HIDROLISIS DE DISACARIDOS

I. INTRODUCCION

La hidrólisis es una reacción química donde ocurre la ruptura de la molécula del agua. Los
reactantes así como los productos de esta reacción pueden ser especies neutras (como
en el caso de las moléculas orgánicas) y/o iónicas (como en el caso de las sales).

Un ejemplo que resulta interesante, es la hidrólisis de proteínas, glúcidos y lípidos

catalizada por enzimas denominadas hidrolasas. De esta manera, las complejas moléculas
de almidón se degradan a azúcares de menor complejidad mediante hidrólisis.

En volumetría ácido-base, la reacción hidrolítica determina el pH del punto final, cuando

se titula una base o ácido débil, con su contraparte fuerte y por tanto debe tomarse en
cuenta para la selección del indicador.

Los disacáridos son un tipo de glúcidos formados por la condensación (unión) de dos
azúcares monosacáridos iguales o distintos mediante un enlace O-glucosídico (con
pérdida de una molécula de agua) pues se establece en forma de éter siendo un átomo
de oxígeno el que une cada pareja de monosacáridos, mono o dicarbonílico, que además
puede ser α o β en función del -OH hemiacetal o hemicetal.

Los disacáridos están formados por la unión de dos monosacáridos, generalmente

hexosas y son los oligosacáridos de mayor importancia biológica y están formados por la
unión de dos hexosas. Su fórmula general es C12H22O12

El enlace que se establece entre las dos unidades de monosacáridos recibe el nombre de
enlace glucosídico (más correctamente O-glucosídico), y consiste en la unión de dos
grupos –OH (hidroxilo) con pér-dida de una molécula de agua. Este enlace se forma entre
un carbono (llamado anomérico) del primer monosacárido y cualquier otro del segundo.
Esta, como todas las reacciones que se dan en las células no es espontánea sino está
catalizada por enzimas. La reacción es reversible, pero en la naturaleza requiere también
la presencia de enzimas hidrolítica específicas para cada disacárido (maltasa, sacarosa,
etc.).

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II. OBJETIVOS

Identificar en forma cualitativa colorimétrica, la hidrolisis o sacarificación de un

disacárido.

III. FUNDAMENTO TEORICO

3.1.DISACARIDOS

Un disacárido término que procede del vocablo inglés disaccharide, es un carbohidrato

que se compone de dos monosacáridos. Esta definición, como se puede advertir, nos
exige saber qué son los carbohidratos y qué son los monosacáridos para comprender la
noción de disacárido.

Los carbohidratos, también llamados hidratos de carbono o glúcidos, son sustancias

orgánicas compuestas por oxígeno, hidrógeno y carbono. Los dos primeros elementos
mencionados aparecen en proporción de dos a uno. Un monosacárido, por otra parte, es
un azúcar cuya descomposición en otro más simple mediante la hidrólisis (el
desdoblamiento molecular por intermedio del agua) no resulta posible.

Los disacáridos, en definitiva, son hidratos de carbono cuya composición presenta dos
azúcares que forman parte del grupo de los monosacáridos. Existen diversos disacáridos
según sus componentes y el tipo de unión que vincula a éstos.

3.1.1. LA LACTOSA

La lactosa, es el disacárido formado por la unión de los monosacáridos galactosa y

fructosa. Este disacárido se encuentra en la leche que producen los animales
mamíferos hembras como: leche de vaca, leche de cabra, leche humana y otros; la
leche humana tiene un 7% de lactosa y la leche de cabra, leche de vaca tiene un 5%
de lactosa. A diferencia de la maltosa y la celobiosa está formada por 2
monosacáridos diferentes y estas son la: αoβ-D-galactopiranosa y αoβ-D-
glucopiranosa.

Las personas cuyo organismo no logra asimilar el disacárido en cuestión de manera

adecuada padecen el trastorno que se conoce como intolerancia a la lactosa.

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3.1.2. SACAROSA

Es el azúcar más corriente de mesa, se trata del edulcorante más popular, empleado
para endulzar todo tipo de comidas y bebidas. Se obtiene comercialmente de la
remolacha o de la caña de azúcar. También está presente en muchas frutas. Está
formado por la unión de α-D-glucopiranosa y β-D-fructofuranosa, por medio de un
enlace glucosídico une al átomo de carbono n° 1 cuando se trata de la unidad del
glucosa y tiene su grupo oxidrilo en posición axial (α) y la fructuosa tiene a su grupo
oxidrilo en posición (β).

3.1.3. MALTOSA

La maltosa, también conocida como maltobiosa o azúcar de malta, es el producto

principal que se obtiene por la ruptura hidrolítica del almidón, esta se rompe en
unidades de maltosa de manera aparentemente aleatoria, por acción de una enzima
que se encuentra en la saliva llama α-1,4´ glucan-4-glucohidrolasa.

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La maltosa es un disacárido formado por 2 α-D-glucopiranosa unidas por un enlace

glucosídico producido entre el oxígeno del primer carbono anomérico (proveniente
de -OH) de una glucosa y el oxígeno perteneciente al cuarto carbono de la otra. Por
ello este compuesto también se llama D-glucopiranosil α (1-4) D-glucopiranosa. Al
producirse dicha unión se desprende una molécula de agua y ambas moléculas de
glucosa quedan unidas mediante un oxígeno monocarbonílico que actúa como
puente.

3.1.4. SELOBIOSA

La celobiosa es un disacárido que se obtiene por hidrolisis parcial de la celulosa. De

la misma manera que la maltosa, la celobiosa está formada por 2 unidades D-
glucopiranosa conectado por un enlace (1→4), pero a diferencia de la maltosa el
enlace glucosídico está en posición ecuatorial (β) y no en posición axial (α).

3.2.HIDROLISIS

Es una reacción química entre una molécula de agua y otra molécula, en la cual la
molécula de agua se divide y sus átomos pasan a formar parte de otra especie química.
Esta reacción es importante por el gran número de contextos en los que el agua actúa
como disolvente.

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Hidrolisis usualmente significa la ruptura de enlaces glucosídicos debido a la adición de

agua en un medio acido. Siendo la hidrolisis de un carbohidrato el rompimiento de su
estructura en componentes tales como moléculas de azúcar (por ejemplo, el
rompimiento de la sacarosa en glucosa y fructuosa).

𝐻 + + 𝑠𝑎𝑐𝑎𝑟𝑜𝑠𝑎 ↔ 𝑠𝑎𝑐𝑎𝑟𝑜𝑠𝑎 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑜𝑛𝑎𝑑𝑎

𝑠𝑎𝑐𝑎𝑟𝑜𝑠𝑎 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑜𝑛𝑎𝑑𝑎 + 𝐻2 𝑂 ↔ 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 + 𝑓𝑟𝑢𝑐𝑡𝑢𝑜𝑠𝑎

Previamente la sacarosa es protonada con la adición de un ácido clorhídrico 0.1 N.

3.2.1. HIDROLISIS DE LA LACTOSA

La lactosa es un componente de la leche y suero de esta. El uso de lactosa es bastante

limitada debido a su baja solubilidad y su indigestividad para muchas personas. La
hidrolisis enzimática de la lactosa es uno de los procesos biotecnológicos más
importantes en la industria alimentaria.

La lactosa es el disacárido más importante en la leche: a veces se denomina azúcar

de leche. La hidrólisis hace que la lactosa produzca glucosa y galactosa.

3.2.2. HIDROLISIS DE LA SACAROSA

La sacarosa no es un agente reductor, no forma osazonas Esto es porque el enlace

involucra el primer carbono de la glucosa y el segundo carbono de la fructosa, y no
queda grupos reductores disponibles. Cuando la sacarosa es hidrolizada, los
productos tienen una acción reductora.

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La hidrólisis de la sacarosa (rotación óptica de +66.5°) produce una molécula de

glucosa (+52.5°) y una molécula de fructosa (-92°). Por lo tanto, los productos
cambian la dextrorotación a levo-rotación. La mezcla molar de la glucosa y fructosa
así formada se llama azúcar invertido. La enzima que produce la hidrólisis en la
sacarosa se llama sacarosa o invertasa.

En presencia de (HCl) y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es decir, incorpora una

molécula de agua y se descompone en los monosacáridos que la forman, glucosa y
fructosa, que así son reductores.

3.2.3. HIDROLISIS DE LA MALTOSA

La maltosa o azúcar de malta existe en pequeñas cantidades en la naturaleza. La

maltosa es muy importante ya que es uno de los productos hidrolíticos del almidón.
Cuando se produce maltosa en el tracto digestivo, ésta se hidroliza para dar dos
moléculas de α-glucopiranosa.

3.2.4. HIDROLISIS DE LA SELOBIOSA

La celobiosa es un disacárido obtenido por hidrolisis muy cuidadosa de la celulosa.

La celobiosa dan lugar exclusivamente a 2 moléculas de β-glucopiranosa por
hidrolisis acida.

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3.3.AZUCAR REDUCTOR

Azúcares reductores son aquellos que, como la glucosa, fructosa, lactosa y maltosa
presentan un carbono libre en su estructura y pueden reducir, en determinadas
condiciones, a las sales cúpricas.

Son reductores los glúcidos que tienen gran capacidad de oxidarse, y al oxidarse reducen
(su grupo carbonilo tiene esa capacidad). La excepción más conocida es la sacarosa.

En presencia de 𝐶𝑢2+ el grupo C = C de los monosacáridos se oxida a ácido y el 𝐶𝑢+ se

reduce a oxido cuproso (precipitado de color rojo teja).

Si tras el experimento la devolución permanece azul, quiere decir que/no tiene grupos
reductores, mientras que la presencia de estos grupos dará lugar a la aparición del color
rojo-amarillento-teja (más fuerte cuanto mayor sea la concentración de sustancias
reductoras).

3.4.REACTIVO DE FELING

Esta prueba se utiliza para el reconocimiento de azúcares reductores. El poder reductor

que pueden presentar los azúcares proviene de su grupo carbonilo, que puede ser
oxidado a grupo carboxilo con agentes oxidantes suaves. Si el grupo carbonilo se
encuentra combinado no puede presentar este poder reductor.

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Los azúcares reductores, en medio alcalino, son capaces de reducir el ión 𝐶𝑢2+ de color
azul a 𝐶𝑢+ de color rojo. Para ello el grupo carbonilo del azúcar se oxida a grupo carboxilo.
En medio fuertemente básico como en nuestro caso el NaOH el ión 𝐶𝑢2+ formaría Cu
(OH)2 insoluble por eso añadimos tartrato sódico potásico que actúa como estabilizador
al formar un complejo con el 𝐶𝑢2+ .

IV. MATERIALES Y METODOS

 Muestra de disacáridos: sacarosa, leche, cereza, piña, uva, naranja.
 Tubos de ensayo.
 Gradilla.
 Mechero.
 Pinza sujeta tubos.
 Ácido clorhídrico 0.1N.
 Acido bicarbonato de sodio.
 Agua destilada.
V. PROCEDIMIENTO
5.1.PREPARACION DEL REACTIVO DE FEHLING
 Mezclar en un tubo de ensayo los reactivos de Fehling A y Fehling B en la
misma proporción (1:1). Observar la coloración azul intensa.

5.2.PREPARACION DE LOS DISACARIDOS

 SACAROSA: Tomar una porción de sacarosa (0.5 g) y echarlo al tubo de
ensayo, luego etiquetarlo en seguida echarle agua destilada y después
echarle ácido clorhídrico 0.1 N (15 gotas), agitar y directamente en el
mechero en forma inclinada hasta que la solución llegue casi hasta su punto
de ebullición (hidrolisis).

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Enfriar la muestra hasta temperatura ambiente, luego adicionar el reactivo

de Fehling (Fehling A + Fehling B) aproximadamente 10 gotas, calentar el tubo
directamente en el mechero en forma inclinada y en movimiento hasta
observar viraje de coloración.

 ZUMO DE UVA: Tomar una porción del zumo de uva (0.5 g) y echarlo al tubo
de ensayo y después echarle ácido clorhídrico 0.1 N (15 gotas), agitar y
directamente en el mechero en forma inclinada hasta que la solución llegue
casi hasta su punto de ebullición (hidrolisis).
Enfriar la muestra hasta temperatura ambiente, luego adicionar el reactivo
de Fehling (Fehling A + Fehling B) aproximadamente 10 gotas, calentar el tubo
directamente en el mechero en forma inclinada y en movimiento hasta
observar viraje de coloración.

 LECHE: Tomar una porción de la leche (0.5 g) y echarlo al tubo de ensayo y

después echarle ácido clorhídrico 0.1 N (15 gotas), agitar y directamente en
el mechero en forma inclinada hasta que la solución llegue casi hasta su punto
de ebullición (hidrolisis).

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Enfriar la muestra hasta temperatura ambiente, luego adicionar el reactivo

de Fehling (Fehling A + Fehling B) aproximadamente 10 gotas, calentar el tubo
directamente en el mechero en forma inclinada y en movimiento hasta
observar viraje de coloración.

 ZUMO DE PIÑA: Tomar una porción del zumo de piña (0.5 g) y echarlo al tubo
de ensayo y después echarle ácido clorhídrico 0.1 N (15 gotas), agitar y
directamente en el mechero en forma inclinada hasta que la solución llegue
casi hasta su punto de ebullición (hidrolisis).
Enfriar la muestra hasta temperatura ambiente, luego adicionar el reactivo
de Fehling (Fehling A + Fehling B) aproximadamente 10 gotas, calentar el tubo
directamente en el mechero en forma inclinada y en movimiento hasta
observar viraje de coloración.

 ZUMO DE SANDIA: Tomar una porción del zumo de sandía (0.5 g) y echarlo al
tubo de ensayo y después echarle ácido clorhídrico 0.1 N (15 gotas), agitar y
directamente en el mechero en forma inclinada hasta que la solución llegue
casi hasta su punto de ebullición (hidrolisis).

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 HIDROLISIS DE DISACARIDOS

Enfriar la muestra hasta temperatura ambiente, luego adicionar el reactivo

de Fehling (Fehling A + Fehling B) aproximadamente 10 gotas, calentar el tubo
directamente en el mechero en forma inclinada y en movimiento hasta
observar viraje de coloración.

VI. CONCLUSION
En conclusión al hidrolizar un disacárido obtuvimos la descomposición de 2
monosacáridos correspondiente a su disacárido.
Aplicando esta prueba pudimos conocer los componentes y características de la
misma, afirmando que es efectiva en presencia de HCl y en caliente, los
disacáridos se hidrolizan, es decir, incorpora una molécula de agua y se
descompone en los monosacáridos que la forman, que sí son reductores.
Mediante la prueba de Fehling, cuya solución presento el viraje de coloración que
indica la presencia de azúcares reductores; con lo que pudimos comprobar
satisfactoriamente el fundamento de la prueba.

VII. CUESTIONARIO
 Anotar las conclusiones respectiva en un cuadro resumen

GLUCIDO/ FEHLING REDUCTOR / NO

¿POR QUE?
ALIMENTO (+ O -) REDUCTOR

En la prueba dio positivo al reactivo

de Fehling, cambiando de color de
SACAROSA + REDUCTOR
un azul oscuro a un rojo-
amarillento-teja.

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En la prueba dio positivo al reactivo

ZUMO DE de Fehling, cambiando de color de
+ REDUCTOR
UVA un azul oscuro a un rojo-
amarillento-teja.
En la prueba dio positivo al reactivo
de Fehling, cambiando de color de
LECHE + REDUCTOR un azul oscuro a un rojo-
amarillento-teja. Observándose
una mínima presencia de lactosa
En la prueba dio positivo al reactivo
ZUMO DE de Fehling, cambiando de color de
+ REDUCTOR
PIÑA un verde azulino oscuro a un rojo-
amarillento-teja.
En la prueba dio positivo al reactivo
ZUMO DE de Fehling, cambiando de color de
+ REDUCTOR
SANDIA un azul oscuro a un rojo-
amarillento-teja.

 ¿Qué es la hidrolisis de un disacárido?

Los disacáridos son el producto de la unión de dos monosacáridos a través de
un enlace químico que recibe el nombre de enlace glucosídico.
La hidrólisis de un enlace glucosídico se lleva a cabo mediante la disociación
de una molécula de agua del medio. El hidrógeno del agua se une al oxigeno
del extremo de una de las moléculas de azúcar; el OH se une al carbono libre
del otro residuo de azúcar. El resultado de esta reacción, es la liberación de
un monosacárido y el resto de la molécula es un monosacárido ya que este
es un disacárido.
La hidrólisis del disacárido es necesario de las enzimas como catalíticas de la
reacción.
Los disacáridos deben ser hidrolizados hasta monosacáridos para poder pasar
la pared intestinal para llegar al torrente sanguíneo y poder ingresar al
interior de las células para su utilización.

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 Escribir la reacción de la hidrolisis de la sacarosa

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