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Q.F.B.
Grupo: 2551
Asesor:
Equipo: 7
Integrantes:
14/02/19
2019-2
OBJETIVOS
Una vez traída la rata (Wistar) del bioterio se procedió a verificar que estuviera
muerta, posteriormente se colocó a la rata en posición decubito supino sujetando
sus cuatro patas (con ayuda de hilo grueso) sobre la tabla de disección. Se analizó
el exterior de la rata identificando los órganos sensoriales y los órganos genitales
externos. Con ayuda de las tijeras mayo se hizo un corte del área pelvica al tórax y
cuatro cortes transversales (partiendo del punto superior e inferior de la primera
insicion), con las pinzas allis se sujeto la piel de la rata y con ayuda de las pinzas
de disección y las tijeras se cortó el difragma y see partio en dos la caja toracica.
Ya que se tuvieron expuestos los órganos de ambas cavidades (toracica y
abdominal) se extrajo en el siguiente orden los órganos: hígado, pancreas,
estómago, intestino delgado y grueso, riñones, glándulas suprarrenales, ovarios,
matriz y corazón. Todos loa órganos fueron puestos en una charola de papel
aluminio y se
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
A las dos variedades de hojas se les realizo el mismo tratamiento, que consta de:
1) Lavar las hojas únicamente con abundante agua, para retirar el exceso de tierra y otras
sustancias que contamine la extracción.
2) Con un mortero se pulverizo las hojas
(previamente desvenadas), mientras se le
agregaba etanol al 76° (7mL aprox.), esto
para poder extraer los pigmentos (α y β
clorofilas, carotenoides, flavonoides, etc.)
de las hojas. Se realizan extracciones con
etanol debido a que aparte de ser
económico y poco contaminante,
pigmentos como las clorofilas y los
carotenoides son muy solubles (a
diferencia de los flavonoides que si son
solubles en agua y se extraen con la sola
Imagen 4. “Pulverización de las
pulverización). (Torossi 2007)
hojas con etanol”
3) Se filtró la mezcla con ayuda de papel filtro de poro abierto, para poder realizar una CP
sin material orgánico que tape los poros del papel.
Cromatografía en papel de pigmentos de hojas verdes (A) y rojas (B) con etanol:
4) En dos vasos de precipitado de 200mL se colocaron 2 tiras (una x vaso) de 20x7 cm, al
vaso “A” se le agrego la mitad del filtrado de hojas verdes y se diluyo con 3mL de etanol
(para favorecer la elución), se dejó eluir durante media hora hasta que se observó la
separación de los componentes del filtrado (pigmentos). Lo mismo sucedió con el vaso “B”
pero este contenía filtrado de hojas rojas en lugar de verdes.
Xantofilas
α-Clorofila
β-Clorofíla
5) Del filtrado de hojas verdes (del restante del mortero) se tomó una alícuota de 5mL y
se realizó una dilución 1:30 con etanol para poder observar las muestras en el
espectrofotómetro. Lo mismo se realizó con el filtrado de hojas rojas.
6) Se colocó un poco de la dilución en la
celda y se procedió a hacer un barrido
leyendo la absorbancia de la muestra a
diferentes longitudes de onda (cada 10
nm) empezando en la longitud 400 y
terminando en la 750. Cada lectura se
ajustaba un blanco con etanol. Lo mismo
se realizó para la muestra de las hojas
rojas.
A
Absorbancia de pigmentos
0.6
0.5
B
0.4
ABSORBANCIA
E
0.3
0.2
D
0.1
C
F
0
400
410
420
430
440
450
460
470
480
490
500
510
520
530
540
550
560
570
580
590
600
610
620
630
640
650
660
670
680
690
700
710
720
730
740
750
LONGITUD DE ONDA (NANOMETROS)
La línea roja corresponde a las lecturas de hojas rojas y la línea verde a las lecturas de
hojas verdes.
En la gráfica existen 6 longitudes de onda importantes que revelan (al comparar con la
imagen 8) el pigmento presente en la muestra:
2) Se separó el material orgánico solido con ayuda de un papel filtro de poro abierto.
Los cloroplastos, al igual que las mitocondrias, son organelos que según la teoría
endosimbiotica fueron incluidos dentro de la célula eucariota primitiva, formando una
simbiosis, esto se cree debido a que contienen su propio material genético y estructuras,
así como dobles membranas. Los cloroplastos presentan una doble membrana externa y
un sistema de membranas interno, las membranas tilacoidales. Dentro de este organelo
ocurre un proceso llamado fotosíntesis, esta se divide en dos fases, la luminosa: se
realiza en la membrana de los tilacoides donde se halla la cadena de transporte de
electrones y la ATP sintasa responsable de la conversión de la energia lumínica en
energia química (ATP) y de la generación de poder reductor (NADPH). La fase oscura: se
produce en el estroma donde se halla el enzima RuBisCO responsable de la fijación de
CO2 mediante el ciclo de Calvin. (Karp, 2011)
CONCLUSIÓN
La fotosíntesis es un proceso metabólico muy importante debido a que por medio de este
se obtiene oxígeno y glucosa indispensables para los organismos heterótrofos, entender
el funcionamiento de los pigmentos que llevan a cabo este proceso y de las estructuras
celulares que los contienen, es de gran importancia para poder predecir y sintetizar
nuevos pigmentos que ayuden a la creación de moléculas importantes para los seres
vivos.
Se logró determinar las longitudes de onda a la cual absorben la luz en el rango de luz
visible (380-700 aprox.) los diferentes pigmentos presentes en las hojas de las plantas, los
cuales se compararon con las gráficas de absorbancia y así se identificó de que
pigmentos se trataba (alfa y beta clorofila y carotenos). Además se aisló y observo los
cloroplastos, que contenían dichos pigmentos.
CUESTIONARIO
Aunque tanto la clorofila a como la clorofila b absorben luz, la clorofila a tiene una
función única y crucial al convertir la energía de la luz en energía química (como
puedes ver en el artículo reacciones dependientes de la luz). Todas las plantas
fotosintéticas, algas y cianobacterias contienen clorofila a, mientras que solo las
plantas y algas verdes contienen clorofila b, junto con algunos tipos de
cianobacterias.
Para lograr ver los diferentes colores de los pigmentos que componen a una hoja.
clorofila b
clorofila a
xantofila
carotenos
BIBLIOGRAFÍA