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Ley de Lambert:
Esta ley establece que cuando pasa luz monocromática por un medio
homogéneo, la disminución de la intensidad del haz de luz incidente es
proporcional al espesor del medio, lo que equivale a decir que la intensidad de
la luz transmitida disminuye exponencialmente al aumentar aritméticamente el
espesor del medio absorbente (Fig. 1):
P0
B
Fig. 1. Ley de Lambert
Ley de Beer:
La intensidad de un haz de luz monocromática disminuye exponencialmente al
aumentar aritméticamente la
concentración de la sustancia absorbente, cuando este haz pasa a través de un
medio homogéneo (Fig. 2).
P0
c
Fig. 2. Ley de Beer
Pero luego
T = P / P0 = 10-abc
A = - log (P / P0) = - log 10-abc
A=abc
Esta ecuación indica que la absorbancia es una función lineal de la
concentración, donde a es una constante de proporcionalidad llamada
absortividad. La magnitud de a depende de las unidades de b y c. Si la
concentración c está expresada en moles por litro y la longitud de la cubeta b en
centímetros, la constante a recibe el nombre de absortividad molar (Ɛ) . Luego
A= Ɛbc
Se han encontrado pocas excepciones a la generalización de que la absorbancia
está relacionada en forma lineal con la longitud de la trayectoria. Por otra parte,
se ha encontrado desviaciones frecuentes de la proporcionalidad directa entre la
absorbancia medida y la concentración cuando b es constante. Para que no
ocurran errores durante nuestro análisis y hacerlo de manera adecuada
hacemos uso de la curva de ringbown.
GRÁFICA DE RINGBOW
Cuando se realiza un análisis espectroscópico se debe trabajar, en lo posible,
con concentraciones que permitan que se cumpla la ley de Beer, con el fin de
obtener una curva de calibración que tenga una relación lineal.
Para obtener el intervalo óptimo de concentraciones primero se construye la
curva de Ringbom, que consiste en construir una gráfica de absorbancia (100-
%T) vs la Concentración. Los datos se obtienen preparando una serie de
soluciones patrón del analito, que cubran una variación de por lo menos dos
órdenes de magnitud de concentración de este y se miden las transmitancias
correspondientes a la longitud de onda analítica escogida. Para la mayoría de
los sistemas la curva de Ringbown corresponde a una curva en forma de S. La
parte lineal de esta gráfica permite obtener el intervalo de concentraciones
óptimo o el intervalo que presentara una relación lineal entre absorbancia y
concentración. En esta gráfica, los cruces de la parte recta (la intermedia), con
la parte baja y con la parte alta, pueden servir para determinar un valor para los
límites de detección mínimo y máximo, respectivamente.