Q.B.P.

Edwin Rizo Solorio Técnicas de Laboratorio

Microbiología

PRÁCTICA 2.
Manejo del microscopio y observación de preparaciones microbiológicas

Objetivos:

 Identificar las partes del microscopio, conocer su manejo adecuado y cuidados necesarios.
 Aprender a reportar las observaciones microscópicas.
 Realizar preparaciones microbiológicas en fresco (con y son colorantes) a partir de muestras naturales.
 Comenzar a describir las características morfológicas, de agrupación y tintoriales de los microorganismos
encontrados en las muestras.

Material:
Portaobjetos
Microscopio Cubreobjetos
Aceite de inmersión Gotero con azul de metileno
Pipetas Pasteur Alimento en descomposición (alumnos)
Mechero Agua de charco (alumnos)
Asa bacteriológica Cinta adhesiva (“Diurex”) (alumnos)

Procedimiento:

1. Identificación de las partes del microscopio.

Siga las indicaciones de su profesor, identifique y manipule adecuadamente cada una de las partes del
microscopio que se le vayan indicando. Reflexione sobre el cuidado y uso del microscopio.

2. Preparaciones húmedas.

A) A partir de una muestra de agua de charco realice dos preparaciones húmedas: la primera sin colorante y la
segunda con colorante.

Preparación sin colorante:

 Con una pipeta Pasteur coloque una o dos gotas de agua de charco sobre un portaobjetos limpio.
 Coloque encima un cubreobjetos.
 Observe al microscopio (10x y 40x).

Preparación con colorante:

 Coloque una gota de azul de metileno sobre un portaobjetos limpio.
 Con una pipeta Pasteur coloque una o dos gotas de agua de charco al lado de la gota de colorante.
 Mezcle suavemente ambas gotas con ayuda de una esquina del cubreobjetos
 Coloque el cubreobjetos sobre la mezcla y observe al microscopio (10x y 40x).

Repita este procedimiento para otras muestras de agua que le indique el profesor.
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B) A partir de una muestra alimento en descomposición (enmohecido) realice dos preparaciones húmedas: la
primera sin colorante y la segunda con colorante.

Preparación sin colorante:

 Coloque un pequeño trozo de cinta adhesiva (2 cm aprox.) en el asa bacteriológica.
 Presione la cinta adherida al asa en el alimento enmohecido.
 Coloque la cinta con la muestra de alimento enmohecido sobre un portaobjetos limpio en donde
previamente depositó una gota de agua.
 Coloque un cubreobjetos encima y observe al microscopio (10x y 40x).

Preparación con colorante:

 Coloque un pequeño trozo de cinta adhesiva (2 cm aprox.) en el asa bacteriológica.
 Presione la cinta adherida al asa en el alimento enmohecido.
 Coloque la cinta con la muestra de alimento enmohecido sobre un portaobjetos limpio en donde
previamente depositó una gota de azul de metileno.
 Coloque un cubreobjetos encima y observe al microscopio (10x y 40x).

Esquema de trabajo:

1. Preparaciones húmedas.
Cubreobjetos Portaobjetos

Muestra

Muestras de agua
Colorante

Muestra

Cubreobjetos Portaobjetos

Gota de agua

Cinta adhesiva con muestra

Alimento
enmohecido
Colorante

Cinta adhesiva con muestra

Observaciones:
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Muestra: ___________________________________________
Tipo de preparación: _________________________________
Tipo de tinción / colorante: ____________________________
Aumento: __________________________________________
Descripción / Observaciones: __________________________
__________________________________________________
__________________________________________________
__________________________________________________

Muestra: ___________________________________________
Tipo de preparación: _________________________________
Tipo de tinción / colorante: ____________________________
Aumento: __________________________________________
Descripción / Observaciones: __________________________
__________________________________________________
__________________________________________________
__________________________________________________

Muestra: ___________________________________________
Tipo de preparación: _________________________________
Tipo de tinción / colorante: ____________________________
Aumento: __________________________________________
Descripción / Observaciones: __________________________
__________________________________________________
__________________________________________________
__________________________________________________

Muestra: ___________________________________________
Tipo de preparación: _________________________________
Tipo de tinción / colorante: ____________________________
Aumento: __________________________________________
Descripción / Observaciones: __________________________
__________________________________________________
__________________________________________________
__________________________________________________
Muestra: ___________________________________________
Tipo de preparación: _________________________________
Tipo de tinción / colorante: ____________________________
Aumento: __________________________________________
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Reporte:

El reporte de la práctica debe tener lo siguiente:

 (HOJA 1) Portada: Universidad, Licenciatura, Materia, Nombre de la práctica, Nombre de los integrantes
del equipo, Grupo, Fecha de la práctica y fecha del reporte.

 Objetivos de la práctica.

 Objetivos particulares (del alumno).

 Diagrama de flujo de la práctica (elaborado por el alumno).

 Resultados (dibujos, observaciones, tablas, etc.).

 Análisis y discusión de resultados.

Esta es la sección más importante del reporte. En esta sección deberás basarte en las observaciones y/o
resultados de las pruebas y preguntarte:

 ¿Los resultados obtenidos son los esperados? ¿Por qué?

 ¿Qué dice la bibliografía (libros, artículos, etc.) respecto a la venopunción y la determinación de
grupo sanguíneo y Rh?
 ¿Está la muestra como esperarías que estuviese?, es decir, ¿es “normal” que hayas observado lo
que observaste en cada una de las muestras? ¿Por qué?
 ¿Qué ventajas y/o desventajas observaste al utilizar distintas técnicas para un mismo paciente?,
¿inconvenientes o dificultades que involucran las técnicas utilizadas y/o a la extracción de sangre?
 ¿Qué ventajas y desventajas observaste al realizar la detección de grupo sanguíneo y Rh?
 ¿Inconvenientes o dificultades que involucran los pasos que siguieron para la determinación de
grupo sanguíneo?

OJO: No deben contestar pregunta por pregunta, sino redactar un escrito de análisis en donde se incluyan
todos los cuestionamientos anteriores.

 Conclusiones (Enunciados concretos de acuerdo a los objetivos planteados y resultados obtenidos)

 Bibliografía consultada.

NOTA: Si en el reporte no se incluye alguno de los puntos antes mencionados, se restarán puntos de la calificación
del reporte.