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Profesor: PhD.

Gerardo Andrés Caicedo Pineda

06. Digestión intestinal de carbohidratos


Materiales que deben llevar los estudiantes: intestino delgado de res u oveja,
tijeras para cortar el intestino, filtro de café. Cada grupo trae su material.
Reactivos: reactivo de Benedict, reactivo de Barfoed, sacarosa al 5%, maltosa al
5%, lactosa al 5%, tolueno, agua destilada.
Vidriería: mortero, beaker de 500 mL y 100 mL, tubos de ensayo, pipetas
graduadas de 10 mL y 2 mL, gradilla para tubo de ensayo, termómetro, embudo.
Equipos: placa de calentamiento.
Prelaboratorio (aspectos a considerar para el informe)
¿Cuál es el objetivo de la práctica?
¿En qué se basan los procesos experimentales?
¿Qué antecedentes hay de las fases experimentales?
¿Qué resultados se espera(n) encontrar en la práctica?
¿Qué valores teóricos existen en la literatura, con los que se pueda comparar
los resultados obtenidos? (llevar estos datos el día de la práctica).
Procedimiento1
Extracción de las enzimas intestinales
Nota: de preferencia, el intestino debe ser de animal recién sacrificado. Se
requiere la primera porción (Duodeno) la cual se debe guardar en el congelador
hasta el momento de la práctica.
• Utilice 10 cm a 15 cm de duodeno. Córtelo a lo largo, con unas tijeras provistas
de buen corte. Lave el intestino, córtelo en pedazos muy pequeños y muélalo.
• Recoja el molido en un beaker. Agregue 50 mL de agua destilada y dos gotas
de tolueno. Haga todo el proceso lo más rápido posible, agitando bien durante
15 minutos.
• Filtre, a través del filtro de café. El líquido debe salir claro (contiene las
enzimas).
Acción enzimática
Tome 15 mL del líquido anterior y sométalo a ebullición durante 5 minutos.

1 Basado en: Míguez J. Prácticas de Bioquímica. UPTC. 1997.

I-2018
Profesor: PhD. Gerardo Andrés Caicedo Pineda

• Prepare tres pares de tubos de ensayo. En cada par, coloque 10 mL soluciones


al 5% de lactosa, maltosa y sacarosa, respectivamente.
• A un tubo de cada par agregue 2 mL de extracto intestinal sin hervir y al otro
2 mL de enzima hervida.
• Coloque todos los tubos a baño maría por 1 hora, manteniendo una
temperatura estable de 38 °C. Pasado ese tiempo, haga las pruebas de
Benedict y Barfoed en cada tubo. Anote los resultados.
Descripción de resultados
Se sugiere tener en cuenta los cambios de coloración de las pruebas, a la hora
del análisis. Así mismo, comprender el tipo de enzima que está trabajando y su
acción enzimática sobre los azúcares problema.

I-2018

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