Ciclo celular y cáncer.

Las ideas recientes en los campos de la regulación del ciclo celular y el cáncer habrían
brindado ejemplos de investigación en las "Fronteras de la Ciencia". Sin embargo, parte de
la información más reveladora sobre ambos temas se deriva de la intersección de los dos
campos. La intención de este resumen es presentar los conceptos básicos del ciclo celular, el
cáncer y su superposición, y luego describir la investigación de dos laboratorios que se
presentó en la sesión. Un tratamiento más completo de estos temas, más allá de esta
descripción para una audiencia general, se encuentra en varias revisiones.
El proceso de replicación de ADN y la división de una célula se puede describir como una
serie de eventos coordinados que componen un “ciclo de división celular,” ilustra para las
células de mamífero. Se reconocen al menos dos tipos de mecanismos de control del ciclo
celular: una cascada de fosforilaciones de proteínas que transmiten una célula de una etapa a
la siguiente y un conjunto de puntos de control que monitorean la finalización de eventos
críticos y retrasan la progresión a la siguiente etapa si es necesario. El primer tipo de control
involucra una familia de quinasas altamente regulada. La activación de la quinasa
generalmente requiere la asociación con una segunda subunidad que se expresa de forma
transitoria en el período apropiado del ciclo celular; la subunidad de "ciclina" periódica se
asocia con su "quinasa dependiente de ciclina" (CDK) asociada para crear un complejo activo
con una especificidad de sustrato única. La fosforilación y la desfosforilación regulatorias
afinan la actividad de los complejos CDK-ciclina, asegurando transiciones bien delineadas
entre las etapas del ciclo celular. En el futuro, la definición molecular adicional del ciclo
celular puede conducir a una progresión más intrincado.
Una representación esquemática del ciclo celular de los mamíferos. En cada ciclo de división celular,
los cromosomas se replican una vez (síntesis de ADN o fase S) y se segregan para crear dos células
hijas genéticamente idénticas (mitosis o fase M). Estos eventos están espaciados por intervalos de
crecimiento y reorganización (fases hueco G 1 y G 2 ). Las células pueden detener el ciclo después de
la división, entrando en un estado de inactividad (G 0 ). El compromiso de atravesar un ciclo completo
se realiza a finales de G 1 . El progreso a lo largo del ciclo se logra en parte por la actividad regulada
de numerosos complejos CDK-ciclina, indicados aquí y descritos en el texto.
Un segundo tipo de regulación del ciclo celular, control de punto de control, es más
supervisor. No es una parte esencial de la maquinaria de progresión del ciclo. Los puntos de
control del ciclo celular detectan fallas en eventos críticos como la replicación del ADN y la
segregación de cromosomas. Cuando los puntos de control se activan, por ejemplo, mediante
un ADN mal replicado o insuficiente, las señales se transmiten a la maquinaria de la
progresión del ciclo celular. Estas señales causan un retraso en la progresión del ciclo, hasta
que se haya evitado el peligro de mutación. Debido a que la función de punto de control no
se requiere en cada ciclo de celda, la extensión de la función de punto de control no es tan
obvia como la de los componentes integrales del proceso, como los CDK.
Superficialmente, la conexión entre el ciclo celular y el cáncer es obvia: la maquinaria del
ciclo celular controla la proliferación celular y el cáncer es una enfermedad de proliferación
celular inapropiada. Fundamentalmente, todos los cánceres permiten la existencia de
demasiadas células. Sin embargo, este exceso de número de células está vinculado en un
círculo vicioso con una reducción de la sensibilidad a las señales que normalmente le dicen
a una célula que se adhiera, se diferencie o muera. Esta combinación de propiedades alteradas
aumenta la dificultad de descifrar qué cambios son los principales responsables de causar
cáncer.
Las primeras alteraciones genéticas que contribuyeron al desarrollo del cáncer fueron las
mutaciones de ganancia de función. Estas mutaciones definen un conjunto de "oncogenes"
que son versiones mutantes de los "protooncogenes" celulares normales. Los productos de
los protooncogenes funcionan en las vías de transducción de señales que promueven la
proliferación celular. Sin embargo, la transformación por oncogenes individuales puede ser
redundante (la mutación de uno de varios genes conducirá a la transformación) o puede ser
específica del tipo de célula (las mutaciones transformarán algunas células, pero no tendrán
efecto en otras). Esto sugiere que múltiples vías distintas de alteración genética conducen al
cáncer, pero que no todas las vías tienen el mismo papel en cada tipo de célula.
Más recientemente, la importancia de las mutaciones de pérdida de función en la
carcinogénesis se ha hecho cada vez más evidente. Inicialmente, se reconoció que las
mutaciones en estos genes llamados supresores de tumores tienen un papel importante en la
susceptibilidad hereditaria del cáncer. Debido a que se requiere la inactivación de ambas
copias de un gen supresor de tumores para la pérdida de la función, los individuos
heterocigotos para las mutaciones en el lugar son fenotípicamente normales. Por lo tanto, a
diferencia de las mutaciones de ganancia de función, las mutaciones supresoras de tumores
con pérdida de función pueden transportarse en el conjunto de genes sin consecuencias
perjudiciales directas. Sin embargo, los individuos heterocigotos para las mutaciones
supresoras de tumores tienen más probabilidades de desarrollar cáncer, porque solo se
requiere un evento mutacional para prevenir la síntesis de cualquier producto génico
funcional.
Ahora parece que es muy probable que las mutaciones en los genes supresores de tumores
promuevan, e incluso pueden ser necesarias, para un gran número de formas de cáncer
espontáneas y hereditarias. Pero, ¿cuáles son las funciones de los productos genéticos
supresores de tumores en una célula normal? Aunque este es un tema para futuras
investigaciones, existe evidencia sugestiva de que varios genes supresores de tumores
codifican proteínas que regulan negativamente la progresión del ciclo celular. Pérdida de la
función del producto del gen supresor de tumor de pRb, por ejemplo, se predijo para liberar
a activadores de la transcripción E2F sin requerir la fosforilación y por lo tanto anular una
regulación negativa normal de control de entrada en el ciclo. Pérdida del supresor de tumor
p16 producto del gen tendría una consecuencia similares, liberando E2Fs mediante el
aumento de la fosforilación de pRb. Además, la progresión del ciclo celular puede ser
detenida en varios puntos por el producto genético supresor de tumores p53, activada en
respuesta a los puntos de control que detectan el ADN y posiblemente también al daño
cromosómico; la pérdida de p53 eliminaría este freno al ciclo.
¿Por qué vía molecular la pérdida de regulación del ciclo celular en un organismo conduce
al cáncer? ¿Qué cambios genéticos pueden cooperar para lograr que las células cancerosas
escapen del equilibrio normal del crecimiento celular? Tyler Jacks describió los resultados
de su laboratorio que abordó estas preguntas, utilizando ratones y líneas celulares derivadas
de ratones que han sido diseñados para carecer de productos génicos supresores de tumores
individuales. Para crear ratones "knock-out", las células madre embrionarias que luego
pueden introducirse nuevamente en un animal en desarrollo están sujetas a mutagénesis
dirigida del gen de interés. Las células con una copia del gen mutante se inyectan en
embriones tempranos, y los ratones que usan las células inyectadas para formar tejido de la
línea germinal se seleccionan para la reproducción. Algunas progenies serán enteramente
heterocigotas para el gen mutante;
Una idea importante de los estudios de ratones que carecen de genes supresores de tumores
es la dependencia de números celulares equilibrados no solo en la regulación de la
proliferación celular sino también en la regulación de la muerte celular. En el pasado, la
muerte celular se consideraba como un fallo accidental de la función celular normal. Sin
embargo, a menudo ocurre lo contrario: los estudios genéticos de la muerte celular indican
un requisito para las señales de muerte activa y la ejecución dirigida (para la revisión de las
proteínas involucradas en la muerte celula. Una colección de experimentos ilustra la
importancia de combinar alteraciones genéticas que desregulan la proliferación celular y la
muerte celular. La inactivación de pRb durante la embriogénesis promueve una actividad
inapropiada del ciclo celular. Esto se sigue de la función de la pRb en la regulación negativa
entrada en el ciclo celular. Sin embargo, en contraste con las expectativas, el aumento de la
actividad del ciclo celular en ratones Rb nulos no produce un aumento neto en el número de
células. Esto se debe a un aumento proporcional en la muerte celular que elimina
específicamente las células anormalmente cíclicas. Esta muerte celular a menudo depende de
la función de p53, como se demuestra en el análisis de embriones de doble mutante RB / p53.
La función de p53 en condenar a las células que crecen de forma inadecuada a la muerte tiene
implicaciones para el desarrollo del cáncer y la quimioterapia. Los tumores murinos con p53
funcional responden a la quimioterapia promoviendo su propia desaparición, pero los que
carecen de p53 por lo general no. Un equilibrio entre la proliferación celular y la muerte
probablemente funcione durante el desarrollo para crear un mapa corporal con un patrón
fino. Esta función normal de la vía de la muerte celular y la posibilidad de inclinar demasiado
el equilibrio hacia la muerte en algunas enfermedades degenerativas serán temas de
investigación futuros y emocionantes.
Claramente, los productos de los genes reguladores del ciclo celular son determinantes
críticos de la progresión del cáncer. Pero, precisamente, ¿cómo afectan las alteraciones de la
secuencia de genes y los componentes reguladores faltantes al funcionamiento de la
maquinaria del ciclo celular? Tener a mano detalles moleculares de las estructuras de las
proteínas abordaría esta pregunta y también sugeriría estrategias para la terapia del
cáncer. Nikola Pavletich describió la investigación en su laboratorio que ha producido
estructuras de alta resolución de p53 y de estados inactivos y activos de CDK2. Estas
estructuras se determinaron a partir de los patrones de difracción de rayos X de proteínas
purificadas y cristalizadas.
Aunque p53 puede cumplir muchas funciones en la célula, su función mejor caracterizada es
como un activador transcripcional. Los residuos de p53 que se mutan con frecuencia en las
células cancerosas son críticos para la unión al ADN. Una estructura de co-cristal de p53-
ADN reveló que estos residuos frecuentemente mutados se pliegan en una región de la
superficie de la proteína. Por lo tanto, las mutaciones que promueven el cáncer que ocurren
a lo largo de la secuencia primaria de la proteína se agrupan en un dominio funcional.
Estudios recientes se han centrado en las bases estructurales para la regulación de los CDK,
utilizando CDK2 como un sistema modelo (para la revisión de los mecanismos reguladores
de CDK. En células de mamíferos, las funciones de CDK2 en la fase S con la ciclina A como
socio. La asociación de ciclina A modifica la estructura de CDK2 determinada previamente
al reorientar un ácido glutámico catalíticamente crítico en la hendidura catalítica y alejar el
lazo regulador que puede bloquear el acceso de una proteína al sustrato para unir el ATP. La
unión de ciclina A estimula la actividad de CDK2, pero se requiere la fosforilación de la
treonina-160 para la activación completa. La estructura cristalina de la CDK2 fosforilada en
treonina complejada con ciclina A revela un cambio conformacional en el sitio de unión al
sustrato y también un fortalecimiento de la interacción CDK2-ciclina A.
Finalmente, se examinó un mecanismo para la inactivación del complejo CDK2-ciclina A:
la unión del inhibidor p27. Los co-cristales de CDK2-ciclina A con el dominio inhibitorio N-
terminal de p27 revelan que la p27 unida bloquea físicamente el sitio activo, insertándose en
la hendidura catalítica. Además, la asociación p27 modifica la estructura del "techo" del sitio
de unión a ATP y bloquea una posible región de acoplamiento del sustrato proteico en la
ciclina A. Con estas modificaciones estructurales en mente, puede ser posible diseñar
moléculas pequeñas que tengan la misma Efecto: bloqueo de la actividad CDK, lo que detiene
el ciclo celular del cáncer en sus pistas.
CDK= kinasa, dependiente de ciclina.

REFERENCIAS
1. Hunter T, Pines J. Cell. 1994; 79 : 573–582. [ PubMed ]
2. Morgan D O. Nature (Londres) 1995; 374 : 131-134. [ PubMed ]
3. Nasmyth K. Science. 1996; 274 : 1643-1645. [ PubMed ]
4. Elledge S J. Science. 1996; 274 : 1664-1672. [ PubMed ]
5. Sherr C J. Science. 1996; 274 : 1672-1677. [ PubMed ]
6. Aaronson S A. Ciencia. 1991; 254 : 1146-1153. [ PubMed ]
7. Weinberg R A. Ciencia. 1991; 254 : 1138-1146. [ PubMed ]
8. Jacks T, Weinberg R A. Nature (Londres) 1996; 381 : 643–644. [ PubMed ]
9. White E. Genes Dev. 1996; 10 : 1–15. [ PubMed ]
10. Morgenbesser SD, Williams BO, Jacks T, DePinho R A. Nature (Londres) 1994; 371 :
72–74. [ PubMed ]