Laboratorio bioquímica:

Proteínas, detección y
Cuantificación

Integrante: Franchesca Álvarez

Matías Araya

Materia: Laboratorio bioquímica

Introducción:
Las proteínas constituyen el grupo de biomoléculas más abundante de los seres vivos, ya que
suponen el 50% del peso seco, por término medio.
Los prótidos están formados por carbono, hidrógeno, oxígeno y nitrógeno, aunque en ocasiones
aparecen fósforo y azufre, y algunos elementos metálicos, como hierro y cobre.
Las proteínas son polímeros de aminoácidos unidos por enlaces peptídicos. Según el número de
aminoácidos que componen el polímero, distinguimos entre péptidos y proteínas.

Existe una gran variedad de métodos para reconocer y cuantificar las proteínas como el
espectrofotómetro que sirve:
“ Un espectrofotómetro es un instrumento usado en el análisis químico que sirve para medir, en
función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica
relativos a dos haces de radiaciones y la concentración o reacciones químicas que se miden en una
muestra. También se utiliza en laboratorios de química para
la cuantificación de sustancias y microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotómetros, que son de absorción atómica, de absorción molecular
(que comúnmente se conoce como espectrofotómetro UV-VIS), y no debe ser confundido con un
espectrómetro de masa.
Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a través de una
muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al
operador realizar dos funciones:

1. dar información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra

2. indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia que nos interesa está presente en la
muestra

entonces la cantidad de luz absorbida es directamente proporcional a la cantidad de luz absorbida

es directamente proporcional al espesor del medio y a la concentración de la sustancia presente.
De esta manera nos indicara la cantidad de sustancia que esta presente en la muestra, en este
caso las proteínas.
Todo está relacionado con la Ley de lamber debido a que es un medio matemático para expresar
como la materia absorbe la luz. Esta ley afirma que la cantidad de luz que sale de una muestra es disminuida por tres
fenómenos físicos:

1.La cantidad de material de absorción en su trayectoria(concentración).

2.La distancia que la luz debe atravesar a través de la muestra (distancia de la trayectoria óptica).

3.La probabilidad de que el fotón de esa amplitud particular de ondas es absorbido por el material (absorbencia o
coeficiente de extinción.
Resultados:

Tubos 1 2 3 4 5 6 MP

Nacl o,9 p/v 2,0 1,8 1,5 1,0 0,5 - -

SAB 5 Mg - 0,2 0,5 1,0 1,5 2,0 -

/Ml
Ovoalbúmina - - - - - - 2,0
diluida 1:20
Reactivo 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0
biuret
Absorbancia 0,000 0,041 0,075 0,171 0.187 Eliminada 0,127

BSA 5 Mg/Ml 0 0,2 0,5 1,0 1,5 Eliminada 2,0

Resultados con
Ovoalbúmina

A= 0,034

B= 0,075

r= 0,798

Resultados sin
Ovoalbúmina

A= 0,011

B= 0,129

r= 0,973
 Curva de calibración
0.2
0.18
0.16
0.14
Absorvancia

0.12
0.1
0.08
0.06
0.04
0.02
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5
BSA 5Mg/Ml
Conclusión
la cuantificación de las proteínas es esencial para todos los experimentos relacionados con
proteínas en una multitud de temas de investigación. Se han desarrollado diferentes métodos
para cuantificar proteínas totales, o alguna en particular. Los métodos de cuantificación de
proteínas totales incluyen métodos tradicionales tales como la medición de la absorbancia. En
el que ayuda el espectrofotómetro, para saber que absorbancia tenía cada muestra.
Bibliografía:

- Guía de laboratorio de “PROTEINAS, DETECCION Y CUANTIFICACION”

-https://es.wikipedia.org/wiki/Espectrofot%C3%B3metro