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2016
2016
Hematología Clínica UST
Contenido
INTERVALOS DE REFERENCIA DE PARAMETROS HEMATOLOGICOS ...............................................................1
VALORES DE ALERTA EN HEMATOLOGÍA .............................................................................................................5
VARIABILIDAD BIOLÓGICA EN PARÁMETROS HEMATOLÓGICOS ......................................................................6
FLUJOGRAMA EN ESTUDIO DE TROMBOCITOPENIA ...........................................................................................7
MODELO CLASICO DE LA COAGULACION: VIA INTRINSECA Y EXTRINSECA ....................................................8
NUEVO MODELO CELULAR DE LA COAGULACION. ..............................................................................................9
....................................................................................................................................................................................9
FLUJOGRAMA DEL ESTUDIO DE TRASTORNOS DE LA COAGULACIÓN...........................................................10
FLUJOGRAMA DEL ESTUDIO DE LAS TROMBOFILIAS........................................................................................11
DIMERO D ................................................................................................................................................................12
ANTITROMBINA III ...................................................................................................................................................13
TECNOLOGIA DE LOS CONTADORES HEMATOLOGICIOS .................................................................................14
GLOSARIO DE TÉRMINOS USADOS EN HEMATOLOGÍA ....................................................................................23
ICSH Recommendations for Peripheral Blood Cell Morphology Standardization and Grading .................................25
RECOMENDACIONES PARA LA INTERPRETACIÓN DEL HEMOGRAMA: SERIE ROJA .....................................30
INCLUSIONES ERITROCITARIAS ...........................................................................................................................33
CONSENSO PARA INFORME DE ALTERACIONES EN EL HEMOGRAMA ...........................................................36
ALGORITMO DE ESTUDIO DE ANEMIAS ARREGENERATIVAS EN EL ADULTO. ...............................................37
ALGORITMO DE ESTUDIO DE ANEMIAS ARREGENERATIVAS EN EL RECIEN NACIDO. .................................38
CUADRO DIFERENCIAL EN LA ANEMIA MICROCITICA .......................................................................................39
PRUEBAS DE LABORATORIO EN ALTERACIONES HEMATOLÓGICAS..............................................................40
FLUJOGRAMA DEL ESTUDIO DE ANEMIA NORMOCITICA ..................................................................................42
FLUJOGRAMA DEL ESTUDIO DE ANEMIA MICROCITICA ....................................................................................43
RESISTENCIA OSMÓTICA ......................................................................................................................................46
INFORME DE RESISTENCIA OSMOTICA ERITROCITARIA ..................................................................................51
ELECTROFORESIS DE HEMOGLOBINA ................................................................................................................52
HEMOGLOBINA FETAL ...........................................................................................................................................54
SCREENING TEST PARA LA DEFICIENCIA DE G6PD ...........................................................................................56
CUERPOS DE HEINZ ...............................................................................................................................................57
TECNICA DE PROVOCACION DE CUERPOS DE HEINZ ......................................................................................58
TINCIÓN DE HEMOSIDERINA MEDULAR ..............................................................................................................59
HEMOGRAMA ..........................................................................................................................................................60
CELULAS SANGUÍNEAS NORMALES ....................................................................................................................79
Hematología Clínica UST
2016
Título Debe sintetizar el tema del trabajo y debe ser atractivo para el lector. Antes de la introducción (centrado)
Autor Nombrar al o los autores que realizan el trabajo. Institución de trabajo o estudio. Año
Resumen El resumen debe contener entre 100 a 150 palabras.
Palabras claves Incluir entre 3 a 6 palabras claves del trabajo.
Hacer la presentación general del tema que se tratará en el Review, logrando persuadir al lector. Primer párrafo
INTRODU
CCIÓN
Estructuración Hacer referencia a los diferentes puntos que se trataran en el desarrollo del trabajo, abordando temas
desde lo general a lo específico. Segundo párrafo
clasificación, diagnóstico y tratamiento actualizado del tema a desarrollar según sea el caso.
LLO
Resumir lo relevante del tema, y plantear los puntos más importantes de acuerdo a lo invesigado.
ÓN
Estructuración
Plantear una pregunta o desafío de investigación futura.
Citar los textos y artículos usados en el trabajo (≥10) según formato APA o Vancouver (Revistas científicas, libros, etc)
OGRA
BIBLI
FIA
Final
Formato
Redactar el documento en 4 páginas tamaño carta
Letra arial narrow tamaño 11 interlineado simple, diseño de página 2 columnas, después del título del trabajo y autor.
El trabajo escrito debe entregarse el día de la presentación oral y enviar el archivo al profesor en formato Word (no se aceptarán entregas posteriores).
El trabajo se realizará individualmente
Evaluación: corresponde a seminarios de Cátedra y tiene una ponderación del 3% del total del curso.
La evaluación se realizara mediante Rúbrica, considerando:
Exposición oral: 30%, Trabajo escrito: 50% y Participación en otros seminarios
(preguntas):20%
PAPER
Objetivo: desarrollar habilidades de búsqueda, identificación y selección de material científico relevante y desarrollar habilidades de trabajo en equipo, análisis y
discusión crítica.
La elección del paper estará a cargo del profesor de laboratorio, por lo tanto los alumnos deberán enviar al profesor vía email 2 trabajos propuestos, por lo menos
con 2 semanas de anticipación.
El paper estará publicado en el aula virtual del curso por lo tanto todos los estudiantes deben leerlo para realizar la discusión y realizar preguntas.
Evaluación: corresponde a seminarios de Laboratorio y que tiene una ponderación del 3% del total del curso y constará de:
Rúbrica: 70%
Evaluación
ITEM A EVALUAR
4 3 2 1
Dominio y comprensión del tema expuesto
Conocimientos/ Contenidos pertinentes a los aprendizajes esperados
Contenidos Análisis de los resultados
Conclusiones fundamentadas con precisión
Presentación de forma clara y convincente
Exposición activa, interacción con la audiencia y énfasis.
Exposición
Vocabulario pertinente y claro, con terminología
técnico/científico.
Respuestas a preguntas de docentes Respuestas fundamentadas y atingentes.
y/o compañeros. Capacidad reflexiva
Creativo, sintético y sin faltas de ortografía
Presentación personal acorde a la exposición.
Aspectos Formales
Cumplimiento con el tiempo destinado a la presentación
(15 min)
Puntaje obtenido/Puntaje total
Nota calculada con escala de 60%
/48
exigencia
NOTA
Escala de apreciación
Excelente Bueno Regular Deficiente
4 3 2 1
Nivel excepcional Nivel de desempeño que Nivel de desempeño estándar. Nivel de desempeño menor de lo
Todos los requerimientos cumple con mínimo de Demuestra comprensión o desarrollo esperado. Bajo nivel de
solicitados en el criterio fueron error. parcial de lo solicitado. comprensión o desarrollo.
cumplidos sin error
Observaciones:
Docente evaluador:
Lenguaje empleado. Emplea lenguaje formal, técnico Emplea lenguaje formal y Emplea lenguaje formal y En la mayor parte del texto
científico adecuado y comprensible. técnico científico adecuado técnico científico, pero emplea lenguaje coloquial y
con pequeños errores requiere aclaraciones y el texto no es comprensible.
enmiendas.
Referencias La bibliografía es de fuentes La bibliografía es de fuentes La bibliografía es de fuentes La bibliografía no es reciente
Bibliográficas. científicas reconocidas. Hace citas científicas reconocidas. Hace científicas reconocidas. ni de fuentes reconocidas. Y
bibliográficas (>10) y las cita en el citas bibliográficas (<10), pero Hace citas bibliográficas no las cita en el texto.
texto. no las cita en el texto. (>10), pero no las cita en el
texto.
COMENTARIOS:
DOCENTE EVALUADOR:
INDICES ERITROCITARIOS
Volumen corpuscular Hemoglobina corpuscular Concentración de hemoglobina
medio (VCM) media (HCM) corpuscular media (CHCM)
Recién nacido 95 – 121 fL 33 – 41 pg 32 – 36 gr/dl
1 mes a 12 meses 73 – 101 fL 21 – 33 pg 32 – 36 gr/dl
1 año a 4 años 75 – 87 fL 22 – 33 pg 32 – 36 gr/dl
5 años a 16 años 78 – 93 fL 23 – 34 pg 32 – 36 gr/dl
Adultos 82 – 96 fL 28 – 33 pg 32 – 36 gr/dl
RETICULOCITOS
Relativo Absoluto Corregido IPR
Recién Nacido 3 – 7% 120.000–400.000/ul
Adultos 0.5 – 2.0% 50.000 -100.0000/ul 0.5 – 1.5% 2-3
FORMULA DIFERENCIAL
Recién Nacido 1 m a 12 meses 1 a 4 años 5 a 16 años ADULTOS Absoluto
Segmentados 40 - 70 % 21 – 39 % 21 – 39 % 40 – 60 % 50 – 70% 2.000-7.000/ul
Linfocitos 30 - 60% 45 – 65 % 50 – 69 % 31 – 50 % 25 – 40% 1.000– 3.000/ul
Monocitos 2 – 12% 2 – 11% 1 – 10 % 1–8% 4 – 12% 200–1000/ul
Eosinófilos 0–5% 0–7% 0–5% 0–5% 1 – 4% 20 -500/ul
Basófilos 0 – 1% 0 – 3% 0 – 3% 0 – 3% 0 – 1% 0-100/ul
Baciliformes 0–6% 0–5% 0–7% 0–7% 0 – 6%
Juveniles 0 – 0%
Mielocitos 0
1
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Plasmocitos 0 - 1%
RECUENTO DE PLAQUETAS
Recién nacido 140 - 475 x 103ul
1 mes a 12 meses 150 - 497 x 103ul
1 año a 4 años 150 - 450 x 103ul
5 años a 16 años 150 – 400 x 103ul
Adultos 150 - 400 x 103ul
Referencias:
J.Van den Bossche, K. 2002. Reference Intervals for a Complete Blood Count on diferrent Automated Haematology Analysers: Abx
Pentra 120 Retic, Coulter Gen’s, Sysmex SE 9500, Abbot Cell Dyn 4000 and Bayer Advia 120. Clin Chem Lab Med 40(1):69-73.
Reference Ranges for Adults and Children. Pre-Analytical considerations.2008. Roche Diagnostics.
Schnell Z., Leeuwen A., Kranpitz T. (2.000). Davis’s Comprehensive Laboratory and Diagnostic Test Handbook-with Nursing
Implications. F.A. Davis Company.
Dacie and Lewis. (2006). Practical Haematology, 10th ed., Copyright © Churchill Livingstone, An Imprint of Elsevier
Referencia:
Dacie and Lewis. (2006). Practical Haematology, 10th ed., Copyright © Churchill Livingstone, An Imprint of Elsevier
3
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Referencia:
Dacie and Lewis. (2006). Practical Haematology, 10th ed., Copyright © Churchill Livingstone, An Imprint of Elsevier
4
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Referencia: M.Van Leeuwen, Schnell Z. A. (2006). Davis’s Comprehensive Handbook of Laboratory and Diagnostic Tests—with Nursing
Implication. Second Edition, Davis Company
Referencia: Menaka P. (2011). Critical Values in the Coagulation Laboratory. Results of a Survey of the North American
Specialized Coagulation Laboratory Association. American Journal of Clinical Pathology, 136, 836-841.
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PARÁMETRO CV CV
INTRAINDIVIDUO INTERINDIVIDUO.
Rec Abs. Eritrocitos 3.2% 6.3%
Hematocrito 2.7% 6.41%
Hemoglobina 2.85% 6.8%
RDW 3.5% 5.7%
VCM 1.4% 4.85%
CHCM 1.06% 1.2%
HCM 1.4% 5.2%
Plaquetas 9.1% 21.9%
Leucocitos 11.4% 21.3%
RAN 17.15% 32.8%
RAL 10.25% 35.3%
RAM 17.8% 49.8%
RAE 21% 76.4%
RAB 28% 54.8%
Rec. Abs. Reticulocitos 13% 33%
TP 4.0% 6.8%
TTPA 2.7% 8.6%
Fibrinógeno 10.7% 15.8%
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Ref. Kottke K. (2008). An algorithmic Aprroach to Hemostasis Testing. Cap pres. Pag 9.
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DIMERO D
Fundamento: Anticuerpos monoclonales anti Dímero D fijados en partículas de látex, reaccionan con
fragmentos D-D presentes en la muestra, produciéndose la aglutinación de las partículas de látex.
Intervalos de referencia
Dependen del método a emplear.
Técnicas cualitativas: negativo
Técnicas cuantitativas: < de 0,5 ug /ml.
Muestra
Sangre venosa anticoagulada con citrato de sodio 3,2%.
Reactivos
Partículas de látex recubiertas de anticuerpos monoclonales Anti Dímero D Comerciales.
Buffer PBS
Control Positivo y Control Negativo
Varilla plástica y Placa de reacción o aglutinación
PROCEDIMIENTO
Técnica cualitativa
1. Llevar los reactivos a temperatura ambiente y homogeneizarlos bien.
2. Poner una gota de látex en 3 círculos de la placa de reacción
3. Al primer círculo agregar 20 ul. de plasma, al segundo una gota de control normal y al tercero
una gota de control anormal
4. Mezclar con una varilla plástica y activar el cronómetro
5. Mover la placa en forma rotatoria por 3 minutos
6. Observar aglutinación dentro de ese tiempo.
Técnica semicuantitativa
1. Si la determinación cualitativa es positiva, diluir el plasma en forma seriada.
2. Con cada dilución realizar la técnica cualitativa antes descrita.
3. Se informa la concentración de Dímero D aproximada, que corresponda a la última dilución
en la que se observó aglutinación.
LECTURA E INTERPRETACIÓN
Una aglutinación negativa sugiere normalidad en el funcionamiento de la fibrinolisis, mientras
que una aglutinación positiva podría corresponder a TVP, EP, CID o a fibrinolisis reactiva,
secundaria a otras patologías.
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ANTITROMBINA III
La Antitrombina III (AT III) es una glicoproteína sérica sintetizada por las células del endotelio
vascular e hígado. Es un inhibidor tipo proteasa y la proteína más importante de la regulación
de la hemostasia. La AT III se une a trombina evitando la conversión de fibrinógeno a fibrina.
Se incuba el plasma con exceso conocido de trombina en presencia de heparina.
La cantidad remanente de trombina es determinada por su actividad amiloiditica sobre un
sustrato cromogénico (reacción leída a 4005 nm)
La cantidad de trombina neutralizada es proporcional al nivel de AT III presente en el plasma
estudiado.
Valores de referencia
Método amiloiditico: 80 – 120% actividad
Muestras
Muestra de sangre anticoagulada con citrato de sodio 3,2%.
Equipos y Reactivo
Kit comercial determinación Antitrombina III
Sustrato cromogénico CBS 34-47
Trombina humana
Buffer
Ácido acético concentrado
Plasma de referencia para calibración
Procedimiento
Preparación plasma diluido
Muestra a estudiar (1:40) con buffer heparinizado.
Diluir el plasma de calibración en buffer heparinizado:
Dil 1:40 actividad de 100%
Dil 1:80 actividad de 50%
Solo buffer corresponde a actividad de 0%
Análisis de muestra
1. En tubo khan a 37ºC agregar:
a) 200 ul de dilución de la muestra
b) 200 ul de trombina, mezclar e incubar
c) 200 ul de sustrato mezclar e incubar 30 seg
d) 200 ul de Ácido acético, agitar
e) 200 ul agua destilada
2. Blanco reactivo
a) 200 ul de Ácido acético
b) 200 ul de bufer
c) 200 ul de trombina
d) 200 ul de sustrato
e) 200 ul agua destilada
3. Leer a 405 nm en contra blanco reactivo (color estable por 2 horas)
Informe
Graficar curva de calibración en papel milimetrado los % de actividad del calibrador en la
abscisa y la DO en la ordenada
Los resultados de expresan en % actividad interpolando en la curva de calibración
Factores de error
En la determinación no influye la concentración de heparina, por lo tanto puede ser
realizada en pacientes con heparinoterapia.
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Los instrumentos automatizados totalmente producen una pantalla gráfica de gran parte de los datos
producidos. Esto se visualiza en un monitor y se pueden imprimir, ya sea en blanco y negro o en color. La
inspección de la pantalla gráfica puede dar más información de lo que está disponible en la evaluación de los
datos numéricos. Muestra lo general en histogramas de tamaño de glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas
y algunos muestran histogramas de concentración y dispersión de los eritrocitos frente a la concentración de
hemoglobina. Los recuentos diferenciales se representan gráficamente como gráficos de dispersión de dos
variables, side scatter y forward scatter.
En la siguiente tabla se muestran diferentes equipos y la tecnología que utilizan para realizar los
recuentos
Automated full blood counters with a five-part or more differential counting capacity
Instrument and Technology used for differential count
manufacturer
Coulter STKS, GEN-S, LH Impedance with low-frequency electromagnetic current
700 series Impedance with high-frequency electromagnetic current
Laser light scattering
Sysmex SE series, Impedance with low-frequency direct current
XE2100 Impedance with radiofrequency current
Bayer H series, Advia Light scattering and absorbance following peroxidase reaction
Two-angle light scatter following differential cytoplasmic stripping
Abbott Cell-Dyn 3500 Four light-scattering parameters: forward light scatter, orthogonal light scatter,
narrow-angle light scatter, and depolarized orthogonal light scatter
Cobas Argos 5 Electrical impedance with intact cells and following differential cytoplasmic stripping
Light absorbance
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Patterns of blood count print out of some automated systems. A: Beckman Coulter
Gen S;B: Sysmex XE 2100; C: Bayer Advia; and D: Abbot Cell-Dyne 4000.
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Cuando una célula atraviesa una apertura por la cual existe una corriente eléctrica continua se produce
una interrupción o resistencia eléctrica, registrado como un pulso que representa una célula, la amplitud
de dicho pulso es proporcional al tamaño celular.
El número de pulsos eléctricos indica la cantidad de partículas que pasan a través de la apertura y el
tamaño de los pulsos es proporcional al volumen de las partículas
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ACANTOCITOS: Células especuladas, en espuela. Célula pequeña con escasas espículas de longitud variable,
distribuidas en forma irregular.
ANILLOS DE CABOT: Restos de membrana nuclear o uso mitótico en glóbulos rojos, pueden adoptar diversas
formas o ser únicos o múltiples.
ANISOCROMÍA: Presencia en el frotis de glóbulos rojos hipocromos y normocromos. El estimador que clasifica
en cruces la semicuantificación es la amplitud de Distribución de la Hemoglobina.
AUTOAGLUTINACIÓN: Aglutinación de glóbulos rojos formando pequeñas o grandes masas de forma irregular.
CODOCITOS: Célula en diana. Célula hipocrómica con zona central de pigmento de hemoglobina, célula delgada.
CUERPOS DE HOWEL JOLLY: Corresponden a uno o más fragmentos de núcleo de 1 µm en la periferia del
glóbulo rojo, característicamente son esféricos, picnóticos de color azul con tinción MGG (May Grünwald-
Giemsa). Corresponden a DNA.
DREPANOCITOS: Células falciformes. Eritrocitos delgados, largos, aguzados en ambos extremos, sin palidez
central.
ELIPTOCITOS: Célula suficientemente larga para tener dos lados paralelos con apariencia de cigarrillo.
EQUINOCITO/CRENOCITO: Célula en erizo. Células con múltiples proyecciones romas distribuidas de manera
regular.
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ESFEROCITOS: Células pequeñas, redondas, sin palidez central; por lo general microcíticas. El VCM se mantiene
porque solamente pierde superficie celular.
ESTOMATOCITOS: Eritrocitos con una zona de palidez central con forma de hendidura. Semeja a una boca o
estoma, del cual deriva su nombre. También llamado hidrocito.
LEPTOCITOS: Célula plana, delgada, con hemoglobina en la periferia y palidez central aumentada.
MEGALOCITOS: Son glóbulos rojos grandes macrocitos ovales, donde se combina una alteración del tamaño y
de la forma, pueden llegar hasta tener 12 µm de diámetro. Se observan en anemias megaloblásticas.
MACROCITOS: glóbulos rojos más grandes de lo normal que presentan halo central. El estimador hematológico
es el volumen corpuscular medio.
MICROCITOS: Glóbulos rojos más pequeños de lo normal y cromía variable. El estimador hematológico es el
volumen corpuscular medio.
OVALOCITOS: Célula ovoide o en forma de huevo que puede o no presentar halo central. En tamaño grande
también es llamado macroovalocito.
POLICROMATOFILIA: El concepto deriva del griego (Polys: Mucho, Chroma: Color, Philia: Afinidad). Poly-
chromatophilia (inglés) y Polychromatophilie (francés). Glóbulos rojos de mayor tamaño de color azul grisáceo con
tinción MGG (May Grunwald -Giemsa ) y equivalente a reticulocitos cuando se utiliza la tinción de ACB (azul cresil
brillante).
POIQUILOCITOSIS: Glóbulos rojos con variación en la forma que orienta la patología hematológica.
PUNTEADO BASOFILO: Glóbulos rojos con precipitado de ribosomas y polirribosomas. Se presentan en forma
puntiforme y de color azul-grisáceo con la tinción de MGG.
QUERATOCITOS: Célula en casco o en cuerno (doble agudeza distal). Fragmento celular en forma de casco de
fútbol americano. También se puede presentar una parte de la proyección.
RETICULOCITOS: Precursor de la línea eritroide inmediatamente anterior al glóbulo rojo maduro. Se denomina
reticulocito a los glóbulos rojos que presentan RNA precipitado cuando se utilizan tinciones como ACB.
ROULEAUX: corresponde a la aglutinación de glóbulos rojos de forma regular y lineal con 4 o más glóbulos rojos
(stack of coin).
Referencia: Retamales E. (2014). Recomendaciones para la interpretación del frotis sanguíneo del subprograma
de morfología sanguínea. Departamento laboratorio biomédico nacional de referencia Instituto de salud pública
de Chile. Disponible en: http://www.ispch.cl/sites/default/files/interpretacion%20hemograma%20-
%2019032013A.pdf
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ICSH Recommendations for Peripheral Blood Cell Morphology Standardization and Grading
J. Burthem, M. Brereton
J. Burthem, M. Brereton
J. Burthem, M. Brereton
J. Burthem, M. Brereton
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Hereditary elliptocytosis
J. Burthem, M. Brereton
Unstable haemoglobin
J. Burthem, M. Brereton
J. Burthem, M. Brereton
J. Burthem, M. Brereton
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J. Burthem, M. Brereton
Hereditary stomatocytosis
J. Burthem, M. Brereton
J. Burthem, M. Brereton
Myelofibrosis
J. Burthem, M. Brereton
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J. Burthem, M. Brereton
J. Burthem, M. Brereton
G. Rozenberg
J. Burthem, M. Brereton
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1.
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Subtipo 1 Microcitosis
2 Codocitos Dianocitos, target cell, Hepatopatía obstructiva, Hb SS, CS, talasemia, ferropenia.
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CONSENSO EQUIVALENTE
A. Normal 1 normal
1 hipocromo Anemiaferropénica
2 anisocromía Anemiaferropénica en tratamiento
1 normal
A. Normal
Eritroblastos
1 16 – 18 µm
basófilos
2 Eritroblasto 12 – 15 µm
policromático
Eritroblastos
B. Acelerada 3 10 – 15 µm
ortocromáticos
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TABLA V: INCLUSIONES
NOMENCLATURA
GRUPO SUBTIPO CUADROS HEMATOLÓ GICOS
CONSENSO EQUIVALENCIA
Referencia:
Retamales E. (2014). Recomendaciones para la interpretación del frotis sanguíneo del subprograma de morfología sanguínea.
Departamento laboratorio biomédico nacional de referencia Instituto de salud pública de Chile. Disponible en:
http://www.ispch.cl/sites/default/files/interpretacion%20hemograma%20-%2019032013A.pdf
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INCLUSIONES ERITROCITARIAS
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NORMAL + ++ +++
70 - 79 60 - 69 < 59
VCM 82 – 96
100 - 109 110 - 119 > 120
ADR (Anisocitosis) 11,5 – 14,5 15 - 18 19 – 22 > 23
HCM 28 – 32 20 - 25 15 – 19 < 14
ADH (Anisocromía) 2,2 - 3,2 3,2 – 3,9 4,0 – 4,9 > 5,0
POIQUILOCITOSIS --- 0–5xC 6 – 10 x C > 11 x C
POIQUILOCITO (cualquiera) --- 0–5xC 6 – 10 x C > 11 x C
Esta Guía debe tomarse como orientación de la Interpretación Morfológica realizada por Tecnólogo Médico Hematólogo para
la confirmación de la hipótesis diagnóstica del Clínico.
REFERENCIA:
Dr. Pablo Bertín Cortéz, (1) T.M. Marta Maffioletti Benitez, (1) T.M. Marta Romero Meza, (2) T.M. Ibette Pape Larré, (2) Dra. María Elena
Cabrera Contreras, (3) Dra. María Soledad Undurraga Sutton, (3) T.M. Silvia Labra Jeldres, (3) T.M. Tamara Palma Fuenzalida, (3) T.M.
José Díaz Garrote, (4) T.M. Eduardo Retamales Castelletto. (5) CROMÍA: RESULTADOS, CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
DE TALLER DE CONSENSO DE EXPERTOS
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Approach to the differential diagnoses of anemia in the adult and child. G6PD, glucose-6-phosphate dehydrogenase; MCV, mean corpuscular
volume; PNH, paroxysmal nocturnal hemoglobinuria; RDW, red blood cell distribution width.
Referencia:
Hoffman R. (2008) Hematology: Basic Principles and Practice, 5th ed.Copyright © Churchill Livingstone, An Imprint of Elsevier
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Approach to the differential diagnosis of anemia in the newborn. G6PD, glucose-6-phosphate dehydrogenase; MCV,
mean corpuscular volume.
Referencia:
Hoffman R. (2008) Hematology: Basic Principles and Practice, 5th ed.Copyright © Churchill Livingstone, An Imprint of Elsevier
_______________________________________________________________________________
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Ref.
Dennis L. Kasper, Eugene Braunwald, Anthony S. Fauci, Stephen L.. Principios de Medicina Interna. 16th ed. Pag 3482.
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RESISTENCIA OSMÓTICA
El test de Resistencia Globular Osmótica es realizado por el método de lisis de los eritrocitos en
soluciones hipotónicas y cuantificación colorimétrica.
Es un examen utilizado como ayuda diagnóstica en la esferocitosis hereditaria, debido a que en este
cuadro clínico los eritrocitos son más sensibles a los cambios de tonicidad del medio externo.
Principio
Materiales:
solución de NaCl 1%
Agua destilada
Pipetas 10 ml
espectrofotómetro
Tubos de vidrio 12 ml
Gradilla
Centrifuga
Procedimiento
1. Preparar todos los reactivos utilizados en esta técnica (ver anexo 1: Preparación de Reactivos) y procurar
que estén a temperatura ambiente al momento del uso.
2. Incubar uno de los tubos con la muestra de sangre del paciente en la estufa a 37ºC por 24 horas.
3. Colocar 12 tubos con capacidad para 12 mL en una gradilla e identificarlos con la concentración de NaCl
que corresponda
4. Realizar diluciones de la solución de trabajo al 1% según tabla:
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Nota: Si la resistencia osmótica a las 0 hrs esta disminuida agregar 2 tubos más con concentraciones:
- 0,9% de NaCl: 9 mL de solución de trabajo (NaCl al 1%) + 1 mL de agua purificada.
- 1,2% de NaCl: 1,2 mL de solución STOCK (NaCl 10%) + 8,8 mL de agua purificada (blanco)
Calculo de resultado
1. Calcular el % de lisis de cada tubo considerando:
- La absorbancia del tubo 0,85% de NaCl es usado como blanco (0% de hemólisis).
- La absorbancia del tubo 0,10% de NaCl es usado como el 100% de hemólisis.
2. Realizar un gráfico a las 0 y 24 hrs con % Lisis versus Concentración de NaCl. Ver anexo 2
Intervalos de Referencia
47
Hematología Clínica UST
48
Hematología Clínica UST
(relacionada a la población de
reticulocitos).
Control de Calidad
Cada vez que se prepare reactivo (una vez al año) se debe procesar una muestra de paciente normal a las 0 y 24
hrs)
Archivar registro de lotes de reactivos, fecha de preparación e informes de muestra normal analizada.
Pesar:
NaCl ………………….90 gr
Na2HPO4………….13,655 gr
NaH2PO4 H2O…..2,149 gr
Agua purificada…1000 mL
Esta solución es estable 1 año mantenida entre 2-8ºC.
49
Hematología Clínica UST
100
80
% Hemólisis
60 Rango Normal
40
20
0
0,00 0,20 0,40 0,60 0,80 1,00
NaCl gr/dl
120
MEDICION A LAS 24 HRS.
100
80
% Hemólisis
Rango Normal
60
40
20
0
0,0 0,2 0,4 0,6
NaCl gr/dl 0,8 1,0 1,2
Conclusión:
_________________________ ________________
Nombre y Firma Profesional que realiza el examen Nombre y Firma Director Médico
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100
80
% Hemólisis
60 Rango Normal
40
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NaCl gr/dl
120
MEDICION A LAS 24 HRS.
100
80
% Hemólisis
Rango Normal
60
40
20
0
0,0 0,2 0,4 0,6
NaCl gr/dl 0,8 1,0 1,2
Conclusión:
_________________________ ________________
Nombre y Firma Profesional que realiza el examen Nombre y Firma Director Médico
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ELECTROFORESIS DE HEMOGLOBINA
Valor de referencia
Reactivos
TRIS-EDTA-BUFFER pH 8,9-9,1
TRIS 7-9 = 16,1 gr
Disodium EDTA = 1,56 gr
Ácido bórico = 0.92 gr
Agua destilada = 1.000 ml
Cloroformo o tolueno
Suero fisiológico
Solución de fijación, Tinción y aclaración
Placa de acetato de celulosa
Papeles secantes
Procedimiento
Preparación del hemolizado:
Centrifugar 2-4 ml de sangre anticoagulada con EDTA
Eliminar el plasma, lavar los glóbulos rojos 3 veces con suero fisiológico, eliminando el
sobrenadante, posterior al último lavado medir el volumen de glóbulos rojos.
Por cada 1 ml de glóbulos rojos lavados agregar 1,5 ml de agua destilada, mezclar bien
Agregar 4 ml de cloroformo o tolueno por cada ml de glóbulos rojos lavados, agitar
vigorosamente por 7 minutos.
Centrifugar 15 minutos a 3000 r.p.m. y obtener el hemolizado aspirándolo.
52
Hematología Clínica UST
Informe:
Gráfico entregado por el densitómetro
Porcentaje de HbA y HbA2 u otra hemoglobina anormal que se observe.
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Hematología Clínica UST
HEMOGLOBINA FETAL
METODO
FUNDAMENTO
VALORES DE REFERENCIA
RN: 55-85%
> De 2 años: 1%
MUESTRA
3-5 ml de sangre oxalatada o con EDTA
REACTIVOS
Suero fisiológico
Tolueno o tetracloruro de carbono
-KOH (1,167gr aforar a 250 ml con agua destilada)
Sulfato de amonio semisaturado (disolver 195 gr. en 250 ml de agua destilada fría agitar
hasta saturarla. Tomar el sobrenadante y diluirlo al 50% con agua destilada, agregar 1 ml de
HCl 10 N y mantener a temperatura ambiente.
HCl 10 N medir 82,8 ml de HCl al 37% de pureza y de una densidad de 1,19 gr./ml y llevar a
100 ml. Con agua destilada, no olvidar de agregar siempre el ácido sobre el agua. Mantener
a temperatura ambiente.
PROCEDIMIENTO
7. LECTURA Y CALCULOS
-Leer las soluciones de hemoglobina total y fetal a 540 nm., utilizando como blanco agua
destilada.
-La concentración de hemoglobina fetal se obtiene utilizando la siguiente fórmula.
Tarea:
Investigue el método citoquímico de elución ácida de Kleihauer Betke para la determinación
de hemoglobina fetal, considere: Fundamento, Valores normales, tipo de muestra y
controles, reactivos, procedimiento e interpretación de resultados.
55
Hematología Clínica UST
VALOR DE REFERENCIA
Negativo
MUESTRA
3 ml de sangre anticoagulada
REACTIVOS
Ascorbato de sodio 10 mg
Glucosa 5 mg
KCN 0,1 M neutralizado, disolver 0,6512 gr. de KCN en 60 ml de agua destilada; agregar 20
ml de buffer fosfato pH 7,4 y aforar con agua destilada a 100 ml. Esta solución es estable
indefinidamente a temperatura ambiente.
PROCEDIMIENTO
En un tubo de hemólisis agregar:
10 ml de Ascorbato de sodio
5 mg de glucosa
2 ml de Sangre
0,1 ml de KCN neutralizado
Encubar a 37ºC y observar cambios de coloración entre las 2-4 horas
LECTURA
En una deficiencia de G6PD se observa una coloración café dentro de 1-2 horas de
incubación a 37ºC. En el control normal se mantiene el color rojo de la sangre. Es posible
obtener falsos positivos en caso de que existiera una deficiencia de glutatión peroxidasa o
glutatión reductasa que son otras enzimas involucradas en la destoxificación del H2O2
Después de la G6PD.
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Hematología Clínica UST
CUERPOS DE HEINZ
Los Cuerpos de Heinz corresponden a hemoglobina denaturada y oxidada. Se debe
buscar con coloración supravital como azul cresil brillante. Hay técnicas de buscan los
Cuerpos de Heinz en forma espontánea o de forma inducida.
La provocación de Cuerpos de Heinz en eritrocitos susceptibles sirve como ayuda en el
diagnóstico de deficiencias enzimáticas del eritrocito (deficiencia de glucosa 6- fosfato
deshidrogenasa), hemoglobinas inestables (HbH, HbZurich, etc) o intoxicaciones por drogas
Tanto en las hemoglobinopatías como en las deficiencias enzimáticas como glucosa 6-
fosfato deshidrogenasa, aparecen después de la ingestión de drogas oxidantes.
Este cuerpo puede ser inducir con una sustancia redox como azul cresil brillante o
acetifenilhidrazina.
La acetifenilhidrazina al igual que otros compuestos aminos, nitroaromaticos y agentes
oxidantes inorgánicos como cloruro de potasio pueden producir la oxidación de grupos
sulfidrilos expuestos en la hemoglobina causando la formación de puentes disulfuros y
distorsión de la estructura terciaria de la hemoglobina. El resultado es la precipitación de ella
formando inclusiones intracelulares llamadas cuerpos de Heinz los cuales son visualización
mediante la tinción con cristal violeta.
Reactivos y equipos
Azul cresil brillante 1 grs
Suero fisiologico 100 ml
Citrato de sodio 400 mg (filtrar antes de usar)
Procedimiento
1. 2 volumen de sangre + 1 volúmenes de solución de azul cresil brillante
2. Incubar a 37ºC y realizar frotis a los 20, 60 y 120 minutos.
3. Observar con objetivo de inmersión.
Interpretación
Los cuerpos de Heinz se tiñen de color purpura intenso pueden ser únicos o múltiples
grandes o pequeños de forma esférica. Se informa en porcentaje. Ver figura 13
57
Hematología Clínica UST
Muestra
Muestra de sangre anticoagulada con EDTA
Reactivos y equipos
Solución de acetilfenilhidrazina (preparar al momento de usar)
o 10 mg de acetilfenilhidrazina en 10 ml de Buffer pH 7,6.
Solución buffer pH 7.6 (preparar al momento de usar)
Solución A
KH2OPO4 0,066M = 0,091 grs. KH2OPO4 en 10ml agua destilada
Solución B
Na2HPO4 0,066M = 0,095 grs. de Na2HPO4 en 10ml agua destilada
Mezclar 1,3 ml de solución A con 8,7 ml de solución B y Agregar 0,02ml de glucosa por cada
10 ml de buffer.
Solución cristal violeta
o 2 gr de cristal violeta y disolver en 100 ml de NaCl 0,73%
o Filtrar
o Agregar el filtrado a otros 100 ml de NaCl 0,73%
o Filtrar antes de usar.
Baño termorregulado
Tubos de vidrio, Gradilla
Portaobjetos, cubreobjetos, Microscopio
Pipetas automáticas, puntas micropipetas
Procedimiento
1 Mezclar 100 ul de sangre con 2 ml de solución acetilfenilhidrazina. Airear la mezcla
insuflando 2 a 3 veces aire con una pipeta plástica.
2 Procesar con la muestra 2 controles normales.
3 Incubar muestra y controles en tubos destapados en baño termorregulado a 37ºC durante 2
horas. Airear la muestra 2 a 3 veces.
4 Incubar un segundo periodo por 2 horas a 37ºC.
5 Luego de la incubación, mezclar y en un portaobjeto juntar una pequeña gota (10ul) de la
muestra con 25ul de solución de cristal violeta. Cubrir con cubreobjeto.
6 Esperar 5 minutos antes de realizar la observación.
7 Observar la preparación al microscopio (100X) y contar el % de los eritrocitos que contengan
5 o más cuerpos de Heinz. Ver figura 14
58
Hematología Clínica UST
Por el método de Perls los iones férricos liberados por un ácido de su unión
a las proteínas, en presencia de ferrocianuro de potasio dan origen a un precipitado
azul de ferrocianuro férrico o azul de Prusia, que se observa en frotis de medula
ósea o de sangre periférica cuando se sospecha de cuerpos de Pappenheimer.
Valores de referencia:
Hemosiderina medular libre en el retículo
% de sideroblastos por cada 100 eritroblastos: 30– 60%
Sideroblastos en anillo: negativos
Hemosiderina en macrófagos siderofagos.
Muestra:
Frotis de sangre periférica o médula ósea.
Reactivos y equipos:
HCl 0,2N (1,65 ml de HCl 37%+ 100 ml agua destilada)
Ferrocianuro de potasio al 2% (a Tº ambiente)
Eosina 0,1%
Metanol p.a
Solución de trabajo preparar al momento de usar: HCl 0,2N y Ferrocianuro de potasio al 2%
en partes iguales.
Procedimiento:
1. Fijar los frotis de medula ósea o sangre periférica en metanol por 15 minutos.
2. Lavar y secar al aire
3. Preparar solución de trabajo en frasco coplin
4. Sumergir los frotis 30 minutos a Tº ambiente
5. Lavar con agua destilada por 5 minutos
6. Teñir con Eosina 0,1% por 5 minutos.
7. Lavar con agua destilada por 2 minutos
8. Secar a Tº ambiente
9. Montar y observar al microscopio.
10. La hemosiderina se observa como gránulos color celeste
Informe:
Buscar hemosiderina libre
Buscar hemosiderina asociada a las células.
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Referencia: Glasy E, (1998). Color atlas of Hematology. An Illustrated Field Guide Based on Proficiency Testing. College of
American Pathologists Notethfield, Illinois.Pag 19.
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BACILIFORME: Célula antecesora del segmentado que se define cuando el núcleo presenta: a.- estrangulación
menor a un tercio del máximo grosor del bastón; b.- Formas diversas incluidas – C, S, P, O, M, W, E, 3, etc.; c.-
Los lados del bastón deben ser paralelos y d.- sin picnosis.
BACILIFORME ANULAR: Célula antecesora del segmentado que se define cuando el núcleo presenta forma de
anillo o es una circunsferencia.
BASOFILIA: Aumento absoluto de los basófilos en la san- gre periférica sobre 75 basófilos/µL. Las causas más
comunes son: síndromes mieloproliferativos crónicos, mixedema, colitis ulcerativa y estrógenos y drogas
antitiroideas.
BASOPENIA: Forma de agranulocitosis asociada con la deficiencia de basófilos. Puede ser definido con valores
bajo 1 basofilo/µL. La detección es facilitada con citometría de flujo.
BASTONES DE AUER: Inclusiones intracitoplasmáticas en forma de varilla o de bastón que se observa en los
mieloblastos, promielocitos y monoblastos.
CROMATINA LAXA: Contenido nuclear o heterocromatina observada en células inmaduras, como en el caso
de los blastos, promielocitos, promonocitos, proplasmocitos, prolinfocitos, etc. Como descriptor de la morfología
celular no debería ser usado porque está dentro del concepto de blasto.
CROMATINA HOMOGÉNEA: Contenido nuclear o eucromatina observada en células maduras, como en el caso
de linfocitos. Como descriptor de la morfología celular se debería usar para describir los linfocitos de las
neoplasias de células maduras (HCL, LLCTA, LF, MCL).
CUERPOS DE DÖHLE: Inclusiones redondeadas basófilos. No son exclusivas de los neutrófilos, igualmente se
pueden encontrar en el citoplasma de los monocitos. Tiene una presentación única o múltiple que se depositan
en la periferia de las células y son poco nítidos.
DESVIACIÓN IZQUIERDA: Fase madurativa de la línea granulocítica que presenta un porcentaje elevado de
baciliformes, mayor del intervalo entre 0 a 5 %, que puede comprometer o no a sus antecesores directo o
precursores propiamente tal.
DESVIACIÓ N A LA DERECHA: Fase madurativa de la línea granulocítica que presenta lobulación que supera los
siguientes valores normales: a) 2 lóbulos 30-35%; b) 3 lóbulos 40-50%; c) 4 lóbulos 15-20%; d.-5 lóbulos 0,5-2%;
e.) 6 lóbulos 0%.
EOSINOFILIA: Aumento porcentual de eosinófilos superior a 50 eosinofilos/µL. Si los eosinófilos superan la cifra
considerada normal no constituye una enfermedad, pero puede orientarnos sobre patología subyacente como
respuesta inmunitaria. Habitualmente indica una respuesta parasitaria (niños), alergia (asma y dermatitis).
EOSINOPENIA: Disminución de los eosinófilos en sangre periférica bajo 50 eosinofilos/µL. Esto suele producirse
en el comienzo de las infecciones agudas.
GRANULACIÓ PATOLÓGICA: Gránulos hipertrofia- dos que le dan un aspecto hipergranular al citoplasma de los
neutrófilos que junto con las vacuolas y los cuerpos de Döhle se encuentran en condiciones tóxicas como
infecciones, septicemia, quemaduras.
81
Hematología Clínica UST
GRÁNULOS AZURÓFILOS: Punteado redondeado, discreto, de color rojo púrpura. Hasta un 10% de los
linfocitos pueden presentar gránulos. Pueden ser muy numerosos, o más pequeño en el citoplasma de los
monocitos.
HIPERPLASIA: Concepto válido cuando se analizan muestras de biopsias medular o mielogramas, en el caso
de la interpretación del hemograma se utiliza el sufijo filia o citosis ( neutrofilia, linfocitosis).
HIPERPROLIFERACIÓN: Concepto que no está documentado en la bibliografía y que tiene un significado incierto,
se recomienda no utilizar.
LINFOCITO ATÍPICO: Término obsoleto para identificar que la morfología del linfocito responde a una activación
antigénica. En la actualidad se usa linfocito reactivo.
LINFOCITO REACTIVO: Célula linfoide que ha recibido un estímulo antigénico modificando sus características
morfológicas: tamaño celular, cantidad de citoplasma, basofilia citoplasmática, deformabilidad citoplasmática,
reborde hiperbasófilo, etc.
LINFOCITOSIS: Aumento absoluto de los linfocitos en la sangre periférica sobre 3.000/µL, descartando la
leucopenia con neutropenia absoluta. Es normal entre los 4 meses y 4 años de edad. Las causas más comunes
son Infecciones agudas (mononucleosis infecciosa por Epstein-Barr y Citomegalovirus, Infecciones crónicas como
la brucelosis, enfermedades hematológicas como leucemia linfocítica aguda y crónica, endocrinopatías y
reacciones alérgicas.
LINFOPENIA: Número de linfocitos en sangre periférica bajo 1000 /µL. Este tipo de cuadro clínico puede ser
producto de diversas causas, como tratamientos farmacológicos, enfermedades crónicas o infecciosas como
tuberculosis o el VIH.
MONOCITOSIS: Aumento absoluto de los monocitos en la sangre periférica por encima de 700/µL. Las causas
más comunes son infecciones bacterianas, enfermedades hematológicas y neoplasias; además enfermedades
del tejido conectivo.
MONOCITOPENIA: Número de monocitos en sangre periférica bajo 100 /µL. Este tipo de leucopenia está
presente en la anemia aplástica. También es una característica de la Leucemia de Células Vellosas.
NÚCLEO EN RELOJ DE ARENA: Células de Rieder encontradas en la leucemia promielocítica con la t(15;17).
Estos promielocitos son de origen clonal o neoplásico.
NEUTROFILIA: Elevación del recuento de neutrófilos absoluto sobre 6.000 /µL. Los recién nacidos tienen cifras
de neutrófilos más altas que los individuos de otras edades y, además, presentan desviación izquierda (presencia
de baciliformes, juveniles, mielocitos y promielo- citos en sangre periférica).
NEUTROPENIA: Disminución absoluta de los neutrófilos en la sangre periférica bajo 1.500 /µl. Se clasifica en leve
(< de 1000), moderada (500-1000) o severa (< de 500). Las neutropenias se clasifican de acuerdo al origen y
lugar donde se produce la destrucción.
PELGER HÜET: Alteración hereditaria (anomalía de Pelger Huet) en la segmentación nuclear de los neutrófilos,
que en individuos heterocigotos se presenta bilobulado en forma simétrica.
PSEUDO PELGER HÜET: Alteración adquirida en la segmentación nuclear del neutrófilo, el núcleo se presenta
bilobulado pero en forma asimétrica.
82
Hematología Clínica UST
REACCIÓN LEUCEMOIDE: El recuento de leucocitos es mayor de 50.000 leucocitos /µL, la línea madurativa no
presenta hiato leucémico y los segmentados presen- tan granulación patológica.
REACCIÓN LEUCOERITROBLÁ STICA: Presencia de células inmaduras de las series mieloide y eritroide en
sangre periférica; células mieloides tempranas (promielocitos, mielocitos, metamielocitos y baciliformes) y en
ocasiones dacriocitos.
SOMBRAS DE GÜMPRECH: Restos celulares observados en el frotis sanguíneo como un artefacto producidos
por la labilidad celular especialmente de la serie linfoide.
VACUOLIZACIÓN PATOLÓGICA: Grandes vesículas con depósitos de proteínas que juegan un papel en el
transporte de materiales.
Referencia:
Retamales E. (2014). Recomendaciones para la interpretación del frotis sanguíneo del subprograma de
morfología sanguínea. Departamento laboratorio biomédico nacional de referencia Instituto de salud pública de
Chile. Disponible en: http://www.ispch.cl/sites/default/files/interpretacion%20hemograma%20-%2019032013A.pdf
83
Hematología Clínica UST
Indentado, hendico,
clivado, escotado, Linfoma folicular, LLC atípica, leucemia de las
Hendido fisurado, abollonado, células vellosas, mononucleosis infecciosa,
1
lobulado. coqueluche.
Cerebroideo,
4 Cerebriforme circonvoluciones. Síndrome de Sézary
84
Hematología Clínica UST
Flower cell,
atrebolado, en flor,
5 Multilobulado LLTA
polilobulado.
Macropolicitos,
6 Hipersegmentado Síndromes mielodisplásicos.
polisegmentado
9
Ovalado LCV
9
10 Plegado Leucemias mieloides
Granulocito anular, SMD, tratamiento con drogas
Subtipo 1 Baciliforme anular displasia antineoplásicas.
granulocítica.
Subtipo 2 Granulocito Núcleo tipo pelger SMD
C. Displasia pelgeroide
nuclear
Subtipo 3 Mielocito pelgeroide Mielocito displásico SMD
85
Hematología Clínica UST
A. Cantidad
Subtipo 2 0 a 2 nucléolos LLA-L1.
Muy pequeño, periférico, no aparente, esbozo, bien delineado, distintivo, poco notorio, uno o más
D. No aplica notorios.
A. relación
subtipo 2 relación N/C baja (**) LLA-L2, LMA
NOMENCLATURA
GRUPO SUBTIPO CUADROS HEMATOLÓGICOS
CONSENSO EQUIVALENTE
86
Hematología Clínica UST
Granulación
Granulación tóxica Infecciones bacterianas, SMD.
Subtipo 1 patológica
Inclusiones
citoplasmáticas LLA-L3, SMD. Síndrome de Chediak
Cuerpos de inclusión
grises en Higashi,
Subtipo 2 citoplasmático.
segmentados y Anomalía de May Hegglin.
púrpura.en linfocitos.
B. Inclusiones
Gránulos primarios Leucemia linfática granular, leucemia
gigantes, agrupación agresiva de células tipo NK, SMD.
Gránulos azurófilos
Subtipo 4 azurófila. Anomalía de Alder Reilly, síndrome de
Chediak Higashi.
Subtipo 1 Regular
Aspecto ameboideo,
C. Forma monocitoides,
Linfocitos reactivos, tipo Downey, leucemia
fusiforme, forma de
Subtipo 3 Borde irregular de células vellosas.
huevo frito.
Síndromes mononucleósidos
Adapta a la superficie
(mononucleosis infecciosa,
Subtipo 4 Deformable de los GR.
citomegalovirus, hepatitis virales, etc).
NOMENCLATURA
GRUPO SUBTIPO CUADROS HEMATOLÓGICOS
CONSENSO EQUIVALENCIA
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Hematología Clínica UST
Subtipo 10 Plasmoblasto MM
Subtipo 1 Mieloblasto
88
Hematología Clínica UST
89
Hematología Clínica UST
J. Burthem, M. Brereton
J. Burthem, M. Brereton
J. Burthem, M. Brereton
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Hematología Clínica UST
J. Burthem, M. Brereton
J. Burthem, M. Brereton
J. Burthem, M. Brereton
G. Rozenberg
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G. Zini
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** These images copyright: Microscopic haematology: a practical guide for the laboratory 3e (c)
2011, Sydney, Elsevier Australia
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Referencia:
James W. Vardiman. (2009).The 2008 revision of the World Health Organization (WHO) classification of myeloid neoplasms and
acute leukemia: rationale and important changes. Blood journals. 114: 937-951
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CAP 1998
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