INFORME FINAL DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

Beatriz Carrillo
Kelly Cruz
María Paula Rodríguez

Universidad del Atlántico

Facultad de Ciencias Básicas

Programa de Biología

Barranquilla, 2017

Km 7 Antigua vía Puerto PBX: (5) 319 7010 www.uniatlantico.

Colombia- Ext.: 1029 edu.co
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INFORME DE LABORATORIO MICROBIOLOGÍA

CONTENIDO

Página
INTRODUCCIÓN 3
LABORATORIO No. 1
DISTRIBUCION Y UBICUIDAD DE LOS MICROORGANISMOS
LABORATORIO No. 2
TÉCNICAS DE CULTIVO Y AISLAMIENTO DE BACTERIAS
LABORATORIO No. 3
TÉCNICAS DE COLORACIÓN BACTERIANA (TENCIÓN SIMPLE)
LABORATORIO No. 4
TÉCNICAS DE COLORACIÓN BACTERIANA (TENCIÓN DIFERENCIAL)
LABORATORIO No. 5- 7
METABOLISMO BACTERIANO
LABORATORIO No. 8
SENBILIDAD BACTERIANA
LABORATORIO No. 9
HONGOS
LABORATORIO No. 10
ALGUNOS PARASITOS DE IMPORTANCIA HUMANA
CONCLUCIÓN
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LABORATORIO No.2

Técnicas de cultivo y aislamiento de bacterias

Objetivos

 Aplicar técnicas de aislamiento para la localización de microorganismos concretos

en muestras

 Emplear diferentes técnicas de siembra y aislamiento de cultivos de bacterias

Metodología

En esta práctica primero cada grupo preparo un medio de cultivo de agar.

Para el cultivo y aislamiento de bacterias se llevó a cabo una siembra de estrías.

Se tomó una caja de Petri y con un marcador en la parte externa se dividió en
cuatro cuadrantes, con el asa ya flameada y fría, se tomó la muestra y se inoculo
la muestra haciendo estrías simples por desgaste en cada cuadrante, sin flamear
de nuevo el asa ni volverla a tomar de la muestra.

En la segunda parte se tomó un tubo de ensayo con caldo nutritivo, se flameo y

enfrió el asa y se tomó la muestra. Se introdujo el asa en el caldo de cultivo sin
tocar las paredes hasta la mitad del caldo y luego se retiró el asa, se hizo una
estría en zigzag en la superficie del bisel. Se repitió el mismo procedimiento del
caldo de cultivo, pero en agar inclinado.

Resultados

Bibliografía

 Verna, L. C. 1945. Técnicas generales y experimentación bacteriológica 657-658

 Stanier, R. Y. 1996. Microbiología. Reverté.

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LABORATORIO No. 3-4

Técnicas de coloración bacteriana (tinción simple y tinción diferencial)

Objetivos
 Realización de diferentes tipos de tinciones que permitan observar la forma y
tamaño de distintos microorganismos, y clasificar los microorganismos en distintos
grupos gram.

Metodología

En tinción simple, la primera parte fue la preparación no coloreada, donde la

muestra que se analizo estaba en un medio líquido, por lo tanto se tomó el asa
estéril y se depositó una gota del cultivo de bacterias, se colocó en un portaobjetos
y se colocó el cubreobjetos encima de la gota. El cultivo de bacterias era de las
muestras de caldo de cultivo de la práctica anterior.
La segunda parte fue la preparación coloreada. Se llevó a cabo el mismo
procedimiento de la primera parte, pero se prepararon varios portaobjetos con
muestras diferentes de cultivo y se le agrego a cada uno un colorante distinto,
usando el tiempo de exposición dependiendo del colorante usado. Luego se lavó
el frotis con agua removiendo el exceso de colorante, se secó alrededor del frotis,
por último se le agrego una gota

En la tinción diferencial la muestra se cubrió con cristal violeta, se dejó actuar por
un minuto y se retiró el exceso de colorante con agua, luego se cubrió con lugol
durante un minuto y se lavó con agua, posteriormente se decoloro con alcohol
cetona por 20 segundos y se lavó con agua, luego se cubrió con safranina y se
dejó actuar por un minuto se lavó con agua y se observó en el microscopio

Por último las muestras se fijaron con bálsamo de Canadá.

Resultados

Bibliografia

 VÁZQUEZ, C., MARTÍN, A., DE SILÓNIZ, M. I., & SERRANO, S. 2011. Técnicas básicas
de Microbiología. Observación de bacterias. REDUCA (Biología), 3(5).

 LÓPEZ-JÁCOME, L. E., HERNÁNDEZ-DURÁN, M., COLÍN-CASTRO, C. A., ORTEGA-

PEÑA, S., CERÓN-GONZÁLEZ, G., & FRANCO-CENDEJAS, R. 2014. Las tinciones
básicas en el laboratorio de microbiología.
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LABORATORIO No. 5-7

Metabolismo bacteriano

Objetivos

 Analizar el comportamiento metabólico e interpretar las diferentes pruebas

bioquímicas que se utilizan en microbiología.

Metodología

En esta práctica cada grupo se encargó de preparar dos medios cada uno, nuestro
grupo preparó los medios de caldo de lactosa y SIM. El profesor se encargó de
inocular cada medio para cada grupo.

Resultados
Prueba de almidón: negativo
Prueba de TSI: positivo
Prueba de SIM: negativo
Prueba de citrato: positivo
Prueba caldo de lactosa: positivo
Prueba de MacConkey: positivo
Prueba EMB: positivo
Prueba SS: positivo
Prueba MRVP: positivo

Ilustración 1 Ilustración 2 Ilustración 3 Ilustración 4

resultados resultado de resultado prueba resultados prueba de
prueba MRVP caldo de lactosa de citrato TSI
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Ilustración 7
Ilustración 5 Ilustración 6 resultado prueba de EMB
resultado prueba resultado prueba
de almidón de SIM

Ilustración 9
Ilustración 8 resultado prueba de SS
resultado prueba de MacConkey

Bibliografía

 CHAVES‐LÓPEZ, C., DE ANGELIS, M., MARTUSCELLI, M., SERIO, A., PAPARELLA, A.,
& SUZZI, G. 2006. Characterization of the Enterobacteriaceae isolated from an artisanal
Italian ewe's cheese (Pecorino Abruzzese). Journal of Applied Microbiology, 101(2), 353-
360.

 BOU, G., FERNÁNDEZ-OLMOS, A., GARCÍA, C., SÁEZ-NIETO, J. A., & VALDEZATE, S.
2011. Métodos de identificación bacteriana en el laboratorio de
microbiología. Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica, 29(8), 601-608.
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ANEXOS

PREGUNTAS

1. DISTINTOS TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO.

R/ MEDIOS DE CULTIVO SEGÚN SU ESTADO FISICO
 MEDIOS LIQUIDOS: Son los que se presentan en este estado,
denominándose por esta razón caldos. El medio líquido más utilizado es el
llamado caldo nutritivo, compuesto principalmente de extracto de carne,
peptona y agua. Se utiliza fundamentalmente cuando se pretende la
obtención de una suspensión bacteriana de una determinada concentración.
 MEDIOS SOLIDOS: Se preparan a partir de los medios líquidos,
agregándoles un agente gelificante. Lo más utilizado son la gelatina y el agar.
Pueden utilizarse para diferentes fines, los más importantes son: agar
comercial para la industria alimenticia, agar bacteriológico, agares purificados
y agarosa, utilizada para electroforesis en gel.
 MEDIOS SEMISOLIDOS: Se preparan a partir de los medios líquidos,
agregando a éstos un agente solidificante en una proporción menor que para
preparar medios sólidos. Uno de sus usos es la investigación de la movilidad
de las bacterias.

MEDIOS DE CULTIVO SEGÚN SU UTILIZACIÓN

 MEDIOS NUTRITIVOS: son aquellos que poseen los componentes mínimos
para que puedas producirse el crecimiento de bacterias que no necesiten
requerimientos especiales. El medio más conocido de este grupo es el agar
nutritivo o agar común, que resulta de la adición de agar al caldo nutritivo.
 MEDIOS DE ENRIQUECIMIENTO: incorporan una serie de factores que
resultan indispensables para el crecimiento de microorganismos exigentes.
Este enriquecimiento se hace por adición de sangre u otros productos
biológicos que aportan dichos factores. Un ejemplo de este tipo es el Agar
Chocolate.
 MEDIOS SELECTIVOS: son utilizados para favoreces el crecimiento de
ciertas bacterias contenidas en una población polimicrobiana. El fundamento
de estos medios consiste en facilitar nutricionalmente el crecimiento de una
población polimicrobiana específica. Un ejemplo de estos medios es el Caldo
Selenito.
 MEDIOS INHIBIDORES: cuando las sustancias añadidas a un medio
selectivo impiden totalmente el crecimiento de una población microbiana, se
denomina inhibidor. Los medios inhibidores podrían considerarse como una
variante más restrictiva de los medios selectivos. Un ejemplo de este tipo de
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medios es el Mac-Conkey.
 MEDIOS DIFERENCIALES: se utilizan para poner en evidencia
características bioquímicas que ayuden a diferenciar géneros o especies.
Algunos ejemplos de este tipo de medios de cultivo son el C.L.E.D. (lactosa
+/lactosa -), el agar sangre (tipo de hemólisis), el SS (que es doblemente
diferencial), entre otros.
 MEDIOS DE IDENTIFICACIÓN: son los destinados a comprobar alguna
cualidad especifica que puede servirnos para reconocer la identidad de un
microorganismo. Estos medios deben poseer los elementos necesarios para
asegurar el crecimiento de microorganismos, el sustrato específico que vaya
a ser metabolizado y el indicador que nos muestre el resultado. Ejemplos de
estos medios es el agar Kligler y el Simmons.
 MEDIOS DE MULTIPLICACIÓN: sirven para obtener una gran cantidad de
células a partir de un microorganismo ya aislado. El caldo-infusión cerebro-
corazón (BHI), es un ejemplo típico de estos medios.

2. PREPARACIÓN Y ESTERILIZACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO.

3. MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN
R/ MÉTODOS QUÍMICOS: estos métodos provocan la pérdida de viabilidad
de los microorganismos con óxido de etileno: es un agente alquilante que se
une a compuestos con hidrógenos lábiles como los que tienen grupos
carboxílicos, amino, sulfhidrilos, hidroxilos, etc. Es utilizado en la
esterilización gaseosa, generalmente en la industria farmacéutica. Destruye
todos los microorganismos incluso virus. Con aldehídos: son agentes
alquilantes que actúan sobre proteínas, provocando una modificación
irreversible en enzimas e inhiben la actividad enzimática.
 Glutaraldehído: Consiste en preparar una solución alcalina al 2% y sumergir
el material a esterilizar de 20 a 30 minutos, y luego un enjuague de 10
minutos.
Este método tiene la ventaja de ser rápido y ser el único esterilizante efectivo
frío. Puede esterilizar plástico, goma, vidrio, metal, etc.
 Formaldehído: se utilizan las pastillas de paraformaldehido, las cuales
pueden disponerse en el fondo de una caja envueltas en gasa o algodón, que
después puede ser expuestas al calor para una rápida esterilización (acción
del gas formaldehído). También pueden ser usadas en estufas de formol, que
son cajas de doble fondo, en donde se colocan las pastillas y se calienta
hasta los 60º C
MÉTODOS FÍSICOS
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 Calor: La utilización de este método y su eficacia depende de dos factores:

el tiempo de exposición y la temperatura. Todos los microorganismos son
susceptibles, en distinto grado, a la acción del calor. El calor provoca
desnaturalización de proteínas, fusión y desorganización de las membranas
y/o procesos oxidantes irreversibles en los microorganismos.
 Calor Húmedo: El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de
proteínas. Estos efectos se debe principalmente a dos razones: El agua es
una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son
producidas por reacciones que eliminan agua. El vapor de agua posee un
coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire.
 Autoclave: Se realiza la esterilización por el vapor de agua a presión.
El modelo más usado es el de Chamberland. Esteriliza a 120º a
una atmósfera de presión (estas condiciones pueden variar) y se deja el
material durante 20 a 30 minutos.
 Equipo: Consta de una caldera de cobre, sostenida por una camisa externa
metálica, que en la parte inferior recibe calor por combustión de gas o por
una resistencia eléctrica, esta se cierra en la parte superior por una tapa de
bronce. Esta tapa posee tres orificios, uno para el manómetro, otro para el
escape de vapor en forma de robinete y el tercero, para una válvula
de seguridad que funciona por contrapeso o a resorte.
 Funcionamiento: Se coloca agua en la caldera, procurando que su nivel no
alcance a los objetos que se disponen sobre una rejilla de metal. Se cierra
asegurando la tapa, sin ajustar los bulones y se da calor, dejando abierta la
válvula de escape hasta que todo el aire se desaloje y comience la salidÔ9de
vapor en forma de chorro continuo y abundante.
 Calor seco: El calor seco produce desecación de la célula, es esto tóxicos
por niveles elevados de electrolitos, fusión de membranas. Estos efectos se
deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos
que están en contacto con éstos. La acción destructiva del calor sobre
proteínas y lípidos requiere mayor temperatura cuando el material está seco
o la actividad de agua del medio es baja.
 Estufas: Doble cámara, el aire caliente generado por una resistencia, circula
por la cavidad principal y por el espacio entre ambas cámaras, a temperatura
de 170º C para el instrumental metálico y a 140º C para el contenido de los
tambores. Se mantiene una temperatura estable mediante termostatos de
metal, que al dilatarse por el calor, cortan el circuito eléctrico.
RADIACIONES: Su acción depende de: el tipo de radiación, el tiempo de
exposición y la dosis
 Ionizantes: Producen iones y radicales libres que alteran las bases de
los ácidos nucleicos, estructuras proteicas y lipídicas, y componentes
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esenciales para la viabilidad de los microorganismos. Tienen gran

penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales termolábiles
(termosensibles) como jeringas descartables, sondas, etc. Se utilizan
a escala industrial por sus costos.
 Rayos ultravioleta: afecta a las moléculas de DNA de los microorganismos.
Son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies y esterilización
de quirófanos.
 Rayos Gamma: Su empleo está basado en los conocimientos sobre
la energía atómica. Este tipo de esterilización se aplica a productos o
materiales termolábiles y de gran importancia en el campo industrial. Puede
esterilizar antibióticos, vacunas, alimentos, etc.
FILTRACIÓN: Se usan membranas filtrantes con poros de un tamaño
determinado. El tamaño del poro dependerá del uso al que se va a someter
la muestra. Los filtros que se utilizan no retienen virus ni micoplasmas, estos
últimos están en el límite de separación según el diámetro de poro que se
utilice. La filtración se utiliza para emulsiones oleosas o soluciones
termolábiles. Se usa para esterilizar aceites, algunos tipos de pomadas,
soluciones oftálmicas, soluciones intravenosas, drogas diagnósticas,
radiofármacos, medios para cultivos celulares, y soluciones de antibióticos
y vitaminas. Existen tres tipos básicos de filtros:
 Filtros profundos o Filtros de profundidad: Consisten de un material fibroso o
granular prensado, plegado, activado, o pegado dentro de los canales de
flujo. En este tipo de filtros la retención de las partículas se produce por una
combinación de absorción y de retención mecánica en la matriz.
 Membranas filtrantes: Tienen una estructura continua, y la retención se debe
principalmente al tamaño de la partícula. Partículas más pequeñas al tamaño
del poro quedan retenidas en la matriz del filtro debido a efectos
electrostáticos.
 Filtros de huella de nucleación (Nucleoporo): Son películas muy delgadas de
policarbonato que son perforadas por un tratamiento conjunto con radiación y
sustancias químicas. Son filtros con orificios muy regulares que atraviesan la
membrana verticalmente. Funcionan como tamices, evitando el paso de toda
partícula con un tamaño mayor al del poro.

4. QUÉ ES EL AGAR Y DE DONDE SE OBTIENE?

R/ El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación
de medios de cultivo. Es un polisacárido compuesto por galactosa, un
azúcar simple, adquiere su consistencia gelatinosa, disuelto en agua a alta
temperatura. Se extrae de algas rojas de diferentes especies como
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5. ¿POR QUÉ EL AGAR NUTRITIVO ES UN MEDIO GENERAL PARA EL

CULTIVO DE BACTERIAS?
R/ El Agar nutritivo es un medio de cultivo usado normalmente como rutina
para todo tipo de bacteria. Es muy útil porque permanece solido incluso a
relativas altas temperaturas. Además, el crecimiento bacteriano en este
agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias
pequeñas.

6. ¿CUÁLES SON LAS VENTAJAS DE UN CULTIVO PURO?

R/ Un cultivo puro es aquel que se desarrolla a partir de una célula pura y
por lo tanto está formado por un solo tipo de microorganismo, entre las
ventajas están: que son esenciales para poder estudiar las características
de los organismos, importantes para poder identificarlos con seguridad y se
han diseñado para observar la pureza de los cultivos y evitar su
contaminación con otros microorganismos.

7. ¿POR QUÉ RAZÓN NO DEBES COMPARTIR EL MECHERO DE BUNSEN?

R/ En las prácticas de microbiología no se debe compartir el mechero, ya
que es un mechero de gas al compartirlo se necesitaría tenerlo apartado del
lugar donde se está trabajando y este es muy necesario para tener asepsia
y esterilizado el lugar y los materiales.

8. ¿CUÁL ES LA RAZÓN PARA FLAMEAR LOS TUBOS ANTES Y DESPUÉS DE

CADA TRANSFERENCIA?
R/ Para eliminar las bacterias que hayan podido alojarse en el tubo, podrían
crecer bacterias que no se sembraron.

9. EXPLICA POR QUÉ DEBES EVITAR QUE EL ASA LLENA DE INÓCULO

TOQUE LA BOCA DEL TUBO FUENTE O DEL TUBO A SER INOCULADO.
R/ Podría contaminarlo con microorganismos, llegando a no dar los
resultados esperados y contaminando el material con que se trabaja.

10. CUANDO TOMAS UN INÓCULO DE UNA CAJA DE PETRI. ¿POR QUÉ ES

NECESARIO TOCAR UNA PARTE ESTÉRIL DEL AGAR CON EL ASA ANTES
DE TOCAR EL CRECIMIENTO BACTERIANO?
R/ Se debe tocar una parte estéril para enfriar el asa que previamente se
flameo, ya que se encuentra caliente y es necesario que se enfrié para que
en el momento de tomar el cultivo no se elimine los microorganismos que se
van a inocular.
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11. ¿POR QUÉ EL ASA DEBE SER FLAMEADA ANTES Y DESPUÉS DE TODOS
LOS PROCEDIMIENTOS DE SIEMBRA?
R/ Se debe flamear antes para evitar la contaminación de los
microorganismos que estuvieran presentes en el filamento metálico. Y
después para evitar que los microorganismos que hemos tomado no
contaminen el laboratorio o sean incluso un riesgo biosanitario.

12. ¿POR QUÉ LAS CAJAS DE AGAR DEBEN MANTENERSE INVERTIDAS

DURANTE LA INCUBACIÓN?
R/ Una vez que se ha colocado la suspensión de bacterias en la placa, se
debe dejar que se evapore una parte antes de comenzar la incubación
durante toda la noche. Sin embargo, quedará una cantidad moderada de
humedad. Si la placa no es invertida durante la incubación, la bacteria no
podrá colonizar el agar apropiadamente, lo que evitará que crezca y forme
colonias adecuadamente, o estimulará el crecimiento de otros
microorganismos. Cualquiera de estas dos consecuencias invalidarán el
experimento. Además, la condensación o humedad puede causar vetas, lo
que hará que elegir y analizar colonias separadas sea mucho más difícil. Una
vez que la bacteria ha formado colonias, la placa también debe ser
almacenada hacia abajo para mantener los niveles de humedad.

13. ¿POR QUÉ LOS COLORANTES BÁSICOS SON MÁS EFECTIVOS PARA LAS
TINCIONES BACTERIANAS QUE LOS TINTES ÁCIDOS?
R/ Los colorantes más utilizados son colorantes básicos, la parte que
proporciona el color está cargada positivamente. Se utilizan estos colorantes
porque las células bacterianas están débilmente cargadas en su superficie
con cargas negativas. Los más utilizados son el Cristal Violeta, el Azul de
Metileno y la Safranina.

14. ¿UNA TINCIÓN SIMPLE PUEDE SER USADA PARA IDENTIFICAR ALGO MÁS
QUE LAS CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS DE UN
MICROORGANISMO? EXPLIQUE
R/ En las tinciones simples se usa un único colorante de carácter básico.
Todas las células de la preparación quedan teñidas y se observan del mismo
color. Se realiza la fijación, por calor, de la muestra al portaobjetos. Se añade
el colorante y se deja actuar el tiempo necesario para que se absorba.
Posteriormente se retira el exceso de colorante y la preparación está lista
para ser observada.

15. SI SE TE OLVIDARA FIJAR LA MUESTRA DURANTE LA APLICACIÓN DEL

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PROCEDIMIENTO DE TINCIÓN SIMPLE, ¿QUÉ DIFERENCIAS CREES QUE

ENCONTRARIAS AL MIRAR TU MUESTRA EN COMPARACIÓN CON UNA
CORRECTAMENTE FIJADA?
R/ Se encontrarían muchas diferencias ya que al momento de no ser fijada la
muestra correctamente se tendría:
 una deformación de las células con el colorante.
 No sería posible posicionar las estructuras internas y externas de la célula
 No se mataría al microorganismo.
 No hubiera una preserva la morfología general pero no las estructuras internas.
 No se Protege la subestructura fina y la morfología de los microorganismos
delicados de mayor tamaño.
Por lo cual no se harían buenos trabajos con los organismos que queremos
trabajar

16. SI DURANTE UNA CHARLA DE AMIGOS UNO DE ELLOS DERRAMA CAFÉ

SOBRE TU CAMISETA Y LUEGO DE VARIAS LABADAS NO PUEDES
RECUPERAR SU COLOR ORIGINAL; ¿PODEMOS DECIR QUE EL CAFÉ ES
UN VERDADERO TINTE BIOLOGÍCO O ES SOLO UNA SUSTANCIA CAPAZ
DE IMPARTIR COLOR? EXPLICA TU RAZONAMIENTO.

17. ¿CUÁL ES LA VENTAJA DE LA TÉCNICA DE TINCIÓN DIFERENCIAL

FRENTA A LA DE TINCIÓN SIMPLE?
R/ La tinción diferencial es una gran herramienta para separar y clasificar los
microorganismos observados de acuerdo a sus características. Es mayor
mente utilizada para visualizar las estructuras como flagelos, cápsulas y
esporas. Para ser clasificado como tinción diferencial debe tener al menos
tres tintes. La tinción simple es utilizada para observar el tamaño, arreglo y
forma. Se utiliza un solo tinte. La tinción directa tiñe a la bacteria, la tinción
negativa tiñe el fondo pero no a la bacteria.

18. DIGA CUAL ES LA FUNCION DE CADA UNO DE LOS SIGUIENTES REACTIVOS

EN UNA TINCION DIFERENCIAL: TINTE PRIMARIO, CONTRATINTE, AGENTE
DECOLORANTE, MORDIENTE
R/ TINCIÓN PRIMARIA: es el colorante principal que se va usar para teñir en
un principio a las células. Se realiza con Cristal Violeta que tiñe a todas las
bacterias. Posteriormente se añade un mordiente (Lugol, que es un
compuesto de Yodo) que intensifica la tinción.
CONTRATINTE: es una tinción que consigue que las células o estructuras
sean más visibles, cuando no se consigue que sean totalmente visibles con
la tinción principal.
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AGENTE DECOLORANTE: es como su nombre lo indica, el agente que

ayuda a decolorar una parte de las células que se han teñido
MORDIENTE: como el Lugol, son sustancias que aumentan la afinidad de la
célula por el colorante. Suelen añadirse después del colorante en
determinadas tinciones diferenciales.

19. ¿POR QUÉ ES ESCENCIAL QUE EL COLORANTE PRIMARIO Y EL CONTRA

TENGAN COLORES CONTRASTANTES?
R/
20. ¿QUÉ FACTORES BIÓTICOS Y ABIÓTICOS CONTROLAN EL CRECIMIENTO
MICROBIANO?
R/ TEMPERATURA: Los microorganismos se pueden desarrollar dentro de
ciertos límites de temperatura. Las temperaturas por debajo del mínimo
hacen que el crecimiento se detenga pero no mata al microorganismo, sus
funciones vitales se paralizan casi completamente a temperaturas cercanas
al punto de congelación del agua. Si las temperaturas exceden a las
máximas, los microorganismos mueren por acción del calor. Se denomina
zona de peligro a la comprendida entre 5° C y 65° C, es la temperatura
adecuada para la proliferación microbiana, por ende es totalmente perjudicial
mantener alimentos dentro de estos valores.
EFECTO DEL PH: El pH es una medida de acidez o alcalina, su escala va de
0 a 14, correspondiéndole el número 7 a las soluciones neutras. La gran
mayoría de los microorganismos, no pueden soportar condiciones ácidas o
alcalinas extremadamente fuertes.
PRESION OSMOTICA: Los microorganismos pueden desarrollarse en
medios con adecuadas concentraciones de sales y/o azucares. La presión
osmótica es generada por dichas concentraciones.
OXIGENO: algunos microorganismos necesitan oxígeno para vivir y se
denominan aerobios, otros pueden vivir sin oxígeno y se denominan
anaerobios.
ACTIVIDAD DE AGUA: Es diferente a la humedad. Se considera actividad de
agua al agua libre para el desarrollo de los microorganismos. Se mide en
escala que va desde o a 1.
NUTRIENTES: los microorganismos como todos los seres vivos, necesitan
alimentarse, para lo cual requieren nutrientes como fuentes de energía y
como material para elaborar sus estructuras celulares.
AGENTES ANTIMICRIBIANOS: compuesto químico, natural, o sintético, que
mata o inhibe el crecimientos de los microorganismos. Como los bactericidas,
fungicidas, bacteriostáticos, antisépticos, desinfectantes.
21. ¿QUE OTROS TIPOS DE MÉTODOS DIRECTOS E INDIRECTOS HAY PARA
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VALORAR EL CRECIMIENTO BACTERIANO?

R/ LOS METODOS DIRECTOS: Se basan en la medida de la evolución del
número de células vivas (técnicas de plaqueo) o del número de partículas
8tecnicas microscópicas y de contadores de partículas).
METODOS INDIRECTOS. Se basan en la medida de algún parámetro del
cultivo que nos permita deducir información sobre la evolución del numero de
microorganismos.

22. ¿EN QUÉ FASE DE CRECIMIENTO SE ENCUENTRA EL CULTIVO EN EL

PUNTO (A)?
R/ Se encuentra en fase de latencia

23. ¿QUÉ EVENTOS METABÓLICOS ESTÁN OCURRIENDO EN LAS CÉLULAS EN

EL PUNTO (A)?
R/ En esta fase se producen las enzimas necesarias para que ellos puedan
crecer en un nuevo medio ambiente. En esta fase no hay incremento de
células, pero hay gran actividad metabólica, aumento en el tamaño individual
de las células, en el contenido proteico, ADN y peso seco de las células.

24. PROPONGA UNA HIPÓTESIS DEL PORQUE EL NÚMERO DE

MICROORGANISMOS NO AUMENTA EN EL PUNTO (C).
R/Las limitaciones de crecimiento ocurren ya sea por agotamiento de algún
nutriente esencial, por acumulación de productos tóxicos, porque se alcance
un número de células elevado para el espacio disponible o por combinación
de las causas anteriores.

25. ¿A QUÉ SE DEBE LA DISMINUCIÓN DEL NÚMERO DE MICROORGANISMO EN

EL PUNTO (D)? JUSTIFIQUE SU RESPUESTA
R/ Se debe a agotamiento de reservas de energía. Algunas veces las células
aparecen grandes, hinchadas, distorsionadas.

26. ¿QUÉ TIPO DE CULTIVO PERMITE QUE EL MICROORGANISMO PASE POR

LAS CUATRO FASES DE CRECIMIENTO? JUSTIFIQUE SU RESPUESTA.
R/

27. ¿CUÁL ES EL MECANISMO DE ACCIÓN DEL MEDICAMENTO PRESENTE EN

LOS SENSIDISCOS UTILIZADOS?
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