INFORME DE BIOQUIMICA

DETERMINACIÓN DE VITAMINA C

RESULTADOS
Datos:
Peso de la naranja: 193.77
Jugo de naranja: 5 ml de
Almidón: 1 ml de
se tituló con yodo
Observación: Al titular con yodo, la solución tomó una coloración violeta oscuro, lo cual
indica positivo para Vitamina C

DETERMINACION DE % DE VITAMINA C
Primero hayamos los gramos de vitamina para poder determinar el porcentaje (%) de
vitamina C.
A) Gramos De Vitamina C, N x Meq x V

Meq. Miliequivalente del yodo 0.1 N - 0.089

V1 Volumen de yodo gastado: 1.6 ml

0.1 x 0.089 x 16: 0,01424

B) % de Vitamina C

Gr de Vitamina C ml de jugo utilizado en el experimento

X 100 ml

Solución: 0,01424 x 100: 0,2846

5

Sustancia Yodo 0.1 N Gramos De % De Vitamina C

Gastado Vitamina C
Jugo sintético 0.1 N 0.0089 0.0356
Naranja 1.6 ml 0,01424 0,2846
Limón 1,2 ml 0,01068 0,2136

ANALISIS
 CUESTIONARIO

1. Otros métodos cuantitativos para la detección de tiamina y riboflavina

Determinación de la concentración de riboflavina por cromatografía liquida de

alta resolución en alimentos.
Se basa en la extracción de la riboflavina a través de un tratamiento enzimático, seguido
por hidrólisis ácida, filtración por membrana 0,22 micras y posterior identificación y
cuantificación de esta por cromatografía liquida isocrática en fase inversa con detector
de fluorescencia, ajustada a una longitud de onda de excitación de 450 nm y de emisión
de 528 nm.
2. ¿Qué es fluorescencia?
Es un fenómeno de luminiscencia.
 La fluorescencia es un proceso de emisión en el cual las moléculas son excitadas
por la absorción de radiación electromagnética.
Fluorescencia: Es la relajación de un estado singulette excitado de baja energía (s1),
hacia el estado fundamental (S0) mediante la emisión de un fotón. Ocurre con una
temporalidad del orden de los (10- 9 s).

3. ¿Tiene fluorescencia la tiamina y la rivoflamina? Y ¿por qué?

R/ Riboflavina: Es una sustancia amarilla fluorescente se encuentra ampliamente

distribuida en los reinos vegetal y animal. Se encuentra la forma sintética como
Riboflavina 5’-sodio fosfato y corresponde a un grupo de vitaminas solubles en
agua que forman parte del grupo de vitaminas del complejo B.
La vitamina B2 es sensible a la luz, utilizar material de vidrio marrón o ámbar.
Considerando las características de la riboflavina y la naturaleza de distintas
matrices de los multivitamínicos, así como de las técnicas de adición, se tienen
elementos que permiten evaluar las interacciones que sufren las variables en la
determinación de riboflavina por medio de fluorometría.

Tiamina (B1) : Se basa en la extracción de la tiamina por un tratamiento

enzimático, hidrólisis ácida, seguido de purificación, oxidación a tiocromo
(compuesto fluorescente cuya fluorescencia es directamente proporcional a la
concentración de tiamina presente en la muestra) y posterior identificación y
cuantificación por cromatografía liquida isocrática en fase inversa con detector de
fluorescencia, ajustada a una longitud de onda de excitación de 365 nm y de
emisión de 436 nm.
La Tiamina (B1): Se encuentra la forma sintética como Tiamina clorhidrato o
mononitrato y corresponde a un grupo de vitaminas solubles en agua que forman
parte del grupo de vitaminas del complejo B.
La vitamina B1 no es sensible a la luz; en cambio el tiocromo que es el producto de
la oxidación si es fotosensible, por lo cual se debe utilizar material ámbar o color
marrón durante la etapa de oxidación.
 4. Definición de onda larga y corta
El espectro electromagnético se extiende desde las bajas frecuencias usadas para la
radio moderna (extremo de la onda larga) hasta los rayos gamma (extremo de la
onda corta), que cubren longitudes de onda de entre miles de kilómetros y la
fracción del tamaño de un átomo. Se piensa que el límite de la longitud de onda
corta está en las cercanías de la longitud Planck, mientras que el límite de la
longitud de onda larga es el tamaño del universo mismo, aunque en principio el
espectro sea infinito y continuo.

Rango del espectro

El espectro cubre la energía de ondas electromagnéticas que tienen longitudes de
onda diferentes. Las frecuencias de 30 Hz y más bajas pueden ser producidas por
ciertas nebulosas estelares y son importantes para su estudio. Se han descubierto
frecuencias tan altas como 2.9 * 1027 Hz a partir de fuentes astrofísicas.

La energía electromagnética en una longitud de onda particular λ (en el vacío) tiene

una frecuencia asociada f y una energía fotónica E. Así, el espectro
electromagnético puede expresarse en términos de cualquiera de estas tres variables,
que están relacionadas mediante ecuaciones.

De este modo, las ondas electromagnéticas de alta frecuencia tienen una longitud de
onda corta y energía alta; las ondas de frecuencia baja tienen una longitud de onda
larga y energía baja.

Siempre que las ondas de luz (y otras ondas electromagnéticas) se encuentran en un

medio (materia), su longitud de onda se reduce. Las longitudes de onda de la
radiación electromagnética, sin importar el medio por el que viajen, son, por lo
general, citadas en términos de longitud de onda en el vacío, aunque no siempre se
declara explícitamente.

Generalmente, la radiación electromagnética se clasifica por la longitud de onda:

ondas de radio, microondas, infrarroja y región visible, que percibimos como luz,
rayos ultravioleta, rayos X y rayos gamma.

El comportamiento de la radiación electromagnética depende de su longitud de onda. Las

frecuencias más altas tienen longitudes de onda más cortas, y las frecuencias inferiores
tienen longitudes de onda más largas. Cuando la radiación electromagnética interacciona
con átomos y moléculas, su comportamiento también depende de la cantidad de energía por
cuanto que transporta. La radiación electromagnética puede dividirse en octavas (como las
ondas sonoras).

La espectroscopia puede descubrir una región mucho más amplia del espectro que el rango
visible de 400 nm a 700 nm. Un espectroscopio de laboratorio común puede descubrir
longitudes de onda desde 2 nm a 2500 nm. Con este tipo de aparatos puede obtenerse
información detallada sobre las propiedades físicas de objetos, gases o incluso estrellas. La
espectrometría se usa sobre todo en astrofísica. Por ejemplo, muchos átomos de hidrógeno
emiten ondas de radio que tienen una longitud de onda de 21.12 cm.

5. Composición de la tiamina y riboflavina

TIAMINA (VITAMINA B1)

Consiste en una pirimidina sustituida enlazada por un puente metileno a un tiazol

sustituido.
Su forma activa es el difosfato de tiamina.
Una tiamina difosfotransferasa dependiente de ATP presente en encéfalo e hígado convierte
la tiamina en su forma activa.
El difosfato de tiamina sirve como coenzima en reacciones que transfieren una unidad
aldehído activada:

Existen dos tipos de reacciones:

Descarboxilación Oxidativa de Alfa Cetoácidos (alfa cetoglutarato, piruvato, análogos de
alfa cetoácidos, leucina, isoleucina y valina.)
Reacciones Transacetolasas (Vía de la Pentosa Fosfato)
°Las reacciones son inhibidas por la deficiencia de tiamina.

El difosfato de tiamina proporciona un carbono reactivo en el tiazol que forma un

carbanión, que se libera más tarde para agregarse al grupo carbonilo de otros compuestos.

El compuesto agregado se descarboxila con la eliminación del bióxido de carbono.

La reacción ocurre en un complejo enzimático : piruvato deshidrogenasa.

Descarboxilación oxidativa de alfa cetoglutarato a succinil CoA y CO2: El difosfato de

tiamina proporciona un carbanión estable para reaccionar con el carbono alfa del alfa
cetoglutarato.

Descarboxilación Oxidativa de derivados de alfa cetoácido carboxílico, de aminoácidos de

cadena ramificada, utiliza difosfatos de tiamina.

La carencia de Tiamina causa Beriberi y Síndromes por deficiencia relacionados.

Se suspenden o se limitan las reacciones que dependen de ella produciendo acumulación de

sustratos como: piruvato, pentoazúcares, y derivados de alfa cetocarboxilados de los
aminoácidos ramificados: leucina, isoleucina y valina.

Fuentes adecuadas de Tiamina: Cereales sin refinar y carne.

BERIBERI: Enfermedad causada por dietas ricas en carbohidratos y escasas en tiamina.

Los síntomas tempranos son: Neuropatías Periféricas, Agotamiento, Anorexia que
conducen a edema y degeneración cardiovascular, neurológica y muscular.

Encefalopatía de Wernicke: Se encuentra en el alcohólico que consume poco alimento.

La actividad de trancetolasa eritrocitaria y excreción urinaria de tiamina y su concentración

sanguínea se emplean en la deficiencia de tiamina.
RIBOFLAVINA (VITAMINA B2)

 Consiste en un anillo de isoaloxacina heterocíclico adherido al alcohol del azúcar

ribitol.

Es un pigmento fluorescente, coloreado y termoestable que se descompone en

presencia de la luz.

La riboflavina activa es el Mononucleótido de Flavina (FMN) y Dinucleótido de

Flavina-Adenina (FAD).

FMN: Se forma de riboflavina por fosforilación dependiente de ATP.

FAD: Se sintetiza por una reacción adicional con ATP donde la fracción AMP del ATP se
transfiere a FMN.

 Éstas enzimas se conocen como flavoproteínas.

Los grupos prostéticos se enlazan con fuerza a sus apoproteínas.

Éstas enzimas contienen uno o más metales: Molibdeno y Hierro, como cofactores y
por ende se les denomina Metaloflavoproteínas.

Las enzimas las representan oxidorreductasas importantes: alfa aminoácido

oxidasa en la desaminación de aminoácidos; Xantina Oxidasa en degeneración de
purinas; Aldehído deshidrogenasa en degeneración de Aldehídos; Glicerol-3-P-
Deshidrogenasa mitocondrial en transportación de equivalentes reductores de
citosol a mitocondria; Succinato Deshidrogenasa en Ciclo de Krebs; Acetil CoA
deshidrogenasa y flavoproteína que transfiere electrones a la oxidación de ácidos
grasos, Dihidrolipoil Deshidrogenasa en Cadena Respiratoria en Mitocondria.

La deficiencia de riboflavina altera esos sistemas enzimáticos.

Papel de Coenzimas: Reducción reversible del anillo isoaloxina para producir sus
formas reducidas, FMNH2 y FADH2.

La carencia de Riboflavina: Síndrome General de Deficiencia no mortal.

Síntomas: Estomatitis angular, queilosis, seborrea y fotofobia.

Fuentes Adecuadas de Riboflavina: Levadura, Hígado y Riñón, absorbidas en

intestino con una secuencia fosforilación-desfosforilación en mucosa.

Hormonas (Tiroides y ACTH), Medicamentos y factores nutricionales afectan la

conversión de riboflavina a sus formas cofactores.
 Debido a su sensibilidad a la luz puede producirse deficiencia de riboflavina en
lactantes con hiperbilirrubinemia tratados con fototerapia.

Actividad de glutatión reductasa en eritrocito: Análisis de estado de riboflavina.

6. Fosfato y calcio en tejido animal

Calcio.

Es el mineral más abundante en el organismo, dado que es un componente fundamental de

los huesos el 90% del Ca del organismo está en el hueso. Está presente asimismo en los
dientes y en el plasma. También participa en la transmisión nerviosa y forma parte de la
estructura de varios enzimas. Es el cuarto componente del cuerpo, después del agua, los
prótidos y los lípidos.

Existen muchas enfermedades que pueden ocasionarse por un consumo inadecuado o

insuficiente de calcio. Una de ellas, la osteoporosis, es una enfermedad sistémica que
produce una disminución de la masa ósea con una pobre calidad de hueso. Como
consecuencia de esta enfermedad se produce dolor, deformidad en manos, aplastamiento de
vértebras y fracturas espontáneas que se dan en su mayoría en antebrazo, columna y cadera.

Fósforo.

El Fósforo es un mineral abundante en el organismo. Más del 80% se encuentra en hueso.

Los fosfatos se encuentran ampliamente distribuidos en los alimentos. Las ingestas diarias
suelen exceder las necesidades. El fosfato se encuentra frecuentemente ligado a proteínas,
lípidos y carbohidratos y participa en gran número de reacciones por lo que su deficiencia
afecta a todas las células.

La ingestión exagerada de antiácidos interfiere la absorción de fosfatos de la dieta.

Metabolismo del Ca y P.

El hueso se comporta como un depósito dinámico, como una reserva dispuesta a

movilizarse.
La sangre actúa como intermediaria entre los distintos órganos y el hueso. La concentración
de Ca y P en sangre se mantiene a un nivel constante por la acción reguladora de:

 La hormona calcitonina que actúa cuando hay un nivel elevado de Ca en sangre,

estimulando la acumulación de Ca en hueso e impidiendo su movilización. Su
presencia es proporcional a la concentración de Ca en sangre.
 La hormona paratifoidea (PTH) que moviliza el Ca del hueso a la vez que estimula
la absorción a nivel digestivo, propicia asimismo la producción de vitamina D y es
inversamente proporcional a la concentración de Ca en sangre.
 La vitamina D3 (Colecalciferol) actúa de forma sinérgica con la PTH al haber sido
estimulada su conversión en el metabolito activo (1,25(OH)2D) precisamente por
esta hormona.
 Ca y P en tejidos blandos.
 Absorción de Ca y P.

BIBLIOGRAFIA

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