Rev Mex Cienc Farm 45 (1) 2014

Trabajo científico

Estudio de mutagenicidad y actividad antibacteriana de

Erythrina herbacea, Zanthoxylum caribaeum y
Dendropanax arboreus
Mutagenicity study and antibacterial activity of Erythrina herbacea, Zanthoxylum
caribaeum and Dendropanax arboreus
Cynthia Ordaz Pichardo,1 Rocío Clemente Garcés,2 Ma. Edith López Villafranco,3
Mireya de la Garza,4 Myriam Arriaga-Alba5

1Laboratorio de Biología Celular y Productos Naturales, Escuela Nacional de Medicina y Homeopatía,

Instituto Politécnico Nacional
2Departamento de Biología Celular, Unidad Académica Multidisciplinaria Reynosa-Aztlán, Universidad
Autónoma de Tamaulipas
3Herbario Izta, Facultad de Estudios Superiores Iztacala, Universidad Nacional Autónoma de México
4Departamento de Biología Celular, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del IPN
5Laboratorio de Investigación en Microbiología, Hospital Juárez de México

Resumen
Este estudio presenta la caracterización fitoquímica y la evaluación antibacteriana y mutagénica de Erythrina herbacea,
Zanthoxylum caribaeum y Dendropanax arboreus, que se utilizan en la medicina tradicional mexicana para el tratamiento
de infecciones gastrointestinales y de la piel. Los extractos contienen aminas, fenoles y alcaloides principalmente al ser
caracterizados por cromatografía en capa fina. El extracto acuoso de D. arboreus y los extractos hexánicos de Z. caribaeum
y E. herbacea fueron los más activos presentando CMIs de < 0.78, 0.78 y 1.56 μg/mL, respectivamente. Ninguno de los
extractos tiene propiedades mutagénicas al ser evaluados con la prueba de Ames. Estos resultados sugieren que los
extractos de estas plantas tienen un buen potencial para ser usados como agentes antibacterianos.

Abstract
This study presents the phytochemical characterization and antibacterial and mutagenic evaluation of Erythrina herbacea,
Zanthoxylum caribaeum and Dendropanax arboreus, used in Mexican traditional medicine for the treatment of
gastrointestinal and skin infections. The extracts contained mainly amines, phenols and alkaloids when were
characterized by thin layer chromatography. The aqueous extract of D. arboreus and the hexane extracts of Z. caribaeum
and E. herbacea were the most active presenting MICs of < 0.78, 0.78 and 1.56 μg/mL respectively. None of the extracts has
mutagenic properties when were evaluated by Ames test. These results suggest that the extracts of these plants have
good potential for be used as antibacterial agents.

Palabras clave: Plantas medicinales, actividad Key words: Medicinal plants, antibacterial activity,
antibacteriana, actividad mutagénica, Erythrina herbacea, mutagenic activity, Erythrina herbacea, Zanthoxylum
Zanthoxylum caribaeum, Dendropanax arboreus. caribaeum, Dendropanax arboreus.

Correspondencia: Fecha de recepción: 24 de enero de 2014

Dra. Cynthia Ordaz Pichardo Fecha de recepción de modificaciones: 11 de abril de 2014
Laboratorio de Biología Celular y Productos Naturales Fecha de aceptación: 21 de mayo de 2014
Escuela Nacional de Medicina y Homeopatía
Instituto Politécnico Nacional
Guillermo Massieu Helguera No. 239 Fracc. La Escalera
Col. Ticomán, C.P. 07320, México. D.F.
Tel: 5729 6000 ext 55535 Fax: 5729 6000 ext 55561
e-mail: dra_cynthia@hotmail.com
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Introducción
Las comunidades rurales en los países en vías de desarrollo
emplean con frecuencia plantas medicinales como tratamiento
alternativo para procurar su salud, debido a que los servicios
médicos son inaccesibles para la mayoría de la población, ya
sea por las largas distancias o los elevados costos.1 Las plantas
medicinales se utilizan con frecuencia en forma de cataplasmas
o infusiones sin tener ningún conocimiento de sus propiedades
químicas, genotóxicas, terapéuticas o sus dosis requeridas.
México ocupa el cuarto lugar en el mundo en diversidad de
plantas y se ha informado que de las 26 000 especies de plantas
que se encuentran en todo el mundo, 9 500 son endémicas de
México. Se cree que el 15% de estas plantas (1 425 especies)
tienen propiedades terapéuticas, sin embargo, sólo se han
realizado estudios genotóxicos, farmacológicos y químicos a
aproximadamente el 5 % del total de éstas. En el Estado de
Tamaulipas, en el noreste de México, las plantas han sido
utilizadas tradicionalmente por sus propiedades nutritivas y
terapéuticas.2
Por otro ladio la resistencia bacteriana a los antibióticos de
mayor uso, se ha convertido en una grave consecuencia del mal
uso de estos fármacos. De hecho, se ha reportado resistencia
bacteriana a compuestos beta- lactámicos, fluoroquinolonas,
aminoglucósidos y otros compuestos.3 Además, muchos de
estos antibióticos tienen efectos adversos o pueden ser
genotóxicos para el ser humano. Por lo tanto, es necesario
evaluar y descubrir nuevos antibióticos que sean más eficientes
y seguros y que sean potencialmente más baratos para los
pacientes. Es este aspecto, las plantas medicinales pueden
ofrecer nuevos compuestos con propiedades antibióticas que
deben ser evaluadas.
El objetivo de este trabajo fue realizar la caracterización
fitoquímica y la evaluación antibacteriana y genotóxica de los
extractos de las plantas, Erythrina herbacea L. (Leguminosae),
Zanthoxylum caribaeum Lam. (Ulmaceae) y Dendropanax
arboreus (L) Dacae y Planch. (Araliaceae), utilizadas
tradicionalmente por los nativos del Estado de Tamaulipas en
México para tratar infecciones gastrointestinales y de la piel.
Este trabajo establece si estos extractos de plantas son una
buena alternativa a la terapia antibiótica tradicional. El
conocimiento científico de las propiedades antibacterianas de
los extractos acuosos de estas plantas dará validación y
confianza a las comunidades rurales para utilizar estos
extractos. Además, los tres nuevos extractos podrían ser
estudiados en futuros tratamientos clínicos.
Material y métodos
Colección e identificación del material vegetal
Las raíces de E. herbacea y las cortezas y tallos de Z. caribaeum
y D. arboreus fueron colectadas en 2010 en la comunidad rural
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MEXICANA
DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS
de Gómez Farías, en el centro del Estado de Tamaulipas. Estas
plantas se encuentran a 350 m de altitud y crecen a temperaturas
que oscilan entre los 7 ºC en invierno y 25 a 35 ºC en verano.4
Después de su colección, las plantas se secaron a 40 ºC y se
identificaron por la M. en C. María Edith López Villafranco en
el "Herbario Izta" ubicado en el campus Iztacala de la
Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), en
donde se asignaron los siguientes números de registro: E.
herbacea (No. 1650), Z. caribaeum (No. 1651) y D. arboreus
(No. 1652).
Preparación de los extractos
25 gramos de material vegetal seco y libre de polvo, se
suspendieron en 250 mL de agua destilada, acetona (Golden
Bell 30200) o hexano (Golden Bell 31220). Los extractos
acuosos se filtraron y se liofilizaron (Ultra dryer
EVO40FXDW) por 96-120 h a -1 °C. Los extractos con acetona
y hexano se filtraron y se secaron completamente en un
rotavapor (Büchi R200/205). Alícuotas de 1 mg de extracto de
las plantas se almacenaron a -20 °C hasta su uso.5
Caracterización de los extractos por cromatografía de capa
fina (ccf) y espectrometría de masas por impacto electrónico
(EM-IE)
Alícuotas de 250 μL de una solución de 1 mg de extracto/mL se
colocaron cuidadosamente en placas de gel de sílice (Merck
105554) y se eluyeron con una mezcla de hexano-acetato de
etilo (80:20 v/v).
Las placas se revelaron con reactivo de Dragendorff-Munier:
mezcla de cloruro férrico (Sigma F134) y ferrocianuro de
potasio (Sigma P3289); 2,4 dinitrofenilhidrazina (Sigma
D19,930-3); vainillina (Sigma V2375); yodo (Sigma 207 772) y
luz ultravioleta para detectar alcaloides, aminas, fenoles,
esteroides, aldehídos, grupos cetona, aminoácidos, ácidos
grasos y grupos cromóforos, respectivamente.6, 7
Los espectros de masas por impacto electrónico fueron
obtenidos en un equipo Jeol AX-505 HA mass spectrometer a
70 eV.
Cultivo de bacterias y reactivos
Cepas empleadas en la prueba de actividad antibacteriana
de los extractos vegetales
Las cepas de Staphylococcus aureus (ATCC 29213) y
Escherichia coli (ATCC25922) fueron cultivadas en caldo
Müeller-Hinton (M-H) (Becton Dickinson, Cockeyvillle, MD)
en un baño de agua con agitación a 37 ºC durante 24 h. Los
controles positivos utilizados para la inhibición del crecimiento
fueron clindamicina (Cli) (Sigma C5269) para S. aureus y
trimetoprima-sulfametoxazol (T-S) (Bactelan, Wyeth SA de CV,
México) para E. coli.
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Cepas empleadas para la prueba de actividad mutagénica
Se prepararon cultivos en fase estacionaria de las cepas de
Salmonella typhimurium TA98, TA100 y TA102 en caldo
nutritivo (Oxoid-No. 2) en un baño de agua con agitación a 37
ºC durante 16 h. Estas cepas fueron amablemente
proporcionadas por el doctor B.N. Ames de la Universidad de
California (Berkeley, CA).
MNNG (10 µg /placa) o CP (500 µg /placa) y como control
negativo se utilizó el disolvente (DMSO). Los ensayos se
realizaron en presencia y ausencia del activador metabólico S9,
mezclando el contenido del tubo con ayuda de un vortex y
colocándolo en placas de Vogel-Bonner que se incubaron
durante 48 h a 37 ºC. Las colonias revertantes de histidina
(His+) se contaron con un contador de colonias Fisher.8

Reactivos Análisis estadístico

La ampicilina (Amp) (A9393), tetraciclina (Tet) (T3258),
D-biotina (B4501), sal dipotásica de D-glucosa 6-fosfato (G6P)
(G7375), sal sódica de β-nicotinamida adenina dinucleótido
fosfato (NADP) (N0505), ácido picrolónico (AP) (P5628),
N-metil-N´-nitro-N-nitrosoguanidina (MNNG) (129941),
mitomicina C (MC) (69824-1EA), 2-amino-antraceno (2AA)
(A38800) y la ciclofosfamida (CP) (C0768) fueron adquiridas
en Sigma Chemical Co. (St Louis, MO., EUA). El dimetil
sulfóxido (DMSO) (D7941) y la L-histidina (H6034) fueron
adquiridas en E. Merck (Darmstad, Alemania). Mientras que la
fracción hepática S9 se preparó como se ha descrito por Maron
y Ames en 1983,8 induciendo con Aroclor-1254 (Analab Inc.,
Reino Unido).
Todos los experimentos se realizaron por triplicado en tres
estudios independientes y los resultados se analizaron en los
programas Microsoft Excel y Statgraphics Plus versión 4.0.
Resultados y discusión
Caracterización fitoquímica por ccf
En la Tabla 1 se resumen los compuestos químicos que se
encontraron en los tres extractos de las plantas estudiadas. El
extracto hexánico de E. herbacea presentó la mezcla más
compleja de compuestos, que consiste en ácidos grasos, aminas,
fenoles, esteroides y alcaloides. En comparación, los extractos
acuoso y acetónico mostraron una menor cantidad de
compuestos.

Tabla 1. Compuestos presentes en los extractos de las

Ensayo de actividad antibacteriana
especies estudiadas
Las cepas de S. aureus ATCC 29213 y E. coli ATCC25922 se
cultivaron en caldo M-H en un baño de agua con agitación a 37 Revelador Tipo de Erythrina Zanthoxylum Dendropanax
°C durante 24 h hasta alcanzar una turbidez de 5 en la escala de compuesto herbacea caribaeum arboreus
Agua Reactivo de Alcaloides ++ + +
McFarland. Posteriormente, las cepas se inocularon en placas Dragendorff
Acetona + + +
de agar M-H usando un hisopo estéril y se colocaron cilindros Hexano +++ ++ ++
estériles sobre el agar, que fueron cargados con los extractos a Agua FeCl3 + Aminas, + + +
las concentraciones de 25, 50 o 100 μg/cilindro. Se utilizó un Acetona KCN fenoles y + + +
control positivo apropiado para la inhibición del crecimiento Hexano esteroides +++++ ++ +++
(Cli o T-S) a 10 μg/mL y como control negativo, se emplearon Agua 2,4- Aldehídos y + + +
100 μL de disolvente (agua destilada, acetona o hexano). Las Acetona dinitrofeni cetona - - -
placas se incubaron a 37 °C durante 18 a 24 h y posteriormente Hexano lhidrazina ++ - +
se midieron los halos de inhibición. Los halos de 7 mm o Agua Vainillina Aminoácidos + + +
Acetona - - -
superiores se consideraron como zonas de sensibilidad
Hexano - - -
bacteriana (S) y las zonas inferiores se consideraron como Agua Ácidos + + +
I2
zonas de resistencia (R).9, 10 Acetona grasos ++ +++ ++
La determinación de la Concentración Mínima Inhibitoria Hexano +++++ +++++ ++
(MIC) se realizó en placas de 96 pozos, agregando 100 μL de las Agua U.V. Cromóforos + + +
cepas bacterianas preparadas como se ha descrito anteriormente Acetona + + +
y añadiendo alícuotas de los extractos hasta llegar a las Hexano + + +
concentraciones entre 0.78 y 250 μg/mL. Las placas se - = compuesto no presente en la muestra; + = presente en baja cantidad;
incubaron a 37 °C durante 18 a 24 h y la densidad óptica (DO) +++++ = presente en altas concentraciones.
se midió a 630 nm en un espectrofotómetro (ELx808, Bio-Tek).
En los extractos de Z. caribaeum se identificaron las mismas
Ensayo de actividad mutagénica familias de compuestos que se encontraron en los extractos de
Alícuotas de 100 μL de las cepas de S. typhimurium TA98, E. herbacea pero en menor cantidad, mientras que D. arboreus
TA100 ó TA102 fueron expuestas a concentraciones entre 1 y tiene la menor complejidad de compuestos químicos. Algunos
200 μg de extracto/placa o a un control positivo adecuado para metabolitos primarios, tales como ácidos grasos y aminoácidos
cada cepa: MC (2 ng/placa), 2AA (10 μg /placa), AP (50 µg/placa),

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se presentaron en todos los extractos debido a que son
componentes esenciales de las plantas. Es importante mencionar
que la polaridad de los disolventes tuvo una influencia
significativa en la separación de estos compuestos.
Propiedades antibacterianas de los extractos
Los tres extractos (agua, acetona y hexano) de las tres especies
evaluadas muestran actividad contra S. aureus a la concentración
de 25 μg/cilindro; resultados similares se observaron para los
extractos con acetona y hexano en contra de E. coli, mientras que
los extractos acuosos de E. herbacea y D. arboreus fueron
activos contra esta misma especie a las concentraciones de 25 y
100 μg/cilindro, respectivamente (Tabla 2). Los valores de CMI
para todos los extractos se presentan en la Tabla 3. Todos los
extractos mostraron actividad inhibitoria contra S. aureus a
concentraciones menores de 3.12 μg/mL, excepto el extracto
acuoso de E. herbacea. Mientras que los mejores resultados
contra la especie E. coli se mostraron en los tres extractos de E.
herbacea con CMIs inferiores a 3.12 μg/mL y en el extracto
hexánico de D. arboreus CMI < 0.78 μg/mL.
Estudio de mutagenicidad (Prueba de Ames)
La prueba de Ames en S. typhimurium demostró que ninguno de
los extractos evaluados induce mutaciones por corrimiento en el
marco de lectura (cepa TA98), mutaciones por sustitución en los
pares de bases (cepa TA100) o mutaciones por daño oxidativo
(cepa TA102). En la Tabla 4 se muestran los resultados de la
prueba de Ames para estos extractos con propiedades
antibacterianas, donde se puede corroborar que el número de
colonias revertantes de histidina provocadas por los diferentes
extractos tiene valores similares al número de colonias
revertantes espontáneas en presencia y ausencia de fracción
metabólica S9. Para que los extractos sean considerados como
mutagénicos es necesario encontrar un incremento dos veces
mayor al número de revertantes espontáneas.8
Diferentes especies del género Erythrina se distribuyen en todo el
mundo en las regiones tropicales y subtropicales, estas especies
son conocidas por ser ricas en flavonoides y alcaloides.
Previamente se han reportado seis alcaloides (erisodina,
erisovina, eritralina, erisopina y el hexósido de la erisopina)
presentes en las semillas de E. herbacea.11 Mientras que en otros
estudios realizados sobre las flores de esta misma especie se
encontraron seis alcaloides (10-hidroxi-11oxoerisotrina,
eritarbina, 10,11-dioxierisotrina, eritrartina, erisotramidina y
erisotrina-N-óxido) con capacidad atrapadora de radicales libres
de peroxinitrito in vitro.12 Y en el estudio más reciente que se ha
reportado se encontraron dos nuevos alcaloides (eribacina A y
eribacina B) con potente actividad antibacteriana contra diversas
cepas de S. aureus resistentes a meticilina.13 A partir de otras
especies del género Erythrina se han aislado 50 flavonoides
prenilados,14 que han demostrado tener diferentes efectos
terapéuticos, principalmente como antihipertensivos, relajantes
musculares y antibacterianos.15-17
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MEXICANA
DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS
Por ejemplo, las isoflavonas preniladas aisladas de la corteza de
la raíz de Erythrina eriotricha y la corteza del tallo de Erythrina
vogelli mostraron actividad antibacteriana contra S. aureus
209P.18, 15 Mientras que los alcaloides también han mostrado
propiedades curativas, incluyendo actividades antibacterianas y
anti-inflamatorias.19 En este trabajo se encontró una elevada
cantidad de alcaloides de manera similar a lo reportado en
trabajos anteriores para las flores, semillas y raíces de E.
herbacea y otras especies del género Erythrina como Erythrina
crista-galli y Erythrina variegata.20 Además de los alcaloides
detectados en E. herbacea, encontramos aminas 4,4-bis
(dietilamino) benzofenona oxima o-metil éter y la
Tris(1,3,2-ditiaborolen-2-il amina), el alcaloide canadina y el
fenol 6-terbutil-o-cresol, algunos de estos compuestos han sido
reportados previamente.20 La caracterización química de estos
compuestos fue determinada por comparación de los espectros en
la librería Wiley275. Aunque algunos flavonoides y alcaloides ya
han sido identificados, nuevos compuestos se pueden aislar en
esta planta; en este momento estamos trabajando en el
aislamiento e identificación de algunos de ellos por resonancia
magnética nuclear (1H-NMR).
Respecto a la especie Zanthoxylum caribaeum no se han
reportado antecedentes, sin embargo, a partir de la corteza del
tallo de Zanthoxylum myriacantum se han aislado el
8,9-dimetoxi-2,3-metilen-dioxibenzofenantridieno (N-nortidina)
y el 7-9-dimetoxi-2,3-metilen-dioxibenzofenantridina.21 De las
hojas de Zanthoxylum budrunga se han aislado los alcaloides
2-(2',4',6'-trimetil-heptenil)-4-quinozolona y la lunacridina.22 De
la corteza del tallo de Zanthoxylum buesgenii se identificaron los
alcaloides buesgenina, decarina, sesamina, matairesinol
dimetileter y metilpluviatilol23 y a partir de Zanthoxylum
madagascariense se aislaron la dihidroqueleritrina, nornitidina,
norqueleritrina y la decarina.24 En el presente estudio, los
compuestos mayoritarios aislados de Z. caribaeum fueron el
alcaloide triptamina y el aldehído 4-formil-biciclo (3.3.2) deca
2,7,9-trien-2-carboxaldehido, ambos se determinaron por EM-IE.
Estos compuestos no habían sido identificados en las otras
especies del género Zanthoxylum.
D. arboreus no ha sido objeto de muchos estudios, de las hojas se
han aislado algunos derivados de acetileno como
dedidrofalcarinol, falcarindiol, dehidrofalcarindiol y dos nuevos
poliacetilenos (dendroarboreoles).25 En el presente estudio, los
compuestos identificados fueron principalmente aminas, fenoles,
esteroides y alcaloides, es importante continuar con los estudios
de las diferentes especies de este mismo género, ya que hasta la
fecha existen pocas descripciones de ellos en la literatura. Es
importante señalar que aunque las comunidades rurales utilizan
infusiones medicinales, puede ser necesario extraer los principios
activos con disolventes específicos para lograr mejores efectos.
En esta investigación, los extractos hexánicos produjeron una
mayor variedad de compuestos químicos, que en consecuencia
tienen mayor potencial para el desarrollo de nuevos
medicamentos a base de plantas medicinales.
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Tabla 2. Actividad antibacteriana de los extractos de las tres especies estudiadas (Halos de inhibición en mm)
S. aureus ATCC 29213 E. coli ATCC 25922
Disolvente Especie 25 µg 50 µg 100 µg 100 µl 10 µg 25 µg 50 µg 100 µg 100 µl 10 µg
/cilindro /cilindro /cilindro disolvente /cilindro Clia /cilindro /cilindro /cilindro disolvente /cilindro
T-S b
Agua Erythrina 7.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 21.6 ± 1.2 7.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 20.6 ± 0.7
herbacea S S S R S S S S R S
Zanthoxylum 7.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 21.2 ± 1.0 0.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 20.8 ± 1.1
caribaeum S S S R S R R R R S
Dendropanax 7.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 21.2 ± 1.0 0.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 21.1 ± 0.7
arboreus S S S R S R R S R S
c
Acetona Erythrina 11.6 ± 0.5 14.3 ± 1.8 25.4 ± 2.9c 0.0 ± 0.0 24.4 ± 1.1 11.4 ± 0.5 12.5 ± 2.0 21.8 ± 2.2 0.0 ± 0.0 26.3 ± 1.0
herbacea S S S R S S S S R S
c
Zanthoxylum 11.7 ± 0.4 15.2 ± 0.8 26.4 ± 2.9 0.0 ± 0.0 23.5 ± 1.0
c 11.3 ± 0.5 13.0 ± 1.2 22.1 ± 2.5c 0.0 ± 0.0 20.7±0.9c
caribaeum S S S R S S S S R S
c
Dendropanax 11.8 ± 2.8 15.6 ± 0.7 26.2 ± 2.3c 0.0 ± 0.0 23.4 ± 1.5 11.4 ± 0.5 13.1 ± 1.5 20.8 ± 1.0c 0.0 ± 0.0 20.8±0.9c
arboreus S S S R S S S S R S
Hexano Erythrina 7.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 18.7 ± 0.8 7.0 ± 0.0 9.0 ± 1.5 10.5 ± 2.6 0.0±0.0 26.3±1.0
herbacea S S S R S S S S R S
Zanthoxylum 7.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 18.3 ± 0.7 0.0 ± 0.0 9.0 ± 1.5 10.5 ± 2.6 0.0±0.0 26.5±1.1
caribaeum S S S R S R S S R S
Dendropanax 7.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 7.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 18.4 ± 0.5 7.0 ± 0.0 9.0 ± 1.5 10.5 ± 2.6 0.0±0.0 27.0± 1.1
arboreus S S S R S S S S R S
S = Sensible (halo igual o superior a 7 mm), R = Resistente (halo inferior a 7 mm) aClindamicina, bTrimetoprima-Sulfametoxazol,c Los halos de
inhibición superiores a los controles positivos se remarcan en negritas.

Tabla 3. Concentración mínima inhibitoria de los extractos de las tres especies estudiadas (µg/mL)
Disolvente Especie S. aureus ATCC 29213 E. coli ATCC 25922
Agua Erythrina herbacea 25 1.56
Zanthoxylum caribaeum 1.56 > 100
Dendropanax arboreus < 0.78 100
Acetona Erythrina herbacea 3.12 3.12
Zanthoxylum caribaeum 1.56 25
Dendropanax arboreus 3.12 12.5
Hexano Erythrina herbacea 1.56 < 0.78
Zanthoxylum caribaeum 0.78 50
Dendropanax arboreus 1.56 < 0.78

Los tres extractos acetónicos exhibieron el mayor efecto
antibacteriano frente a S. aureus y E. coli por el método de
difusión con disco en agar. Los valores de CMI de los extractos
acuoso, acetónico y hexánico de la raíz de E. herbacea fueron
de 25, 3.12 y 1.56 µg/mL, respectivamente contra la especie S.
aureus; mientras que para la especie E. coli fueron de 1.56, 3.12
and <0.78 µg/mL, respectivamente. Estos resultados son
similares a los resultados de las evaluaciones de otras especies
de Erythrina.26, 27 Sin embargo, los disolventes de esos estudios
fueron generalmente polares (agua, etanol y acetona) y los
métodos y concentraciones utilizadas varían entre las diferentes
investigaciones. Por ejemplo, el extracto etanólico de la corteza
del tallo de Erythrina senegalensis ha sido evaluado sobre S.
aureus y Enterobacter faecalis, mostrando CMIs de 12 y 23
µg/mL, respectivamente.26 Por el contrario, el mismo tipo de
extractos obtenidos de Erythrina mulungu no inhibió el
crecimiento de S. aureus o E. coli, incluso a 100 µg/mL.
Pero mostraron un efecto antibacteriano muy interesante contra
cepas de S. aureus manipuladas genéticamente resistentes a
macrólidos y fluoroquinolonas y cepas con daño en las bombas
de flujo electrónico.27 Algunos investigadores han evaluado la
actividad antibacteriana de extractos de otras especies del
género Erythrina contra bacterias Gram-positivas y
Gram-negativas a dosis de 1000 µg/mL, observando actividad
antibacteriana contra bacterias Gram-positivas
exclusivamente.19, 17 Nuestros resultados indican que la especie
E. herbacea tiene una mayor actividad antibacteriana contra
bacterias tanto Gram-positivas como Gram-negativas.
Respecto al género Zanthoxylum, la corteza del tallo y los tallos
de las plantas se han estudiado usando disolventes no polares
para la preparación de extractos principalmente. En este
estudio, los extractos acuoso, acetónico y hexánico de corteza
del tallo de Z. caribaeum mostraron buena actividad
antibacteriana con valores de CMI de 1.56, 1.56 y 0.78 µg/mL

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frente a S. aureus, respectivamente y >100, 25 y 50 µg/mL significativamente diferentes, dejando abierta la posibilidad de
contra E. coli, respectivamente. Esto sugiere que la especie Z. desarrollar investigación sobre una amplia variedad de plantas
caribaeum es un inhibidor más potente contra las bacterias medicinales.
Gram-positivas. En estudios realizados sobre otras especies del
mismo género se ha encontrado que el extracto con No existen muchos estudios que reporten la actividad biológica
diclorometano de Zanthoxylum tetraspermum contiene diversos de D. arboreus; en un trabajo reciente se reportó que el extracto
alcaloides con actividad antibacteriana contra S. aureus a acuoso y hexánico de las hojas tienen actividad contra S. aureus
concentraciones entre 1.56 y 3.12 µg/mL, sin tener efecto y S. epidermidis con CMIs de 5 mg/mL.31 Y en otro trabajo se
inhibidor contra E. coli.28 Los extractos acuoso, metanólico y encontró que el extracto etanólico de las hojas tiene actividad
acetónico de Zanthoxylum chalybeum y Zanthoxylum citotóxica contra las líneas celulares tumorales Hep-G2, A-431,
usambarense mostraron actividad antibacteriana contra H-4IIE y L-1210.32 Mientras que en otros estudios se han
Bacillus subtilis, Micrococcus luteus y S. aureus a 100 μg/mL, evaluado sus propiedades citotóxicas utilizando líneas celulares
pero no contra cepas Gram-negativas de Klebsiella pneumoniae cancerosas de riñón, pulmón y ovario encontrando que el
o E. coli.29 Esta información refuerza la hipótesis de que los falcarinol es el responsable de la actividad citotóxica y
metabolitos contenidos en Z. caribaeum son antibacterianos anticancerígena en un modelo xenográfico inducido con células
sólo contra las bacterias Gram-positivas. En contraste, los de melanoma humano.25 En este estudio, los extractos acuoso,
extractos con metanol, cloroformo y hexano de Zanthoxylum acetónico y hexánico de D. arboreus mostraron buena actividad
rhoifolium y Z. budrunga son antibacterianos contra cepas antibacteriana con valores de CMI de <0.78, 3.12 y 1.56 µg/mL
Gram-positivas y Gram-negativas a concentraciones entre 12.5 frente a S. aureus respectivamente y 100, 12.5 y <0.78 µg/mL
y 200 µg/mL.30 A partir de esta información, podemos concluir contra E. coli, respectivamente. Esto sugiere que la especie D.
que incluso cuando las plantas pertenecen al mismo género, los arboreus tiene potencial antibacteriano contra bacterias
metabolitos secundarios y la actividad biológica pueden ser Gram-positivas y Gram-negativas.
Tabla 4. Evaluación de la actividad mutagénica de los tres extractos vegetales en S. typhimurium con la prueba de Ames. Los resultados
se expresan como número de colonias revertantes Histidina+ (Promedio ± desviación estándar)
Extracto Activador metabólico µg/placa Histidina + (Promedio ± DS)
TA98 TA100 TA102
E. herbacea S9 (-) 50 26.6 ± 2.9 183 ± 9.8 346 ± 45.8
25 26.5 ± 1.9 169 ± 11.0 324 ± 24.2
12.5 24.3 ± 3.3 155 ± 8.2 311 ± 28.8
Z. caribaeum S9 (-) 50 26.4 ± 1.4 189 ± 7.6 334 ± 43.6
25 25.8 ± 1.6 186 ± 5.58 294 ± 21.4
12.5 24.5 ± 3.4 183 ± 11.8 285 ± 27.6
D. arboreus S9 (-) 50 25.4 ± 1.1 204 ± 12.4 322 ± 21.5
25 23.8 ± 1.8 175 ± 12.5 313 ± 25.4
12.5 22.0 ± 0.9 167 ± 14.2 271 ±18.1
AP 50 428.2 ± 30.9 - -
MNNG 5 - 13248 ± 1036 -
MC 0.025 - - 4386 ± 248
DMSO 10 30.0 ± 2.0 187 ± 18 372 ± 19
E. herbacea S9 (+) 50 37.4 ± 3.0 204 ±16.6 337 ± 57.7
25 23.1 ± 6.1 195 ±15.9 336 ± 50.1
12.5 21.8 ± 5.5 184 ±17.1 308 ± 49.0
Z. caribaeum S9 (+) 50 31.6 ± 2.4 194 ±11.4 452 ± 47.5
25 30.5 ± 1.7 164 ± 6.7 362 ± 35.9
12.5 30.4 ± 2.2 159 ± 4.2 361 ± 37.0
D. arboreus S9 (+) 50 27.0 ± 1.5 200 ± 9.2 356 ± 39.4
25 25.7 ± 1.2 199 ± 8.1 350 ± 23.4
12.5 23.5 ± 1.7 194 ± 9.3 320 ± 28.0
2AA 10 4910 ± 187 - 2055 ± 3 47
CF 500 - 564.8 ± 20.8 -
DMSO 10 33.8 ± 2.9 168 ± 10.1 348.6 ± 37
Cada resultado es el promedio de tres experimentos independientes realizados por triplicado. La activación metabólica se realizó con fracción S9 hepática
de rata inducida con Aroclor 1254. Controles: Ácido Picrolónico (AP); N-metil-N´-nitro-N-nitrosoguanidina (MNNG); Mitomicina C (MC);
Ciclofosfamida (CF); Dimetil sulfóxido (DMSO).
Revertantes espontáneas: TA98 = 30.0 ± 2.0, TA100 = 187.0 ± 18.0 y TA102 = 372.0 ± 19.0

83
Rev Mex Cienc Farm 45 (1) 2014
La evaluación de la actividad mutagénica de plantas utilizadas
con fines medicinales debe ser un procedimiento de rutina para
eliminar el riesgo de exposición a compuestos mutagénicos
presentes en los productos naturales. Generalmente las plantas
medicinales carecen de efectos tóxicos, pero existen algunas
investigaciones que describen la inducción de mutaciones por
corrimiento en el marco de lectura, como el caso de Gnapalium
spp. y Valeriana procera.33
Sin embargo, es mayor la cantidad de plantas que tienen
propiedades anti-mutagénicas y anti-cancerígenas, debido a la
presencia de antioxidantes.34 Ninguna de las tres plantas
evaluadas en este trabajo induce mutaciones al ser evaluadas
con la prueba de Ames en S. typhimurium. Estos resultados son
similares al único estudio que se ha reportado en la literatura,
donde los autores encontraron que los extractos acuoso y
etanólico de las hojas y corteza de tallo de Zanthoxylum
ailanthoides Sieb & Zucc no tienen propiedades mutagénicas,
en presencia y ausencia de la fracción S9, al ser evaluadas en las
cepas de S. typhimurium TA97, TA98, TA100, TA102 y
TA1535.35 Nuestro estudio contribuye a incrementar la lista de
extractos de plantas medicinales que no son mutagénicos y por
lo tanto tienen baja probabilidad de ser cancerígenos. Por lo
tanto, estos extractos pueden ser utilizados con mayor confianza
para propósitos medicinales.
Conclusiones
Los extractos acuosos, acetónicos y hexánicos obtenidos de E.
herbacea, Z. caribaeum y D. arboreus son antibacterianos y no
mutagénicos. Estas propiedades los convierten en buenos
candidatos para nuevos estudios sobre su uso como antibióticos
contra bacterias tanto Gram-positivas como Gram-negativas.
Nosotros pensamos que debe ampliarse la investigación sobre
sus propiedades anti-mutagénicas y estos extractos podrían ser
evaluados por su posible potencial como anti-cancerígenos.
Agradecimientos
Gracias al Fondo Mixto de Fomento a la Investigación
Científica y Tecnológica CONACYT, Gobierno del Estado de
Tamaulipas, por el financiamiento otorgado al proyecto:
TAMPS-2005-C08-13. Al Dr. Jorge Cornejo Garrido por su
apoyo en la interpretación de los resultados de espectrometría
de masas.
84
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