SISTEMA DE MEMBRANAS

CITOPLASMÁTICAS

D. en C. Noé Velázquez Márquez

1) Transporte regulado

2) Transporte
transmembrana
(translocones)

3) Transporte
vesicular

4) Vía endocítica
Revisión del sistema endomembranoso
Revisión del sistema endomembranoso
Revisión del sistema endomembranoso
 Revisión del sistema endomembranoso
Vía biosintética-
secretora

Secreción constitutiva Secreción regulada

Células endocrinas que

liberan hormonas

Células pancreáticas
que liberan enzimas
Formación de la ECM y digestivas
la membrana
Células nerviosas que
plasmática
liberan neurotransmisores
 Revisión del sistema endomembranoso

ENDOSOMAS
Vía
endocítica
LISOSOMAS
El retículo endoplásmico (RE)
El retículo endoplásmico (RE)

Retículo endoplásmico liso

(REL)

Retículo endoplásmico
rugoso (RER)
 Retículo endoplásmico liso (REL)
Túbulos renales

Músculo esquelético

Glándulas endocrinas productoras de esteroides

 Retículo endoplásmico liso (REL)
Síntesis de hormonas esteroideas en las células endocrinas
de las gónadas y la corteza suprarrenal

Desintoxicación en el hígado de diversos compuestos

orgánicos (oxigenasas «p450»)
Función
Implicadas también en reacciones de hidroxilación
(complejo denominado hidroxilasa de hidrocarburos de
arilo) de hidrocarburos policíclicos

Secuestro de iones calcio en el citoplasma celular

Metabolismo de hidratos de carbono. Hidrólisis enzimática

del glucógeno (glucógeno fosforilasa/glucosa 6-fosfatasa)
 Retículo endoplásmico rugoso (RER)
El RER es el punto inicial de la vía
biosintética

Proteínas

Cadena de
sintetiza
carbohidratos

Cadena de
fosfolípidos

Célula secretora de moco del recubrimiento del tubo digestivo (célula caliciforme)
 Síntesis de proteínas en ribosomas

Proteínas que secreta la célula

Unidos a la Proteínas integrales de membrana

RE
membrana
del RE AG
Proteínas solubles que se
encuentran en compartimientos del
sistema de endomembrana lisosomas

vesículas
vacuolas
 Síntesis de proteínas en ribosomas
Proteínas destinadas a Enzimas de la glucólisis
permanecer en el
citosol Proteínas del
citoesqueleto

Proteínas periféricas de espectrinas

Ribosomas libres la superficie citosólica
de las membranas
anquirinas

Proteínas que se transportan al núcleo

Proteínas que se incorporan a los
peroxisomas, cloroplastos y mitocondrias
 Síntesis de proteínas en ribosomas
Núcleo

Retículo endoplásmico Peroxisomas

Complejo de Golgi
citosol Cloroplasto

mb plasmática Lisosomas Mitocondria

Vía secretora
Síntesis de proteínas en ribosomas unidos RE
 Síntesis de proteínas en ribosomas unidos RE
¿Qué determina el sitio de la célula en el que se sintetiza una
proteína?

1) Las proteínas secretoras contienen una secuencia señal en su extremo

amino

2) El polipéptido se mueve hacia el espacio de cisterna del RE

Síntesis de proteínas en ribosomas unidos RE
Síntesis de proteínas en ribosomas unidos RE
Síntesis de proteínas en ribosomas unidos RE
Se elimina el péptido señal localizado
en el extremo amino Peptidasa de señal

Se agregan carbohidratos a la
Oligosacariltransferasa
proteína naciente

Adquisición de una estructura Chaperonas moleculares

tridimensional correcta (HSP)

Formación de enlaces disulfuro (S-S) Isomerasa de disulfuro

de proteína

El RE cumple la función como puerto de entrada en la vía biosintética de

la célula
Síntesis de proteínas en ribosomas unidos RE
Síntesis de proteínas en ribosomas unidos RE
Síntesis de proteínas en ribosomas unidos RE
Síntesis de proteínas en ribosomas unidos RE
Síntesis de proteínas en ribosomas unidos RE
Síntesis de proteínas unidas a lípidos
Biosíntesis de membrana en el RE
La mayor parte de los lípidos se sintetizan
en el RE excepto

Esfingomielinas Empiezan Terminan

en el RE en el AG
glicolípidos

Algunos lípidos únicos de las membranas de

las mitocondrias y cloroplastos
 Biosíntesis de membrana en el RE
Enzimas que modifican
los lípidos que ya están
dentro de su membrana

PS PC

1 2 3
Biosíntesis de membrana en el RE
Citosol

- +

Vesícula
 Biosíntesis de membrana en el RE
Cara extracelular

-
+
Cara citosólica
 Modificaciones proteicas
Agregado y procesado de hidratos de carbono
(glicosilación) en el RE y en el Golgi

Formación de puentes disulfuro en el RE

Plegado apropiado de las cadenas de polipéptidos

y ensamblaje de proteínas compuestas de
subunidades múltiples en el RE

Cortes proteolíticos específicos en el RE, el Golgi

y las vesículas secretorias
 Glicosilación
La glicosilación proteica es una modificación que consiste en la unión covalente
de oligosacáridos (glicanos) a residuos de aminoácidos situados en secuencias
particulares de glicoproteínas.

Participan en el plegamiento correcto

Estabilidad

Conformación

Vida media circulatoria y función de las proteínas

Forman parte del sitio activo de la proteína

Participan como elemento regulador de la interacción

glicoproteína-ligando.
 Glicosilación
Glicosilación proteica

N-glicosilación O-glicosilación
 Glicosilación en el RER
La N-glicosilación es una modificación co- y post-traduccional que ocurre en el
retículo endoplásmico (RE) y en el aparato de Golgi

Complejo de oligosacárido

N
proteína
Asparagina

Glicosiltransferasas Asn-X-Ser Asn-X-Thr

 Glicosilación en el RER
¿Qué tipo de proteínas son glicosiladas?

Proteínas integrales

Enzimas lisosómicas solubles

Enzimas vacuolares

proteínas de la ECM
 Glicosilación en el RER
Glicosiltransferasas

Tres moléculas de glucosa

(Glc)

Nueve moléculas de manosa

(Man)

Dos moléculas de N-
acetilglucosamina (GlcNAc)

Glc3Man9(GlcNAc)2̶̶̶̶̶
Glicosilación en el RER
 Glicosilación en el RER
Citosol
P P
P P P P

P P P
Dolicol fosfato P

GlcNAc

Man
Glc3Man9(GlcNAc)2
Lumen del RE
Glc
Glicosilación en el RER

CONTROL DE CALIDAD
 Control de calidad de las proteínas en el RE
Proteínas que se unen
a los oligosacáridos de
proteínas plegadas de
forma incompleta y
las retienen en el RE

Calnexina

Calreticulina
 Control de calidad de las proteínas en el RE
Las proteínas mal
plegadas son exportadas
desde el RE y degradadas
en el citosol
 Las proteína mal plegadas en el RE activan una
respuesta de proteínas desplegadas (UPR)
La consecuencia de la acumulación de proteínas mal plegadas en
el RE

1) Desencadena una respuesta a proteínas desplegadas

¿en que consiste la respuesta a proteínas mal plegadas?

¿Cómo pueden las proteínas mal plegadas en el RE enviar una señal al

núcleo?
 Sensores de proteínas mal plegadas

IRE1 PERK ATF6

LUMEN

La fosforilación inactiva el CITOSOL

factor de inicio de la traducción
La maduración Reducción de
controlada del mRNA proteínas que
inicia la traducción de entran al RE
La proteolisis
Traducción
regulada libera
selectiva de

PROTEÍNA 1 REGULADORA DE GENES PROTEÍNA 2 REGULADORA DE GENES PROTEÍNA 3 REGULADORA DE GENES

Activación de genes que aumenta la capacidad de plegamiento de la

proteína en el RE
 Acción del sensor PERK

INACTIVO

BiP BiP ACTIVO BiP

BiP LUMEN

P P

CITOSOL
El sensor PERK activo P Reducción de proteínas
fosforila al factor de eIF2α
que entran al RE
inicio de la traducción
 Acción del sensor ATF6

BiP BiP Lumen

de RE

Citosol Aparato
de Golgi
INACTIVO
ACTIVO
Generación de
proteínas que
alivian el estrés Núcleo
del RE
 Estrés del RE

Activación de UPR

Chaperonas Proteínas de Proteínas que Fosforilación

moleculares transporte participan en la de eIFα
fuera del RE destrucción

La última vía es la
APOPTOSIS
 Patologías relacionadas con el plegamiento
proteico
Regulador de conductancia
Fibrosis quística
transmembrana de la fibrosis
quística (CFTR)
 Patologías relacionadas con el plegamiento
proteico
Enfisema El déficit de alfa-1 antitripsina
hereditaria (AAT; cromosoma 14)

Inhibidor de la
proteasa de los
neutrófilos
Del RE al aparato de Golgi
Estación de clasificación

Red trans
Golgi(RTG)
Cisternas
trans

Cisternas
mediales

Cisternas
cis

Red cis
Golgi (RCG)

Estación de clasificación
 Glicosilación en el AG

Se lleva acabo la O-glicosilación

Las cadenas de oligosacáridos son procesadas

en el complejo de Golgi por enzimas (proteínas
transmembrana de paso único)

Se ensamblan los proteoglicanos (proteínas que

presentan GAG)
 Glicosilación en el AG
CLASIFICACIÓN
1) Fosforilación de oligosacaridos lisosómicos RCG

2) Eliminación de manosas CCG

3) Eliminación de manosas Dictiosoma

4) Adición de GlcNAc CMG (apilamiento
5) Adición de fucosa de cisternas)
6) Adición de Gal
CTG
7) Adición de Sia (NANA)

8) Sulfatación de tirosinas y carbohidratos

CLASIFICACIÓN
RTG
 Movimiento de materiales a través del AG
El transporte a través del AG se lleva a cabo mediante
transporte vesicular o maduración de las cisterna
¿Cuál es el propósito de la glicosilación?

Participación de las selectinas en

el proceso de extravasación

Proteínas que participan en el

proceso de coagulación

Protección de la membrana
celular por ataques
proteolíticos
 ¿Cuál es el propósito de la glicosilación?
La ausencia total de la N-glicosilación provoca la muerte en embriones
antes de la implantación

La interrupción parcial de la vía de glicosilación en el RE causan trastornos

hereditarios graves que afectan casi cualquier aparato o sistema

Trastornos congénitos de la glicosilación

Retraso psicomotor Gastrointestinal Tegumentario

Nervioso central Hematológico

Músculo-esquelético Inmune
 ¿Cuál es el propósito de la glicosilación?

1. Alteración de glicosiltransferasas

2. Aumento de la expresión Sia

3. Aumento en la expresión de Fuc

4. Síntesis de estructuras (ramificadas o

prematuras)
Tipos de transporte en vesículas y sus funciones
1) Vesículas cubiertas con COPII

2) Vesículas cubiertas con COPI

3) Vesículas cubiertas con

CLATRINA
Tipos de transporte en vesículas y sus funciones
 Vesículas cubiertas con COPII
Las proteínas abandonan el RE en vesículas
de transporte recubiertas por COPII
(movimiento anterógrado)

Ensamble de Sec12/Sec23/Sec
COPII 24/Sec13/Sec31

Sar 1 (GTPasa) controla el

ensamblaje de la cubierta
 Vesículas cubiertas con COPII
La hidrólisis de GTP desencadena el
desensamblaje de la cubierta de COPII

Sar 1 Sar 1
Sar 1 Sar 1 Sar 1 Sar 1
GTP GTP
GTP GTP GTP GTP

Sec13 Sec31

Sec23 Sec24
 Vesículas cubiertas con COPII
¿Qué proteínas son seleccionadas por las vesículas
cubiertas con COP II?

1) Enzimas que actúan en las etapas avanzadas de la

vía biosintética, como glicosiltransferasas del AG

2) Proteínas de membrana participantes en la

fijación y fusión de la vesícula como el Señal di-acídica
compartimiento blanco (p. ej.,Asp-X-
Glu), en el
3) Proteínas de membrana que pueden unirse con dominio citosólico
cargamento soluble (como las proteínas secretoras)
Vesículas cubiertas con COPII
La vía COPII esta relacionada con
enfermedades hematológicas

1) Anemia tipo II eritropoyetica

congénita → mutación en el gen SEC23B

2) Deficiencia combina de factores de

coagulación V y VIII → mutaciones en
el gen de la proteína 1 de unión a
manosa (lectina ERGIC53)
 Vesículas cubiertas por COP I
Red cis-Golgi al RE. Cisternas del Golgi posteriores hacia
anteriores (transporte retrógrado). Transporte de recuperación.

Coatómeros que contiene

Ensamble de siete subunidades COP
COPI diferentes

ARF (GTPasa) controla el ensamblaje de la cubierta

 Vesículas cubiertas por COP I
La vía de recuperación del RE utiliza señales de clasificación

Señal KKXX Proteínas integrales residentes del

RE

Señal KDEL Proteínas solubles residentes del

RE
Vesículas cubiertas por COP I
 Fusión de las vesículas de transporte con sus
membranas diana
Las proteínas SNARE participan en el proceso de fusión

1) vSNARE (sinaptobrevina)
presente en la vésicula

2) tSNARE (sintaxina) presenta

en el membrana diana

3) tSNARE (SNAP25) presente

en el membrana diana
 Fusión de las vesículas de transporte con sus
membranas diana
Las proteínas Rab (GTPasas monoméricas)
guían el direccionamiento de las vesículas

Las SNARE unidas tienen que ser separadas

antes de volver a ser usadas (NSF y a-SNAP
rompen los complejos SNARE)

Las bacteria que produce el botulismo

secreta potentes neurotoxinas que penetran
neuronas específicas y destruyen proteínas
SNARE en las terminales nerviosas
Fusión de las vesículas de transporte con sus
membranas diana
tSNARE
vSNARE (VAMP)
Sar 1
SNAP-25
Sar 1 GTP
GTP sintaxina

Sar 1
Sar 1 GTP
GTP
Rab
GTP

Sar 1
Sar 1 GTP
GTP Organelo
Sar 1
GTP
diana

NSF y a-SNAP rompen los complejos SNARE

Ordenamiento de proteínas en la RTG
 Ordenamiento y transporte de enzimas
lisosómicas
¿Cómo pueden ser reconocidas y seleccionadas las proteínas
lisosómicas con la precisión necesaria?

Las hidrolasas lisosómicas presentan solo un

marcador, grupos de MANOSA-6-FOSFATO
(M6P)

La M6P se añaden exclusivamente a los N-

oligosacaridos, por dos enzimas que actúan
de manera secuencial
 Ordenamiento y transporte de enzimas
lisosómicas

1) Una GlcNAc-fosfotransferasa en el cis Golgi añade

GlcNAc-P a uno o dos residuos de manosa
2) Una segunda enzima (Nacetilglucosidasa) elimina el residuo
GlcNAc, dejando un marcador M6P
Ordenamiento y transporte de enzimas
lisosómicas

Las vesículas brotan de la RTG con

una cubierta de clatrina/AP1
 Ordenamiento y transporte de enzimas
lisosómicas
Vesículas que se desprenden de la RTG van cubiertas de
CLATRINA mas un adaptador proteico (AP)

Clatrina/GGA Clatrina/AP1 Clatrina/AP3

Fusión con los lisosomas

vía endosoma tardío
Trans-Golgi Fusionan directamente
hacia los con la membrana
lisosomas Proteínas de membrana lisosómica
(Tyr-X-X-Φ)
 Ordenamiento y transporte de enzimas
lisosómicas
En humanos, los defectos de GlcNAc
fosfotransferasa causa una enfermedad de
acumulación lisosómica

Enfermedad de células I (no

pueden degradar GAG) debido a
la falta de hidrolasas ácidas

Los hidrolasas ácidas se

encuentran en el torrente
sanguíneo a consecuencia de una
mala clasificación
Separación y transporte de proteínas no
lisosómicas

Constitutiva

Vesículas
secretorias Cromogranina A

Regulada Cromogranina B

Secretogranina
II
 Exocitosis

La fusión de una
vesícula secretora
o gránulo secretor
con la membrana
plasmática y la
descarga
subsiguiente de su
contenido
 Lisosomas
Los lisosomas son el lugar principal de
digestión intracelular

Presenta más de 40 enzimas

(HIDROLASAS ÁCIDAS)

Mantienen el pH alrededor de 4.5-5

Presentan una ATPasa de H+ vacuolar

Lisosomas

Modelo de
maduración de los
lisosomas
 Varias vías aportan materiales a los lisosomas
1) Autofagia

2) Materiales
incorporados por
endocitosis

3) Fagocitosis
 Autofagia
Es el mecanismo del que dispone la célula para la eliminación de
organelos completos y complejos proteicos que la degradación
proteosómica no pudo eliminar

1) Inducción por proteínas cinasa

2) Nucleación y extensión de una membrana

3) Cierre del autofagosoma por una doble membrana

4) Fusión del nuevo compartimiento con el lisosoma (por SNARE)

5) Digestión de la membrana interna del autofagolisosma y de su

contenido
Autofagia
Se pueden formar cuerpos
residuales o gránulos de lipofuscina
 Autofagia y enfermedades

Alzheimer, Huntington y
Cáncer
Parkinson
 La vía endocítica:
Transporte hacia el interior de la célula
de la membrana plasmática

1) Pinocitosis
Endocitosis
2) Mediada por receptor

3) Fagocitosis
Endocitosis mediada por receptor
Requieren de receptores y se
concentran en regiones conocidas
como concavidades cubiertas

Hormonas

Factores de crecimiento

Enzimas

Proteínas sanguíneas
 Endocitosis mediada por receptor

Trisquelion
Endocitosis mediada por receptor
Complejo proteico
adaptador (AP2)

Cadena μ

Adaptina α
Adaptina β
Cadena σ

CLATRINA

DINAMINA
 Endocitosis mediada por receptor
Vía endocítica (Tyr-X-X-
Φ)

Vía endocítica Asn-Pro-X-

Tyr (NPXY) receptor LDL
Clatrina/AP2
Vía endocítica (enzimas
lisosomales secretadas)
«receptor de manosa-6-P»

Vía endocítica proteínas de

membrana plasmática (Leu-
Leu)
 Endocitosis mediada por receptor

AP AP AP

GDP + Pi

GTP DINAMINA
 La vía endocítica
Receptores sujetos a
endocitosis

Domésticos Señalización

Receptores de transferrina Encargado de unir los ligandos

extracelulares que llevan mensajes que
cambian las actividades celulares
Receptores de lipoproteínas (hormonas y factores de crecimiento)
de baja densidad (LDL)

El receptor regresa luego a la El receptor es destruido, en un

superficie celular para realizar proceso llamado regulación en descenso
mas rondas de captación del receptor
La vía endocítica

Maduración del endosoma

 La vía endocítica
Endosoma tardio (pH 5.0 a
6.0), presenta cuerpos
Endosoma tardio multivesiculres
(pH 5.0 a 6.0)
Ingestión por
endocitosis
o fagocitosis
Lisosoma (pH 4.5 a
5.0)
Descenso de pH.
Intercambio de
Proteína (M6P)
proteínas Rab (p.
ej., de Rab5 a Rab7)

Endosoma temprano
(pH 6.0 a 6.5) Célula Endosoma temprano
(pH 6.0 a 6.5)
Endocitosis mediada por receptor

Receptor LDL hace un viaje

de ida y vuelta cada 10-20
minutos (vida de 20 horas)
 Endocitosis mediada por receptor
El nivel de LDL en sangre se
relaciona con el desarrollo de
ateroesclerosis
 Endocitosis mediada por receptor
Formas mutantes del receptor de LDL, provocan una
endocitosis defectuosa de la LDL y altos niveles de colesterol
en el suero (hipercolesterolemia familiar)
Endocitosis mediada por receptor

Receptor del factor de

crecimiento epidermico (EGF)
Fagocitosis
Fagocitosis
Fagocitosis
Fagocitosis
 Fagocitosis

1) Antígeno 2) Antígeno
exógeno endógeno
 Fagocitosis
Los Mϕ además de fagocitar son células presentadoras de Ag y
son capaces de aprender

Mϕ
Trancistosis
Es el transporte de
macromoléculas de un lado de la
célula a otro mediante vesículas

combina endocitosis y exocitosis

se produce principalmente en
láminas de células epiteliales
polarizadas.
 Preguntas analíticas
Responder las preguntas 2, 3, 6, 11, 12 y 14 del capítulo 8