Compte rendu : préparation de milieu de culture gélose

nutritive

Introduction :
En biologie, la gélose nutritive est un milieu de culture non sélectif car il
ne permet pas de sélectionner une souche bactérienne précise. Ce milieu
permet donc à toutes souches bactériennes de pouvoir poussé à
condition qu’elles soient non exigeantes elle permet la culture de
microorganismes en microbiologie.

Matériels et méthodes :
- Fiole

-Bécher

- Agitateur

-Balance

- Spatule

- Cylindre gradué

-Peptone 5g
- Extrait de levure 2g

- Extrait de viande 1g

- Glucose 2g, Na cl 5g, agar 15-20g,

-H2O 1000ml, pH 7 / 7, 4
Méthode de travail:

On va verser la quantité d’eau distillé à l’aide d’un cylindre gradué on se dirige

ensuite à la balance pour peser le milieu de culture en poudre, on allume puis
on assure qu’elle est à 0 ensuite on pèse 2g de glucose et 2g d’extrait de viande
le peptone et Na cl à puis on verse le tous dans le bécher contentent de ‘eau
distillé et on mélange a l’aide d’une spatule en métal on ajoute un agitateur
magnétique a l‘intérieur du bécher et mettre le tout sur la plaque chauffante
jusqu’à le milieu de culture bouille puis l’enlever ensuite on prend la bouteille
en verre et on verse le tout dedans après on ajoute l’agar et on homogénéise
puis la mettre dans l’autoclave pour stérilisé cette dernière en général une
stérilisation de 15-20 minutes à 120°C est préconisée.

On attend jusqu’à la préparation refroidis et on coule le milieu dans des boites

de pétris

Alors on assure d’abord les conditions de stérilisation, on met les boite de

pétris à cote on allume le bec bunsen et on entame notre travail

Avant e commencer, on allume le bec bunsen présent sur la paillasse, en

faisant en sorte que la flamme soit bleue

Ceci a pour but de rendre stérile notre environnement.

Lors de cette manipulation on doit rester à proximité de la flamme après on

sort les boites de pétri de leur emballage et on les place a cote de la flamme,
âpres on ôte le couvercle de la boite de pétri ainsi que la protection du milieu
de culture et remplir la boite avec ce dernier jusqu’à un peu moins que la
moitié de la boite on referme immédiatement la boite une fois celle-ci remplie
et on passe à la suivante on emporte les boites a frais ce qui empêche toute
prolifération.