!"#$%!"#$"%& &'6-(0.=.(*+6%7,'+.

0,%-6*%)2A)+',+6
Pipetear en cubetas Blanco de Muestra ò
reactivo (Br) !+.(%
Método GLDH
Muestra / !+.(% --- 10 µl
Método completamente enzimático para !#)*% 1000 µl 1000 µl
determinaciones cinéticas de urea
Mezcle, incube por 1 minuto aproximadamente.
&'()(*+,-./*%0(1%()+2-3( !+,-% 250 µl 250 µl
!"#$% 10521 8 x 50ml Estuche completo Mezcle, lea la absorbancia de la muestra/!+.(% después de 30
10104 9 x 3ml Estándar segundos (A1). Active el cronómetro y lea exactamente 1 minuto
!&'(% después (A2). Calcule la diferencia de absorbancia:
$AMuestra/!+.(% = (A2 - A1) - $ABr.
45+606%1,2,3
La urea es hidrolizada en presencia de agua y ureasa para producir &'6-(0.=.(*+6%7,'+.0,%-6*%=2()+',
amonio y dióxido de carbono. El amonio producido en esta reacción se Pipetee en las cubetas Blanco de Muestra ò
combina con 2-oxoglutarato y NADH en presencia de glutamato- reactivo (Br) !+.(%
deshidrogenasa (GLDH) para formar glutamato y NAD+. La prueba ha Muestra / !+.(% --- 10 µl
sido mejorada de forma que la GLDH es la enzima límite. La 1000 µl 1000 µl
Reactivo de trabajo
disminución de la absorbancia es proporcional a la concentración de
urea dentro de los intervalos de tiempo dados. Ya que la prueba Mezcle, lea la absorbancia de la muestra/!+.(% después de 30
cinética es muy rápida, ha sido diseñada para ser realizada segundos (A1). Active el cronómetro y lea exactamente 1 minuto
preferiblemente en analizadores. después (A2). Calcule la diferencia de absorbancia:
$AMuestra/!+.(% = (A2 - A1) - $ABr.
&'.*-.7.6%0(%1,%'(,--./*
ureasa
8,1-216)%0(%1,%-6*-(*+',+.6*%0(%2'(,
Urea + 2 H2O !!" 2 NH4+ + CO32- @2('6L%71,)=,
GLDH C = 80 X $A muestra / $A !+.(% [mg/dl] o
2-oxoglutarato + NH4+ !!" L-glutamato + H2O + NAD+ C = 13,3 $A muestra / $A !+.(% [mmol/l]
+ NADH
M'.*,
86*+(*.06)
!#)*% 9%:%;<%=1%#*>.=,) C = 80,8 X $A muestra / $A !+.(% [mg/dl] o
Buffer Tris (pH 7,8) 120 mmol/l C = 1340 X $A muestra / $A !+.(% [mmol/l]
ADP 750 mmol/l N,-+6'()%0(%-6*E(').6*%7,',%O!P%Q%2'(,
Ureasa # 40 kU C (BUN) = 0,466 X C (urea) C (urea) =2,14 X C (BUN)
GLDH # 0,4 kU
8,',-+('R)+.-,)%0(%1,%(F(-2-./*
!+,-% 9%:%?<%=1%@2A)+',+6 Linearidad
2-Oxoglutarato 25 mmol/l La prueba es lineal hasta 300 mg/dl ó 50 mmol/l.
NADH 1,2 mmol/l La linearidad depende del analizador utilizado.
!+.(% ?%B%C%=1%#)+D*0,' Muestras con concentraciones superiores deben diluirse 1 + 1 con
Urea 80 mg/dl agua destilada y se debe repetir la prueba. Multiplique los resultados
ó 13,3 mmol/l por 2.
Los datos típicos de ejecución de la prueba pueden ser encontrados
&'(7,',-.6*%0(1%'(,-+.E6
en el informe de verificación, accesible vía
!#)*% y !+.(% están listos para usar y se pueden aplicar directamente
www.human.de/data/gb/vr/su-urluv.pdf ó
en analizadores automatizados (procedimiento partida con substrato).
www.human-de.com/data/gb/vr/su-urluv.pdf
El '(,-+.E6% 0(% +',A,F6 (procedimiento partida con muestra) se
prepara mezclando 4 partes de !#)*% con 1 parte de !+,-%. 86*+'61%0(%-,1.0,0
Ej: 40 ml !#)*% + 10 ml !+,-%. Se pueden emplear todos los sueros control con valores de urea
determinados por este método.
#)+,A.1.0,0%0(1%'(,-+.E6 Recomendamos el uso de nuestro suero control HUMATROL de
Cuando se almacenan los reactivos entre 2...8°C, se mantienen esta- origen animal ó nuestros SERODOS de origen humano.
bles hasta la fecha de caducidad, aún después de abrir. Se debe
evitar la contaminación de los reactivos. $2+6=,+.>,-./*
El '(,-+.E6%0(%+',A,F6 se mantiene estable por 5 días entre 15...25°C Proposiciones para la aplicación de los reactivos sobre analizadores
y por 4 semanas entre 2...8°C. están disponibles sobre demanda. Cada laboratorio tiene que validar la
aplicación en su propia responsabilidad.
42()+',
Suero, plasma, excepto plasma heparinato de amonio, ó orina. P6+,)
Diluya la orina 1 + 100 con agua destilada (resultados X 101) Todos los reactivos contienen azida de sodio (0,095%) como
preservativo. No ingerir, evitar el contacto con la piel y las membranas
#*),G6 mucosas.
Longitud de onda: 340nm, Hg 334 nm, 365 nm
Paso óptico: 1 cm S.+(',+2',
Temperatura: 25°C, 30°C ó 37°C 1. Kassirer, J. P., New Eng. J. Med. T9U, 385 (1971)
Medición: Contra blanco de reactivo (Br). 2. Talke, H., Schubert, G. E., Klin. Wochenschr. ;C, 174 (1965)
Sólo se necesita un blanco de reactivo por 3. Tietz, N. W., Fundamentals of Clinical Chemistry, 3rd. Edition
serie. Cinética de 2 puntos. (1987), 676 - 679, W. B. Saunders Company Philadelphia
4. MacKay, E. M., MacKay, L. L, J. Clin. Invest. ;, 295 (1927)
H,16'()%0(%'(I('(*-.,%4,5 5. Sarre, H., Nierenkrankheiten, Georg Thieme Verlag Stuttgart
Suero: 10 - 50 mg/dl o 1,7 – 8,3 mmol/l (1959)
Orina: 20 - 35 g/24h o 333 - 583 mmol/24h
J*+('I('(*-.,)
La prueba no es influenciada por hemoglobina hasta 500 mg/dl,
triglicéridos hasta 2000 mg/dl, bilirrubina hasta 60 mg/dl, glucosa
hasta 500 mg/dl y ácido ascórbico hasta 30 mg/dl. SU-URLUV

#)K2(=,%0(%7.7(+(6
INF 1052101 E
10-2005-6 !
Por favor utilice únicamente el estándar recomendado por HUMAN
(dentro del estuche o disponible por separado !"#$% 10104)

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