Neutralización (Tabla 9.

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El fundamento de esta técnica se basa en poner en evidencia la capacidad neutralizante de los
anticuerpos presentes en el suero del paciente sobre las cepas virales patrón (prototipo). Los
anticuerpos neutralizantes protectores están dirigidos contra antígenos de superficie de los
virus (glicoproteínas de envoltura, o antígenos de la cápside) y son protectores. Estos
anticuerpos son tipo específico viral (a diferencia de los detectados por FC), por lo que
permiten determinar el serotipo causante de la enfermedad. Los anticuerpos neutralizantes
persisten muchos años en circulación y, frecuentemente son detectables de por vida.

Los inconvenientes de esta técnica son: su complejidad, el requerimiento de virus que puedan
propagarse en cultivos celulares o animales; paneles de antisuero específicos y condiciones de
bioseguridad. Sin embargo, esta técnica es de gran valor en estudios epidemiológicos, y
resulta indispensable para determinar la presencia de anticuerpos protectores inducidos
mediante vacunas.
Para detectar anticuerpos por neutralización se mezcla una cantidad conocida (100 DICT 50) de
virus (cepa patrón) con diferentes diluciones del suero del paciente y, luego de 1 hora de
incubación a 37°C para facilitar la neutralización se inocula la mezcla en cultivos celulares o
animales de experimentación. Los cultivos se emplean para la mayoría de los virus, mientras
que inoculación en ratones se emplea para Coxsackie A, arbovirus y virus Juni ́n.

Los cultivos y animales infectados deberán conservarse varios días o semanas hasta la
aparición de la ACP en cultivos o de enfermedad y/o muerte en los ratones. El resultado se
registra y se evalúa por medios matemáticos, siendo el más usado el de Reed y Muech.

Hemadsorción (Had)
Algunos virus (influenza y parainfluenza) no siempre producen una clara ACP en los cultivos
infectados, pero debido a que tienen hemaglutininas en las espi ́culas de su envoltura, pueden
aglutinar eritrocitos de diversas especies in vitro. Las hemaglutininas virales también se
expresan en la membrana de las células infectadas, por lo cual si se añ ade una suspensión
de glóbulos rojos de cobayo a una monocapa infectada por un mixovirus o paramixovirus
(con exc. Del virus sincitial respiratorio) se Este fenómeno se denomina hemadsorción. Cuando
un cultivo exhibe hemadsorción positiva se deberá subcultivar en otros tubos con nuevas
células para confirmar el aislamiento y se identificará el virus aislado por IF u otras técnicas.

Interferencia
Algunos virus no producen una ACP clara pero puede detectarse su presencia por su capacidad
de inhibir la propagación de un segundo virus inoculado en el cultivo. Este procedimiento se
utilizó́ durante mucho tiempo para la detección de virus rubeola y se conoce como "método de
interferencia".
Para realizarlo, se inocula el virus rubéola en cultivos de riñ ón de primate y luego de 10 días se
inocula un segundo virus (ECHO 11) en los mismos tubos y en tubos controles. Luego de 48
horas en los cultivos infectados con rubéola, debido al fenómeno de interferencia, no habrá
desarrollo de ACP por el virus ECHO, mientras que en los tubos controles se observará la ACO
típica de éste.