notamment par l’IL-12.
Toutes ces molécules participent à l’orientation de la ré-
ponse immune vers une réponse cellulaire [28, 37].
Cette dernière est caractérisée par la présence d’une
activation de lymphocytes T CD8+ et des cellules du sys-
Vol. 31, n° 4, 2008 Effet de la corticothérapie sur la réponse immune au cours des uvéites Behçet et idiopathique
tème monocyte/macrophage [38]. Les lésions oculaires
observées durant l’uvéite sont caractérisées par une in-
filtration de ces cellules ainsi que par une production
locale des chémokines qui leur sont spécifiques [39-41].
L’augmentation du taux de ces trois médiateurs serait
indicatrice de la réponse inflammatoire caractéristique
de l’uvéite et orienterait la réponse immune vers un pro-
fil Th1 au cours des deux pathologies étudiées.
Nous avons observé une diminution significative in
vivo et in vitro des taux des trois molécules étudiées
chez les deux catégories de patients. Les profils de pro-
duction ont montré une grande hétérogénéité dans les
réponses cellulaires avec ou sans induction.
Les glucocorticoïdes exercent un effet inhibiteur sur
les réponses inflammatoires [24]. Ils agissent générale-
ment au niveau transcriptionnel et post-transcriptionnel
[24, 42-44]. Ils affectent généralement l’activité du NFκB.
Ce dernier joue un rôle primordial dans les réponses
immunes puisqu’il intervient dans la transcription de
nombreuses molécules dont les cytokines. En effet, les
glucocorticoïdes inhibent la production de l’IL-8 et de
l’IL-12 au niveau transcriptionnel [45, 46]. Ils inhibent éga-
lement la production du NO en inhibant la synthèse de la
NOS2 au niveau transcriptionnel et post-transcriptionnel
[47].
Les différents résultats obtenus in vivo et in vitro in-
diqueraient que la production des trois molécules serait
régulée différemment au cours des deux types d’uvéites
et chez les sujets sains.
Les résultats relatifs à la production de ces médiateurs
immuno-inflammatoires au cours de l’uvéite idiopathi-
que ont montré une hyperproduction de l’IL-8 et du NO
indiquant un état fortement inflammatoire associé à la
pathologie considérée avec une implication majeure des
deux molécules. De plus, l’augmentation des taux de
l’IL-12, refléterait le rôle non négligeable des cytokines
de type Th1 observé auparavant par notre équipe [15].
La production de toutes ces molécules a montré une
importante sensibilité à la thérapie avec des réductions
significatives des taux in vivo et in vitro. Cet effet est
moins important sur la production de l’IL-12. Cette
différence impliquerait un mécanisme de régulation
différent de celui de l’IL-8 et du NO. En effet, l’IL-12
intervient principalement durant la réponse immune
adaptative [37, 38] alors que l’IL-8 et le NO interviennent
de manière plus marquée dans l’immunité innée et au
cours des processus inflammatoires [19, 47]. Ces
différences pourraient être dues à la diminution des
réponses inflammatoires non spécifiques produites par
les polynucléaires neutrophiles notamment pour la pro-
duction de l’IL-8 [28]. Les différences observées entre
les résultats obtenus in vivo et in vitro pourraient être
expliquées par l’absence des polynucléaires neutrophiles
dans la culture in vitro, effecteurs non négligeables durant
l’inflammation et source essentielle d’IL-8 et de NO.
Nous rappelons que les polynucléaires représentent une
cible pour les glucocorticoïdes administrés. Ces derniers
ne se retrouvent pas dans le milieu de culture.
Contrairement aux profils de production des trois mé-
diateurs au cours de l’uvéite idiopathique, ceux obtenus
au cours de l’uvéite de type Behçet montrent une très
grande hétérogénéité in vivo et in vitro. Cet effet est
encore plus marqué suite à l’administration des gluco-
corticoïdes. En effet, avant l’administration des corti-
coïdes, les taux de l’IL-12 retrouvés in vivo ont montré
une très grande variabilité (48,5 pg/ml-673,5 pg/ml).
Cette hétérogénéité est relativement diminuée au cours
de la thérapie. Cette diversité refléterait celle de la po-
pulation des lymphocytes Th selon les patients. Quoique
l’importante production d’IL-12 indique un profil des
cytokines de type Th1, la production de faibles quanti-
tés d’IL-10 par un faible nombre de cellules Th0 pourrait
être à l’origine de l’effet observé. Cette hétérogénéité
pourrait également être due à la présence d’un profil
mixte Th1/Th2 avec une prédominance du profil Th1.
Ce profil a été préalablement observé par notre équipe
[15]. De plus, la diminution significative des taux d’IL-12
observé suite à l’administration des corticoïdes pourrait
être expliquée par la production des cytokines de la voie
Th2 induite par l’action additionnelle et/ou synergique
des glucocorticoïdes et de la PHA. Ces deux molécules
induisent la production des interleukines 4 et 10 in vivo
et in vitro [48, 49]. Toutes ces données sont en accord
avec l’hypothèse d’une réponse plus spécifique chez les
patients atteints d’uvéite de type Behçet.
Chez les patients atteints d’uvéite de type Behçet, la 393
stimulation des cultures de PBMC par la PHA a induit
une augmentation importante des taux de l’IL-8 et de
NO. Ce résultat indiquerait que les synthèses de l’IL-8
et le NO se trouveraient sous une régulation différente
de celle de l’IL-12. Le NO serait produit par la NOS2
induite par l’IL-12 ou l’IFN γ. En effet, la production im-
portante de l’IFN γ a été mise en évidence chez les pa-
tients atteints d’uvéite Behçet dans de nombreux tra-
vaux dont ceux de notre équipe [15, 49, 50]. L’IFNγ est
un puissant inducteur de la synthèse de la NOS2 [51]. Il
est lui-même induit par l’IL-12 [38]. La production si-
multanée d’IL-12 et d’IFN-γ expliquerait l’absence d’in-
hibition dans la production du NO. La synthèse de l’IL8
serait régulée par d’autres mécanismes ou cytokines. La
production de l’IL-8 est fortement induite par l’IL-1 ou
le TNF-α. Ces deux cytokines sont retrouvées à très
fortes concentrations chez les patients atteints de la
maladie de Behçet [52, 53].
CONCLUSION
Notre étude a porté sur la production de trois média-
teurs impliqués dans les réponses immunitaires inflam-
matoires et/ou spécifiques au cours de la thérapie aux
corticoïdes de patients atteints d’uvéite idiopathique,
une pathologie spécifique d’organe, ou d’uvéite
Behçet, une manifestation d’une maladie systémique.
Nos résultats ont montré une augmentation des taux
 H. Belguendouz et coll.
des trois molécules avant le début du traitement des
patients. Les profils obtenus in vivo, ont montré des
similitudes entre les deux catégories de patients avec
un effet moins prononcé chez les patients atteints
d’uvéite Behçet. Ces résultats impliqueraient une diffé-
rence dans la réponse cellulaire chez les deux catégories
de patients. Chez les patients atteints d’uvéite idio-
pathique, l’implication des processus inflammatoires
non spécifiques est plus importante que chez les pa-
tients atteints d’uvéite Behçet. L’IL-8 a montré des pro-
fils similaires au cours des deux pathologies et pourrait
constituer un marqueur commun pour le suivi des réac-
tions inflammatoires retrouvées au cours des deux pa-
thologies. À l’inverse, l’IL-12 a montré des profils de
production différents in vivo et in vitro au cours des
pathologies. Ces données lui confèrent un rôle de bio-
marqueur dans l’évolution des réponses spécifiques
associées aux deux pathologies. Elle représenterait éga-
lement un bon marqueur de suivi de la réponse à la
corticothérapie et permettrait d’apprécier l’efficacité de
la thérapie et le suivi de l’évolution de la pathologie.
RÉFÉRENCES
1. Flament J. Ophtalmologie. Pathologie de l’œil. Paris : Éd Masson ;
2002, p. 133-41.
394 2. Brézin A. Sémiologie et classification des uvéites. La revue du pra-
ticien, 1999;49:1982-98.
3. Chaine G. Ophtalmologie. Paris : Éd doin ; 2000, p. 87-103.
4. McCluskey PJ, Towler HMA, Lightman S. Management of chronic
uveitis. BMJ, 2000;320:555-8.
5. Whitcup SM. The double-edged ocular immune response: the
Cogan lecture. Invest Ophthalmol Vis Sci, 2000;41:3243-8.
6. Cassoux N, Fardeau C, Lehoang P. Manifestations oculaires de la
maladie de Behçet. Ann Med Interne, 1999;150:529-34.
7. Yato H, Matsumoto Y. CD 56+ T cells in the peripheral blood of
uveitis patients. Br J Ophthalmol, 1999;83:1386-8.
8. Huhtinen M, Repo H, Laasila K, Jansson SE, Kautiainen H, Karma
A, et al. Systemic inflammation and innate immune response in
patients with previous anterior uveitis. Br J Ophthalmol,
2002;86:412-7.
9. Murray PI, Hoekzema R, van Haren MA, de Hon FD, Kijlstra A.
Aqueous humor interleukin-6 levels in uveitis. Invest Ophthalmol
Vis Sci, 1999;31:917-20.
10. Taguchi C, Sugita S, Tagawa Y, Nishihira J, Mochizuki M. Macro-
phage migration inhibitory factor in ocular fluids of patients with
uveitis. Br J Ophthalmol, 2001;85:1367-71.
11. Murphy CC, Duncan L, Forrester JV, Dick AD. Systemic CD4+ T cell
phenotype and activation status in intermediate uveitis. Br J
Ophthalmol, 2004;88:412-6.
12. Whittle RM, Wallace GR, Whiston RA, Dumonde DC, Stanford MR.
Human antiretinal antibodies in toxoplasma retinochoroiditis. Br J
Ophthalmol, 1998;82:1017-21.
13. de Smet MD, Bitar G, Mainigi S, Nussenblatt RB. Human S-antigen
determinant recognition in uveitis. Invest Ophthalmol Vis Sci,
2001;42:3233-8.
14. Deeg CA, Kaspers B, Gerhards H, Thurau SR, Wollanke B, Wildner
G. Immune responses to retinal autoantigens and peptides in
equine recurrent uveitis. Invest Ophthalmol Vis Sci, 2004;42:393-8.
15. Guenane H, Hartani D, Chachoua L, Lahlou-Boukoffa OS, Mazari
F, Touil-Boukoffa C. Production des cytokines Th1/Th2 et du
monoxyde d’azote au cours de l’uvéite « Behçet » et de l’uvéite
idiopathique. J Fr Ophtalmol, 2006;29:146-52.
J. Fr. Ophtalmol.
16. Mirza GE, Karakuçuk S, Er M, Gungormus N, Karakuçuk I, Saray-
men R. Tear nitrite and nitrate levels as nitric oxide end products
in patients with Behçet’s disease and non-Behçet’s uveitis.
Ophthalmic Res, 2001;33:48-51.
17. Zlotnik A, Yoshie O. Chemokines: a new classification system and
their role in immunity. Immunity, 2000;12:121-7.
18. Williams G, Borkakoti N, Bottomley GA, Cowan I, Fallowfield AG,
Jones PS, et al. Mutagenesis studies of interleukin-8. Identification
of a second epitope involved in receptor binding. J Biol Chem,
1996;271:9579-86.
19. Moncada S. Nitric oxide: discovery and impact on clinical medicine.
J Roy Soc Med, 1999;92:164-9.
20. Arya SK, Wong-Staal F, Gallo RC. Dexamethasone-mediated inhi-
bition of human T cell growth factor and γ-Interferon messenger
RNA. J Immunol, 1984;133:273-6.
21. Adcock IM, Nasuhara Y, Stevens DA, Barnes PJ. Ligand-induced
differentiation of glucocorticoid receptor (GR) trans-repression and
transactivation: preferential targetting of NF-kB and lack of I-kB
involvement. Br J Pharmacol, 1999;127:1003-11.
22. Nissen RM, Yamamoto KR. The glucocorticoid receptor inhibits
NFκB by interfering with serine-2 phosphorylation of the RNA poly-
merase II carboxy-terminal domain. Genes & Developement,
2000;14:2314-29.
23. Ashwell JD, Lu FW, Vacchio MS. Glucocorticoids in T cell develop-
ment and function. Annu Rev Immunol, 2000;18:309-45.
24. Franchimont D, Galon J, Gadina M, Visconti R, Zhou Y, Aringer M,
et al. Inhibition of Th1 immune response by glucocorticoids: dexa-
methasone selectively inhibits IL-12-induced stat4 phosphorylation
in T lymphocytes. J Immunol, 2000;164:1768-74.
25. Bodaghi B, Gendron G, Wechsler B, Terrada C, Cassoux N, Huong
du LT, et al. Efficacy of interferon alpha in the treatment of refrac-
tory and sight-threatening uveitis: a retrospective monocentric
study of 45 patients. Br J Ophtalmol, 2007;91:335-9.
26. Tugal-Tutkun I, Güney-Tefekli E, Urgancioglu M. Results of inter-
feron-alfa therapy in patients with Behçet uveitis. Graefes Arch Clin
Exp Ophthalmol, 2006;244:1692-5.
27. International Study Group for Behçet’s Disease. Criteria for diagno-
sis of Behçet’s disease. Lancet, 1990;335:1078-80.
28. Murphy PM, Baggiolini M, Charo IF, Hébert CA, Horuk R, Mat-
sushima K, et al. International Union of Pharmacology. XXII.
Nomenclature for Chemokine Receptors. Pharmacol Rev,
2000;52:145-76.
29. Tugal-Tutkun I, Urgancioglu M, Foster CS. Immunopathologic
study of the conjunctiva in patients with Behçet disease. Ophthal-
mology (Rochester MN), 1995;102:1660-8.
30. Hashida N, Ohguro N, Yamamoto S, Nakagawa Y, Tano Y. Unusual
neutrophil infiltration under the soft contact lens in a patient with
Behçet’s disease. Jpn J Ophthalmol, 2003;47:469-72.
31. Carletto A, Pacor ML, Biasi D, Caramaschi P, Zeminian S, Bella-
vite P, et al. Changes of neutrophil migration without modification
of in vitro metabolism and adhesion in Behcet’s disease. J Rheu-
matol, 1997;24:1332-6.
32. Eksioglu-Demiralp E, Direskeneli H, Kibaroglu A, Yavuz S, Ergun T,
Akoglu T. Neutrophil activation in Behcet’s disease. Clin Exp Rheu-
matol, 2001;19(Suppl 24):S19-24.
33. Lit LC, Wong CK, Tam LS, Li EK, Lam CW. Raised plasma concen-
tration and ex vivo production of inflammatory chemokines in
patients with systemic lupus erythematosus. Ann Rheum Dis,
2006;65:209-15.
34. Ben Ahmed M, Houmam H, Miled M, Dellagi, Louzir H. Involve-
ment of chemokines and Th1 cytokines in the pathogenesis of
mucocutaneous lesions of Behçet’s disease. Arthritis rheum,
2004;50:2291-5.
35. Koarada S, Haruta Y, Tada Y, Ushiyama O, Morito F, Ohta A, et
al. Increased entry of CD4+ T cells into the Th1 cytokine effector
pathway during T-cell division following stimulation in Behcet’s
disease. Rheumatology, 2004;43:843-51.
36. Dugas B, Debré P, Monocada S. Nitric oxide, a vital poison inside
the immune response and inflammatory network. Res Immunol,
1995;146:664-70.
Vol. 31, n° 4, 2008 Effet de la corticothérapie sur la réponse immune au cours des uvéites Behçet et idiopathique
37. Gately MK, Renzetti LM, Magram J, Stern AS, Adorini L, Gubler U,
et al. The interleukin-12/interleukin-12- receptor system: role in
normal and pathologic immune responses. Annu Rev Immunol,
1998;16:495-521.
38. Romani L, Puccetti P, Bistoni F. Interleukin-12 in Infectious Diseases.
Clin Microbiol Rev, 1997;10:611-36.
39. Hiroshi K, Jun-Ichi S, Kusuki N, Takayuki S, Masahiko U. Clonally
accumulating T cells in the anterior chamber of Behçet disease. Am
J Ophthalmol, 2000;130:243-5.
40. Kaburaki T, Fujino Y, Kawashima H, Merino G, Numaga J, Chen J,
et al. Plasma and whole-blood chemokine levels in patients with
Behcet’s disease. Graefe’s Arch Clin Exp Ophthalmol, 2003;241:
353-8.
41. Mi-La C, Ju-Young K, Hyeok-Jae KO, Young-Hoon K, Wan-Uk K,
Chul-Soo C, et al. The MCP-1 promoter — 2,518 polymorphism
in Behcet’s disease: Correlation between allele types, MCP-1 pro-
duction and clinical symptoms among Korean patients. Autoimmu-
nity, 2004;37:77-80.
42. Stellato C. Post-transcriptional and nongenomic effects of gluco-
corticoids. Proceedings of the American Thoracic Society,
2004;1:255-3.
43. Tobler A, Meier R, Seitz M, Dewald B, Baggiolini M, Fey MF. Glu-
cocorticoids Downregulate Gene Expression of GM-CSF, NAP-l/IL-S,
and IL-6, but not of M-CSF in Human Fibroblasts. Blood,
1992;79:45-51.
44. Mukaida N, Morita M, Ishikawa Y, Rice N, Okamoto S. Novel
Mechanism of Glucocorticoid-mediated Gene Repression. Nuclear
factor-KB is target for glucocorticoid-mediated interleukin 8 gene
repression. J Biol Chem, 1994;269:13289-95.
45. Walker G, Pfeilschifter J, Kunz D. Mechanisms of Suppression of
Inducible Nitric-oxide Synthase (iNOS) Expression in Interferon
(IFN)-γ-stimulated RAW 264.7 Cells by Dexamethasone. Evidence
for glucocorticoid-induced degradation of iNOS protein by calpain
as a key step in post-transcriptional regulation. J Biol Chem,
1997;272:16679-87.
46. Ahuja SK, Lee JC, Murphy PM. CXC chemokines bind to unique
sets of selectivity determinants that can function independently
and are broadly distributed on multiple domains of human interleu-
kin-8 receptor B. Determinants of high affinity binding and recep-
tor activation are distinct. J Biol Chem, 1996;271:225-32.
47. Christopherson II K, Hromas R. Chemokine regulation of normal
and pathologic immune responses. Stem Cells, 2001;19:388-96.
48. Williams L, Jarai G, Smith A, Finan P. IL-10 expression profiling in
human monocytes. J Leukoc Biol, 2002;72:800-9.
49. Woltman AM, van der Kooij SW, de Fijter JW, van Kooten C. Matu-
ration-resistant dendritic cells induce hyporesponsiveness in allo-
reactive CD45RA+ and CD45RO+ T-cell populations. Am J
Transplant, 2006;6:2580-91.
50. Hamzaoui K, Hamzaoui A, Guemira F, Bessioud M, Hamza M, Ayed
K. Cytokine profile in Behçet’s disease patients. Relationship with
disease activity. Scand J Rheumatol, 2002;31:205-10.
51. Boehm U, Klamp T, Groot M, Howard JC. Cellular responses to
interferon-gamma. Annu Rev Immunol, 1997;15:749-95.
52. Akdeniz N, Esrefoglu M, Keles MS, Karakuzu A, Atasoy M. Serum
interleukin-2, interleukin-6, tumour necrosis factor-alpha and nitric
oxide levels in patients with Behcet’s disease. Ann Acad Med Sin-
gapore, 2004;33:596-9.
53. Bardak Y, Aridogan BC. The demonstration of serum interleukin
6-8, tumor necrosis factor-alpha, complement, and immunoglobu-
lin levels in Behçet’s disease with ocular involvement, Ocul Immu-
nol Inflamm, 2004;12:53-8.
395