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I UNIDAD

MICROBIOLOGÍA:

Definiciones:

 Estudio de los microorganismos: entre los aspectos que se estudian en estos,


se encuentra la forma, estructura, reproducción, tamaño, fisiología,
metabolismo, genética.
 Es la ciencia que estudia los organismos unicelulares (esta definición ya esta
desfasada, pues existen organismo que constituyen el campo de estudio de la
Microbiología, pero que no son unicelulares). Esta definición nos lleva a la
definición de la célula, la cual se concibe de la siguiente manera:

Célula: unidad básica de un ser vivo que esta compuesta por una sustancia conocida
como protoplasma y el cual a su vez esta formada por proteínas, ácidos nucleicos y
lípidos.

Características Sistema Biológico

1. Capacidad de reproducción
2. Capacidad para digerir sustancias y formar energía y de esta manera lograr el
desarrollo.
3. Capacidad para excretar sustancias de desechos (aca poner el ejemplo de los efectos negativos
y positivos de estas sustancias, tal como las toxinas y antibióticos)
4. Capacidad para reaccionar a cambios del medio lo que se conoce como
irritabilidad
5. Capacidad de mutación

Ventajas de la Microbiología versus Biología


1. Con respecto a los microorganismos, estos tienen comportamiento para
realizar investigaciones en lo que respecta a la fisiología, genética y reacciones
bioquímicas.
2. Los microorganismos pueden cultivarse
3. Los microorganismos pueden desarrollarse a velocidades extraordinarias, es
decir en una proporción geométrica y mas que aritmética.
4. Los microorganismos no utilizan iguales fuentes de energía que los
organismos superiores tales como: fotosíntesis, quimiotropismo, etc.

Reinos de Clasificación Microbiana

1. Reino Protista de Haeckel


Fue un zoólogo alemán que en 1886 Surgió la presencia de un 3º reino conocido
como reino protista (además del reino animal y vegetal), el cual se conforma por
organismo unicelulares que contenían características tanto del reino animal como
vegetal. En este reino se incorporaba, bacterias, protozoos, algas y hongos.
2. Reino eucariota y Procariota
Investigar libro microb. Pág. 6 y 7 de Pelczar/Reíd/Chad
3. Cinco reinos de Whittaker
Esta clasificación se basa en las 3 formas de nutrición celular, tales como
Fotosíntesis, Ingestión y Absorción.

Los cincos reinos de Whittaker

1. Reino animal
2. Reino vegetal
3. Reino Monera (bacterias, algas azul-verdosas)
4. Reino Protista (formado por microalgas y protozoos)
5. Reino Fungí (formado por hongos y levaduras)

Reino Protista

1. Algas: Las algas contiene clorofila y son capaces de llevar a cabo la


fotosíntesis, se pueden encontrar en ambiente húmedos y acuáticos ejemplo:
Gonyalux catenella.

2. Bacterias: organismos procariotas unicelulares que por lo común se


reproducen por FISION BINARIA. (aca poner el esquema de una fision binaria como forma de
reproducción)

3. Hongos: organismo desprovisto de clorofila y por lo regular son multicelulares,


no poseen ramas ni tallo, ejemplos: Penicillium.

4. Protozoos: Son organismo protista, eucariota monocelulares que se diferencia


en base a características morfológicas, nutritivas y fisiológicas.
Distribución de los microorganismos en la naturaleza

Los microorganismo se localizan ampliamente desde la corteza terrestre en la naturaleza


y depende de 3 aspectos importantes tales como: Nutrientes, Temperatura Adecuada,
Humedad (este factor es importante en la proliferación microbiana, es la humedad intracelular y no la extracelular (ej. Jugo de
Tomate versus el Tomate- el procesamiento de los productos alimenticios, llevan consigo la perdida de la humedad del alimento)
y temperatura adecuada). Ejem;

Determinante Leche Maíz


Nutrientes Rico en Prot. / m.o afín con las proteínas Rico en CHO / m.o afín con los CHO
presentes presentes
*Húmedad Humedad elevada / m.o afín con la Humedad baja / m.o afín con la humedad
humedad elevada baja.
Temperatura adecuada Termofila / Mesofila / Psicrofila. Termofila / Mesofila / Psicrofila.

Ramas de la Microbiología

1. Bacteriología: Rama de la microbiología que estudia las bacterias


2. Parasitologia: Se subdivide de la siguiente manera :
a) Protozoologia La cual estudia los Protozoos
b) Helmintología La cual estudia los Helmintos (gusano)
3. Micologia : Rama que estudia los hongos y levaduras
4. Virologia : Rama que estudia los virus
5. Ficología : Rama que estudia las algas

Campos de aplicación de la microbiología:

1. MICROBIOLOGÍA MEDICA: Ayuda a estudiar microorganismos causante de


enfermedades en el hombre y es de mucha importancia para determinar el control
y prevención de enfermedades.
2. MICROBIOLOGÍA DE AGUAS Y DRENAJES : Trata de estudio de microbiología
de las aguas no domesticas la cual puede ser tanto de origen superficial como
subterranea
3. MICROBIOLOGÍA DEL AIRE : Estudia la distribución de los microorganismo en el
aire el cual es influido por 2 aspectos
a) Condiciones Meteorológicas
b) Tipos de Terreno.
La supervivencia de los organismos en el aire esta determinado por la presencia de
ondas de luz u .v. y otros agentes microbicidas en la luz

4. MICROBIOLOGÍA DE LA LECHE: Es uno de los productos mas altamente


contaminable y esto es debido en parte al alto contenido de proteínas. El proceso
de pasteurización elimina las bacterias patógenas, bacterias que producen
enfermedades. No todas las bacterias son nocivas para el hombre, algunas
inclusive permiten crear subproductos ejemplo: mantequilla, queso, etc. Algunos
m.o participan indirectamente en la formación de la leche, ya que estos pueden
descomponer la celulosa del forraje y formar proteínas y minerales que
conformaran la leche.
5. MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS: Este campo de aplicación trata de estudiar
las enfermedades transmitidas por los alimentos (ETA.), las cuales poseen 2
mecanismos de producción:
a) Infección = directo (proliferación microbiana).
b) Intoxicación = indirecto (metabolismo microbiano).

Entre las bacterias importantes en la producción de toxina se encuentra los sig


organismos: Staphylococcus aureus. (explicar el significado de la especie aureus = oro) y Clostridium
botulinum (explicar el significado de la especie botulus = salchicha)

Las enfermedades transmitidas por los alimentos se pueden reducir mediante


implantación de las estrategias siguientes:
a) Inspección sanitaria de los alimentos.
b) Imposición de reglamentos sanitarios.
c) Implantación de métodos conservación de los alimentos.

MICROBIOLOGÍA. DEL SUELO: Algunos microorganismos aumentan la fertilidad del


suelo a través de la fijación de nitrógeno atmosférico al mismo.

MICROBIOLOGÍA. INDUSTRIAL: Algunos atributos de los microorganismos se utilizan


para la elaboración de algunas sustancias eje: bebidas alcohólicas, enzimas, ácidos
orgánicos:
a) Bebidas alcohólicas: cerveza, levaduras llamada Saccharomyces cerevise
b) Ácidos orgánicos: acido acético, Acetobacter acetti
c) Producto farmacéutico, Penicillium crisogenum, penicilina
d) Enzimas.

MICROBIOLOGÍA INSECTOS: Se refiere a los estudios de los microorganismos que son


Vehiculados por medio de insectos.

Enfermedad Insecto vehiculador m.o. causante

Chagas Tríatoma dimidiada Tripanosoma cruzi


Rhodnius prolixus

Dengue Aedes aegypti Flavivirus

Anopheles albimanus Plasmodium vivax


Malaria Anopheles albopictus Plasmodium falciparum

LA MICROBIOLOGÍA DE LAS TRANSFORMACIONES GEOQUÍMICAS

Se ha observado que algunas bacterias oxidan la materia orgánica transformando a


productos similares al petróleo.

Algunas bacterias encontradas en el sedimento marino contienen hidrocarburos cuya


composición es similar a la del metano.
Se ha estudiado que el petróleo contenido en las capas terrestres pueden pasar de una
capa a otra, por medio de las siguientes acciones microbiológicas:
a) Los ácidos y gases formados por las bacterias disuelven los materiales
calcáreos de cimentación y descomponen materiales sulfatados proveyendo
porosidad a las rocas que contienen el petróleo
b) Las bacterias producen CO2, e hidrogeno molecular el cual reduce la
viscosidad y aumenta la presión de gas permitiendo su migración a través
de las capas terrestres.
c) Las bacterias producen sustancias detergentes que permiten que el
petróleo se desprenda de las capas terrestres que lo contienen.

La Microbiología y el origen de la vida:

Los factores desencadenantes del origen de la vida según la teoría de la Microbiologia,


fueron: Aumento de Temperatura, Descargas eléctricas y Luz U.V. Estas incidieron
sobre las sustancias inorgánicas para convertirlas en sustancias orgánicas, estas a su
vez se sedimentaron en el mar y formaron los primeros ácidos nucleicos, estos se
unieron para formar los aminoácidos, estos a su vez los péptidos y luego los
polipéptidos para originar las proteínas.

Evolución de la Microbiología

EL MICROSCOPIO.

1. La microbiología se empezó a desarrollar cuando el hombre comenzó


a pulir los lentes de vidrio para poder ver los m.o
2. En el siglo XIII Roger Bacón postula la enfermedad ara causada por
organismos invisibles. Esto mismo determino Francastoro de Verona,
Von Plenciz (1762) pero ninguno dio prueba de que esto sucedió.
3. En 1458 monje Kircher hizo referencia a que gusanos invisibles a
simple vista podían descomponer los cuerpos humanos, carne, leche
y exudados diarreicos. Si bien su descripción no fue precisa fue el
primero en el significado del papel que juegan los m.o en la producción
de las enfermedades.
4. En 1665 Robert Hooke vio por primera vez las células en un pedazo
de corcho concluyendo que los animales y plantas se constituyen por
“Únicas partes elementales repetidas en frecuencias” acotación
que fue hecha por Aristóteles en el siglo IV antes de cristo.
5. El termino bacterias fue acuñado por el alemán Ehremberg (1828)
palabra que significa “bastoncito” (griego)
6. El termino “microbio” fue acuñado por el francés Charles Sedillot
7. El holandés Antonio Van Leeuwenhoeck fue el primer científico en
comunicar las observaciones y descripciones utilizando un microscopio
elaborado por el mismo que aumentaba el tamaño de los objetos en
aproximadamente 200 y 300 diámetros.
GENERACION ESPONTANEA VRS BIONESIS.

1. Se creía por parte de los griegos que la diosa GEA se encargaba de crear
animales y plantas a partir de objetos inanimados mientras que Aristóteles
teorizo que los organismos podrían crearse a partir del suelo
2. Se acepto que los gusanos invisibles podrían producirse espontáneamente
por la exposición de la carne al aire lo cual fue descartado por Francisco.
Redi al colocar carne cubierta con gasa
3. En (1749) John Needham explico con un experimento que al colocar carne
expuestos a las cenizas no se producían microorganismos en un primer
momento poco tiempo después Spallanzani hirvió la carne y al sellarla no
observo la formación de m.o.Con ambos experimentos Needham concluyo que
el aire era un factor importante en el crecimiento de los m.o.

4. Poco tiempo después Franz Schulze y Teodor Schwann explicaron que


además de la interacción anaeróbica existen otros factores que determinan la
aparición de los m.o, como el calor y acido.

5. En (1850) Schröeder y Van Dusch demostraron que al colocar pequeños


tapones de algodón en las entradas de aire se eliminaba el crecimiento
microbiano en el mismo.
6. En (1864) Pasteur demostró con experimento sencillo y logro descartar la
teoría de la generación espontánea propuesta por Pouchet.

Teoría del Germen de la Enfermedad

1. Francastoro de Verona: Sugirió que la enfermedad podía obtenerse a través


de organismos invisibles que se transmite de persona a personas
2. (1762): Von Plenciz no solamente afirmo que las enfermedades eran
causadas por m.o. sino que cada c/u de las enfermedades eran transmitidas
por un solo tipo de m.o.
3. Un ejemplo de lo explicado por Francastoro de Verona fue lo que el cirujano
Oliver Wendell Holmes demostró que la enfermedad producida como Fiebre
Puerpebral se producía de personas enfermas o sanas por medio de la
médicos o enfermeras que atendían los partos
4. A raíz de la hipótesis de Holmes el científico húngaro Ignaz Semmelvis
descubrió y aplico los antisépticos en las practicas obstétricas, pero fue hasta
en 1890 que este descubrimiento tuvo un impacto al ser aplicado en Inglaterra
5. Pasteur inicio su carrera, la universidad de Lille en Francia iniciando sus
investigaciones en el proceso de producción de vinos y cerveza. Observo que
manteniendo los jugos de fruta a 62 ºC por media hora se podría eliminar las
m.o. productores de alteraciones en los mismos se le conoció con el nombre
de pasteurización.
Es de notar este tratamiento no evitabas los olores y sabores desagradables
previamente producidos en este producto.
El segundo trabajo de importancia fue el descubrimiento del agente productor
de la enfermedad conocida como Pebrina, la cual es una enfermedad que
ataca los gusanos de seda y que, en esa época provoco grandes perdidas a la
industria textil en Francia. El 3º trabajo de Pasteur lo constituyo el
descubrimiento del agente productor de la enfermedad conocida como
Carbunco, la cual era una enfermedad que atacaba a especies bovinas,
ovinas y caprinas, esta enfermedad era transmitida por medio de la sangre
infectada.
6. Robert Koch fue un medico alemán que tenia una gran atracción por la MB a
Tal punto de colaborar posteriormente en el descubrimiento de carbunco.
A partir de ese trabajo Koch formulo 4 enunciados que explicaba la
transmisión de enfermedades de un animal enfermo a un sano y que ahora se
conoce como los 4 Postulados de Koch.

 Los organismos deberían estar presentes en cada caso de


enfermedad pero ausente de organismos sanos.
 Los organismos sospechosos deben ser aislados y deben de
crecer en cultivos puros en laboratorios.
 La misma enfermedad podría resultar cuando los organismos
aislados son inoculados en organismos sanos.
 El mismo organismo debería ser aislado nuevamente del animal
enfermo experimentalmente.

M.O.
M.O.

El Concepto de Cultivo Puro

En 1870 Joseph Lister obtuvo por primera vez lo que hoy se conoce como:
cultivo axénicos lo cual significa un crecimiento microbiano libre de otro m.o.
pero no necesariamente significa pureza genética.
Este experimento Lister lo hizo utilizando la bacteria de la leche conocida
como Bacterium lactis
Cultivo mixto Cultivo Axénico Cultivo Puro

Fenotipo distinto Fenotipo igual Fenotipo igual


Genotipo distinto Genotipo distinto Genotipo igual

MICROBIOLOGIA APLICADA

1. Edwin Klebbs y Frederick Loeffler


Descubrieron el bacilo que produce la enfermedad conocida como difteria lo
cultivaron e hicieron producir in Vitro los venenos (toxinas) de dichos m.o.
2. Von Behring y Shibasaburo Kitasato
Idearon el método para producir inmunidad para las infecciones causadas por
m.o. por medio de la síntesis de la sustancia conocida como antitoxina este
experimento se hizo utilizando la bacteria Clostridium tetani (aca colocar y explicar el
esquema de Behring y Kitasato)

Cl. tetani
Toxina Anticuerpo
Cl. tetani

3. En el año 1901 Salmm y Smith demostraron que la inmunidad a las


enfermedades también se podía adquirir por medio de la inoculación de
organismos muertos. ( aca colocar el esquema de Salmm y Smith)
Prod.
Antic
.

Muestra
Calor

1. Trabajando con Pasteur, el ruso Elie Metchnikoff descubrió que en el cuerpo


existe un tipo de célula que nos protege de organismos patógenos. Estas
células tienen la capacidad de ingerir los agentes patógenos, a las que se les
bautizo con el nombre de fagocitos. Con esto Metchnikoff se convierte en el
padre de la inmunidad celular.
4. El alemán científico Paúl Erlich explico que en el cuerpo existen sustancias
que nos defienden de las enfermedades lo que se conoce como
ANTICUERPO. Con este descubrimiento, Erlich se convierte en el padre de la
inmunidad humoral Además se le atribuye el descubrimiento del primer
agente quimioterapeutico, utilizado con el tratamiento de la Sífilis.
5. En el periodo 1880-1900 se le considera época de oro de la microbiología ya
que en esa época se dan los mejores descubrimientos de Koch y Pasteur.
6. Un discípulo de Pasteur fue el científico Widal el cual descubre la reacción
que diagnosticaba la tifoidea, lo mismo hizo Wasserman para el diagnostico de
la sífilis.
7. El campo de la Microbiologia de suelos se abre mediante las investigaciones
realizadas por el ruso Sergio Winogradsky el cual demostró la fijación de
Nitrógeno atmosférico por algunas bacterias. El irlandés Beijerinck (1901)
demostró que uno de los géneros microbiano que llevaba a cabo esta acción
pertenece al genero Azotobacter sp.
8. Otro estudio fue realizado por los científicos Hellriegel, Wilfarth que
demostraron la acción simbiótica entre algunas bacterias y plantas
leguminosas como el trébol y la alfalfa.
9. El danés Emil Christian hansen abrió el campo de la microbiología industrial
al descubrir la producción del vinagre por medio de bacterias y levaduras. Más
tarde el austriaco Adametz uso cultivos puros de bacterias para producir
queso, mientras que Conn y Weigman usaron bacterias para producir
mantequilla.

Principales Características de los M.O.

1. Características de cultivo: Estas se refiere a los requerimientos


nutricionales y condiciones del medio que favorecen el crecimiento microbiano.
Las condiciones necesarias para el crecimiento, es la temperatura, la presencia de gases
en el medio de cultivo, según el primero, los m.o. se clasifican en Psicrofilo, mesofilo y
termofilo, mientras que el segundo aspecto, clasifica los m.o, en:
a) Anaerobios estrictos: No Requieren O2 para vivir
b) Anaerobios facultativos: Puede o no requerir O2
c) Aerobios: Requieren O2
d) Microaerófilos: Requieren O2 (en menos cantidad)

2. Características Morfológicas:
Esta se refiere al tamaño, forma, agrupación y color de la célula. En cuanto a su forma los
organismos se clasifican: Coco, (forma esféricas), bacilos (forma alargada), espiroquetas
(espiral) y Vibriones, (espirales incompletas o comas).

3. Características Metabólicas:
Esta se refiere a la forma como los m.o, transforman los componentes químicos de un
determinado componente químico del medio de cultivo mediante una acción metabólica.

4. Características Composición Bioquímica


Se refiere a la composición de las principales características de los Componentes
químicos de la célula.

5. Características Antigénicas
Se refiere a las identificaciones de componentes celulares especiales que se dan prueba
de similitud entre las especies.

6. Características Genéticas:
Esta se refiere al análisis del ADN. Los principales estudios genéticos que se realizan
para caracterizar genéticamente los m.o, son: composición porcentual base del ADN,
mientras que el otro se relaciona e hibridación ADN.

Es el primer caso la composición porcentual base que se define como la cantidad de


moles en forma porcentual que existe de las bases pirimidinicas, citocina y guanina.

%(C+6)= moles de Citocina+moles de guanina X 100


Moles de C + moles de G + moles A + moles T

La CPB. De los m.o. varia desde un 23% hasta 75% si dos organismos tienen relación
base muy diferentes significara que no son muy afines.

El otro estudio genético se le conoce como: hibridación ADN., la cual es una


determinación del grado de precombinación entre el ADN aislados de diferente m.o. y
puestos en presencia uno del otro en condiciones experimentales. (Aca colocar el ejemplo grafico de la
hibridación de las dos cadenas sencillas de ADN al colocar una de ellas procedente de un organismo conocido, con un desconocido)

Taxonomía, Nomenclatura y Clasificación Microbiana


En el mundo biológico los nombres científicos responden a la sistemática la cual se
define como la ciencia que pretende crear un orden de la especie agrupada en otras
categorías de mayor envergadura.

Taxonomía
Se refiere al agrupamiento de los organismos en grupos conocidos como Taxa.
La taxonomía se divide en 3 partes interdependientes:
a) Clasificación: Es un agrupamiento ordenado de las unidades en grupos dentro de
unidades mayores.
b) Nomenclatura: Se refiere a la denominación de las unidades definidas.
c) Identificación: Se refiere a la diferenciación de los m.o. en base a la identificación
realizada comparando características conocidas con las desconocidas.

Nomenclatura
La denominación uniforme de los m.o. fue hecha a través de la formulación conjunta de
los zoólogos y biólogos en el año de 1890 fue durante el año siguiente se publico el
código internacional de nomenclatura zoológica y en 1906 el código internacional de
nomenclatura biológica. En 1947 se publico por vez primera el código internacional de
nomenclatura bacteriana la cual sigue siendo revisada continuamente.

Principios Nomenclatura

Los códigos de clasificación internacional se rigen por enunciado tales como.


1. Cada clase distinta de un organismo se designa como una especie.
2. Las especies se nombra por 2 vocablos latinos para ajustarse a un sistema
binomial de nomenclatura.
3. La aplicación de los nombres esta reglamentada.
4. Una ley de prioridades asegura el nombre legítimo más antiguo posible.
5. Se requiere la designación de categorías para clasificar los m.o.
6. }Se establecen criterios para la publicación efectiva de los nuevos nombres así
como la normativa para acuñar los nuevos.

Nombres Científicos de Bacterias

1.- Cada clase distinta de un organismo se define como una especie.

2.- Cada nombre científico esta formada por 2 vocablos latinos en donde el
primero corresponde al genero y comienza con mayúscula y el segundo la especie
y comienza con minúscula.
Bacillus subtilis
Genero especie

En donde el 1º. nombre es latín y comienza con mayúscula. El segundo nombre es un


epíteto del género comienza con minúscula y tiene el objeto de describir al género en la
forma siguiente:
a) Un adjetivo que modifica el nombre.
Staphy lococcus aureus Aspergillus niger
Viene de aureos dorada niger = negro negro
Latín “dorada”
b) Un adjetivo en forma de participio activo de un verbo ejemplo:
Clostridium disolvens (dissolver)
Bacillus coagulans (coagular)
c) Un nombre en posesivo que modifica el nombre ejemplo:
Salmonella pullorum (pollo)
d) Un nombre explicativo eje.
Actinomyces actinomycetencomitans (hongos)
Shizosaccharomyces
3.- Se puede añadir el nombre del autor de la bacteria eje.
Bacillus coagulans (Hammer)
4.- En ocasiones es conveniente separar o subdividir la especie en variedades eje.
Streptococcus lactis var maltigenes

Nombres de bacterias Común

Nombre Común Nombre Científico


Gonococo Neisserie gonorrhoeae
Bacilo Tífico Salmonella typhi
Bacilo Diftérico Corynebacterium diphteriae
Bacilo Tuberculoso Mycobacterium tuberculosis
Bacilo Sifilítico Treponema pallidium

Categorías Taxonómicas
Para agrupar los organismos relacionados en diferentes niveles de similitud se aplican
una serie de categorías taxonómicas o también conocidas como taxas, estas son la sig.
a) ESPECIE: Organismos de una misma clase.
b) GENERO: Grupo de especie relacionados.
c) TRIBU: Grupo de género relacionados.
d) FAMILIA: Grupo de tribus relacionados.
e) ORDEN: Grupo de familias relacionados.
f) CLASE: Grupo de órdenes relacionados.
g) PHYLUM: Grupo de clases relacionados.
h) REINO: Grupo de PHYLA relacionados.

Sistema de Clasificación
Uno de los primeros sistemas de clasificación se propuso en 1773 el sistema común y
ampliamente conocido para la clasificación de bacterias fue propuesta por el manual de
Bacteria Determinativa de BERGEY cuya 1º edición fue realizada en 1923.

Existen 2 formas generales para la clasificación microbiana, estos son:


1. Un sistema artificial o utilitario ideado para identificar organismos conocidos
como la (clave diagnostica) para un grupo especifico de organismos
2. Un sistema natural o filogenético a manera que el árbol genealógico intenta
ordenar los organismos de tal modo que denoten relaciones entre si. De este
modelo se depreden 2 sistemas específicos:
a) Clave de Skerman: Este capacita al usuario para determinar si cualquier
organismo aislado presenta alguna semejanza con otro organismo
descrito con el manual de Bergey.
b) Clasificación ADANSONIANA.
Esta presenta 5 aspectos siguientes:
 La taxonomía ideal y natural es aquella en que los taxas poseen el
máximo contenido de información y se basa en el mayor contenido de
rasgos en común
 Cada rasgo tiene igual valor en la construcción de los taxas superiores.
 El grado de similitud esta en función de los rasgos en común.
 Los taxas distintos se basan en rasgos correlacionados.
 La afinidad se trata como independiente de la filogenia, es decir como
una dimensión taxonómica independiente y por lo tanto fenética.

Observación microscópica de los Organismos

Los microscopio pertenece a dos tipos Ópticos y Electrónicos, los cuales se diferencian
por su poder de amplificación. Los microscopios ópticos basa su sistema de amplificación
en la interposición de lentes y son de los siguientes tipos:
1. Campos luminoso
2. Campos oscuro
3. Contraste de fases
4. Luz ultra violeta.
5. Fluorescencia
El microcopio electrónico basa su sistema de amplificación en el uso de un haz de
electrones en vez de ondas luminosas.

1. Microscopio de Campo Luminoso: En este tipo de microscopio el


campo luminoso se encuentra intensamente iluminado y los objetos aparecen
oscuros.
Los aumentos útiles de este microscopio varían desde 1000 a 2000 diámetros
y se pueden distinguir en el 2 aspectos importantes:
a) Poder de resolución: Esta propiedad se refiere a la capacidad a distinguir
2 objetos adyacentes como diferentes y separados. El poder de resolución
esta en función de la longitud de onda de la luz y la apertura numérica de
lente que usa
b) Apertura numérica (AN): Es la medida que resulta del producto del índice
de refracción (n = 1 cuando el factor es aire y 1.58 cuando el factor es
aceite de inmersion) que llena el espacio entre el cubre objetos y el objetivo
por el seno del ángulo de los rayos mas externos que capta el objetivo.
Las ondas de la luz visible utilizada por el microscopio óptico son limitadas,
ya que esta únicamente se encuentra en el rango de 400 a 700
manómetros (1 manómetro = 1*10 -9 m)

El poder de resolución del microscopio se ve limitado por 2 elementos:


a) Valores limitados por la apertura numérica
b) Longitud de onda de la luz visible
El tamaño más pequeño que un microscopio puede observarse esta determinado por la
fórmula siguiente:

Máximo Poder Resolución = (nm)


(M. P. R.) Apertura Numérica Condensador + Apertura Numérica Objetivo

= nanómetro (1*10 -9m) M.P.R. =M (1*10 -6m)

Aumentos superiores al poder de resolución podría no ser útiles ya que la imagen es


borrosa y menos definida.
2. Microscopio de Campo Oscuro
Consiste en observar los objetos más intensamente iluminado en fondo
oscuro, esto es debido a que la luz utilizada por este microscopio no entra por
el objeto y todo el campo se ve oscuro.
El microscopio de campo Oscuro es de gran valor en la observación de m.o.
sin colorear o suspendidos en líquidos.
3. Microscopio de Luz Ultra Violeta
Este microcopio presenta un mayor poder de resolución ya que utilizaba luz
u.v. cuya longitud de onda se encuentra en el rango de 180 – 400 nm.
La principal ventaja del microscopio de luz u.v. estima en devolver la
absorvancia específica de este tipo de luz por algunos organelos celulares
4. Microscopio por Contraste de Fases
Es la técnica de incalculable valor para el estudio de las células vivas y de
amplio uso en los estudios biológicos especulativos y aplicables.
El sistema óptico de este microscopio esta dotado de un sistema que permite
distinguir estructuras que defieren ligeramente en su índice de refracción.
En este microscopio la luz atraviesa un material y pasa a otra de una densidad
diferente, la luz sufre una ligera desviación, produciendo irregularidades
mínimas que determina la morfología celular del espécimen.
El dispositivo de este microscopio cambia estas irregularidades y la transforma
en intensidad en brillantez.
5. Microscopio de Transmisión Electrónica
Con este tipo de microscopio podemos observar hasta 100 veces más con
relación al microscopio óptico.
Su uso data desde 1960, y su mecanismo se basa en la utilización de ondas
de electrones y campos magnéticos. En el microscopio eléctrico el espécimen
se prepara como una pequeña película la cual es colocada entre el objetivo y
condensador magnético
a) Técnica del Sombreado
Consiste en colocar una capa de metal sumamente delgada en un
Angulo oblicuo sobre microorganismo con esto se logra una
representación topográfica de la superficie del m.o.
b) Cortes Ultra Finos.
Esta técnica se realiza mediante el uso del aparato conocido como
micrótomo, el cual corta el m.o. en rebanadas.
c) Tinción Negativa.
Este tipo de técnicas se utiliza una sustancia tensa en densa en
electrones tal como: ácidos fosfotungstico el cual no penetra la célula
si no que forma depósitos en las hendiduras del mismo.
d) Técnicas de Crió Fractura.
En esta técnica el has uso de la fijación m.o. mediante métodos físicos
tal como el frió.
e) Localización de Constituyentes Celulares.
Esta técnica determina el marcaje de los constituyentes mediante una
sustancia conocida como ferritina.
f) Localización de Enzimas en Cortes Finos.
La mayoría de estas técnicas se basan en la formación de sales de
plomo insoluble generalmente del tipo fosfato de plomo
g) Auto Radiografía.
Es un método cito químico en la cual se localiza los constituyentes
celulares mediante el uso de material radioactivo
6.- Microscopio Electrónica de Barrido.
Este no posee la resolución del microscopio de transmisión eléctrica
pero tiene la ventaja de poder presentar una notable imagen
tridimensional del objeto observado.

Preparación para el examen con el M.O. Óptico


Se basa de 2 usos:
1. Suspensión de los organismo en un liquido
2. Elaboración de películas o frotis fijados y colocados de la muestra

Técnicas Montaje Húmedo y Gota Pendiente

Esta hace referencia al uso de vida normal ambos tiene su utilidad en las siguientes
condiciones:

 Algunas bacterias en especial se deforman y alteran cuando se colorea o se


fijan
 Se requiere en algunos casos determinar si existen movilidad o no en la
bacterias en estudio
 Algunos procesos como división celular, cambios citoquimicos ocurren
cuando la célula esta viva
 Con este método se puede observar fácilmente algunas inclusiones
citoplásmica vacuolas y partículas grasas.

Frotis Fijos y Teñidos

Las ventajas son:


1. Las células son mas visibles claramente después de ser coloreada
2. En preparación coloreada la diferencia entre las células de especie distinta y
dentro misma especie se demuestra en soluciones coloreadas apropiada
Los pasos esenciales en la preparación de los frotis fijos y teñidos son:
 Realización de los frotis
 Fijación
 Aplicación de soluciones apropiados coloreadas

Coloración Microbiológica

De acuerdo a la estructura molecular de los colorantes estos se pueden clasificar


 Trifenilmetano
 Oxacina
 Tiacina

Con respecto ala cito química los colorantes se clasifican en:


 Aniónicos o Ácidos: Los cuales colorean elementos básicos
 Básicos o Cationicos: Los cuales colorean elementos ácidos
 Neutro o no Iónicos.
a) Coloración Simple: Es la aplicación de un solo colorante a las preparaciones
fijas de los m.o.
b) Coloración Diferencial: Esta coloración demuestra las diferencias es la
tinción de los diferentes organelos de las células
c) Coloración de Gram. Este tipo de coloración es compuesta por lo siguiente
colorantes:
 Cristal Violeta: Colorante principal 1 min.
 Lugol : Mordente 1min
 Alcohol – Acetona: Decolorados 4 seg.
 Zafra Nina: De contraste 10 seg.
Con la aplicación de la coloración de Gram, las bacteria, se clasifican en:

Gram.+: Violeta / Azul


Gram.-: Rosado/ Fucsia

Las bacterias Gram.+ contiene menos lípidos en su pared celular que las bacterias G-
además las paredes celulares de las bacterias G- mas delgadas que las bacterias G+.
Las bacterias G+ son mas susceptible a la penicilina y menos a la desintegración por
métodos mecánicos o enzimáticas.
Las bacterias G- son susceptible a la estreptomicina, es de hacer notar que las levaduras
se colorean como G+.
d) Coloración de Giemsa: Se utiliza la observación de las formas microbianas
conocidas como Rickettsias además se utilizan por la coloración de algunos
protozoos sanguíneo eje:
Plasmodium vivax (malaria)
Trypanosoma cruzi (chagas)
e) Coloración Negativa: Con este método la célula no sufre ninguna agresión
física o química , y posee la importancia en la observación de los organismos
capsulados como es el caso de lo siguiente:
 Cryptococus neoformans (levadura)
 Histoplasma capsulatum (protozoario)

Morfología y Estructura Fina de las Bacterias (Acá van los cálculos de


la relación superficie/ volumen)
Tamaño forma y Agrupación Microbiana.

Las bacterias varían desde muy pequeñas (.0.01 hasta 5 m) en su forma: coco, bacilo
espiroquetas y vibriones.
La consecuencia importante del ínfimo tamaño de los m.o. es su relación superficie -
volumen si se compara con un organismo de mayor tamaño. Esta relación explica 2
fenómenos importantes:
 Elevado metabolismo
 Elevado a nivel de producción

(En este punto se deben de explicar y poner los problemas que tienen que ver con la relación del radio y la superficie-
volumen)

Muchas bacterias son móviles y esta capacidad de movilización esta determinada por la
presencia de organelos conocidos como flagelos que viene del latín flagellum = látigo.
Además los microorganismos se pueden movilizar a través de otras de otras estructuras
como los cilios los cuales son más cortos y numerosos que los flagelos. Los flagelos
según su colocación en las células se clasifican en: flagelos polares y flagelos
peritricos.
Los flagelos no poseen forma recta si no helicoidales y esta compuesta por subunidades
de una proteína conocida como flagelina. El flagelo consta de 3 partes: filamento,
gancho y estructura basal.

La función principal no esta definido pero se cree que posee las siguientes funciones:

Adhesión a una superficie inerte para formar una película.


Apareamiento entre las especies.

Otra estructura externa de importancia de las bacterias lo constituye la capsula y que


anteriormente se le conocía como capa mucilaginosa y que en actualidad recibe el
nombre: glucocalix. Este organelo esta constituido por polisacáridos como: Dextran,
Dextrin, Levan y Celulosa.

El glucocalix posee las siguientes funciones:


 Fijación del m.o. patógenos al huésped.
 Dificultad en el reconocimiento y por ende la destrucción por células
fagocitos del sistema inmunológico.
 Proveer resistencia a la desecación bacteriana.

PARED CELULAR

Tiene el objeto de dar rigidez a la célula bacteriana, posee la capacidad de resistir


presiones hasta 65 lb. Por pulgada, constituyendo del 10% al 40% del peso seco de la
bacteria.

COMPONENTES Q.Q. Y ESTRUCTURA PARARED CELULAR

La sustancia polimérica que le brinda rigidez a la pared celular se le conoce como:


 PEPTIDOGLUCANOS.
Las bacterias Gram.-, el peptidoglucano, constituye una fracción mucho mas pequeña
de la pared celular en comparación con bacterias Gram.+. El acido teicoico en una sustancia
propia de la pared celular de las bacterias, Gram.+.
Es de hacer notar que las bacterias Gram.- posee un lipopolisacarido conocido como
ENDOTOXINA el cual es importante ya que determinan:

 Antigenicidad
 Susceptibilidad a la infección por fagos.
 Toxigenicidad.

Estructura Peptidoglucano:
Se compone de 3 bloques estructurales:
 Acetil glucosamina
 Acido Acetil Muramico
 Un péptido que consta de 4 o 5 aminoácidos de variedad limitada.

Estructuras internas a la pared celular.

Protoplastos y Esteroplastos

Los Protoplastos: Son cuerpos redondeados que toman una forma esférica desde el
momento que carecen de paredes celular externa. Los protoplastos poseen las sig,
características:
a) Son esféricas. b) Inmóviles c) No se dividen
d) No forman nuevas paredes. e) No son susceptibles
a la infección por fagos

Cuando el peptidoglucano se separa de las bacterias Gram.- otras capas de estructura


de estructura se adhieren a esos cuerpos redondeados y a estos se les llaman

ESFEROPLASTOS, a los que se les considera como protoplastos limpios.

Membranas Citoplásmica. Inmediatamente después dentro de la pared celular


existe una membrana fina a la cual se le conoce como: membrana citoplásmica,
protoplasmica o plasmática. Esta es una estructura de de gran importancia debido a
su característica de ser semipermeable lo que permite la entrada de nutrientes y la
salida de sustancias de desecho. Además contiene las enzimas que intervienen en el
transporte activo y fosforilaciones oxidativas.
Intrusiones membranosas. La estructura de los meso somas bacterianas es de
extrema importancia ya que se encuentra asociado con varios procesos vitales de la
célula, a tal punto que se le ha llegado a considerar una extensión de la membrana
citoplásmica.
Citoplasma. El material celular contenido dentro de la célula se divide en:

1) Área citoplásmica de aspecto granular rica en ARN


2) Área cromosómica o nuclear rica en ADN
3) Parte liquida que disuelve las sustancias nutritivas
Es de hacer notar que el ARN combinado con las proteínas se le conoce como
ribosomas.
Inclusiones citoplásmicas. Los granos de volutina, también se le conoce como
gránulos meta cromática y se encuentra en muchas bacterias, algas, hongos y
protozoos. Los principales constituyentes de estos gránulos son: meta fosfatos,
poli fosfatos, gránulos del acido B, hidroxibutirico, almidón y azúcar.
La presencia de gránulos en la célula esta determinado por

1. Edad de la célula.
2. Ambiente en general en que la célula se ha desarrollado.

Se ha considerado que estos gránulos se convierten en reservas alimenticias para


la célula.
Material nuclear. En la bacteria por no ser un lugar definido se le conoce como:
Cuerpo cromático, nucleoide, equivalente nuclear y cromosoma bacteriano.
No existen evidencias de que exista la membrana nuclear.
Endosporas. Estos organelos son cuerpos esféricos y ovales de pared gruesa y
que se encuentran con mayor frecuencia como los géneros Bacillus y Clostridium.
Están constituidos por ácidos por ácidos Dipicolinicos y que junto con el calcio
determina la alta resistencia térmica de la endospora. Por su colocación en la
célula, la endospora se dividen en: Terminales, Subterminales y Centrales

II UNIDAD CONTROL DE LOS MICROORGANISMOS

Importancia del control de los microorganismos.


Las razones de importancia del control de microorganismos son:
 Prevenir la transmisión de la infección y la enfermedad.
 Prevenir la contaminación de organismos perjudiciales.
 Prevenir la destrucción de los materiales por los microorganismos
Tipos de control microbiano

Los tipos de control pueden ser mediante fundamentos químicos y físicos:

ESTERILIZACION: Se refiere ala destrucción total de los microorganismos y se basa en 2


procedimientos:
Autoclave: cuyo mecanismo se basa en una temp. 121Cº 15min. 15 lb. .. a este se le
conoce como esterilización húmeda.
Horno: cuyo mecanismo se basa en una 160-180 Cº Por 2 horas. A este se le conoce
como esterilización por calor seca.
DESINFECTANTE: es un agente generalmente Químico, capaz de matar formas en
desarrollo, pero no generalmente las esporas resistentes de los microorganismos
patógenos.
ANTISEPTICO: Se refiere a toda sustancia que impide el desarrollo de microorganismos.
se aplica a sustancias que tienen contacto físico con seres animados
SANEAMIENTO: Consiste en reducir la población M.B. por medio de un agente que mata
el 99.9% de las bacterias en crecimiento, los objetos a los que se aplica el saneamiento
son inanimados.
GERMICIDAS: Es casi siempre igual a un desinfectante aunque la sustancia germicida es
para todo tipo de aplicaciones (animado e inanimado y para todo tipo de germen
BACTERICIDAS: Agente que mata bacterias, el mismo término se puede aplicar para la
destrucción de algas, larvicidas, fungicidas.
BACTERIOSTACIS: Se define como la perdida de capacidad de desarrollo de los
microorganismos, perdida capacidad de desarrollo.

Curva de Crecimiento Microbiano


Esta curva posee tres variables:
 Concentración de nutrientes
 Población Microbiana
 Tiempo

Se divide en 4 fases: Inicial, Estacionaria, Logarítmica y de Muerte.


Características de las fases
Fase Inicial: (adaptación microorganismo) características microorganismo vivos
Fase Logarítmica (Elevada actividad metabólica No de microorganismos vivos> no vivos).

Fase Estacionaria (Cantidad de organismos vivos es igual a la cantidad de organismos


muertos)
Fase de Muerte (microorganismos vivos menores que microorganismos muertos).

Curva de muerte MB
Esta curva posee tres variables las cuales son:

o Concentración del agente

o Tiempo

o Población microbianas
La curva de muerte Microbios no tiene fase ni etapas.

PASOS PARA DEFINIR UNA MUERTE MICROBIANA

 Conteo celular

 Prueba de la acción microbicida


La bacteria que se elige para trabajar en el cultiva en numero de frascos una vez que la
bacteria ha crecido, colocamos solución salina estéril. Colocamos cloro en un tiempo
determinado se incuba y el m.o. y contamos que promedio de bacterias tenemos.
Lo que se valora es el tiempo.

Condiciones que influyen en la condición microbicida

TEMPERATURA: El aumento de la temperatura con otro agente que puede ser químico
puede aumentar la destrucción de los m.o.
CLASE DE MICROORGANISMOS: Las especies de microorganismos defieren en su
sensibilidad a los agentes ya sean estos físicos o químicos.
ESTADO FISIOL1OGICO DE LOS MICROORGANISMOS: Las células jóvenes por tener
un elevado metabolismo son muy susceptibles a la acción antimicrobiana en comparación
con las células viejas ya que estas últimos poseen un metabolismo bajo.

AMBIENTE: Las propiedades físicas y químicas del medio o las sustancias que contiene
el medio en el que se desarrollan los microorganismos tienen una gran influencia en la
velocidad y eficacia de la destrucción microbiana por Ej.: el calor es más eficaz un
ambiente acido en comparación con un ambiente alcalino.

La presencia de materia orgánica extraña en un ambiente reduce notablemente la acción


de un agente de control.

La materia orgánica combinada con el agente de control puede llevar a los siguientes
resultados:

 Combinación de la materia orgánica con el agente de control para producir un


producto que no es microbicida.

Combinación con el agente de control para producir un precipitado

 Acumulación de la materia orgánica en las paredes celulares del Microorganismo


evitando de esta manera el contacto del agente y la célula.

El agente de control generalmente ha bajas concentraciones tiene un efecto


bacteriostático, mientras que a altas concentraciones tiene un efecto bactericida.
Es de hacer notar que existen agentes de control que activan de forma inversa.

Mecanismo de acción de los agentes microorganismo

Daño a la pared celular. Algunos daños de la pared celular son producidos por enzimas
conocidas como Lisosomas las cuales provocan ruptura de la pared celular creando lo
que se conoce como protoplastos los cuales son muy sensibles lisis uno se le provee las
condiciones ambientales necesarias.
los lisosomas se pueden encontrar en las lágrimas leucocitos y secreciones mucosas.
El efecto antimicrobiano de la penicilina se le atribuye a la inhibición de la síntesis de la
pared celular.
Alteración de la permeabilidad celular.
El daño a esta membrana resulta una inhibición del desarrollo o muerte celular.
La actividad anti microbiológica de los compuestos fenolicos, jabón, detergente, sintéticos
y compuestos cuaternarios de amonio llevan como efecto la alteración de la
permeabilidad celular y de esta manera se produce la salida de los constituyentes vitales
para la célula
Alteración de las moléculas de las proteínas y ácidos nucleicos
La viabilidad de una célula esta vinculada al mantenimiento de las proteínas y ácidos
nucleicos en un estado natural.
El aumento en la temperatura y la concentración de los agentes de control produce una
coagulación de forma irreversible en los compuestos vitales para la vida M B.
Inhibición de la acción enzimática.
La disminución de las reacciones que suministran energía son particularmente dañinas.
Muchos componentes utilizados como agentes de control poseen este mecanismo.
Entre estos sistemas afectados se encuentran el sistema de ácido tricarboxilico de
Krebs, el sistema glucolítico y el sistema citocromo oxidasa.
El cianuro es un agente que altera la vía enzimática del citocromo oxidasa.
El fluoruro inhibe el sistema glucolítico. Mientras que los compuestos arsenicales
trivalentes inhibe el sistema del ácido tricarboxilico del Krebs.
Es importante hacer mención que el dinitrofenol permite el desacople de las
fosforilaciones oxidativas.
Antimetabolitos: Un ejemplo clásico es el metabloqueo del acido fólico por medio de
sulfonamidas.
Muchos procesos vitales pueden ser inhibidos mediante sustancias conocidas como
Antimetabolitos.
Inhibición de la síntesis de ácidos nucleicos.
Existen 2 categorías en esta inhibición:
Compuestos que interfieren en la formación de bloques estructurales de ácidos nucleicos,
nucleótidos, purinas y piridinas .
Compuestos que intervienen en la polimerización de los nucleótidos en ácidos nucleicos.
Control de los microorganismos por agentes físicos.

Temperatura, agua y vida


Conforme a que la temperatura se aumenta también la enzimática celular, pero existe un
límite en el cual las enzimas y otros nutrientes sufren procesos irresistibles de
desnaturalización o muerte m b.
Es así como cada microorganismo posee lo que se conoce como: Temperatura cardinales,
las cuales se clasifican de la forma siguiente:
Temperatura máxima: Temperatura sobre la cual no existe multiplicación celular.
Temperatura óptima: Temperatura en la cual se detiene la actividad metabólica y por lo
tanto mayor multiplicación celular.
Temperatura mínima: Temperatura baja la cual no existe multiplicación celular.
De acuerdo a la temperatura óptima de crecimiento los microorganismos se clasifican en:
Termófilas: Si su temperatura optima se encuentra a temperaturas altas
Mesófilos: Si una temperatura optima de crecimiento se encuentra a temperatura
ambiente.
Psicrófilos: Si una temperatura optima de crecimiento se encuentra a baja temperatura.
En cuanto a la presencia de la necesidad del agua es necesario que esta se encuentre en
forma disponible para ejercer las reacciones metabólicas importantes para la vida
microbicida.
El agua en un ambiente microbicida puede ser reducida por dos aspectos:
Presencia de solutos afines al agua.
Presencia de artefactos que absorban agua.
La disponibilidad del agua en términos físicos se expresa como Actividad acuosa que se
conoce Activity water (Aw).
Es de hacer notar que existe un fenómeno importante que relaciona la actividad acuosa y
este se conoce con el nombre de Ósmosis, el cual a su vez se define como: el proceso
mediante el cual el soluto se difunde a través de una membrana semipermeable, este
fenómeno tiene su origen en las diferencias de los gradientes de la concentración de
solutos a ambos lados de la membrana celular.
El proceso de ósmosis conduce a una deshidratación celular y el efecto contrario conduce
a un transporte activo.

Susceptibilidad de los microorganismos a altas temperaturas:


La susceptibilidad a temperatura de los microorganismos combinadas a un alto grado de
humedad son los métodos más efectivos para destruir Microorganismos.
El calor húmedo mata los microorganismos debido a la coagulación en forma irreversible
de las proteínas indispensables para la vida microbicida este mecanismo es mas rápido y
efectivo que el calor el cual baza su mecanismo en la oxidación de las proteínas.

Punto térmico letal. Se define como la temperatura mas baja a la que una suspensión
bacteriana muere en 10 min.
Tiempo térmico letal: Se define al tiempo mas corto para matar una suspensión
bacteriana a una temperatura determinada y bajo condiciones especificas.

Reducción decimal de tiempo.


Se define a la unidad de destrucción de los microorganismos mediante el uso del calor

RDT = Población inicial-Población final


Tiempo final-Tiempo inicial

Población Inicial =1*1010 ufc /ml


Población secundaria =1*108 ufc /ml
Tf =5 min.
RDT = 1*1010 ufc/ml-1*108ufc/ml =1.98*109 ufc/ml
5-0 min

Aplicación de temperatura alta para destrucción de microorganismos.

Esterilización Fraccionaria
Algunos medios bacteriológicos y sustancias químicas no pueden calentarse por enzima
de 100cº por lo que se hace uso del procedimiento conocido como: Esterilización
Fraccionada o Tindalización el cual se basa en calentamientos sucesivos a temperatura
inferiores 100 Cº seguida de un proceso en incubación por el espacio de 3 días .
Agua Hirviente.
Este proceso físico únicamente asegura el proceso de desinfección pero no de
esterilización.
Pasterización
Este método únicamente elimina ciertos tipos de Microorganismos pero no todos.
La pasterización es un proceso que emplea calor ligero para reducir las poblaciones
microbianas de algunos productos como la leche, la característica de ser termo sensibles.
Originalmente este proceso se emplea para la eliminación de algunos organismos
productores de enfermedades como: la brucelosis, tifoidea, y tuberculosis además de
eliminar todo microorganismo la pasterización mejora las condiciones de almacenamiento
de la leche.
La pasteurización por destello es un proceso que emplea una temperatura de 71Cº por
espacio de 15 segundos para posteriormente iniciar proceso de enfriamiento rápido.
La pasterización tiene algunas ventajas:
Una menor modificación del sabor
Puede llevarse a cabo en un proceso de flujo continuo

CALOR SECO

Este tipo de proceso se recomienda cuando no se desea o no se requiere que el vapor a


presión tenga contacto completo y indirecto con el material que desea esterilizar, ejemplo:
artículos de vidrio , cajas de petri, pipetas, aceites, polvos y similares.
El aparato a utilizar para este proceso es el horno eléctrico de gas el cual llega a alcanzar
una temperatura de 160-180cº por espacio de 2 horas
Incineración:
Este proceso mata todos los microorganismos y se utiliza para destruir esqueletos
materiales de laboratorio infectados y otros materiales de desecho.

Otros procesos de esterilización física


Esterilización por Filtro: Este proceso se utiliza cuando los líquidos a esterilizar son
sensibles al calor. esta técnica se basa en dejar pasar el líquido a esterilizar por una
superficie porosa en el cual quedaran retenidos los microorganismos presentes en la
sustancia.
Existen Tres tipos de filtros
 Filtro de Profundidad: Este se define como una placa fibrosa de papel, asbesto o
fibra de vidrio, la cual se constituye en una disposición fortuita de fibras
sobrepuestas.
 Filtro de Membrana Convencional:
Este es un disco constituido por acetato de celulosa fabricado de tal forma que contenga
pequeños agujeros.
 Filtro de Huella de Nucleación: Este filtro funciona como un verdadero tamiz
pues debido a que el diámetro de los agujeros es menor el líquido a filtrar pasa
con mayor dificultad a través de este.

Desecación: Este proceso produce la detención de la actividad metabólica seguido de


la declinación de la población viable total.
La desecación depende de varios factores tales como :
Clase de microorganismo.
 Material en el que o con el que se desecan microorganismo.
 Terminación del proceso de desecación.
 Condiciones físicas alas cuales los microorganismos son expuestos tales como:
Temperatura
Luz
Humedad
Al parecer algunas especie de cocos como es el caso Meningococo y Gonococo son muy
sensibles a desecación, pero otros, Streptococcus y Mycobacterium tuberculosis son
altamente resistentes a este proceso.
El fenómeno de desecación tiene aplicación en la microbiología, en el proceso conocido
como: LIOFILIZACIÓN.

Bajas Temperaturas.

En conclusión las bajas temperaturas no sirven para desinfectar o esterilizar de este punto
de vista, podríamos aceptar que las bajas temperaturas tienen un efecto bacteriostático
mientras altas temperaturas tienen un efecto bactericida.
A pesar de la capacidad de unos microorganismos para sobrevivir a las temperaturas
bajas existe un límite dentro del cuál ellas mueren.
El agua pura se congela a 0cº mientras que el agua de mar se congela a -2.5Cº, a esta
temperatura todavía existen pequeñas bolsas microscópicas de agua que hacen posible
la vida microbicida, pero a -30Cº estas reservas de agua se congelan y por lo tanto la
posibilidad de vida desaparece.
El principal daño producido por la congelación celular posiblemente sea el daño físico
causado por pequeños cristales de hielo que rompe o lesiona la membrana celular, y por
lo tanto salida de los constituyentes celulares.

Congelación rápida Utilizamos nitrógeno líquido (explicar la formación de pequeños cristales de hielo y
su consecuencias)
Menor cantidad de H2O atrapado Provee menor cantidad de nutrientes
Se pierde más rápido los constituyentes nutritivos

Congelación lenta: se utiliza en el hogar(explicar la formación de grandes cristales de hielo y su


consecuencias)

Tendrá mayor concentración de poluto presentes en los cristales de hielo


Y posibilidad de vida menor cantidad de nutrientes en los alimentos.
Son ángulos más amplios.
Daño mucho menor.
Presión Osmótica.
Se define como el paso de sustancias de dentro hacia fuera solubles en agua a través de
una membrana semipermeable por medio de una diferencia en el gradiente de
concentración solubles a ambos lados de dicha membrana.
El proceso mediante el cual el soluto sale de la célula acompañado del agua, es decir (la
célula se deshidrata) se le llama plasmólisis, mientras que el proceso inverso se le llama
plasmóptisis.
Los organismos que pueden sobrevivir en altas concentraciones de soluto como es el
caso de la sal que se le conoce con el nombre de halofilicos mientras que a los que
resisten a altas concentraciones de azúcar se les llaman sacarofilicos.
Parece ser que la inhibición por el uso de sal puede andar en una concentración de 10 a
15%, mientras que la inhibición por azúcar la concentración.
Parece ser que la inhibición por el uso de sal puede andar en una concentración de 10 a
15%, mientras que la inhibición por azúcar la concentración puede ser 50 a 70%.

15% NaCl 50 a 70% azúcar

Compuesto inorgánico Compuesto Orgánico (no actúa como inhibidor)


Es un carbohidratos y la célula la toma como
No sirve como nutriente sustrato alimenticio.
Microbicida

Radiaciones
La energía se transmite a través del espacio de una gran variedad de formas llamadas
radiaciones, un ejemplo de esto son las radiaciones electromagnéticas que poseen dos
características.
a). Ondas continuas b) Partículas descontinúas

Estas radiaciones electromagnéticas poseen partículas descontinúas a las que se les


conoce como paquetes, quantas de energía y algunas veces se les conoce como fotones.
Los rayos Gamma y rayos” x” poseen una energía de 10 electrón-voltio y por esa razón se
les conoce como radiaciones ionizantes.
(Es decir que posee suficiente energía para empujar los electrones de la molécula y por lo
tanto ionizados).
Cuando estas radiaciones pasan a través de la célula microbiana se produce:
1-Hidrógeno libre.
2 Radicales Hidroxilo (OH-)
Algunos peróxidos que producen cierto daño intercelular.
La radiación menor energética es la luz U.V y se caracteriza por ser absorbida por
algunos constituyentes celulares.
Además de las radiaciones electromagnéticas los microorganismos pueden ser sometidos
a otros tipos de radiación tales como:
Radiaciones acústicas y partículas subatómicas que se desprenden de la radioactividad.
En microbiología la aplicación de las radiaciones tiene muchos usos y se le ha llegado a
considerar como un proceso de esterilización fría esto es debido al leve incremento de la
temperatura en el material que esteriliza.
Radiación U.V
Se incluyen en este grupo las radiaciones que se encuentran en el rango siendo mas letal
150 a 3900Aº sus usos radican a nivel de quirófanos y cuartos de llenado asépticos.
MECANISMOS DE ACCIÓN: las sustancias a las que más daña esta radiación son los
ácidos nucleicos específicamente a la formación de dimero de pirimidina.
FOTOREACTIVACION: este proceso se lleva a cabo por la exposición de la célula a la luz
visible, pero esta nos llega a recuperar la eficiencia total de la célula. este proceso
necesita una enzima luz dependiente.
REACTIVACION POR EXCISION: este proceso se lleva a cabo por 2 enzimas
especificas:
ADN-POLIMERASA: la cual sintetiza el fragmento faltante y la enzima ADN –LIGASA
que coloca el fragmento faltante en el lugar correspondiente.
Rayos “X” (Roentgen)
estos rayos son letales para todos los M.O y formas superiores de vida , poseen una
considerable capacidad de penetración pero presentan los sigs. Inconvenientes:
Cuesta mucho producirlos en cantidades suficientes.
Son difíciles de utilizar de forma eficiente ya que salen en diferentes direcciones.

Rayos Gamma:
Esta radiación tiene mucha energía y son emitidas por ciertas isótopos radiactivos como
el Cobalto 60 (Co.60)
Estos rayos tienen un comportamiento similar a los rayos x con la diferencia que poseen
una longitud de onda más corta. Presentan una ventaja ya que presentan una mayor
capacidad de presentación de los rayos “x” y es por esa razón que se utiliza en la
esterilización de materiales de considerable grosor pero posee las siguientes desventajas:

Existen problemas para el desarrollo de una fuente de radiación a gran escala.


El diseño de un equipo de protección para el operador.
RAYOS CATODICOS:

Otras fuerzas físicas para el control de la Microorganismo.

Electricidad
El paso de la corriente eléctrica por un cultivo MB mata un % de los mismos el mecanismo
de acción se basa en los siguientes: Existe un aumento en la temperatura generada por el
paso a través de la célula.
Se producen algunos cambios químicos que llevan a formar cloro y ozono en pequeñas
cantidades a nivel intracelular y que eje4rcen una acción bactericida; El uso de este
agente se ve limitado aunque su uso se ha hecho industrialmente en el tratamiento de la
leche, jugos de fruta y desinfección de aguas.
Tensión superficial
La entrecara entre un líquido y un gas se caracteriza por fuerzas de atracción
desequilibradas entre las moléculas de ambas superficies, a esto se le conoce como
tensión superficial: además esto se puede dar entre dos líquidos que no se mezclen
mientras que la tensión interfacial se da entre cara de un sólido y un líquido.
Existen agentes que eliminan estos fenómenos tales como el jabón, fenol, sales biliares.
La acción desinfectante de algunos agentes se incrementa cuando se utiliza los agentes
depresores mencionados.

Sólido Gas Líquido


----------------- ___________ _________

------------------ ____________ _________


Líquido Líquido Líquido
FILTRACIÓN : Los factores que determinan el paso de los microorganismos a través del
filtro son las siguientes :
Porosidad
La carga eléctrica de filtro.
La carga eléctrica del microorganismo.
Naturaleza de líquido que va a filtrar.
Control de los m.o. por agentes químicos.
Características de un desinfectante ideal
La actividad de un desinfectante deberá ser a menor concentración deberá eliminar una
gran cantidad de M.O. a esto se le conoce como amplio espectro elimina una gran gama
de M.O. presente en un ambiente.
SOLUBILIDAD: Se define a que el agente debe ser soluble en H2O
ESTABILIDAD: Se refiere a las características que define que los cambios químicos del
agente sean mínimos al entrar en contacto con una población de M.O.
No deberá ser toxico para el hombre o los animales, es decir letal únicamente par los
M.O. HOMOGENEIDAD: Debe ser homogéneo en su composición química, no debe
reaccionar con materia orgánica extraña, deberá ser toxico para los M.O. tanto en
temperatura ambiente como a temperatura corporal; es decir, no debe de incrementarse la
temperatura para aumentar la acción del agente.
CAPACIDAD DE PENETRACIÓN: Su acción germicida se limitara al sitio de aplicación:
No deberá de correr ni teñir el agente.
Propiedad desodorante es decir deberá tener un olor agradable o inodora.
Capacidad detergente: La acción detergente aumentara la acción desinfectante.
DISPONIBILIDAD: Deberá ser un precio razonable.

Selección de agentes químicos antimicrobianos.


Existen tres aspectos que determinan la selección de estos agentes:
Naturaleza del material que será tratado: Se define a que la sustancia química a utilizar
deberá ser compatible con el material el que entrara en contacto. Ej.: ácido con el metal.
Tipo de M.O.: Existen diferencias en las susceptibilidad de M.O algunos agentes
Pseudomonas.
Condiciones ambientales: Se requiere saber la influencia que ejerce ciertos factores
tales como: pH, Tº, presencia de concentración y presencia de materia orgánica extraña
sobre la partícula.

Principales grupos de agentes Antimicrobiano


Fenol y Compuestos Fenólicos (ácido fenico). Este tipo de agente trabaja
desnaturalizando las proteínas las células para posteriormente dañar la membrana celular
algunos de ellos Hexilresorcinol disminuye considerablemente la tensión superficial la
actividad de estos agentes se puede disminuir por los siguientes factores:

PH alto; presencia de materia orgánica temperatura baja y presencia de jabón


El ácido fenico puro es cristalino e incoloro en concentración del 2 al 5% se utiliza para
desinfecto de sustancias como orina, esputo, eses, materiales e instrumentos El Cresol es
mas potente que el ácido fenico mas bien trabaja con tres componentes que lo conforman
mas bien debería llamarse tricrisol este tiene químicos limitados solubles en agua H 2O
pero o es emulsificaciones y de jabón.

Alcohol.
El etanol es en concentraciones que van del 50-70% es efectivo contra las células
vegetativas pero no esporas, este agente no produce condiciones de esterilidad.
El metanol es menos bactericida que el etano que además es mas toxico que este en
conclusión se puede decir que el poder germicida de los alcoholes se determina
especialmente por el peso molecular.
El mecanismo de acción de los alcoholes se determina por los aspectos siguientes:
 Desnaturalización de las proteínas
 Disolución de lípidos
 Acción deshidratante

Halógenos.
a) Iodo
Es uno de los agentes mas antiguos y eficaces en el control Microbiano es un elemento
cristalino, azúl oscuro y con brillo metálico, es poco soluble en agua pero es muy soluble
en alcohol y soluciones acuosas de yoduro de Kº y sodio el agente germicida del yodo se
le conoce como Tintura de yodo
b) Cloro y compuesto de cloro: El gas comprimido se emplea de forma universal de
suministros de H2O potable. Entre estos compuestos están: Hipoclorito: El hipoclorito de
calcio Ca (OCl)2 y el hipoclorito de sodio Na (OCl) son compuestos ampliamente
utilizados en la industria y en el hogar.
El hipoclorito de calcio a concentración del 50-70% es utilizado por diferentes equipos de
lechería y utensilios en restaurantes.
El hipoclorito Na al 1% se utiliza para la higiene personal y como desinfectante casero
mientras que en concentraciones de 5-12% será como blanqueador.
Cloraminas:
Químicamente se caracteriza por uno o mas átomos de H+ de los grupos amino de estos
compuestos esta sustituido por cloro Ej. De estos compuestos:
Monocloramina
Cloramina T
Azocloramina

Estos compuestos presentan una mayor estabilidad que los hipocloritos.


La acción germicida de estos compuestos radica en su formación del ácido hipocloroso tal
como se determina a continuación.
Cl2 + H2O ____ HClO (ácido hipocloroso) + HCL
HCLO HCL +O (agente oxidante)

4) Metales Pesados y otros Compuestos.


Los más efectivos para el control de M.B. son Mercurio, Plata, Cobre.
Los metales pesados poseen como características en su mecanismo de acción lo que se
conoce como: OLIGODINAMICA, la cual significa que una pequeña porción de esta
sustancia eliminara una gran cantidad de organismos se cree que el mecanismo de
acción de estos compuestos se deba a la afinidad de algunos iones metálicos.
Los metales pesados actúan contra la M.O. al combinarse con las proteínas y
posteriormente desnaturalizadas un ejemplo de esto es el cloruro mercúrico el cual actúa
sobre las enzimas que poseen grupos sulfihídrilos.

5) Colorantes: Los más comunes son los derivados

Trifenil metano
Acridina
Dentro de estas primeras tenemos:
Trifenil Metano Acridina
Verde brillante de cresilo Proflavina
Verde de Malaquita Acriflavina
Cristal Violeta

6) Ácidos y Álcalis.
La acción desinfectante de los álcalis depende de la disociación de los iones hidroxilo
resultante.
Los álcalis son más efectivos contra bacterias Gram- y virus en comparación con
bacterias Gram + y protozoarios.
En gral. los ácidos son más efectivos que los álcalis.

7) Glutaraldehído H-C-CH2-CH2-CH2- C-H


Fórmula desarrollada del gluteraldehído
El compuesto es un dialdehído que a concentraciones del 2% presenta una amplia
variedad microbicida y se utiliza en el campo de la medicina para desinfectar instrumentos
biológicos y su formula es la siguiente:
H H
O = C -CH2 -CH2 -CH2 C = O

8) Quimioesterilizadores gaseosos: se basa en exponer los materiales a un gas a una


temperatura ambiente. La aplicación de estos compuestos es para materiales sensibles al
calor, Ej.
Oxido de etileno
Beta Propiolactona
Formol

Antibióticos
Los agentes quimioterapeuticos son sustancias que se usan para tratamientos de
infección o ayudan a disminuir la proliferación celular malignas, a estas sustancias se les
llama antibióticos.
Las características ideales de un agente quimioterapeutico son las siguientes.

a) Deberá destruir o impedir la actividad de un parásito sin provocar daños al


huésped o que este daño sea mínimo.
b) Ser capaz de actuar sobre parásitos antes de que penetre a la célula o tejido del
huésped.
c) No alterar los mecanismos naturales del huésped como es la producción de fagocitos y
anticuerpos.

Historia (Salvarsan)
Fue el primer medicamento ideado contra la sífilis y se aplico en el año de 1495 y que
tenia una base de Hg. (Mercurio), fue hasta 1910 que Paul Erlich ideo un producto que
eliminaba dicho M.O sin producir efectos secundarios.

QUININA.
En 1630 los europeos descubrieron la corteza de un árbol conocido como quinina, el
cual era ampliamente usado por los indios del nuevo continente para la eliminación
malaria.

SULFONAMIDAS.
Estos compuestos son especialmente activos para el tratamiento de infecciones
producidas por Shigella sp, Meningococo además se utilizo para el tratamiento de
infecciones causadas por: Streptococcus sp y Staphylococcus sp, ademas de
infecciones causadas por bacterias gram- vias urinarias, estos antibioticos son utiles
en el tratamiento de la prevencion de enfermedades tales como:
Endocarditis Bacteriana
Fiebre reumatica
Infecciones de heridas o vías urinarias producidas por cirugías o cateterización.
Las Sulfonamidas se definen como en producto metabólico que es perjudicial o de otro
organismo en pequeñas cantidades.
Los organismos vivos se pueden proteger además de otros organismos vivos por
medio de los mecanismos siguientes:
Por amontonarlos o eliminarlos físicamente privándolos de un alimento a utiliza.r
Haciendo el medio demasiado alcalino o demasiado ácido para sus competidores o
mediante la modificación de la presión osmótica y la tensión superficial.
Excretando sustancias que interfieren en el metabolismo de otros impidiendo su
desarrollo. Cándida sp (se encuentra en vagina de mujeres).
El termino antibiosis fue creado por el frances Vuillemin (1889) . Las primeras
investigaciones sistemáticas para el estudio de los antibióticos fueron realizadas por
las investigadoras Grathia y Dath (1829) con el descubrimiento del antibiótico
ACTINOMICETINA.
En 1929 Alexander Fleming descubrió la penicilina producida por el hongo
Penicillium sp. En 1939 René Dubos descubrió que la bacteria conocida como
Bacillus brevis producía antibióticos como Gramicidina y Tirocidina a este hallazgo se
unió el descubrimiento de la Estreptomicina – Sellman Waksman.

Propiedades de un antibiótico útil.


Ser capaz de destruir o inhibir muchos m.o. a esto se le llama: Amplio espectro.
Debe de impedir la aparición rápida de formas resistentes de un microorganismo.
No debe producir efectos secundarios en el huésped, es decir no debe dar o eliminar
la flora M.B. normal para no alterar el equilibrio natural del huésped.

Tipos de antibióticos
PENICILINA: Es producida por los hongos siguientes.
Penicillium notatun
Penicillium crisogenum
Este antibiótico es util contra bacterias gram +, espiroquetas, Bacterias gram-,
Diplococos gram-.
Las penicilinas naturales se preparan como sales de Na, K+, procaínas y otros.
Las penicilinas en forma natural son cristalinas e incoloras y se inactivan con los
siguientes elementos: acido clorhídrico , Hidroxido de sodio, calor, cisteina y
penicilinaza nuestra mayor estabilidad a los ácidos de otras penicilinas.
El núcleo Básico de la penicilina lo constituye el acido Aminopenicilanico.
Algunas de las penicilinas semi-sinteticas producidas para un clínico es Feniticilina
que se absorbe mas fácilmente que la penicilina V.
La Meticilina es mas resistente a la penicilinaza por lo tanto menos probable que
inactive.
La ampicilina es un antibiótico de amplio aspecto y fuertemente Bactericida, carece de
toxicidad pero no resiste a la penicilinaza tampoco resiste al acido clorhídrico del jugo
gástrico.
Usualmente las bacteria gram+son mas sensibles a los antibióticos que las bacterias
gram-, aunque existen antibióticos que únicamente actúan contra estos últimos.
En antibióticos que actúan contra bacterias gram+ y gram- se les conoce como amplio
espectro. Es importante reconocer los blancos bacterianos de los en los antibióticos
estos son: paredes celulares, membranas celulares, procesos biosinteticos de
proteínas y síntesis de ácidos nucleicos.
RESISTENCIA A LOS ANTIBIÓTICOS: Hay varias razones por las cuales pueden
haber resistencias hacia un antibiótico estas son:
El organismo puede carecer de la estructura a la cual el antibiótico inhibe.
El organismo puede ser impermeable al antibiótico.
El organismo puede ser capaz de cambiar el antibiótico a una forma inactiva.
El organismo pude cambiar el blanco del antibiótico
Mediante un cambio genético puede haber una alteración en la vía metabólica a la
cual el antibiótico bloquea.

1. ESTREPTOMICINA:
Es producida por la bacteria Streptomyces griseus el cual tiene como habitat el suelo.
Este compuesto es muy importante por que inhibe muchos organismos que resisten a
la penicilina y sulfonamidas . este antibiotico es efectivo contra:
Salmonella y Mycobacterium tuberculosis.
Cuando se administran por periodos prolongados de tiempo tiene un efecto adverso
en el nervio cranial produciendo sordera y Vertigo debido al daño del octavo nervio
Craneal 8a.

Química de la Estreptomicina
Este antibiotico es soluble en H2O, pero insoluble en eter, Cloroformo y acetona.
Es estable en forma cristalina cuando se guarda 50Cº.
No afecta el suero, Plasma sanguineo y liquidos corporales.
2. ERITROMICINA: fue descubierto por Sellman Waksman (1952) producida de la
bacteria Streptomyces erythraeus, este antibiotico es importante como bactericida.
Gram+, Gram- y algunas espiroquetas y bacterias resistentes la penicilina y
estreptomicina.
3. CLORANFENICOL: También se le conoce como: Cloromicetina y químicamente se
caracteriza por poseer un anillo nitrobencenico que posee un cloro no ionico.
4. TETRACICLINA.
Este antibiótico posee efectos bacteriostáticos y dentro de la familia se tiene los
siguientes:
Clortetraciclina: Streptomyces aureofasciens

Oxitetraciclina: Streptomyces rinosus

5 . CEFALOSPORINAS:
Producida por el hongo marino llamado : Cephalosporium acremonium. En efectivo
contra bacterias gram+ gram- en este grupo se tiene los antibioticos sig:
Cefaloridina
Cefalo glicina
Cefa lexina

6. NISTATINA.
Es un antimicotico para infecciones no sistémicos. Producido por la bacteria
siguiente. Streptomyces noursei, descubierto por Elizabeth Hazen y Rachel Brown
(1950). Este antibiótico es efectivo contra hongos y levaduras siguientes:
Candida sp (Lev)
Botrytis sp (Lev)
Aspergillus sp( hongo)
Penicillium sp (hongo)
7. GRISEOFULVINA:
esta es una sustancia que se obtiene del hongo Penicillium griseofulvun y para la
infeccion micoticas como no sistemicas.
8. POLIMIXINA:
Producida por Bacillus polimixa se usa para el tratamiento de infecciones causadas
por Pseudomonas sp.
Agentes Quimioterapeuticos Sintéticos
NITROFURANOS: El furfural es un aldehído derivado del furano qq se le conoce
como: el II furaldehido descubierto (1832) cuando accidentalmente se estudiaba la
azúcar.
Fue en 1844 que Dodd y Stillman fueron a conocer las propiedades antimicrobicidas
de este compuesto. Esta sustancia es efectiva contra bacterias Gram+ y Gram- ,
Protozoos y hongos que causan lesiones superficiales.
Hidrazida de ácido izó nicotínico
Es efectiva contra la tuberculosis humana y su efecto se aumenta cuado se va a
combinar con la estreptomicina.
ACIDO NADILIXICO.
Es útil contra bacterias Gram.- causantes de infecciones urinarias su mecanismo de
acción es a través de inhibición síntesis ADN.
Ensayo de la Potencia Antimicrobiana de los Antibióticos
La potencia de los antibióticos se determina en tres métodos:
EL ENSAYO QQ: Es el mas preciso requiere menos tiempo pero son menos
sensibles.
EL ENSAYO BIOLOGICO: Expresa las unidades de un determinado antibiótico que
ejerce un efecto bactericida o bacteriostático en una población m.b.

III UNIDAD
MB DEL AGUA DE USO DOMESTICO Y DRENAJE

Purificación de agua.
En este proceso el H2O se encuentra libre de agentes patógenos y sustancias
químicas en niveles que afectan la salud en personas que la consumen.
AGUA
POTABLE FF-Turbidéz- no soluble(1-15 NTU)
QQ – PH (G-5 -8-5)
M.B Org. Patógenos

Suministro individual del agua

Las fuentes subterráneas, pozos y manantiales abastecen la mayoría de las casas


rurales.

Cuando el agua proviene de pozos, este pasa por capas subterráneas que le permiten
estar libre de materiales en suspensión pero no de microorganismos.
Es de vital importancia para la selección de los lugares en donde se habilitaran pozos
para el consumo humano, ya que deberán estar protegidos y ubicados en lugares libres
de contaminación microbiana tales como: plantas de tratamiento, granjas avícolas,
porcinos desagües domesticas, etc.

Suministro municipal de H2O.


Las operaciones principales que se efectúan en una planta municipal de H2O tiene la
objetivo de mantener una buena calidad de líquido procesado a través de los siguientes
tratamientos:
- sedimentación
- filtración
- clorinacion
La sedimentación: se efectúa en grandes depósitos en Farmacia los cuales el H 2O
permanece en reposo y las partículas grandes se sedimentan. La función de precipitado
se acelera agregando al H2O sulfato de Al. El cual incrementa y permite la formación de
floculos. Después del proceso de sedimentación y la filtración de fóculos en H2O sigue el
proceso de clorinacion, cuya dosis de Cloro agregado permanezca en una concentración
libre constante la cual deberá estar en el orden 0.5 a 1.0 ppm 1:litro.

El proceso de purificación incluye la eliminación de minerales que hacen dura al H 2O, el


ajuste del PH, la eliminación de colores y sabores indeseables así como la adición de
fluoruro, importante elemento para disminuir las caries dentales

DETERMINACION DE LA CALIDAD SANITARIA DEL AGUA

Es importante hacer notar que el H2O deberá ser potable si se presenta en aspecto claro
sin color ni sabor ya que aunque estas características el agua podría estar contaminada.
Investigación Sanitaria.
La investigación de las sistemas productoras de H2O se les conoce como: investigación
sanitaria, poseen las etapas siguientes:
Investigación de las fuentes sin tratar y la condición que influyen en su calidad.
Investigacion de plantas purificadoras y de la construcción de pozos.
El mecanismo de distribución líquido a consumidores.
Las investigaciones sanitarias revelan que el H 2O esta siendo consumida en condiciones
necesarias, no obstante las condiciones de la misma puede ser analizada a través de los
parámetros químicos, físicos y microbiológicos de agua.
Pruebas Bacteriológicas de Contaminación del Agua
Se supone que el objetivo de análisis rutinario en el agua son para determinar la
presencia de m.o. patógenos en el agua, sin embargo esto podría no ser cierto debido a
las siguientes razones:
1. Los organismos patógenos llegan al agua en forma esporádica y no sobreviven
por mucho tiempo, y por lo tanto podrían no estar presentes en la muestra
enviada al laboratorio.
2. Si estos m. o. se encuentran en el agua, podrían encontrarse en pequeñas
cantidades y por lo tanto pasar desapercibido a los procedimientos de
diagnóstico de laboratorio.
3. Se necesitan 24 hrs. o más para determinar los resultados de los exámenes, si
acaso estos resultados fueron positivos, muchas de las personas ya lo
hubieran ingerido, el agua estudiada antes que se conocieran los resultados y
por lo tanto haber estado expuesta a la infección.

Puesto que los exámenes de laboratorio para encontrar M.O. patógenos, tienen las
desventajas anteriormente descritas se han desarrollando técnicas para su detección
escritas particularmente; la coliforme, Org indicadores este propósito a probado ser
satisfactorio en la práctica y presenta las siguiente ventajas.

1. Los m.o. Coliformes y sobretodo E. coli habitan constantemente en el intestino


en grandes cantidades.
2. Estos m.o. viven más tiempo en el H2O que los microorganismos patógenos.
3. La presencia de coliformes en el H2O se toma como señal pues determina que
el H2O ha sido contaminado peligrosamente.

El Grupo Coliforme.
Este grupo de bacterias comprende todos los bacilos aeróbios y anaeróbios
facultativos, Gram.-, no esporulados y que producen ácido y gas al fermentar la
glucosa.
Pertenecen a este grupo las bacterias siguientes:
E. coli (Escherichia coli)
Enterobacter aerogenes

Estos organismos poseen una relación en otros organismos entericos, entre


los cuales tenemos:
Salmonella sp
Shigella sp
Proteus sp
Pseudomonas sp
Alcalígenas sp
Todos los cuáles son bacilos gram- no esporulados y como estas especies
tienen gran semejanza en un aspecto morfológico y características bioquímicas
para determinar la identificación de uno a otro M.O, entre las pruebas
laboratoriales se mencionan las siguientes:
1. Capacidad para producir INDOL: E. coli es (+) Enterobacter aerogenes (-).
2. Cantidad de ácido producido: E. coli produce (+) ácido que el Enterobacter
aerogenes (-).
3. Capacidad para producir acetil metil carbinol en un medio y glucosado, también
llamado como: “reacción de Vogues- Proskauer : “E. coli es (-) y Enterobacter
aerogenes (+)
4. Utilización del citrato de sodio como única fuente del carbono: E. coli es (-)
Enterobacter aerogenes (+).

ESQUEMA GENERAL DE LAS PRUEBAS DE LABORATORIO PARA DETENCION


DEL GRUPO COLIFORME EN EL H2O.

Prueba Presuntiva

(Inoculación en el caldo lactosado)

Presencia de gas No hay gas


(Inoculación a partir de tubos con presencia de gas) (No hay m.o. Coliforme)

Caldo verde brillante del cresilo Agar con Eosina azúl de Metileno

Técnicas bacteriológicas.
Es necesario cuidar los siguientes detalles cuando sen someten las muestras de H 2O a
análisis bacteriológicos entre los que se mencionan los siguientes:
1. Las muestras se tomaran en frascos estériles.
2. La muestra a de ser representativa de la muestra original.
3.se evitara la contaminación de la muestra durante y después de su obtención.
4. La muestra se analizara lo más pronto posible después de 3 a 4 horas máximo de su
obtención.
5. Si no es posible el análisis de la muestra en forma inmediata se deberá guardar a
temperatura de aproximadamente de 2 a 6 Cº.

Procedimiento bacteriológico de rutina.


Cuenta en placa.
Se usa para determinar el número de bacterias presentes en una muestra.
Pruebas que determinan la presencia de Coliformes en una muestra (H2O).
Este conteo deberá hacerse antes o después de los tratamientos específicos.
Pruebas para determinar presencias coniformes. Este proceso se basa en tres etapas
necesarias:
Prueba Presuntiva: Determina Coliformes totales.
Prueba Confirmativa: Determina Coliformes fecales.
Prueba Consumación: Determina Escherichia coli.

Técnica de Membrana Filtrante:


Tiene muchas aplicaciones útiles dentro de las que se mencionan las siguientes:

1. Se puede examinar grandes volúmenes de H2O.

2. La membrana puede pasarse de un medio a otro con el objeto de seleccionar


el tipo de bacteria a crecer.
3. Se obtienen resultados más rápidos que los métodos convencionales.

4. Se pueden lograr estimaciones cuantitativas del número de bacterias presentes


en la muestra.

Microórganismos diferentes a los Coliformes.


Muchas bacterias en los sistemas de agua son denominados indeseables, debido a que
producen olor, color, sabor indeseable al H2O e inclusive producen sustancias que pueden
llegar a precipitarse produciendo la obstrucción de la red.
Streptococcus faecalis.
Bacterias entéricas que viven en el intestino de animales de sangre caliente, además de
su representante (Stretococcus faecalis) se contiene otras especies tales como:
Streptococcus faecium.
Streptococcus bovis
Streptococcus equinus

Ferrobacterias.
Estas bacterias transforman los compuestos solubles del hierro en insolubles (oxido
férrico) los cuales se pueden depositar en dos formas:
Como envoltura bacteriana como es el caso del género Sphaerotilus sp o pueden
formarse tallos o cintas adheridas a la bacteria como es el caso del género Gallionella sp.
El depósito y la acumulación de estas sustancias en las tuberías producen obstrucciones
de las mismas, además producen olores, sabores y colores indeseables en el H2O,
permitiendo inclusive la formación del limo.
Sulfobacterias o Tiobacterias.
Estas bacterias pertenecen al género Thiobacillus sp capaces de oxidar el azúfre o ácido
sulfónico pudiendo elevar la acidez hasta el PH 4 produciendo como consecuencia la
corrosión de tuberías.
Desulfovibrio desolfuricans reduce los sulfatos y otros compuestos del azufre hasta ácido
sulfonico, produciendo el mismo efecto.
Algas.
Entre las características de estos organismos en el H 2O es la producción de aspectos
indeseables como:
Cambio en el sabor, olor y turbidez en el agua. Además se sabe que algunas algas
producen sustancias tóxicas al hombre y animales.
Virus.
El grupo de virus más importante en el agua es Picornavirus en la cual se incluyen los
virus siguientes: ECHO, COXSACKIE, POLIO. También se ha aislado el virus de la
Hepatitis “A” infecciosa.
Aguas negras.
Se incluyen los siguientes:

 Desechos tóxicos que salen con el H2O y que corre con el drenaje domiciliario.
 Desechos industriales como ácidos, aceites, grasas, material animal/ vegetal
desechado por las fábricas.
 Aguas profundas y superficiales además de las atmosféricas que entran al sistema
de drenaje.

 Existen tres clases de drenaje en el H2O:

 Desagües sanitarios.
Lleva aguas negras domiciliarias y fabricas (industriales)

 Alcantarillados.
Conduce H2O superficiales y lluvias.

 Desagües combinados.

Características Químicas de las Aguas Negras


Están formados por 99.9% de agua y 0.02-0.03% de sólidos en suspensión y otras
sustancias.
Las H2O negras se constituyen por compuestos orgánicos aportados por excretas
humanos de desechos domésticos, además de sustancias inorgánicas y orgánicas
procedentes de las industrias.
Los componentes orgánicos que constituyen los H2O negras se clasifican en:
Nitrogenados y No nitrogenados, entre los primeros se tiene la uréa aminoácidos y
aminas, mientras segundos se incluye: Carbohidratos y jabones.
Algunos detergentes sintéticos que desplazan el jabón son resistentes a la degradación
microbiana.(un aspecto importante de las H2O negras lo constituye la (D.B.O.) Demanda
Bioquímica de Oxígeno, la que define como: la cantidad de O2 usada por los
microorganismos en el proceso respiratorio con el objeto de oxidar la materia orgánica del
H2O negras por el metabolismo avanzado de los organismos sintetizadores.
Características de las aguas negras.
Además de millones de bacterias las aguas negras son fuente potencial de otros
organismos tales como: protozoos, helmintos, hongos y virus.
El predominio de algunos tipos fisiológicos de bacterias cambia durante el curso de la
digestión de los H2O negras.
Un aparato conocido como digestor en una primera etapa se lleva a cabo un proceso
anaeróbico y por lo tanto el predominio de M.O. en esta etapa son del tipo anaeróbio, en
algunos casos también existe la probabilidad de encontrar anaeróbios facultativos
perteneciente a los géneros siguientes:
Enterobacter
Escherichia
Pseudomonas
Alcaligenes
A estas bacterias les sigue el crecimiento de bacterias productoras de metano como:
Methanococcus
Methanosarcina
Methanobacterium

Tratamiento y Desechos de las Aguas Negras


El desecho de aguas negras maltratadas esta relacionado con los aspectos
siguientes:

1) Aumento posible de la diseminación de microorganismo patógenos.

2) Mayor peligro de usar depósitos naturales contaminados para beber.

3) La contaminación de ostras y otros mariscos que se pueden tornar


peligroso para el consumo.

4) Disminución de la población de aves acuáticas debido a la contaminación.

5) Peligro para quienes nadan en dichas aguas y la disminución del valor de


los casos en que estos sean utilizados para fines recreativos.

6) Consumo del suplemento O2 del H2O por parte de la materia orgánica


inestable.

7) La aparición de factores objetables como el olor desagradable y


acumulación de basura que permite una. disminución de la calidad del H2O.

MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS.
Flora microbiana de alimentos frescos.
Es necesario definir que las superficies interna de las carnes de los animales
sacrificados es estéril y una contaminación es un fiél reflejo de la inadecuada
manipulación que se le brinda.

Carnes.
Las carnes congeladas tienen especies en su superficie M.O del medio de instrumento
utilizado para su corte. Las especias más comunes presentes en las carnes
pertenecen al género:
Pseudomonas sp
Staphylococcus sp
Coliformes
Enterococos
Micrococcus sp

Aves de corral.
La superficie de la carne de las aves del corral, posee M.O. de los corrales o
gallineros, de la manipulación durante la matanza, en el desplumado y de la
eviceracion.
El M.O. más importante de las superficies de éstas carnes recién sacrificadas
pertenece al género Pseudomonas sp.

Huevos.
El interior de los huevos frescos esta libre de microorganismo el contenido microbiano
subsecuente está determinado por las condiciones sanitarias a con que se mantienen
primero de su almacenaje (temperatura y humedad).
Los microorganismo sobre todo los hongos pueden penetrar los huevos a través de
fisuras en los cascarones.
Frutas y Verduras.
La invasión microbiana de los tejidos vegetales ocurre durante varios estadios de su
desarrollo y cuanto mayor sea la extensión de lo invadido mayor será su desarrollo.
El segundo factor importante que contribuye a la contaminación M.B de las frutas y
verduras depende de un buen o mal manejo que se le de al producto hasta llevarlo al
mercado.
El PH de las frutas es bajo y varia desde 2.3 en los limones hasta 5 en los plátanos, lo
cuál retarda el crecimiento de las bacterias pero no la de los hongos, el margen de
crecimientos de las bacterias es de 5 a 7 lo cuál es exactamente el PH al que se
encuentra en algunos vegetales.

Ostras y Pescados.
La flora de microbiana de estos alimentos está muy relacionada y refleja la calidad de
microbiana. de las aguas donde fueron obtenidas.
Las ostras que se reproducen en aguas contaminadas pueden vivir como reservorios y
contaminación para la Hepatitis infecciosa tipo “A”.

DESCOMPOSICIÓN MICROBIANA DE LOS ALIMENTOS


La mayoría de los alimentos son buenos medios de cultivo para los
microorganismos al desarrollarse en estos se producen cambios en el
aspecto, sabor, color y otras cualidades de los alimentos. Este proceso de
degradación se describe así:
Proteínas alimenticias más microorganismos proteoliticos

 ACIDOS SULFIHIDRICOS
 AMINOACIDOS
 AMINAS

Carbohidratos alimenticios más microorganismos fermentadores de carbohidratos.


ACIDOS, ALCOHOLES Y GASES
Grasas alimenticias más microorganismos lipolíticos. ACIDOS GRASOS Y
ESTERES.

Descomposición de Alimentos Enlatados.


Estos m. o. se agrupan de acuerdo a la acidez del producto. Por su resistencia al calor,
los m.o. esporulados Bacillus y Clostridium son los géneros del producto enlatado.
Los 3 tipos de descomposición microbiana más frecuentes en los alimentos enlatados
son:

o Enranciamiento.

o Putrefacción.

 Descomposición anaeróbica termófila.

Preservación de Alimentos
Esta íntimamente ligada con la congelación y enlatado que ha sido métodos desarrollados
en los siglos XIX y XX. El hombre ha intentado desde tiempos atrás la forma de
conservación de alimentos, uno de los cuáles se conoce desde los romanos y se basará
en los procediéndoos de ahumado, salado y desecado.
Los métodos modernos resumen los procedimientos antiguos y técnicas modernas.
Las prácticas utilizadas para la conservación de alimentos son:
Manejo aséptico.
Calor: Ebullición, Vapor a presión, Pasteurización
Temperaturas bajas: Refrigeración y congelación
Deshidratación.
Presión osmótica: Concentración del azúcar, Salmuera
Química:
 Ácidos orgánicos

 Sustancias desarrolladas durante el proceso (ahumado)

Sustancias aportadas por acción microbiana (ácidos)


Radiaciones: Ionizantes y no ionizantes.
Todos estos métodos de conservación en uno o más de los
principios siguientes:

1. Prevención o eliminación de los contaminantes.

2. Inhibición del desarrollo en metabolismo microbiano.

3. Muerte de los microorganismos.

Calor
La preservación de los alimentos por calor requiere el conocimiento de la resistencia
de dichos m.o. organismos en particular las esporas microbianas.
La preservación de los alimentos por aire caliente, una aplicación de éste proceso en
forma industrial al que se conoce como pasteurización. Este se define como el
proceso mediante el cuál no se elimina todos los microorganismos, únicamente los
patógenos. Uno de los inconvenientes de éste procedimiento es que no todos los
alimentos conservan el sabor, valor nutritivo debido a la desnaturalización proteica.
Temperaturas Bajas
El desarrollo de éste método de conservación ha permitido conocer el comportamiento
de los microorganismos a bajas temperaturas. En alguna situación previo al
almacenamiento a bajas temperaturas se lleva a cabo el proceso conocido como:
escaldado, el cuál básicamente es el sometimiento de los alimentos a vapor con el
cuál se logran inactivar enzimas y que posteriormente podrían alterar el alimento. El
método de congelación rápida es más efectivo que el método de congelación lenta,
éste ultimo amplio uso en el sector doméstico. El número y el tipo de m.o. en los
productos congelados es un fiél reflejo de la contaminación microbiana del producto
crudo, además de las salubridades de las plantas de procesamiento.

Deshidratación
Este proceso basa su mecanismo de acción en la microbiostasis ejercida sobre
microorganismos, lo cuál no es igual que la eliminación o muerte microbiana. Los m.o.
se inhiben por la reducción de la humedad a niveles inferiores alcríticos. Este nivel
crítico está determinado por características propias de microorganismos y por la
capacidad de guardar de humedad que no está disponible como agua ligada. Aunque
la levadura y hongos son resistentes a éste proceso de control, existen importantes
aspectos que determinan la validez de éste método para preservar/conservar
alimentos además del proceso de deshidratación , la presión osmótica no elimina o
mata m.o..
Sustancias Químicas
La adición de sustancias químicas a los alimentos con propósitos de conservación
está formada por UNITED STATE FOOD DRUG AND COSMETIC ACT. que data de
1972 en la cuál se aceptan una cantidad de sustancias químicas para utilizarlas en
conservar alimentos y son:
ácido benzoico, ácido sórbico, ácido acético, ácido láctico, ácido propiónico,
todos ellos ácidos orgánicos.
Se determina que los hongos del pan se previene con ácido sórbico o propiónico, en
cambio las de carnes con nitrato o nitrito, además de crear un ambiente anaeróbio
permite conservar el color rojo de las mismas.
Algunos alimentos se consternan de la contaminación como resultado de la acción
microbiana produciendo ácidos como: acéticos, láctico y propiónico.
ACIDEZ INHERENTE: Propia del alimento
ACIDEZ BIOLOGICA: Acción metabólica del m.o.
Durante el ahumado se forman sustancias como cresoles y aldehídos que poseen su
acción antimicrobiana al penetrar la carne creando una acción preservante.
Radiación.
La radiación ultra violeta se utiliza para eliminar m.o. presentes en las superficies de
las carnes. Los enlatados o empaquetados son esterilizados mediante el uso de dosis
de radiaciones y a ésta se le conoce como esterilización fría ya que únicamente se
aumenta en pocos grados la temperatura del alimento.
MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL
Los m.o. en la industria
Desde el punto de vista industrial m.o. actúan sobre los sustratos funcionando de ésta
manera como fabricas químicas y transformando el producto determinado: alcohol,
caña de azúcar – Acetobacter acetti (ácido acético) del vinagre.

Prerrequisitos para los procedimientos del m.o.


Los prerrequisitos para que un proceso microbiano sea practicable y útil son:
microórganismo, medio y producto.
MICROORGANISMO. El m.o. que se emplee debe de ser capaz de transformar
grandes cantidades de sustratos al producto, además de poseer características
estables y una capacidad de desarrollo, rápido y vigoroso, además no deberá de ser
patógeno.
CARACTERISTICAS DEL MEDIO. Incluyendo el sustrato que transformara el m.o.
deberá ser barato y fácilmente obtenible en grandes cantidades.
PRODUCTO. El producto formado por el metabolismo m.o. es una mezcla
heterogénea obtenida por cosecha de células microbianas. Cuando el producto se
obtiene a gran escala se exige poner en marcha un método de purificación y
recuperación para lograr un buen producto final.

Principales Clases de Producto


Los m.o. empleados principalmente en la industria microbiana son: bacterias, hongos
y levaduras, siendo las principales de uso industrial las sigs:
Bebidas Alcohólicas. Corresponden a este grupo productos tales como cervezas y
vinos.
Químicas Farmacéuticas. Los más prominentes en éste grupo de productos lo
constituyen los antibióticos y esteroides.
Suplementos Alimenticios. La producción masiva de levaduras y algas en medios
que contienen sales inorgánicas nitrogenadas son buena fuente de proteínas
utilizadas como suplemento alimenticios.
Sustancias Químicas Valiosas Comercialmente. Varios preparados con enzimas
microbianas poseen un valor comercial muy importante.
Vacunas. El cultivo masivo de m.o. para producir vacunas puede considerarse como
una importante industria comercial que una fermentación microbiana. Otro aspecto
importante es el papel que juega los m.o. en el deterioro.

USO DE LAS BACTERIAS EN LA INDUSTRIA


Producción Acido Láctico
Para producir ácido láctico se usan varias sustancias que contienen carbohidratos
como ser almidón, maíz, papa y suero de leche. La reacción es la sig.:
C12H24O12 + H2O ----- 2C6H12O6 Sistema 2CH3CHOHCOOH
lactosa Enzimático ácido láctico

Producción de Vinagre
La producción del vinagre se deriva del italiano vinaigre (vino agrio) producto que
se fabrica dejando el sustrato en condiciones controladas, existen dos formas de
producción:

 Fermentación alcohólica del carbohidrato.

 Oxidación alcohólica a ácido acético.

Este último procedimiento se utiliza la bacteria Acetobacter acetti, la cuál lleva a cabo la
sig. reacción:
2CH3CH2OH + 2O2 -------->2CH3COOH + H2O
Etanol Acido Acético

Producción de Aminoácidos
Muchos m.o. sintetizan aminoácidos a partir de compuestos inorgánicos nitrogenados
dentro de los aminoácidos producidos, se encuentran: ácido glutámico, glicina y lisina.
Entre las ventajas del proceso de producción del aminoácido utilizando m.o. se
encuentra la producción de formas biológicas activas llamadas formas “L”.
Producción de L-Lisina
Uno de los métodos comerciales para producir lisina, consiste en un procedimiento
formado por 2 pasos y utiliza 2 tipos de m.o. los cuáles son:

 La formación del ácido Diaminopimetico por T. coli.


 Descarboxiliación por la enzima por Lico medio de DAP Descarboxilasa. La cuál es
producido por la bacteria Enterobacter aerogenes . La lisina es un aminoácido
especial y al igual que las proteínas de los cereales son deficiéntes en éste
aminoácido, se usa como suplemento del pan.
Producción L-Glicina (L-Glutámico)
Se utiliza los géneros sigs.: Arthrobacter sp
Brevibacterium sp
Microbacterium sp
La sal de éste aminoácido conocido como glutamato se ha utilizado ampliamente como
condimento para darle sabor a las comidas. La forma comercial de éstas sustancias se
conoce como glutamato monosódico.
Usos industriales de la levadura
El uso más importante y conocido de la levadura es la producción de alcohol etílico por
medio de fermentación de carbohidratos.

Fermentación Alcohólica
Los aspectos microbianos en el proceso de obtención del alcohol etílico se resume de
la sig. manera:
SUSTRATO
Se puede utilizar como sustrato, el almidón, el cuál es necesario desdoblar mediante
el proceso de ionización y de ésta forma quede reducido a azucares más sencillos.
Las enzimas necesarias para llevar a cabo este proceso se obtiene de la cebada y
malta y en algunos casos de los hongos. Los materiales crudos más frecuentemente
utilizados para producir etanol son: maíz, melaza, mieles azucarados, papas y uvas.
El organismo utilizados es un hongo conocido como: Saccharomyces cerevisae con la
sig. reacción:
C6H12O6----->CH3CH2OH + CO2
Glucosa Etanol

 Las levaduras en la Panadería


Las características de algunas sepas de Saccharomyces cerevisae destinado a la
producción comercial de levaduras para hornear, incluye la capacidad de fermentar la
pasta y esponjar rápidamente. El CO2 es el responsable del espojamiento del pan.
La calidad del producto depende de 3 aspectos:

 Empleo de buenos ingredientes.

 Condiciones de incubación.

 Selección de las levaduras.

Las levaduras como alimento


El cultivo masivo de bacterias, hongos, algas es buena fuente de sustitutos
alimenticios para el hombre y animales.

USOS INDUSTRIALES DE LOS HONGOS


Los hongos se utilizan para antibióticos en la industria química, además en la
fabricación de enzimas.

Producción de Penicilina
Fue el primer antibiotico que se produjo industrialmente a partir del hongo conocido
Penicillium notatum (Roberto Fleming). La maravillosa actividad quimioterapeútica de
la penicilina fué demostrada por Florey y Chain (1939-1941) poco a poco este
antibiótico fue produciéndose en grandes cantidades.
Los adelantos que se dieron en el proceso de producción masiva fueron:

1. Mejoramiento de la composición del medio microbiano.

2. Aislamiento de mejores especies de Penicillium notatum


3. Desarrollo de una técnica de cultivo sumergido

4. Desarrollo de especies mutantes de sepas Penicillium crisogenum

5. La adición de sustancias químicas al medio para que sirvan como


precursores de la síntesis de penicilina.

6. Mejoramiento de los métodos de recuperación del antibiótico que se


encuentra en el medio.

Los pasos principales para la producción de Penicilina

1) Preparación del inóculo.

2) Preparación y esterilización del medio.

3) Inoculación del medio en el fermentador.

4) Inoculación forzado con aire estéril.

5) Eliminación del miselio del hongo después de la incubación.

6) Extracción y purificación de la penicilina.

Acido Cítrico
Se emplea para la fabricación de medicamentos, extractos aromatizantes, alimentos,
dulces, tintas para tintorería y estampados . Varios hongos pueden convertir el azúcar
en ácido cítrico, ejemplo: Aspergillus niger . Muchos azucares puéden ser sustratos
para producir ácidos cítricos, pero se usan la melaza en las que se usan procesos
biológicos. Es por esta razón que la producción del ácido cítrico , tiénen mayor
eficiéncia cuándo se usan fermentadores.
La sepa empleada la composición del medio , el grado de aeración y la temperatura
son aspectos que determinan la cosecha de este ácido.

Producción de Enzimas
Mediante el proceso industrial, es posible concentrar enzimas pertenecientes a
hongos.
Aspergillus, Penicillium, Rhizopus, Mucor.
Los tipos de enzimas producidos por estos hongos son: amilasa, invertasa,
proteasa, pectinasa, son útiles para procesar muchos materiales. La amilasa
hidroliza el almidón para formar azucares y dextrínas , los cuáles se utiliza para
aderezos, adhesivos, tratamiéntos de textiles, clarificación de jugos y la manufactura
de productos farmaceúticos , la invertasa hidrolisa la sacarosa para formar la levulosa
y glucosa , se emplea en la elaboración de dulces y jarabes no cristalizables de
sacarosa. La proteasa se usa para curtir cueros con el objeto de darles textura fina y
peso adecuado, se usa además para la fabricación de gomas liquidas, engomado de
la cera y como coadyuvante de jabón de lavandería. La pectinaza se usa para
clarificar jugos de frutas y la hidrolizacion de la pectina resultante del proceso de
maceración del lino.
Conversión de Esteroides.
En la actualidad muchas hormonas esteroideas son agentes quimioterapeuticas en el
tratamiento de enfermedades conocidas como: artritis , leucemia, reumatismo ,anemia
hemolítica , otros.
A diferencia de otros usos industriales son la producción de esteroides , resulta ser
muy dificultosa además de costosa.
Inmunología.
Es el estado resistencia o falta de susceptibilidad a las moléculas toxicas, m.o. y
células extrañas. El estudio de la inmunologia, campo amplio que comprende la
investigación básica y la aplicación clínica se ocupa de antigenos , anticuerpos y
funciones mediadas por células en especial las que se relacionan con inmunidad a la
enfermedad, relaciones biológicas a la hipersensibilidad, alergias y rechazos a tejidos
extraños.

TEMA: SISTEMA INMUNOLOGICO

Tipos de Inmunidad.
Natural.
Es la resistencia que no se adquiere por contacto de un antigeno, es inespecífica e
incluye barreras o agentes infecciosos ejemplo: piel y membranas mucosas e intactas,
células asesinas naturales, fagocitosis, inflamación, interferon y otros factores
inespecíficos.
Adquirida.
Pasiva: Se transmite por anticuerpos creados en otros huéspedes. La ventaja
principal de la pasiva es la pronta disponibilidad de cantidades abundantes de
anticuerpos; la desventaja es la corta supervivencia de estos y las posibles reacciones
de hipersensibilidad si se administran globulinas de otras especies.
Activa: Es la resistencia inclusive después del contacto efectivo con antígenos
extraños , este contacto puede producir en infección clínica o subclínica , inmunización
con agentes infecciosos vivos ,muertos o sus antígenos o transplantes de celulas
extrañas. Las ventajas de estos incluyen resistencia a largo plazo, las desventajas es
el lento inicio de la resistencia y la necesidad de un contacto prolongado y repetido
con el antígeno.
Respuesta Inmunitaria.
Puede ser mediada por anticuerpos (humoral) o por células (celular) o por ambas.
Las características de los antigenos que determinan su inmunogenesidad son las
sigs.:
Carácter extraño. Para que se manifieste la inmunogenesidad deben ser identificados
como no propio.
Tamaño de la molécula. Los inmunogenogenos mas potentes son proteínas con un
peso molecular mayor de 100,000 Daltons.

DEFINICION DE TERMINOS
Anticuerpos. Proteína producida como resultado de la introducción de un antígeno y
que tiene las propiedades de combinarse con el antígeno que estimuló su producción.
Antígenos (Ag). Sustancia que puede inducir una respuesta inmunitaria detectable
cuando se introduce en un animal.
Linfocito B. Esta célula se deriva de la bolsa de Fabricio en algunas especies aves,
son precursores de las células plasmáticas las cuáles producen anticuerpos.
Linfocito T. Célula derivada del Timo y que tiene capacidad de participar en diversas
capacidades de inmunidad lidiadas por células.
Inmunoglobulina. Licoproteína compuesta por H y L las cuáles funcionan como
anticuerpos. Todos los anticuerpos son inmunoglobulina, pero no todos las
inmunoglobulinas son anticuerpos. Existen 5 clases de inmunoglobulina:
Ig M, Ig A, Ig G, Ig E, Ig D.
Macrófago. Célula mononuclear fagocítica derivada de la medula ósea y que se
puede encontrar en los tejidos o sitios de inflamación.
Los macrófagos tienen papeles accesorios en la inmunidad celular.

Base Celular de la Respuesta Inmunológica


Durante el desarrollo embrionario los precursores celulares se encuentran en el
hígado fectal. En la vida postnatal residen en la medula ósea.
Células B. Son linfocitos que se desarrollan en el equivalente de la bolsa de Fabricio
abierta y dan origen al desarrollo de anticuerpos. Las células B no requieren el timo
para su maduración.
Célula T. Son linfocitos que requieren procesamiento en el timo y forman muchas
subclases y dan origen a la inmunidad mediadas por células.

Anticuerpos (inmunoglobulina)
Los anticuerpos se forman por globulina. Cada persona posee linfocitos (10 a 100)
cuyo promedio de vida es en días o semanas y se forman en tejidos informes
agafados al sistema gastrointestinal, ejemplo: amígdalas o apéndices. La célula T
pueden exponer moléculas de inmunoglobulina en su superficie en aproximadamente
105 por célula.
Todas las células inmaduras pueden aportar en su superficie la inmunoglobulina Ig M y
la gran mayoría posee Ig G.
Las células T posee receptores de su superficie como Fracción Constante (FC) tiene
varios componentes del compuesto. Un antígeno interactúa con linfocitos B que
muestra el mejor ajuste en virtud de su receptor inmunoglobulina de su superficie. El
antígeno se une a este receptor y la célula B es estimulada al unirse y formar un
plano.
El paso inicial de la formación de anticuerpos es la fagocitosis del antígeno por lo
general macrófago, los cuáles procesan el antígeno a las células B, a las células D
colaboradoras o ambas. Las células B que poseen la inmunoglobulina superficial
compatible con el antígeno seleccionado y diferenciarse en células plasmáticas. Estos
a su vez producen copias de anticuerpos.

ESTRUCTURA DE UN ANTICUERPO
Una molécula individual de anticuerpos siempre consiste en cadenas de H y L idénticas.
Las moléculas mas simple de anticuerpos Y esta compuesta por 4 cadenas polipeptídicas
2H y 2L. Las 4 cadenas se unen por convalencia por puentes disulfuro. Las cadenas H y L
se dividen en regiones variables y constantes.

Clases de Ig
Ig G
Anticuerpos predominantes en respuesta secundaria y constituye una respuesta
importante contra virus, bacterias amino, anticuerpos que atraviesan la placenta y por lo
tanto es la globulina más importante para el recién nacido.
Ig M
Producida con rapidez en la respuesta inmunológica primaria, se compone de 5 unidades.
Es la inmunoglobulina más eficiente en la fijación y complemento. Puede ser producida
por un feto infectado, incluyendo 10 sitios de fijación. Tiene la avidez más deseada de
todas las inmunoglobulinas.
Ig A
Inmunoglobulina principal en secreciones como la leche, saliva, lágrimas, secreciones
vías respiratorias, gastrointestinales y genitales. Protege a las membranas mucosas
contra virus y bacterias.
Ig E
Es la inmunoglobulina principal en las personas con hipersensibilidad alérgicas mediadas
con anticuerpos, la concentración de Ig E se incrementa en forma notable. El Ig E puede
generarse en secreciones internas, es común que la Ig E se encuentre en el suero
humano cuándo se padezca con el virus o gusanos.
Inmunidad por Anticuerpos (Humoral).
Respuesta Primaria. Cuando un antigeno encuentra por vez primera otro antigeno en el
suero, la concentración del Ig M tiende a disminuir lo mas pronto posible.
Respuesta Secundaria. En el caso de un segundo encuentro con el mismo antigeno
meses o años después, el anticuerpo responde con mas rapidez y se alcanza valores mas
altos que la respuesta primaria.
Fagositosis. Las partículas incluyendo m.o. y algunos complejos moleculares solubles
que circulan en la sangre y linfa o se encuentran en los tejidos con frecuencia son
engullidas por células especializadas en el proceso conocido como fagocitosis. Las
células fagocitarías principales son: macrófagos y granulocitos. La fagocitosis es un
mecanismo especial de defensa del huésped tanto en tejidos normales como en
respuesta inflamatoria.
Macrófagos. La función importante del macrófago en la respuesta simultánea consiste en
procesar las moléculas antigenicas a los linfocitos, paso necesario para la respuesta
inmunológica. Los macrófagos participan en la respuesta inflamatoria, curación de heridas
y metabolismo de lípidos.
Hipersensibilidad. La hipersensibilidad o alergia denota un estado en el cual una
respuesta inmunológica desencadena una respuesta nociva para el huésped. Entre tipos
de hipersensibilidad se procede en la de tipo 1 conocido como: ANAFILACTICA, cuyos
mediadores es la HISTAMINA, esta molécula se encuentra en estado preformado en
plaquetas de gránulos y células cebadas y sudares hivasofilos.Su liberación causa
incremento y contriccion en el músculo liso.
El tratamiento de estas reacciones se puede tener basofilos en algunos medicamentos
como: adrenalina, antihistamínico, cromolin sádico (costicostiroides).
La hipersensibilidad tipo 2 conocido como:CITOTOXICA fué formado con medicamentos
como: penicilina, fenacetina, quinidina. La hipersensibilidad tipo 3 conocida como
Complejo 3 puede causar trastornos corporales como artritis, netritis, vasculitis.

REACCION ANTIGENA ANTICUERPO “in vitro”


Aglutinación.
El antigeno esta particulado (bacterias y linfocitos) esta recubierto con partículas inertes
de látex.

Precipitación
En la reacción precipitación (precipitina) el antigeno esta en solución.
Radio Inmuno Analisis (RIA).
Este método se emplea cuantificar antigenos haptenos que fue marcado con
radioactividad.
Inmunoflorescencia
Colorante fluorescente (fluoroceína y auramina) pueden unirse por covalencia a
moléculas de anticuerpos y hacer visible con ayuda de luz ultra violeta y
microscopio de fluorescencia.

Análisis Inmunosolvente con Enzima Enlazado ( E.L.I.S.A.)


Enzyme Linked Inmuno (ASSAY)
Este método tiene número variable y depende de una enzima o un anticuerpo.