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DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE CIENCIAS BÁSICAS

GUIA PRACTICA DE
PARASITOLOGÍA

Ciclo Biológico en Malaria

ALUMNO:…………………………………………….………….…………………

PROFESOR:…………………………………… DIA-GRUPO:…………………

LIMA-PERÚ 2018-II
FMH-USMP-Parasitología 2018

PROPIEDAD INTELECTUAL: Departamento Académico de Ciencias Básicas- USMP


RESPONSABLE DE LA ASIGNATURA: Dr. Arturo Pareja Cruz
COORDINADORA DE LA ASIGNATURA: Dra. Maritza M. Calderón Sánchez
GUIA ELABORADA POR: Dr. Juan A. Jiménez Chunga

LIMA - PERÚ
2018-II

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FMH-USMP-Parasitología 2018

CONTENIDO

Páginas
INTRODUCCION ............................................................................................................ 4
PRÁCTICA 1................................................................................................................... 4
NORMAS DE BIOSEGURIDAD .................................................................................... 4
PRÁCTICA 2................................................................................................................. 10
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO ............................................... 10
PRÁCTICA 3.................................................................................................................. 19
CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE ............................................................. 19
PROTOZOARIOS Y HELMINTOS INTESTINALES ................................................. 19
PRÁCTICA 4.................................................................................................................. 23
IDENTIFICACIÓN DE AMEBAS INTESTINALES .................................................. 23
Y DE VIDA LIBRE........................................................................................................ 23
PRÁCTICA 5.................................................................................................................. 31
IDENTIFICACIÓN DE FLAGELADOS Y ................................................................... 31
CILIADOS INTESTINALES ......................................................................................... 31
PRÁCTICA 6.................................................................................................................. 35
IDENTIFICACIÓN DE ESPOROZOARIOS INTESTINALES Y TISULARES ......... 35
PRÁCTICA 7.................................................................................................................. 42
IDENTIFICACIÓN DE FLAGELADOS HEMÁTICOS - TISULARES Y DEL
APARATO GENITOURINARIO .................................................................................. 42
PRÁCTICA 8.................................................................................................................. 47
IDENTIFICACIÓN DE ESPOROZOARIOS HEMÁTICOS ........................................ 47
PRÁCTICA 9.................................................................................................................. 51
IDENTIFICACIÓN DE TREMÁTODES ...................................................................... 51
PRÁCTICA 10-11 .......................................................................................................... 57
IDENTIFICACIÓN DE CÉSTODES INTESTINALES Y TISULARES ..................... 57
PRÁCTICA 12- 13 ......................................................................................................... 65
IDENTIFICACIÓN DE NEMÁTODOS INTESTINALES ........................................... 65
PRÁCTICA 14................................................................................................................ 72
IDENTIFICACIÓN MORFOLÓGICA DE ARTRÓPODOS ........................................ 72
ANEXOS ........................................................................................................................ 80
GLOSARIO .................................................................................................................. 118

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FMH-USMP-Parasitología 2018

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ......................................................................... 121

INTRODUCCION

La Parasitología es la disciplina que se encarga de estudiar el parasitismo producido


por protozoarios, helmintos, y artrópodos. El parasitismo se da entre un organismo
llamado parásito y otro denominado hospedero. El primero vive a expensas del
segundo y le causa daño.

Las enfermedades parasitarias, se presentan en todas las edades, aunque con


mayor frecuencia en niños. En las parasitosis influyen las condiciones sociales y
económicas; de hecho la pobreza conlleva casi siempre a que se presenten.
Actualmente la importancia de las parasitosis ha aumentado con la presencia de
inmunodeprimidos, y con el aumento de poblaciones migrantes. Las enfermedades
parasitarias clínicamente son muy variadas y van desde asintomáticas hasta fatales

El diagnóstico de los parásitos se fundamenta en la observación y el


reconocimiento de sus características morfológicas, macroscópicas y microscópicas,
obtenidas de muestras biológicas que faciliten la identificación del agente infeccioso
mediante la utilización de exámenes directos. Algunas parasitosis también pueden ser
diagnosticadas por exámenes indirectos o serológicos.

La finalidad de la parasitología en el campo de la Medicina es luchar contra los


parásitos tanto en el hospedero como en el medio para de esta forma controlar y o
disminuir su impacto en los organismos vivos y en el ambiente

El presente manual de Parasitología Humana tiene la finalidad de funcionar


como guía de trabajo, mediante el cual el estudiante conocerá, comprenderá y
analizará sus conocimientos en Parasitología, aplicando y desarrollando sus saberes
teóricos; debido a que en el laboratorio se requiere que trabajen en un ambiente de
respeto, responsabilidad y ética, haciendo uso de sus habilidades en el manejo de
equipo, así como en el desarrollo de metodologías, previo sustento teórico.

PRÁCTICA 1
NORMAS DE BIOSEGURIDAD

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FMH-USMP-Parasitología 2018

I. INTRODUCCIÓN

La bioseguridad es un conjunto de medidas probadamente eficaces para evitar


la adquisición accidental de infecciones con patógenos contenidos en las muestras, así
como los riesgos relacionados con la exposición a agentes químicos, físicos y/o
mecánicos a los que está expuesto el personal en los laboratorios.

Sólo si las personas que trabajan en los laboratorios conocen las normas de
bioseguridad y las aplican, pueden determinar su propia seguridad, la de sus
compañeros y de la colectividad. El personal de laboratorio debe cumplir con las
normas de bioseguridad y los directivos de la institución deben cumplir con brindar las
facilidades para que éstas sean aplicadas.

II. AGENTES DE RIESGO

El personal de laboratorio diariamente realiza muchas actividades que pueden


causar enfermedad o daño en él o en las personas que trabajen en ambientes
cercanos, e incluso en sus familiares y la comunidad.

Estas enfermedades pueden ser causadas por:

- Agentes biológicos, transmitidos por ingestión, inhalación, inoculación y por


contacto directo a través de piel o mucosas.

- Agentes físicos y mecánicos, como las temperaturas extremas, radiaciones


ionizantes, contactos eléctricos o conexiones defectuosas y vidrios
resquebrajados de recipientes dañados o tubos rotos.

- Agentes químicos que pueden ser corrosivos, tóxicos, carcinogénicos,


inflamables, explosivos.

III. PRINCIPIOS BÁSICOS DE BIOSEGURIDAD

- Universalidad:
Las medidas de bioseguridad deben involucrar a todas las dependencias
de la institución. Todo el personal, pacientes (si los hubiera) y visitantes deben
cumplir de rutina con las normas establecidas para prevenir accidentes.

- Uso de barreras:
Establece el concepto de evitar la exposición directa a todo tipo de
muestras potencialmente contaminantes, mediante la utilización de materiales o
barreras adecuadas que se interpongan al contacto con las mismas,
minimizando los accidentes.

- Medios de eliminación del material contaminado:

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Es el conjunto de dispositivos y procedimientos a través de los cuales se


procesan y eliminan muestras biológicas sin riesgo para los operadores y la
comunidad.

La mayoría de los accidentes están relacionados con:


• El carácter potencialmente peligroso de la muestra.
• Uso inadecuado de equipos de protección.
• Errores humanos. Malos hábitos del personal.
• Incumplimiento de las normas

IV. NIVELES DE CONTENCIÓN

El término contención se utiliza para describir métodos seguros para manejar


materiales infecciosos en el ambiente de laboratorio donde son manipulados o
conservados. El objetivo de la contención es reducir o eliminar la exposición de
quienes trabajan en laboratorios u otras personas y del medio ambiente externo a
agentes potencialmente peligrosos.

El elemento más importante de la contención es el cumplimiento estricto de las


prácticas y técnicas microbiológicas estándar de procesamiento de las muestras de
laboratorio. Cuando las prácticas de laboratorios no son suficientes para controlar los
riesgos asociados a un agente o a un procedimiento de laboratorio particular, es
necesario aplicar medidas adicionales. Estas medidas adicionales corresponden a los
equipos de seguridad diseñados para la protección del personal y prácticas de manejo
adecuadas (barrera primaria), un diseño de la instalación y características de la
infraestructura de los locales (barrera secundaria).

Estos niveles están definidos de la siguiente manera:

Contención Primaria:
Constituyen la primera línea de defensa cuando se manipulan materiales
biológicos, químicos y/o físicos.

Las barreras de contención primaria son:


• Equipos de protección personal (EPP).
• Técnicas de laboratorio estándar y normas de higiene personal.
• Inmunización (vacunación).
• Esterilización y desinfección de instrumentales y superficies.

Es la protección del personal y del medio ambiente inmediato contra la


exposición a agentes infecciosos y/o productos químicos de riesgo. Es provista por una
buena técnica microbiológica y el uso apropiado del equipo de seguridad. El uso de
vacunas aumenta el nivel de protección personal.

Contención secundaria:

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Se refiere al diseño y construcción de un laboratorio, lo que en seguridad


biológica se conoce como contención o barrera secundaria, contribuye a la protección
del personal de laboratorio, personas que se localizan fuera del laboratorio y protege a
las personas de la comunidad frente a posibles escapes accidentales de agentes
infecciosos.

En los laboratorios donde los niveles de bioseguridad son 1 y 2, las barreras


secundarias pueden incluir la separación del área de trabajo del laboratorio del acceso
al público, la disponibilidad de descontaminación (por ejemplo, autoclave) e
instalaciones para el lavado de las manos. En los niveles de bioseguridad 3 y 4, la
infección por exposición a aerosoles infecciosos es probable, aquí se utilizan las
máximas barreras de contención para evitar que el agente se escape hacia el medio
ambiente, los cuales incluyen sistemas de ventilación especializados para asegurar el
flujo de aire direccional, las zonas de acceso controladas, los sistemas de tratamiento
de aire, esclusas de aire en las puertas de acceso al laboratorio o edificios o módulos
separados para aislar el laboratorio.

V. CLASIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS POR GRUPO DE RIESGO

Agente biológico del grupo 1


Microorganismos que representan escaso riesgo para el individuo y la
comunidad, tienen pocas probabilidades de provocar enfermedades en el ser humano
o los animales. Ejemplo: Naegleria gruberi, entre otros.

Agente biológico del grupo 2


Microorganismos que representan riesgo moderado para el individuo y limitado
o bajo para la comunidad; pueden provocar enfermedades humanas o animales pero
tienen bajas probabilidades de entrañar un riesgo grave para el personal de laboratorio,
la población, el ganado o el medio ambiente. La exposición en el laboratorio puede
provocar una infección grave, pero existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces
y el riesgo de propagación es limitado por ejemplo existe disponibilidad de tratamiento
y medidas preventivas y el riesgo de diseminación está limitado. Ejemplo:
Acanthamoeba castellani,, Balantidium coli, Cryptosporidium spp. E. histolytica,
Giardia lamblia entre otros

Agente biológico del grupo 3


Microorganismos que representan riesgo elevado para el individuo y escaso
para la comunidad; usualmente causan enfermedades serias a humanos y animales
que resultan en importantes consecuencias económicas, la diseminación no es
ordinaria y depende del contacto casual de un individuo a otro, puede haber
disponibilidad de medidas preventivas y terapéuticas eficaces. Ejemplo: Echinococcus
granulosus , Taenia solium Trypanosoma cruzi.

Agente biológico del grupo 4


Microorganismos que representan riesgo elevado para el individuo y para la
comunidad; causa serias infecciones a humanos o animales, en ocasiones sin
tratamiento y puede transmitirse fácilmente de un individuo a otro, o de un animal a
humano o viceversa directa o indirectamente o por contacto casual; normalmente no

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existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces. Ejemplo: Ebola, Hanta, virus de la


rabia de murciélagos,, Junin, entre otros.

VI. TIPOS DE LABORATORIO CON RELACIÓN AL NIVEL DE BIOSEGURIDAD


(NBS)

NBS 1:
A esta categoría pertenecen todos los laboratorios de investigación y servicio de
apoyo en los que no se procesen muestras frescas de origen humano. Es adecuado
para trabajos que involucran agentes biológicos de riesgo 1.

Estos laboratorios no necesitan de infraestructura de contención especial y en


ellos sólo son de aplicación las buenas prácticas microbiológicas ya que el riesgo
biológico es nulo o insignificante. El personal de laboratorio cuenta con una
capacitación específica acerca de los procedimientos realizados en el laboratorio y es
supervisado por una persona con capacitación general en microbiología o una ciencia
relacionada

NBS 2:
A esta categoría pertenecen todos los laboratorios de investigación y servicios
de apoyo en los que se procesen muestras frescas o cultivos celulares de origen
humano o de otros primates para los cuales no sea exigible un nivel de contención
superior. Es adecuado para trabajos que involucran agentes biológicos de riesgo 2.

Estos laboratorios necesitan de cierta infraestructura de contención biológica y


de una normativa y control especiales ya que en ellos existe riesgo biológico aunque
éste es de bajo nivel. Es necesario establecer ciertas barreras entre el material
biológico y el personal expuesto, manteniendo también determinadas medidas de
contención que impidan el escape de material biológico al medio ambiente exterior.

NBS 3:
Se utiliza para trabajar con agentes nativos o exóticos que tienen potencial de
ser transmitidos por vía respiratoria (aerosol) y que pueden causar infecciones serias y
potencialmente letales. Es adecuado para trabajos que involucran agentes biológicos
de riesgo 3. Los materiales potencialmente infectados con estos agentes pueden ser
estudiados a nivel de NBS-2 sólo para efectos de diagnóstico, pero la manipulación y
experimentación posteriores requieren de condiciones NBS -3.

Las barreras protectoras primarias y secundarias para este tipo de laboratorio


hacen énfasis en la protección del personal de laboratorio, así como también de
personal en áreas cercanas, la comunidad y el medio ambiente, frente a aerosoles
potencialmente infecciosos.
Las barreras primarias son similares al equipamiento protector personal de
NBS-2, pero pueden también incluir equipo respiratorio si existe riesgo de infección a
través de inhalación. Las barreras secundarias en laboratorios NBS-3 incluyen las
barreras de NBS-2 además de algunas otras barreras un poco más sofisticadas. Los
corredores deben estar separados del acceso directo al laboratorio. El acceso debe ser
a través de puertas dobles que se cierren solas. Los sistemas de aire deben estar

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diseñados para asegurar que el flujo de aire negativo , para que el aire alrededor de
puertas y ventanas fluya hacia el laboratorio en lugar de hacia fuera del laboratorio. El
aire bombeado hacia el interior del laboratorio no recircula al interior del edificio. Esta
medida evita que se lleven aerosoles infecciosos fuera del laboratorio a través del aire.

NBS 4:
Se utiliza para trabajar con agentes peligrosos y exóticos que poseen un alto
riesgo de infección y riesgosos para la vida, y agentes altamente infecciosos de
transmisión por vía aérea. También se estudian en estos laboratorios agentes
relacionados con riesgo de transmisión desconocido. Estos agentes suponen un alto
riesgo de enfermedad mortal, pueden ser transmitidas por vía aerosol (respiratoria) y
no tienen vacuna o terapia disponible. Este NBS permite manipular agentes
biológicos del grupo 4.

El personal que trabaja con estos agentes debe recibir entrenamiento


especializado para el manejo de agentes infecciosos extremadamente peligrosos y en
el funcionamiento de los equipos de contención. Además, el acceso al laboratorio está
restringido. Las prácticas de laboratorio para el NBS-4 incluyen todas las prácticas
NBS-3, más: Acceso estrictamente controlado al laboratorio, cambio de ropa antes de
entrar y salir del laboratorio y descontaminar todo el material al salir del lugar.

Las barreras primarias incluyen la realización de procedimientos en gabinetes


de bioseguridad usados en los otros niveles de bioseguridad en combinación con un
traje que cubre todo el cuerpo, con oxigeno y presión positiva. Así, los trabajadores de
laboratorios de NBS-4 no entran al laboratorio a menos que estén usando un “traje
especial”. Las barreras secundarias incluyen todas las barreras físicas de los
laboratorios NBS -3 más: Una zona aislada o un edificio separado, sistemas de entrega
y escape, vacío, sistemas de descontaminación y ausencia de ventanas es
recomendada, cualquier ventana debe ser sellada y debe ser resistente al rompimiento.

VII. PRECAUCIONES DE TRABAJO

1. Las puertas del laboratorio deberán estar cerradas y el acceso al mismo deberá
estar restringido mientras se lleven a cabo trabajos con materiales biológicos.
La puerta deberá portar emblemas que digan: "Prohibido pasar, Peligro
biológico".
2. El laboratorio deberá ser mantenido limpio, ordenado y libre de materiales
extraños.
3. No se permitirá comer, beber, fumar y/o almacenar comidas así como el uso de
cualquier otro ítem personal (Ej. cosméticos, cigarrillos) dentro del área de
trabajo.
4. Usar bata, chaqueta o uniforme dentro del laboratorio. Esta ropa protectora
deberá ser quitada inmediatamente antes de abandonar el área de trabajo.
5. Antes de iniciar la tarea diaria asegúrese que la piel de sus manos no presente
cortes, raspones y otras lastimaduras, en caso que así sea cubrir la herida de
manera conveniente antes de colocarse los guantes.
6. Usar guantes de látex de buena calidad para todo manejo de material biológico
o donde exista un potencial el riesgo de exposición a sangre o fluidos

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corporales. Cambiar los guantes de látex toda vez que hayan sido
contaminados, lavarse las manos y ponerse guantes limpios. Una vez usados
los guantes de látex deberán ser colocados dentro del recipiente con solución
decontaminante.
7. No tocar los ojos, nariz o piel con las manos enguantadas.
8. No abandonar el laboratorio o caminar fuera del lugar de trabajo con los
guantes puestos.
9. El uso de agujas, jeringas y cualquier otro instrumento similar deberá ser
restringido a su uso indispensable. Las agujas y otros elementos punzantes
deberán ser descartados en un recipiente resistente y destinado a tal fin.
10. Todas las muestras deben ser tratadas como altamente infecciosas para evitar
posibles contagios.
11. Los procedimientos deberán ser realizados de manera tal que sea nula la
creación de aerosoles, gotas, salpicaduras, etc.
12. Bajo ninguna circunstancia se pipeteará sustancia alguna con la boca, para ello
se usarán pipeteadores automáticos.
13. Las superficies del área de trabajo deberán ser decontaminadas cuando se
termine la tarea diaria. Usando para tal efecto una solución de hipoclorito de
sodio en concentración adecuada.
14. El recipiente para decontaminar especimenes deberá contar con tapa de
seguridad para todo traslado fuera del lugar de trabajo. En ese caso el exterior
del recipiente deberá ser mantenido libre de toda contaminación con sangre
usando solución decontaminante.
15. El desecho de los fluidos orgánicos puede efectuarse por las cañerías
habituales una vez que estos hayan sido convenientemente decontaminados.
16. Lavar las manos con jabón (líquido o sólido suspendido) y agua inmediatamente
después que el trabajo haya sido terminado. Si los guantes de látex están
deteriorados, lavar las manos con agua y jabón después de quitarlos.
17. Informe inmediatamente a su superior de cualquier accidente ocasionado con
elementos del laboratorio.

PRÁCTICA 2
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO

I. INTRODUCCIÓN:

Las parasitosis son un gran problema de Salud Pública, afectan a la población,


principalmente a los niños en su desarrollo físico y mental, ya que son los más

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vulnerables. La transmisión y el mantenimiento de la población es el resultado de un


proceso interactivo entre el agente, el medio ambiente y el huésped humano.

Es posible identificar el agente a través de métodos de diagnostico


parasitológico. Hoy en día, existen innumerables técnicas eficaces y apropiadas para la
detección de estos organismos nocivos al hombre, ya que el tratamiento médico
adecuado que se va a administrar a un individuo infectado, no debe basarse sólo en los
datos obtenidos a partir de la sintomatología, pues en parasitosis causadas por
diferentes agentes, se observan manifestaciones muy similares, y en muchos de los
casos, los síntomas presentados por el paciente, son demasiado escasos para
establecer el diagnóstico de certeza.

II. MÉTODOS DIAGNÓSTICOS DE ENTEROPARÁSITOS

Puesto que el diagnóstico de la parasitosis intestinal depende del hallazgo de


huevos o larvas de helmintos y quistes o trofozoítos de protozoos en heces, la
colección y el manejo adecuado de las muestras son indispensables para la búsqueda
e identificación de los parásitos en el laboratorio.

Hay que tener en cuenta que la ingestión de medicamentos previa a la


colección y las muestras viejas o conservadas en forma inadecuada, son factores que
interfieren en el examen. La cantidad de heces para un examen rutinario es del tamaño
de una nuez o de cinco a seis cucharadas. Las muestras se depositan en un recipiente
de boca ancha, con tapa hermética y limpia, no debe contaminarse con agua, orina o
cualquier otro material extraño; no debe obtenerse de la taza del bañó, ni del suelo. En
lactantes, la muestra se obtiene mediante la cucharilla recta.

Las muestras deben ser etiquetadas con el nombre del paciente, hora de
colección y fecha. Generalmente se recomienda examinar tres muestras en serie y en
días sucesivos. Las heces blandas, diarreicas y líquidas, deben examinarse dentro de
las primeras horas de haber sido colectadas, si esto no es posible, las heces deben
depositarse en una solución conservadora. Ej.: Formol 10%, alcohol polivinilico (PVA),
merthiolate – yodo (MIF) o fenol-alcohol-formol (PAF). Las heces formadas pueden ser
examinadas durante el mismo día de su colección. Si no es posible pueden ser
refrigeradas durante 24 horas o conservadas (una parte de material fecal por tres de la
solución conservadora).

2.1. EXAMEN DIRECTO:

Principalmente se busca en muestras frescas, la presencia de formas evolutivas


de parásitos de tamaño microscópico sean estos trofozoítos, quistes de protozoos:
Entamoeba histolytica, Giardia intestinalis, Balantidium coli, etc.; así como larvas
(Strongyloides stercoralis), o huevos de helmintos: Ascaris lumbricoides, Trichuris
trichiura, Hymenolepis nana, Taenia sp., Fasciola hepatica, etc..

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Es imprescindible el reconocimiento de los elementos normales (no


parasitarios), ya que son causa de errores frecuentes en observadores poco
experimentados, esos suelen ser estructuras reconocibles y otras no, fruto de la
ingestión de alimentos. Las más frecuentes son: Fibras vegetales, Cristales de oxalato
de calcio,Granos de almidón, esporas de hongos, fosfato amónico–magnesio, granos
de polen, fibras musculares lisas, fibras musculares estriadas, cristales de ácidos
grasos, entre otros, en este sentido los residuos alimenticios presentan grandes
variaciones de forma y tamaño y tienen contornos irregulares. Esto no sucede con los
elementos de origen parasitario, los cuales presentan además estructuras nítidas y
regulares en cuanto a su contenido y disposición, que pone de manifiesto una
verdadera organización.

Materiales:
- Muestras de heces frescas/fijadas en formol 10%
- Lámina portaobjeto y laminilla cubreobjeto.
- Mondadientes
- Guantes y mascarillas
- Suero fisiológico (SF) 0.85%
- Lugol
- Papel lente
- Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol)
- Microscopio de luz

Procedimiento:
- Recolecte la muestra de heces en un envase limpio y tápela. Asegúrese de no
mezclar papel higiénico u orina con la muestra.
- Transporte la muestra hasta el laboratorio a temperatura ambiente.
- Coloque una gota de salina en una lámina portaobjeto.
- Añada una cantidad pequeña de muestra de heces utilizando un aplicador de
madera y mézclela con la solución salina. Proceda igual agregando lugol.
- Sitúe un cubreobjetos sobre la muestra y examine bajo el microscopio (10X y/o
40X).
- Evalué la muestra y determine si hay parásitos presentes. El diagnóstico
definitivo se logra demostrando la presencia de parásitos. En algunas ocasiones
es necesario hacer exámenes repetidos en días consecutivos antes de
establecer que la muestra está negativa.

Diagnostico parasitológico directo

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2.2. MÉTODOS DE CONCENTRACIÓN:

Este método permite concentrar quistes de protozoarios, larvas y huevos de


helmintos contenidos en las heces, para obtener una mayor cantidad de parásitos
mediante centrifugación, sedimentación, o flotación. Las más usadas son
Sedimentación espontánea, Ritchie, Willis, Faust, entre otras.

A. Métodos de Flotación:

Técnica de Willis:

Este método se basa en la propiedad que tiene algunos quistes de protozoarios


y huevos de helmintos de flotar en la superficie de una solución saturada de cloruro de
sodio debido a su menor densidad.

Materiales:
- Muestra de heces fresca.
- Tubo de ensayo y gradillas
- Lámina portaobjeto y cubreobjeto.
- Guantes y mascarillas
- Solución saturada de Cloruro de sodio (NaCl)
- Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol)
- Lugol.
- Microscopio de luz.

Procedimiento:
- Colocar en un tubo de prueba uno o dos gramos de heces. Añadir 4 ml de
solución saturada de NaCl. Emulsionar con una bagueta y completar con la
misma solución el tubo hasta que en el borde se forme un menisco, déjelo
reposar durante 20 minutos.
- Se toma la muestra cubriendo el tubo con un cubreobjeto, en el se adhieren los
protozoarios. Hacer una observación microscópica de la muestra en una lámina
con lugol.

B. Método de centrifugación y flotación:

Técnica de Faust modificada:

Se basa en que los quistes y/o huevos de los parásitos flotan en la superficie
por ser de menor densidad que el sulfato de zinc a 33,3%, cuya densidad es 1,180. Es
útil para la búsqueda de quistes y/o huevos de parásitos y excepcionalmente se
observan larvas. Se recomienda controlar la densidad del sulfato de zinc y usar agua
filtrada para el lavado previo de la muestra.

Materiales:

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- Tubo de ensayo 13 x 100 mm


- Gradillas
- Sulfato de Zinc USP 33,3 g
- Agua destilada tibia 100 ml
- Muestra de heces frescas
- Guantes y mascarillas
- Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol)
- Lugol
- Microscopio de luz

Procedimiento:
- Preparar una suspensión fecal en un tubo de prueba, completar el volumen a 10
ml con agua destilada.
- Centrifugar a 2500 RPM durante un minuto y decantar el sobrenadante; repetir
el procedimiento anterior tres veces (hasta que el sobrenadante este claro).
- Agregar la solución de sulfato de zinc 2 ml, mezclar bien y completar con la
misma solución.
- Centrifugar a 2500 RPM.
- Luego con un asa de platino tomar una o dos asadas del material flotante
(superficie) y colocarlo una lámina portaobjeto.
- Agregar una gota de lugol y cubrir la preparación con una laminilla cubreobjeto
- Observar al microscopio.

Técnica de Faust

C. Método de concentración por sedimentación:

Técnica de Ritchie:

Se basa en la concentración de quistes y huevos por sedimentación mediante la


centrifugación, con ayuda de formol (fijador) y éter (disuelve las grasas de las heces)
para separar y visualizar los elementos parasitarios.

Materiales:
- Tubo centrifuga 13 x 100 mm
- Gradillas

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- Éter sulfurico
- Formol
- Solución salina
- Muestra de heces
- Guantes y mascarillas
- Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol)
- Lugol
- Centrifuga
- Microscopio de luz

Procedimiento:
- Se mezcla 1 g de heces con 8 ml. de solución salina en un tubo. Homogenizar.
Centrifugar a 2000 RPM (revoluciones por minuto) por 2-3 minutos y decantar
(repetir 2 veces, hasta que el sobrenadante este claro).
- Decantar el sobrenadante y agregar al sedimento 6 ml. de formol al 10%.
Homogenizar. Reposar 5 minutos.
- Luego se agrega 3 ml. de éter sulfúrico y se agita con cuidado (usar un tapón).
- Centrifugar 3 min. a 3000 RPM.
- Se rompe la capa de detritus y se decanta.
- Se toma una gota del sedimento y se prepara el examen directo con lugol.

Técnica de Ritchie

2.3. MÉTODOS ESPECIALES:

Test de Graham:

Se usa para la búsqueda de huevos de Enterobius vermicularis, ya que los


huevos no se encuentran habitualmente en material fecal. Esto se debe a que las
hembras adultas migran, a través de ano, hasta la zona perianal, lugar en el que
depositan los huevos. Este proceso se desarrolla, generalmente, durante la noche. Los
huevos de E. vermicularis son muy contagiosos. Realice la toma de muestras
extremando las medidas de higiene.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

Materiales:
– Láminas portaobjetos desengrasadas.
– Cinta adhesiva transparente o cinta “scotch” de 1 pulgada de ancho.
– Solución salina o tolueno.

Procedimiento:
Consiste en aplicar el lado adhesivo de un pedazo de cinta sobre el área peri anal,
despegar el mismo y volver a pegarlo sobre la lámina portaobjeto.

– Por la mañana, antes de levantarse el paciente, se separan las nalgas y se


hace presión hacia ambos márgenes, para que en la cara engomada queden
adheridos los huevos.
– La cinta adhesiva se coloca sobre un portaobjetos con la cara engomada hacia
el cristal, y se envía al laboratorio en un sobre o envuelto en varias capas de
papel
– En el laboratorio, se desprende la cinta engomada del frotis perianal por un
extremo, se agrega solución de tolueno, hidróxido de sodio 2% o solución salina,
aplicando 1 ó 2 gotas de la sustancia elegida que clarificará la muestra y que
permitirá una mejor observación de los huevos y/o adultos de E.vermicularis. Es
necesario observar la lámina en su totalidad. En ocasiones, se pueden observar
al microscopio, huevos de otros helmintos, principalmente huevos de Taenia sp.,
Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura entre otros.

Test de Graham
III. MÉTODOS DIAGNÓSTICOS DE HEMO E HISTOPARÁSITOS:

Después de las heces, la sangre es la muestra más estudiada. Los métodos


directos van desde la microscopia (“estándar”) hasta el diagnostico molecular y los
indirectos son el serodiagnóstico.
En la microscopia las técnicas más empleadas son: Extensión fina y preparación de
gota gruesa, estas se basan en la búsqueda de parásitos circulantes en pacientes que
están en fase aguda de la infección. Son de utilidad en el diagnóstico de
Tripanosomiasis americana (Enfermedad de Chagas) malaria y entre otras.
emplean las siguientes técnicas:

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FMH-USMP-Parasitología 2018

Para estas técnicas se utiliza sangre extraída del pulpejo del dedo o de la vena
en este caso se debe utilizar con anticoagulante y las preparaciones pueden ser
hechas en extensión o frotis en gota gruesa.

Frotis:

- Se prepara de modo que las células sanguíneas se dispongan planas sobre la


superficie del vidrio.
- Se pretende que las células no se amontonen, que su espesor no supere una
célula.
- Todos los elementos quedan un poco aplanados ( tamaño).
- Las proteínas séricas (incluyendo la hemoglobina) deben fijarse previamente
- Estas preparaciones son muy útiles para estudiar detalles de hematíes y
parásitos sanguíneos.
- Principal limitación: Escasa cantidad de sangre estudiada.

Gota gruesa:

- Contiene entre 6-20 veces más cantidad de sangre que la extensión.


- Se extiende sobre un área de aproximadamente 15 x 12 mm.
- No se fija antes de la tinción.
- Se somete a un tratamiento de deshemoglobinización.
- La rotura de los hematíes y la pérdida de su hemoglobina permite la
observación microscópica de otras estructuras, incluyendo parásitos.
- Resulta útil para diagnóstico rápido de parasitemias leves.
- No es muy adecuado para estudios morfológicos finos.

Importante:

- Portaobjetos limpios y bien desengrasados.


- Sangre fresca.
- Punción dedo.
- Punción lóbulo de la oreja.
- Punción venosa  Realización inmediata.
- Realización extensión.
- Secado  al aire  Eventualmente estufa 37º C.
- Fijación (previa a tinción) o no.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

Métodos de investigación de parásitos hemáticos

Coloración de gota gruesa:

- Para colorear con Wright, la preparación debe ser previamente hemolizada,


para lo cual a la preparación ya seca, se le agrega agua y se deja un tiempo
hasta que toda la hemoglobina de los glóbulos pase al agua.
- Verter el agua suavemente y dejar secar.
- Colorear en la forma indicada para el frotis.
- Si se usa el colorante Giemsa, se sumerge el portaobjeto en el colorante, sin
hemólisis previa, luego del tiempo necesario (variable según el colorante) se
lava con cuidado y se deja secar.

Coloración de frotis con colorante Wright:

- Cubra el frotis con el colorante.


- Déjelo actuar 1 o 2 minutos (El alcohol metílico que es el disolvente del
colorante actúa como fijador)
- Luego agregue una gota de agua taponada y sin que se derrame mezcle bien
soplando suavemente, deje reposar de 5 a 7 minutos,
- Lavar con chorro débil de agua corriente y déjese secar.
- Observar con objetivo de inmersión y aceite de inmersión.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

PRÁCTICA 3
CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE
PROTOZOARIOS Y HELMINTOS INTESTINALES

I. INTRODUCCIÓN

El intestino humano puede ser parasitado por una amplia diversidad de


protozoos y helmintos. La incidencia de estas infecciones es especialmente elevada en
aquellas regiones geográficas de climas cálidos y húmedos donde existen condiciones
higiénico-sanitarias deficientes que favorecen las distintas formas de transmisión. Su
trascendencia clínica es muy variable, dependiendo del parásito involucrado y el grado
de infestación

Los parásitos intestinales se identifican rutinariamente por sus características


morfológicas en los análisis de laboratorio de la materia fecal, conocidos como examen
coprológico, mediante observación microscópica en montajes húmedos con solución
salina o lugol. También se pueden hacer extendidos para realizar posteriormente
coloraciones permanentes, como la coloración de hematoxilina férrica o la coloración
tricrómica de Gomori, los cuales facilitan la identificación al revelar detalles
estructurales no detectables en los montajes húmedos. En algunos casos se pueden
tomar biopsias intestinales para identificar la patológia producida por el parásito y
observarlo en el tejido.

En el intestino humano se pueden encontrar protozoos patógenos y protozoos


comensales, la aparición de estos últimos puede deberse a varios factores como son
las condiciones de salubridad e higiene y factores inmunológicos; su aparición, aunque
no amerita tratamientos para su erradicación, puede dar una idea de estas condiciones
en los pacientes.

Los protozoos intestinales se presentan generalmente bajo tres formas de vida:


El trofozoito o forma vegetativa, que generalmente es el que produce la patología; el
quiste o forma de resistencia que desarrolla el parásito para poder sobrevivir en
condiciones adversas y el prequiste que es una forma intermedia.

Existen tres grupos de helmintos de importancia medica: Nematodes, Cestodos


y Trematodos. Los estadios que normalmente aparce con las tecnicas de diagnostico
son los huevos y las larvas. Con frecuencia pueden verse gusanos adultos y
obervacion de segmentos o proglotidos. No obstante, en la mayoria de la infecciones,
la identificacion se basa en los huevos.

II. MATERIAL

- Heces frescas/fijadas en formol 10% (pool de parasitos)


- Pipetas, baguetas, guantes, mascarilla
- Suero fisiológico 0.85% y lugol
- Aceite de inmersión, láminas portaobjeto y laminillas cubreobjeto

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FMH-USMP-Parasitología 2018

- Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol)


- Microscopio de luz
- Papel lente

III. PROCEDIMIENTO:

Realizar método directo para la observación de estructuras parasitarias. Las


observaciones se realizaran con objetivos de 100X y 400X de aumento

IV. CARACTERÍSTICAS DE ALGUNOS ESTADIOS DE PARÁSITOS


INTESTINALES:

Conocer microscópicamente las características morfológicas de los principales


parásitos del intestino humano en extendidos de materia fecal en montaje húmedo.
(Figura 1 y 2).

1. Quiste de Entamoeba coli:


Es ovalado o redondeado, mide de 10 a 30 micras (µm) de diámetro,
con más de cinco núcleos, y en ocasiones presencia de barras cromidiales
finas como astillas en el citoplasma. En las preparaciones teñidas con lugol se
suele apreciar vacuolas yodófilas.

2. Quiste de Endolimax nana:


Es quiste oval o redondeado, mide de 5 a 10 µm de tamaño,
generalmente, presenta cuatro núcleos. La preparación teñida con lugol permite
observar los núcleos como puntos más brillantes.

3. Quiste de Iodamoeba butschlii:


Es de forma irregular, mide de 5 a 14 µm, Tiene un solo núcleo, el cual
presenta una cariosoma grande. Presenta una vacuola que en preparación
con lugol, se aprecia teñida (color marrón) debido a su contenido de glicógeno
(vacuola yodófila).

4. Quiste de Giardia intestinalis:


Es de forma ovalado con doble membrana, mide de 10 a 12 µm en su
diámetro mayor, se distinguen de dos a cuatro núcleos, el axostilo y en
ocasiones los cuerpos parabasales.

5. Quiste de Chilomastix mesnili :


Es de forma redondeada con una prominencia que lo asemeja a un
limón, mide de 6 a 9 µm, presenta doble membrana y en su interior se observa
un surco.

6. Blastocystis hominis:
Es de forma esférica, mide de 4 a 20 µm. Presenta gran vacuola central
que ocupa el 50 a 95% de las células y restringe el citoplasma a un espacio
periférico que contiene los núcleos en número de 2 a 5.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

7. Huevo de Ascaris lumbricoides:


Es de forma ovalada con cubierta mamelonada. Identificar huevo: Fértil,
infértil, decorticado.

8. Huevo de Trichuris trichiura:


Son de forma elíptica, de color parduzco cuya dimensión alcanza de 40
a 50 µm en su diámetro mayor. Presentan una envoltura gruesa y con tapones
en ambos polos.

9. Huevo de Enterobius vermicularis:


Se distinge la forma plana-convexa a cada lado. Su tamaño alcanza de
50 a 60 µm de largo por 20 a 30 µm de ancho; en el interior se reconoce la
larva.

10. Huevo de Taenia sp:


Es de forma esférica, mide de 35 a 40 µm. Presentan una cáscara
gruesa y radiada conteniendo un embrión hexacanto u oncósfera en el que se
distingue los ganchos.

11. Huevo de Diphyllobotrium sp:


Es de forma ovalada, se distingue en ellos una cubierta lisa y en uno de
sus polos el opérculo. Los huevos de D. pacificum miden 50-60 x 36-40µm, más
pequeñas que D. latum (59-75 x 42-45µm).

12. Huevo de Hymenolepis nana :


Es de forma ovalada, mide de 30 a 40 µm de diámetro, que se
caracteriza por presentar corteza transparente. Presenta dos mamelones
polares de donde nacen tres pares de filamentos, contiene un embrión
hexacanto con ganchos dispuestos en paralelo.

13. Huevo de Fasciola hepática:


Es de forma ovalada, mide de 120 a 150 µm. Presenta una cubierta
gruesa y en uno de sus polos el opérculo.

14. Huevo de Uncinarias (Ancylostoma duodenale y Necator americanus):


Son de forma oval, miden de60 a 70 µm por 30 a 40 µm . Presentan
cáscara delgada y traslúcida y con blastómeros.

Las uncinarias son conocidos como anquilostomideos, se localizan en el


intestino delgado del hombre sobre todo en el yeyuno. El término uncinaria se
refiere a la curvatura del extremo anterior a manera de gancho, con cápsula
bucal con dientes (Ancylostoma) o placas cortantes (Necator).

15. Larva rabditiforme de Strongyloides stercolaris:


Miden aprox. 200 µm de longitud; en la parte anterior localice cápsula
bucal corta y un esófago con un bulbo posterior.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

ESQUEMAS (PRÁCTICA 3)

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FMH-USMP-Parasitología 2018

PRÁCTICA 4
IDENTIFICACIÓN DE AMEBAS INTESTINALES
Y DE VIDA LIBRE

I. INTRODUCCIÓN:

Las amebas son organismos eucariontes unicelulares. Presentan locomoción


por seudópodos. Su ciclo biológico incluye generalmente dos fases: trofozoíto (forma
móvil y vegetativa) y quiste (forma inmóvil y de resistencia). El citoplasma se divide en
una masa central granular denominada endoplasma y una capa externa más clara
llamada ectoplasma. Su reproducción es por fisión binaria . La forma infectante es el
quiste mientras que las formas diagnósticas son tanto quistes como trofozoítos.

Las amebas intestinales se transmiten principalmente por el consumo de agua


contaminada y/o alimentos con excremento de una persona infectada. Viven en el
intestino grueso y pueden llegar a invadir e incluso lesionar capas internas de la
mucosa intestinal, llegando a producir úlceras o perforaciones. Las infecciones por
amebas de vida libre constituyen una de las infecciones oportunistas emergentes del
mayor interés médico, aunque su frecuencia es baja, se han descrito en casi todo el
mundo. Estas amebas se encuentran distribuidas en la naturaleza, se han detectado en
redes públicas de agua, albercas, estanques, lagos, ríos, etc , y son capaces de
llegar a órganos como el pulmón, o cerebro debido a que están provistas de un
poderoso grupo de enzimas con las que pueden abrirse paso entre tejidos.

El hombre puede ser infectado por las siguientes especies de amebas


intestinales: E. histolytica, E. coli, Endolimax nana, Iodamoeba butschlii, entre otras.
Estas amebas generalmente se comportan como comensales; sólo E. histolytica
puede producir alteraciones más o menos severas, afección conocida con el término de
amebiasis. Respecto a las amebas de vida libre, existen 3 géneros asociadas a
enfermedad en humanos: Naegleria, Acanthamoeba y Balamuthia,; aunque diversas
especies pertenecientes al genero Acanthamoeba son capaces de producir
enfermedad, A. castellanii, Naegleria fowleri y Balamuthia Mandrillaris, han sido
identificadas como causantes de enfermedad en humanos.

II. MATERIALES:

– Láminas coloreadas y montadas


– Aceite de inmersión
– Microscopio.

III. PROCEDIMENTO:

Agregar a cada lámina coloreada una gota de aceite de inmersión y observarla con
aumento de 100 X.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

IV. AMEBAS INTESTINALES:

La vía de infección de estas parasitosis es la oral - fecal y el mecanismo de


transmisión es la ingestión de alimentos contaminados con quistes ya estos que
permanecer viables por semanas, dependiendo de las condiciones ambientales Los
quistes son resistentes a los jugos gástricos y ya en el organismo de su huésped se
transforman en trofozoítos y se establecen en el colon. (Figura 3)

4.1. AMEBA PATÓGENA:

Entamoeba histolytica:

Amebiasis es el nombre de la enfermedad causada por la ameba Entamoeba


histolytica, un protozoario que puede causar graves síntomas gastrointestinales, como
diarrea sanguinolenta y absceso en el hígado.

Características morfológicas:

- Trofozoíto:
Forma vegetativa, vive en el intestino grueso del ser humano pudiendo
invadir y atravesar la mucosa intestinal. Mide de 20 a 40 µm. El trofozoíto
ameboideo con membrana citoplasmática. Presenta un citoplasma dividido en
una parte externa hialina y transparente casi sin granulaciones (ectoplasma) y
otra interna muy granulada con orgánulos celulares (endoplasma). El núcleo es
esférico y con cromatina muy pequeña en el centro (puntiforme), llamado
cariosoma. Además presenta cromatina adherida a la cara interna de la
membrana nuclear, distribuida en forma más o menos homogénea .

- Quiste:
Forma de resistencia, se eliminan al exterior con las heces. Mide de 10 a
20 µm de diámetro. El quiste maduro tetranucleado es la forma infectante y Los
estadios de prequiste presentan de 1 a 2 núcleos. Las características
nucleares son las descritas en la forma vegetativa. Se observan cuerpos
cromidiales con extremos romos .

Diagnóstico parasitológico:

Examen microscópico de muestra de heces para demostrar la presencia de


trofozoítos o quistes mediante el examen directo de la muestra en solución salina,
lugol o coloración (tricrómica de Gomori o hematoxilina férrica) o su demostración en
biopsia de la mucosa intestinal o hepática. E. histolytica también puede ser
diagnosticada por métodos serológicos o indirectos

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FMH-USMP-Parasitología 2018

4.2. AMEBAS NO PATÓGENAS

Entamoeba coli

Características morfológicas

- Trofozoíto:
Se ubica en el ciego y colon y su incidencia es muy alta. Mide de 20 a
30 µm. Coloreado con hematoxilina férrica se observa un citoplasma granular
indiferenciado. Bacterias en las vacuolas alimenticias. El nucleo presenta un
cariosoma grande y excéntrico, cromatina alrededor de la membrana nuclear
dispuesta en masas grandes e irregulares.

- Quiste:
Mide de 15-30 µm. Redondeados u ovales con doble envoltura. Ocho
núcleos como máximo, visibles fácilmente. En los quistes inmaduros se
observan los cuerpos cromidiales en forma de aguja y haces de extremos
irregulares. Vacuolas de glicógeno de color caoba al teñirse con lugol.

Diagnóstico parasitológico:

Examen microscópico de muestra de heces, para demostrar la presencia de


trofozoítos o quistes mediante el examen directo de la muestra en solución salina, lugol
o coloración (tricrómica de Gomori o hematoxilina férrica).

Iodamoeba butschlii

Características morfológicas:

- Trofozoíto:
Se ubica en el intestino grueso del hombre. Mide de 8 a 20 µm. Los
seudópodos pueden ser romos o en forma de dedo. Presentan núcleo único,
que no se ve en preparaciones sin teñir; cuando se tiñe el cariosoma es grande
y casi siempre central, carece de cromatina periférica. El citoplasma es granular
grueso, vacuolado y puede contener bacterias, levadura u otros detritos.

- Quiste:
Mide de 5-20 µm, Los quistes maduros tienen un solo núcleo, no visible
en preparaciones sin teñir o tenidas con yodo. Con tinciones permanentes el
núcleo contiene un cariosoma grande por lo general excéntrico. La
característica más destacada es la presencia de una masa de glucógeno
compacta en el citoplasma, esta vacuola no se tiñe en coloraciones
permanentes, pero aparece como una masa bien definida.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

Diagnóstico parasitológico:

Examen microscópico de muestra de heces, para demostrar la presencia de


quistes mediante el examen directo de la muestra en solución salina, lugol o coloración
(tricrómica de Gomori o hematoxilina férrica).

Endolimax nana:

Características morfológicas:

- Trofozoíto:
Es la ameba más pequeña del intestino. Mide de 6-12 µm. Los núcleos
son característicos de la especie, es decir cariosoma grande oscuro y
membrana nuclear sin cromatina periférica.

- Quiste:
Mide de 5 a 10 µm. Presentan cuatro núcleos, estos son puntiformes y
mucho más pequeños que en el estadio de Trofozoíto. En muchos casos los
cuatro núcleos no son visibles en un mismo plano de foco.

Diagnóstico parasitológico:

Examen microscópico de muestra de heces, para demostrar la presencia de


quistes mediante el examen directo de la muestra en solución salina, lugol o coloración
(tricrómica de Gomori o hematoxilina férrica).

Blastocystis hominis

Características morfológicas:

Es un protozoario que habita el intestino del hombre y de otros animales.


Asociado a sintomatología gastrointestinal inespecífica. Posee pseudópodos de
locomoción y de alimentación; se multiplica por fisión binaria, endodiogenia,
esquizogonia. Presenta tres formas morfológicas diferentes: vacuolar, granular
y ameboide.

Generalmente se observan de forma esférica, mide de 4 a 20 µm., con una


gran vacuola central que ocupa el 50 a 95% de las células y restringe el
citoplasma a un espacio periférico que contiene los núcleos en número de 2 a 5.

Diagnóstico parasitológico:

Examen microscópico de muestra de heces, para demostrar la presencia de del


parasito, mediante el examen directo de la muestra en solución salina, lugol o
coloración (tricrómica de Gomori o hematoxilina férrica).

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FMH-USMP-Parasitología 2018

V. AMEBAS DE VIDA LIBRE:

Las amebas de vida libre (AVL) se encuentran ampliamente distribuidas en la


naturaleza. Se han detectado en redes públicas de agua, albercas, estanques, lagos,
ríos, aguas termales, lodos, suelos desnudos y encharcados, canales artificiales, aguas
de desecho industrial, redes de agua potable, agua embotellada, unidades dentales, de
diálisis, fisioterapia, y aire acondicionado, así como en materia fecal de diversos
animales. Algunas especies pueden encontrarse en aguas saladas. Adicionalmente,
Naegleria y Acanthamoeba han sido aisladas en tracto respiratorio de sujetos con y sin
datos de infección en vías respiratorias. Las AVL son capaces de producir
enfermedades en el hombre como la meningoencefalitis amebiana aguda o primaria
(Naegleria fowleri) y la meningoencefalitis amebiana crónica o granulomatosa
(Acanthamoeba castellani y Balamuthia mandrilaris) (Figura 4).

Acanthamoeba castellani:

Características morfológicas

- Trofozoítos:
Son pleomórficos, de 15-45 µm de diámetro. En el citoplasma se
distinguen un núcleo central y abundantes vacuolas. El carácter distintivo de los
trofozoítos es la presencia de seudópodos puntiagudos llamados acantopodios.

- Quistes:
Miden 10-15 µm de longitud. Se caracterizan por poseer un solo núcleo
y una pared doble, en donde la capa externa es de forma irregular y la interna
es poligonal. También se observa la presencia de poros llamados ostiolos.

Balamuthia mandrilaris:

Características morfológicas

- Trofozoítos:
Son pleomórficos, de 12-60 µm de diámetro. En el citoplasma se
distinguen de 1-2 núcleos cada uno con 2-3 cuerpos nucleares.

- Quistes:
Son esféricos y miden 12-30 µm de longitud. Se caracterizan por poseer
un solo núcleo y una pared triple.

Diagnóstico parasitológico:

Tanto para Acanthamoeba castellani y Balamuthia mandrilaris, la demostración


microscópica de los trofozoítos o quistes es la base del diagnóstico. Los exámenes
histopatológicos de biopsias de cerebro piel o córnea son recomendados. También se

27
FMH-USMP-Parasitología 2018

recomienda el diagnóstico por imágenes (tomografía axial computarizada, resonancia


magnética).

Se puede cultivar las amebas en un medio con baja concentración de nutrientes


en el cual se ha sembrado previamente bacterias coniformes (Medio xenico).

Los exámenes de líquido cefalorraquídeo o los extendidos coloreados con la


tinción de Wright o Giemsa no se recomiendan pues son poco sensibles.

Naegleria fowleri

El mecanismo de transmisión se lleva a cabo en aquellos individuos que toman


baños de aguas contaminadas con estas amebas: lagos, piscinas, embalses, corrientes
termales, manantiales. Estas amebas en algunos casos pueden penetrar a través de la
lámina cribosa del etmoides, pudiendo alcanzar el cerebro y las meninges causando
graves cuadros de necrosis e inflamación. Observaciones experimentales inducen a
pensar que la infección por Naegleria se contrae por penetración de los
microorganismos a través de la nariz o a través del neuroepitelio olfatorio.

Características morfológicas:

Se caracteriza por presentar tres formas morfológicas diferentes: el trofozoíto, la


forma flagelada y el quiste.

- Trofozoítos:
Son pleomórficos, de 10-25 µm de longitud. En el citoplasma se
distinguen un núcleo central y abundantes vacuolas. El carácter distintivo de los
trofozoítos es la presencia de seudópodos redondeados llamados lobopodios.

- Biflagelada:
Bajo ciertas condiciones del medio, principalmente por la concentración
de iones, los trofozoítos pueden adoptar una forma biflagelada.

- Quistes:
Son esféricos y miden 7-14 µm de diámetro. Se caracterizan por poseer
un solo núcleo y una pared delgada sin la presencia de poros.

Diagnóstico parasitológico:

La demostración microscópica de los trofozoítos es la base del diagnóstico. Se


recomienda realizar exámenes de líquido cefalorraquídeo (LCR) o extendidos
coloreados con la tinción de Wright o Giemsa. Si la muestra de LCR resulta negativa,
se puede recurrir a exámenes histopatológicos de biopsias cerebrales o diagnóstico por
imágenes (tomografía axial computarizada).

Se puede cultivar las amebas en un medio con una baja concentración de


nutrientes en el cual se ha sembrado previamente bacterias coliformes.

28
FMH-USMP-Parasitología 2018

Las técnicas serológicas tiene poco valor diagnostico pues la respuesta inmune
demora en aparecer. Se ha probado la técnica de inmunoensayo enzimático (ELISA) y
la inmunofluorescencia indirecta (IFI).

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FMH-USMP-Parasitología 2018

ESQUEMAS (PRÁCTICA 4)

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FMH-USMP-Parasitología 2018

PRÁCTICA 5
IDENTIFICACIÓN DE FLAGELADOS Y
CILIADOS INTESTINALES

I. INTRODUCCIÓN:

Los Flagelado son parásitos caracterizados por poseer flagelos en su forma de


trofozoíto, los cuales les sirven para la locomoción. Como las amibas, los flagelados
tienen un ciclo biológico directo que no involucra hospedadores intermediarios. Desde
el punto de vista clínico, podemos dividirlos según la localización anatómica donde se
suelen encontrar en flagelados intestinales, genitales, hemáticos y tisulares. Entre los
flagelados intestinales la especie más importante es Giardia intestinalis, parásito que
se localiza en el duodeno y que se multiplica por división longitudinal. En los niños
provoca cuadros diarreicos, aunque a veces pueden encontrase en heces sin estar
asociado a patología alguna. Otras especies de flagelados intestinales menos
frecuentes son: Trichomonas hominis, Chilomastix mesnilii

Los ciliados son protozoarios que se caracterizan por presentar cilios como
órganos para la locomoción. Balantidium coli, es el único ciliado que parasita al
humano y se localiza en el intestino grueso. Es el protozoario en humanos más grande.
El único que presenta vacuolas contráctiles y el único que posee un macronúcleo y un
micronúcleo. Es un parásito común en cerdos pero se le encuentra de manera poco
frecuente en humanos, por tal motivo los cerdos son considerados como la fuente de
la mayoría de las infecciones en humanos, pero la difusión puede ocurrir de persona a
persona.

Para ambos grupos, la forma infectante es el quiste mientras que las formas
diagnósticas son tanto quistes como trofozoítos. La vía de infección de estas
parasitosis es la oral y el mecanismo de transmisión es la ingestión de alimentos
contaminados con quistes.

II. MATERIALES:

– Láminas coloreadas y montadas


– Aceite de inmersión
– Microscopio.

III. PROCEDIMENTO:

Agregar a cada lámina coloreada una gota de aceite de inmersión y observarla con
aumento de 100 X.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

IV. FLAGELADOS INTESTINALES:

Giardia intestinalis:

Protozoario patógeno vive en forma de trofozoito en la luz del intestino delgado


(principalmente en el duodeno) adherido a las vellosidades intestinales
La patología originada por G. lamblia se debe principalmente a los efectos que causan
la acción mecánica de adherirse y fijarse al epitelio intestinal. Dichos efectos producen
una alteración de las microvellosidades, que disminuyen su superficie de exposición al
ser engrosadas, y esto conlleva la aparición de diversas alteraciones fisiológicas más o
menos graves, según el mayor o menor deterioro del proceso de absorción. (Figura 5).

Características morfológicas:

- Trofozoíto:
Mide 10-20 µm. Es periforme de simetría bilateral con dos núcleos
ovales y cuatro pares de flagelos, dos axóstilos y dos cuerpos parabasales y un
disco suctorio.

- Quiste:
Mide 8-19 µm (promedio 10-14 µm). Son ovoides que contienen 4
núcleos pequeños, restos de flagelos y cuerpo parabasal, el citoplasma esta
claramente separado de la pared quística.

Diagnóstico parasitológico

Examen microscópico de muestra de heces para demostrar la presencia de


trofozoítos o quistes mediante el examen directo de la muestra en solución salina, lugol
o coloración (tricrómica de Gomori o hematoxilina férrica) .
.
Chilomastix mesnilli:

Protozoario no patógeno. (Figura 5).

Características morfológicas:

- Trofozoíto:
Mide de 6-20 µm. De morfología piriforme, presenta una parte caudal
rígida y una hendidura en espiral que se extiende a través de la superficie
ventral del cuerpo, lo que contribuye a su movimiento característico rotatorio y
giratorio. El organismo presenta también un citostoma conspicuo que se
extiende 1/3 a 1/2 de la longitud del cuerpo.

- Quiste:
Mide 6-9 µm. Es de forma redondeada con una prominencia que lo
asemeja a un limón. Presenta doble membrana y en su interior se observa un
surco.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

Diagnóstico parasitológico:

Examen microscópico de muestra de heces para demostrar la presencia de


trofozoítos o quistes mediante el examen directo de la muestra en solución salina, lugol
o coloración (tricrómica de Gomori o hematoxilina férrica).

V. CILIADOS INTESTINALES

Protozoario no patógeno. (Figura 6).

Balantidium coli:

Unico miembro de la familia Balantiididae que se conoce como patógeno para


los seres humanos. Sus huéspedes incluyen cerdos, jabalíes, ratas,
primates (incluyendo humanos), entre otros La infección es producida entre estas
especies por transmisión fecal-oral. Los cerdos son los reservorios más comunes.

Características morfológicas:

- Trofozoíto:
Mide de 50 a 200 µm de longitud y 40 a 50 µm de ancho. Tiene forma
ovoide, en su extremo anterior presenta el citostoma y en el posterior el
citopigio. Tiene un núcleo grande reniforme (macro núcleo), uno más pequeño
(micro núcleo) y vacuolas contráctiles.

- Quiste:
Mide de 40 a 60 µm de diámetro , es mas o menos redondeado, con
membrana gruesa. En su interior resalta el macro núcleo.

Diagnóstico parasitológico

La balantidiosis requiere de un diagnóstico clínico diferencial con otros agentes


infecciosos que producen colitis o disentería. Principalmente entamoebosis, disentería
bacilar y colitis ulcerativa. El diagnóstico de laboratorio se realiza por el examen de
heces, al observarse los trofozoítos móviles al examen directo, en heces diarreicas, o
los quistes en heces no diarreicas.

33
FMH-USMP-Parasitología 2018

ESQUEMAS (PRÁCTICA 5)

34
FMH-USMP-Parasitología 2018

PRÁCTICA 6
IDENTIFICACIÓN DE ESPOROZOARIOS INTESTINALES Y
TISULARES

I. INTRODUCCIÓN

El Phylum Apicomplexa que son reconocidos como los Esporozoos y Coccidios,


son parásitos intracelulares estrictos que a diferencia de los otros protozoarios no solo
presentan reproducción asexual, si no tambien sexual a la cual vamos a denominar
Esporogonia porque dan lugar a la formación de los esporozoitos;
Los generos Cryptosporidium, Cyclospora, Cystoisospora, conocidos como
coccidios, son protozoarios del Phylum Apicomplexa pues con microscopía electrónica
se visualiza una estructura denominada complejo apical (conoide, anillo polar, roptrias,
microtúbulos). Estos géneros habitan en el intestino del huésped, específicamente en
los enterocitos. Su forma diagnostica es el ooquiste, los cuales generalmente
presentan esporozoitos. La vía de infección de estas parasitosis es la oral y el
mecanismo de transmisión es la ingestión de alimentos contaminados con ooquistes.
En el caso particular de Cryptosporidium el ooquiste eliminado en las heces ya es
directamente infectante .

Toxoplasma gondii y Sarcocystis spp, igualmente pertenece al Phylum


Apicomplexa, son parasitos tisulares. . Toxoplasma gondii es un protozoo intestinal
del gato considerado como hospedero definitivo, mientras que el hombre y otro
animales son hospederos intermediarios. En el hombre son parásitos tisulares ya que
penetran células de diferentes tejidos que pueden ser musculo, SNC, ganglios
linfáticos, formando verdaderos quistes tisulares mediante sucesivas multiplicaciones.
Este es el estadio crónico, los quistes se forman porque los bradizoitos (la forma
latente se recubren por una células. Lo más destacable en la patología humana es la
infección congénita y la del enfermo inmunodeprimido. El diagnóstico en humanos es
básicamente serológico. Sarcocystis spp, produce en el hombre sarcocistosis
muscular., enfermedad poco frecuente y generalmente de poca gravedad .

II. MATERIALES:

– Láminas coloreadas y montadas


– Aceite de inmersión
– Microscopio.

III. PROCEDIMENTO:

Agregar a cada lámina coloreada una gota de aceite de inmersión y observarla con
aumento de 100 X.

IV. PARASITOS INTESTINALES:

35
FMH-USMP-Parasitología 2018

Cryptosporidium spp:

Características morfológicas

Coccidio intestinal con ciclo complejo que se completa en un único huésped


(monoxeno). Distintas especies y distintos genotipos: C. parvum: genotipo en 1
humanos, genotipo 2 en rumiantes y genotipo 3 en caninos. Otros: C. felis, C.
meleagridis, C hominis.

Se localiza en el epitelio intestinal con localización de las etapas reproductivas


dentro de una vacuola parasitófora: intracelular pero extracitoplasmática. La vía de
transmisión es por ooquistes de pared delgada (autoinfección) y los ooquistes de pared
gruesa (heteroinfección). Puede infectar todo el tracto digestivo y también otros
epitelios. Altera la arquitectura del epitelio intestinal (vacuola parasitófora). Ocasiona
atrofia de las vellosidades, aumento de las criptas e infiltración de la lámina propia.
Interfiere con la absorción de fluidos y nutrientes lo que conduce a provocar diarrea
coleriforme que puede comprometer la vida por desequilibrios hidroelectrolíticos.

- Ooquiste:
Pequeño, de 4 – 6 µm de diámetro, ovoide o esférico, altamente
refringente, con cuatro paredes exteriores lisas. Pueden observarse 4
esporozoitos inermes dentro del ooquiste maduro , no se presenta
esporoquistes. (Figura 7).

Diagnóstico parasitológico;

La demostración microscópica de los ooquistes es la base del diagnóstico. Se


recomienda realizar exámenes seriados de heces y métodos de concentración
(técnicas de Ritchie y Sheather). Los ooquistes se pueden observar en un extendido
teñido con coloración ácido-resistente (método de Kinyoun o Zielh-Neelsen modificado)
y/o Auramina/rodamina

Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parásitos por biopsia
intestinal o utilizarse el diagnóstico indirecto para detectar coproantígenos con la ayuda
de las técnicas de inmunoensayo enzimático (ELISA) o inmunofluorescencia indirecta
con anticuerpos monoclonales (IFI).

Cyclospora cayetanensis

Características morfológicas

- Ooquiste:
Presentar una forma esférica y mide entre 8-10 µm de diámetro. Cada
ooquiste contiene dos esporoquistes que desarrollan dos esporozoítos cada
uno. Se eliminan en las heces de forma inmadura (Figura 7).

Diagnóstico parasitológico:

36
FMH-USMP-Parasitología 2018

La demostración microscópica de los ooquistes es la base del diagnóstico. Se


recomienda realizar exámenes seriados de heces y métodos de concentración
(técnicas de Ritchie y Sheather).

Los ooquistes se pueden observar en un extendido teñido con coloración ácido


resistente (método de Kinyoun o Zielh-Neelsen modificado). Con luz ultravioleta
presentan autofluorescencia.

Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parásitos por biopsia
intestinal o utilizarse el diagnóstico indirecto para detectar coproantígenos con la ayuda
de las técnicas de inmunoensayo enzimático (ELISA) o inmunofluorescencia indirecta
(IFI).

Cystoisospora belli:

Características morfológicas::

- Ooquiste:
Presentar una forma ovalada y mide entre 20- 30 µm de largo por 10-20
µm de ancho. Cada ooquiste contiene dos esporoquistes de membrana doble
que desarrollan cuatro esporozoítos cada uno. Se eliminan en las heces de
forma inmadura (Figura 7).

Diagnóstico parasitológico:

La demostración microscópica de los ooquistes es la base del diagnóstico. Se


recomienda realizar exámenes seriados de heces y métodos de concentración
(técnicas de Faust y Sheather). Es característica la presencia de los cristales de
Charcot Leyden, que se generan por la destrucción de los eosinófilos.

Los ooquistes se pueden observar en un extendido teñido con coloración ácido-


resistente (método de Kinyoun o Zielh-Neelsen modificado). Con luz ultravioleta
presentan autofluorescencia.

Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parásitos por biopsia
intestinal o utilizarse el diagnóstico indirecto para detectar coproantígenos con la ayuda
de las técnicas de inmunoensayo enzimático (ELISA) o inmunofluorescencia indirecta
(IFI).

Toxoplasma gondii:

Características morfológicas:

- Ooquiste:
Tiene una forma esférica y mide entre 10-12 µm de diámetro. Cada
ooquiste contiene dos esporoquistes que desarrollan cuatro esporozoítos cada
uno.

37
FMH-USMP-Parasitología 2018

- Taquizoítos :
Tienen aspecto semilunar o en “arco” y miden entre 4-6 µm de largo por
2-4 µm de ancho (Figura 8).

- Quistes tisulares :
Son redondeados y poseen una membrana propia, miden entre 20-200
µm de diámetro.

Diagnóstico parasitológico:

El criterio clínico es la base del diagnóstico. La demostración microscópica de


los taquizoítos es difícil y muy rara vez es posible observarlo en muestras de LCR y
médula ósea. También se puede intentar su aislamiento mediante inoculación
experimental en ratones o en líneas celulares.

Se pueden buscar los parásitos por biopsia intestinal o utilizarse el diagnóstico


indirecto para detectar anticuerpos con la ayuda de la reacción de Sabin & Feldman
(RSF) o las técnicas de inmunoensayo enzimático (ELISA), inmunofluorescencia
indirecta (IFI) o hemoaglutinación indirecta (HAI).

Actualmente se recomienda el uso de técnicas moleculares (como la reacción


en cadena de la polimerasa PCR) para muestras de sangre, LCR, médula ósea y
biopsias.

Sarcocystis sp.

Características morfológicas:

Sarcocystis spp, puede tener al hombre como hospedero definitivo (Invasion


intestinal) o como intermediario (Invasion muscular). Un sarcoquiste mide en promedio
70 µm, pero su tamaño fluctúa entre 30 y 130 µm. Se le ha encontrado en todo el
mundo infectando diversas especies. Es una zoonosis, entre los animales que infecta
se pueden incluir ovejas, caballos, cerdos, perros, gatos, conejos, ratones, pollos,
humanos, venados, patos, focas, entre otros. Existen varias especies, nombradas de
acuerdo al hospedero en donde se encuentran, por ejemplo: S. rileyi (pato), S. cuniculi
(conejo), S. tenella (oveja) y S. miescheriana (cerdo). Produce la enfermedad conocida
como sarcocystosis. Las principales especies que infectan humanos son S. hominis y
S. suishominis. Los humanos pueden infectarse por ingestión de carne infectada o bien
por ooquistes excretados en las heces (Figura 9).

Diagnóstico parasitológico

Análisis de las heces de animales infectados donde se observan los ooquistes


esporulados. Observación de los quistes en los hospederos intermediarios por medio
de biopsias de tejido (con gran cantidad de bradizoitos. La sarcocistosis extraintestinal
puede detectarse mediante anticuerpos anti-Sarcocystis a través de las pruebas
serológicas, entre ellas la ELISA, HAI, dot-ELISA e IFI.

38
FMH-USMP-Parasitología 2018

Microsporidios

Los microsporidios son responsables de infecciones oportunistas; son parásitos


estrictamente intracelulares que se desarrollan en las células intestinales,
principalmente. Muchos géneros han sido descritos en humanos, entre los que
Encephalitozoon y Enterocytozoon son los más comunes. Es probable que el contagio
ocurra por consumir esporas presentes en agua o alimentos contaminados. También lo
es la transmisión directa de persona a persona. Los principales afectados son los
pacientes inmunodeprimidos (individuos con VIH y pacientes que se han sometido a un
trasplante de órganos o de médula ósea).

Características morfológicas:

El tamaño promedio de sus esporas (forma infectante) varía entre 1.2 a 2 µm de largo
por 0,7-1.5 µm de ancho

1. Enterocytozoon bienusi,:
Es el principal microsporidio patógeno del hombre. Infecta los
enterocitos del intestino delgado, principalmente en pacientes
inmunocomprometidos. Su desarrollo se produce directamente en el citoplasma
de la célula hospedadora sin formar vacuola parasitófora. Su túbulo polar
presenta de 5-7 vueltas.

2. Encephalitozoon intestinales:
Infecta los enterocitos del intestino delgado, principalmente en pacientes
inmunocomprometidos. Su desarrollo se produce en el interior de una vacuola
parasitófora. Su túbulo polar presenta de 4-7 vueltas.

3. Encephalitozoon hellem: P
Produce en vacuolas parasitóforas en el interior de las células de su
hospedador y forma esporas redondeadas. Su túbulo polar presenta de 6-8
vueltas.

4. Encephalitozoon cuniculi:
Pproduce en vacuolas parasitóforas en el interior de las células de su
hospedador y forma esporas. Su túbulo polar presenta de 4-5 vueltas.

5. Nosema connori:
No produce vacuola parasitófora y forma esporas ovales. Su túbulo polar
presenta de 10-11 vueltas.

6. Vittaforma corneae:
No pproduce vacuola parasitófora y forma esporas cilíndricas Su túbulo
polar presenta de 5-6 vueltas.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

7. Pleistophora sp:
Forma vacuolas parasitóforas y sus esporas son de aspecto oval, Su
túbulo polar tiene 10-11 vueltas.

Diagnóstico parasitológico:

La demostración microscópica de las esporas es la base del diagnóstico. Las


esporas se pueden detectar en material de biopsia o mediante el examen de heces,
esputo, aspirado duodenal, LCR y orina.

Se pueden observar utilizando extendidos teñidos con la coloración de Gram


(son grampositivos), la coloración ácido-resistente (método de Zielh-Neelsen), la de
Giemsa o la de Schiff. La coloración de Weber basada en cromotropos ha demostrado
ser útil.

Se puede utilizar pruebas serológicas como la inmunofluorescencia indirecta


(IFI) o moleculares como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), pero aún no
han demostrado ser fiables para el diagnóstico de rutina. También se han logrado
cultivar en líneas celulares como las de riñón de mono (MK) o de pulmón fetal humano
(FLH).

40
FMH-USMP-Parasitología 2018

ESQUEMAS (PRÁCTICA 6)

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FMH-USMP-Parasitología 2018

PRÁCTICA 7
IDENTIFICACIÓN DE FLAGELADOS HEMÁTICOS - TISULARES
Y DEL APARATO GENITOURINARIO

I. INTRODUCCIÓN

Los flagelados parásitos sanguíneos tienen como hospedador intermediario a


un vector. Se reproducen por fisión binaria longitudinal. Leishmania en su ciclo
biológico adopta la forma de amastigote (con un flagelo intracelular) y de promastigote
(con flagelo libre pero sin membrana ondulante). Trypanosoma cruzi en su ciclo
biológico adopta la forma de amastigote, epimastigote (con flagelo libre y una corta
membrana ondulante) y tripomastigote (con flagelo libre y membrana ondulante
completa - forma infectante). La forma infectante en el caso de Leishmania es el
promastigote metacíclico y en el caso de Trypanosoma es el tripomastigote metacíclico
(deyecciones del vector) La vía de infección de estas parasitosis es la cutánea. El
mecanismo de transmisión es la picadura del vector (Leishmania). Las formas
habituales de transmisión de Trypanosoma cruzi son aquellas conectadas directamente
al vector, a la transfusión de sangre, a la vía congénita y, más recientemente, las que
ocurren vía oral, por la ingestión de alimentos contaminados. Mecanismos menos
comunes envuelven accidentes de laboratorio, manejo de animales infectados,
transplante de órganos.

Los flagelados urogenitales (Trichomonas) carecen de forma quística. La vía de


infección de esta parasitosis es la sexual y el mecanismo de transmisión es el contacto
sexual y los fomites.

II. MATERIALES:

– Láminas coloreadas y montadas


– Aceite de inmersión
– Microscopio.

III. PROCEDIMENTO:

Agregar a cada lámina coloreada una gota de aceite de inmersión y observarla con
aumento de 100 X. A los vectores observar en objetivos de 10 X u macroscópicamente.

IV. FLAGELADOS HEMATICO TISULARES:

Leishmania spp.

Los parásitos son transmitidos por la picadura de las hembras de mosquitos de los
géneros Lutzomya. El reservorio lo constituyen generalmente mamíferos salvajes o
domésticos. Su capacidad infectiva se manifiesta de forma variada en la
sintomatología, dando lugar a formas viscerales (kala-azar), mucocutáneas y cutáneas.

42
FMH-USMP-Parasitología 2018

Características morfológicas

– Amastigotes:
Se presentan como cuerpos redondeados u ovalados de 2-6 m m de
diámetro, en los que se identifican un núcleo, un cinetoplasto puntiforme y un
flagelo interno, este último sólo visible al microscopio electrónico. (Figura 10).

El cinetoplasto tiene forma de “bastoncillo” y esta conformado por ADN.


Es una estructura que contiene al cuerpo parabasal y un blefaroplasto
puntiforme de donde se origina el flagelo

– Promastigotes:
Son alargados, de alrededor de 20 por 2-3 m m, con un núcleo central,
un flagelo externo, anterior, rodeado de membrana plasmática, de longitud
similar al cuerpo del parásito y un quinetoplasto, ubicado en el extremo anterior,
en la proximidad del origen del flagelo (Figura 10).

Diagnóstico parasitológico:

La demostración microscópica de los amastigotes es la base del diagnóstico.


Se debe buscar el parásito en muestras de tejidos. Se recomienda realizar exámenes
directos de extendidos de las lesiones mediante raspado con bisturí utilizando
coloraciones de Giemsa o Leishman. Si la muestra resulta negativa, se pueden
buscar los parásitos por biopsia de tejidos o se les puede cultivar en medio de Novy,
McNeal y Nicolle (NNN) e inocularlos en animales de laboratorio.

Las técnicas serológicas útiles para el diagnóstico indirecto son la técnica de


intradermoreacción (prueba de Montenegro), el inmunoensayo enzimático (ELISA) e la
inmunofluorescencia indirecta (IFI).

Vector: Lutzomyia spp

Son insectos hematófagos nocturnos, con metamorfosis completa. Mide de 2 a


4 mm. Tienen un solo par de alas, estas son ovaladas, en forma de V y densamente
cubiertas por pelos; tienen antenas con más de 6 segmentos y pieza bucales
relacionadas con sus hábitos alimentarios (Figura 11).

Trypanosoma cruzi

Características morfológicas

– Amastigotes:
Son redondos u ovalados, miden de 1.5 a 4 micras de diámetro y no
poseen flagelo visible, estos amastigotes se aglomeran en las células formando
“nidos”.Estas formas se encuentran en el interior de las células del huésped
vertebrado (Figura 12).

43
FMH-USMP-Parasitología 2018

– Epimastigotes:
Son alargadas, miden de 35 a 40 micras y tienen un flagelo que se
origina cerca del cinetoplasto. El cinetoplasto se encuentra anterior al
núcleo. Estas formas no se encuentran en el huésped vertebrado (Figura 12).

– Tripomastigotes:
Tiene forma alargada, su tamaño es alrededor de 20 micras, poseen un
flagelo que sale del parásito por el extremo anterior, a lo largo de su cuerpo
tienen una membrana ondulante. Poseen un núcleo cerca de la parte central y
un quinetoplasto grande que los caracteriza morfológicamente. Este estadío se
encuentra en la sangre de las personas infectadas (Figura 12).

Diagnóstico parasitológico:

La demostración microscópica de los tripomastigotes es la base del diagnóstico.


Se debe buscar el parásito en muestras de sangre o tejidos. Se recomienda realizar
exámenes directos de extendidos sanguíneos y técnicas de “gota gruesa” con
coloraciones de Giemsa o Wright.

También se pueden utilizar métodos de concentración (técnica de Strout) y se


les puede cultivar en medio de Novy, McNeal y Nicolle (NNN) e inocularlos en animales
de laboratorio.

Las técnicas como el xenodiagnóstico y el hemocultivo, se utilizan con fines


epidemiológicos. Las técnicas serológicas útiles para el diagnóstico indirecto son la
técnica de fijación de complemento (prueba de Guerreiro-Machado), el inmunoensayo
enzimático (ELISA), la hemoaglutinación indirecta (HAI) y la inmunofluorescencia
indirecta (IFI). La determinación de zimodemas (perfiles isoenzimáticos) es útil en la
identificación específica de los parásitos.

Vector: Triatominae.

La subfamilia triatominae son un grupo de insectos perteneciente a


la familia Reduviidae del orden Hemiptera. Aproximadamente 130 especies que
conforman esta subfamilia, son todas hematófagas, es decir, se alimentan
de sangre de vertebrados. Todas las especies de triatominos son vectores
potenciales de la enfermedad de Chagas pero aquellas especies como Triatoma
infestans, Pantrongylus spp y Rhodnius prolixus que se han adaptado a vivir con
los seres humanos son consideradas "vectores importantes" del parásito responsable
de esta enfermedad, Trypanosoma cruzi (Figura 13 y 14).

44
FMH-USMP-Parasitología 2018

V. FLAGELADO GENITO-URINARIO:

Trichomonas vaginalis :

Características morfológicas:

Trofozoíto:
Se caracterizan por presentar una forma piriforme y miden entre 10-30 µm de
largo por 5-12 µm de ancho. Cada trofozoíto se caracteriza por la presencia de un
núcleo (con cariosoma subcentral y cromatina uniformemente distribuida) además de
un citostoma (abertura oral), blefaroplastos, axostilo y cuerpos parabasales. (Figura 15).

El carácter particular de los trofozoítos es la presencia de dos pares de flagelos


anteriores libres y un quinto a lo largo de la membrana ondulante que ocupa 2/3
anteriores del cuerpo.
No presenta formas quística.

Diagnóstico parasitológico:

La demostración microscópica de los trofozoítos es la base del diagnóstico. Se


recomienda realizar exámenes directos de muestras frescas de secreción vaginal,
secreción uretral u orina. Son característicos los movimientos de rotación de los
parásitos.

También se pueden observar los trofozoítos en un extendido teñido con


coloración Giemsa o Papanicolau y se pueden cultivar en medio de Diamond (crecen
después de 5-7 días).

Si la muestra resulta negativa, se pueden buscar los parásitos en secreción


prostática o utilizarse el diagnóstico indirecto con la ayuda de las técnicas de
inmunoensayo enzimático (ELISA) o inmunofluorescencia indirecta (IFI).

45
FMH-USMP-Parasitología 2018

ESQUEMAS (PRÁCTICA 7)

46
FMH-USMP-Parasitología 2018

PRÁCTICA 8
IDENTIFICACIÓN DE ESPOROZOARIOS HEMÁTICOS

I. INTRODUCCIÓN:

Son parásitos pertenecientes al phylum Apicoplexa, clase Aconoidasida, orden


Haemosporida y familia Plasmodiidae, cuyos miembros son causantes de la
enfermedad conocida como malaria o paludismo

El parásito siempre tiene dos huéspedes en su ciclo vital: un mosquito que


actúa como vector y un huésped vertebrado. Al menos diez especies infectan al
hombre. Para humanos hay cuatro especies causales de malaria.

- P. falciparum : Terciaria maligna o fiebre perniciosa


- P. vivax : Terciaria benigna
- P. malariae : Cuartana
- P. ovale: Fiebre terciaria

El ciclo biológico de ellos, incluye estadios asexuales (trofozoítos, esquizontes y


merozoítos) y sexuales (macrogametocitos, microgametocitos, ooquistes y
esporozoítos). La vía de infección de esta parasitosis es la cutánea y el mecanismo de
transmisión es la picadura del vector (inyecta esporozoitos). La forma infectante es el
esporozoíto y las formas diagnósticas se observan en la sangre periférica, las cuales
van a depender de la especie de Plasmodium

II. MATERIALES:

– Láminas coloreadas y montadas


– Aceite de inmersión
– Microscopio.

III. PROCEDIMENTO:

Agregar a cada lámina coloreada una gota de aceite de inmersión y observarla con
aumento de 100 X. A los vectores observar en objetivos de 10X u macroscópicamente.

IV. ESPOROZOARIOS HEMATICOS

Plasmodium spp.

Características morfológicas:
En el hombre se pueden observar estadios de trofozoíto, esquizonte y gametocito, que
tienen valor diagnóstico.

47
FMH-USMP-Parasitología 2018

Diferencias morfológicas de Plasmodium humanos en sangre periférica

ESPECIES P. vivax P .falciparum P. malariae

Trofozoíto joven Anular ocupa 1/3 Anular ocupa 1/6 Anular o en banda
del hematíe rara del hematíe a ocupa 1/3 del
vez hay 2 menudo varios en hematíe muy raro
un hematíe más de una.
Trofozoíto Adulto Forma irregular Forma ameboidea Forma en banda se
ameboidea, se ve pequeña. No se ve ve en sangre
en sangre en sangre periférica, pigmentos
periférica, pigmento periférica. en gránulos grandes.
marrón amarillento Citoplasma
fino. compacto, pigmento
oscuro.
Esquizonte joven Grande amenoide Tamaño medio, Pequeño cromatina
cromatina cromatina fragmentada,
fragmentada, fragmentada, no se pigmento grueso.
pigmento fino ve en sangre
periférica
Esquizonte maduro Grande doble hilera Pequeños, sólo en Forma de roceta o
de merozoítos de sangre visceral 18 a margarita con 6 a 12
18 a 24. 32 merozoítos merozoítos.
Microgametocito Grandes, esféricos, Media luna, Similar a P. vivax,
cromatina difusa, cromatina única pero más pequeños.
Abundante laxa, Pigmento
pigmento malárico y malárico oscuro.
granulaciones
(amarillo)
Macrogametocito Esférico, cromatina Media luna, Similar a P. vivax
compacta, cromatina pero pequeño,
Abundante compacta, pigmento grueso
pigmento malárico y Pigmento malárico diseminado.
granulaciones oscuro.
(amarillo)
Presencia de Todas las formas Gametocitos y Todas las formas
formas en sangre dependiendo del Trofozoítos como suceden en
circulante momento en que Jóvenes P.vivax.
tome la sangre en
relación en relación
con el ciclo febril.

(Figura 16)

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FMH-USMP-Parasitología 2018

Diagnóstico parasitológico:

La demostración microscópica de los estadios esquizogónicos (trofozoítos,


esquizontes y gametocitos) es la base del diagnóstico. Se recomienda realizar
extendidos sanguíneos y métodos de concentración (técnica de “gota gruesa”).
Los estadios esquizogónicos se pueden observar en un extendido teñido con
coloración de Giemsa, Wright o Leishman.

También se puede utilizar pruebas serológicas como el inmunoensayo


enzimático (ELISA), la inmunofluorescencia directa (IFD) o la hemoaglutinación
indirecta (HAI), aunque no son de gran ayuda en el diagnóstico. En la actualidad se
usan las pruebas moleculares como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), la
cual es de gran ayuda en la detección de infecciones mixtas.

Vector: Especies del genero Anopheles.


(Figura 17)

Anopheles albimanus :
Son insectos pertenecientes a la clase insecta, orden díptera. Mosquito de
tamaño mediano, delgado de probóscide larga y delgada. El tórax en su región dorsal,
es de color gris oscuro y presenta tres manchas oscuras, dos laterales y una posterior,
Alas con escamas oscuras y blanco amarillentas en forma de pelos y dispuestas en
formas de manchas en las venas. El abdomen es de color castaño oscuro. Las patas
son largas y delgadas con anillos blancos. Sus trompas, tórax y abdomen forman una
línea recta y en reposo, se mantiene en posición inclinada dentro de un ángulo
comprendido entre 45 y 90 grados

49
FMH-USMP-Parasitología 2018

ESQUEMAS (PRÁCTICA 8)

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FMH-USMP-Parasitología 2018

PRÁCTICA 9
IDENTIFICACIÓN DE TREMÁTODES

I. INTRODUCCIÓN

Este grupo de parásitos pertenecen al Phylum Platelminto, se caracterizan


principalmente por ser parásitos aplanados dorso-ventralmente y por ser
hermafroditas. Tienen un cuerpo en forma foliácea, presentan una ventosa oral y otra
ventral. La excepción es Schistosoma mansoni, es el único trematodo que presenta
dimorfismo sexual. Su cuerpo no se divide en regiones y presenta dos ventosas, una
oral y otra ventral (acetábulo). Presenta aparato digestivo incompleto. Su fecundación
es interna. La mayoría tienen ciclos de vida complejos con estadios que afectan a
varias especies; en estado adulto son endoparásitos de vertebrados, incluido el ser
humano (como por ejemplo Fasciola hepatica, Paragonimus y Schistosoma), y en
estado larvario lo son de moluscos y, a veces, de un tercer hospedado.

Su ciclo biológico incluye estadios de huevo, larva (miracidio, esporoquiste,


redia, cercaria y metacercaria) y adulto. En los trematodos (Fasciola y Paragonimus)
la forma infectante es la metacercaria mientras que la forma diagnóstica es el
huevecillo no embrionado. La vía de infección de estas parasitosis es la oral y el
mecanismo de transmisión es la ingestión de alimentos contaminados

II. MATERIALES:

– Láminas coloreadas y montadas


– Microscopio.

III. PROCEDIMENTO:

Cada lámina debe ser observarla con aumento de 10 y 40 X.

IV. TREMATODES DE IMPORTANCIA MEDICA:

Fasciola hepática:

Características morfológicas:

– Huevos:
Son depositados en los conductos biliares. Miden de 130 a 150 µm de
longitud por 60 a 90 µm de ancho; tienen opérculo, son de color amarillento.
( Figura 18)

– Miracidio:
Es una larva ciliada que eclosiona tras la maduración de los huevos. Se
caracterizan porque la porción anterior es ensanchada y lleva una papila cónica

51
FMH-USMP-Parasitología 2018

diminuta y una mancha ocular prominente, adelgazándose hacia la porción


posterior. En promedio, mide 128 x 25 µm.

– Esporoquistes y redias:
Las larvas miracidio se transforman en esporoquistes o esporocistos
dentro del caracol. Los esporcistos originan la primera generación
de redias (sucede en unas 3 semanas). Pasando una semana más se forma la
segunda generación de redias y posteriormente aparecen las cercarias.

– Cercaria:
Del caracol salen hacia el agua las cercarias. Se caracterizan porque la
parte anterior es más ancha y piriforme y remata en el cono bien diferenciado;
los dos tercios posteriores forman la cola móvil y granulosa, que remata en una
estructura digitiforme. Miden en promedio 270 a 340 µm de largo por 270 µm de
ancho cefálico; la cola alcanza una longitud de 700 µm. Son muy sensibles a
las temperaturas altas y la desecación, pero soportan temperaturas muy bajas,
posibilitando así la supervivencia invernal. Nadan durante 8 a 12 horas; se
adhieren a plantas acuáticas, pierden la cola, se hacen redondas y se enquistan
formando la metacercaria.

– Metacercaria:
Es la forma infectante para el hombre y para los demás animales que
sirven de hospedero definitivo. Se encuentran enquistadas en la vegetación
acuática que normalmente comen los animales y que el hombre también
acostumbra a ingerirlas. Al llegar al duodeno se desenquistan liberando un
parásito juvenil que perfora la pared intestinal y en unas 3 horas, se aloja en la
cavidad peritoneal en donde pasa de 3 a 16 días; posteriormente avanza por el
peritoneo, llega a la cápsula de Glisson, la perfora, penetra al parénquima
hepático del cual se alimentan los parásitos juveniles durante su migración
hacia los conductos biliares en donde se desarrolla hasta el estado adulto, lo
que sucede en unos 2 meses; después empezará a reproducir huevos que
salen al exterior con la bilis y materias fecales, complementando así el ciclo
biológico.

- Adulto:
La Fasciola hepatica adulta es un trematode de 20 a 50 mm de largo por
6 a 12 mm de ancho caracterizado por su forma lanceolada, con dos ventosas,
una bucal y otra ventral. Reside en los conductos biliares del hospedero
definitivo. Para completar su ciclo biológico, la F. hepatica necesita dos
hospederos, uno intermediario (caracol) y otro definitivo (mamífero . ( Figura 19).

Diagnóstico parasitológico:

La demostración microscópica de los huevecillos es la base del diagnóstico. Se


recomienda realizar exámenes seriados de heces y utilizar métodos de concentración
(técnica de Faust o de Baerman). Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden
buscar los parásitos en bilis por aspirado duodenal, estudios radiológicos o biopsias
hepáticas.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

También puede utilizarse el diagnóstico indirecto para detectar coproantígenos.


Doble difusión arco 2 (DD-2), inmunoensayo enzimático (ELISA), hemoaglutinación
indirecta (HAI) e inmunofluorescencia indirecta (IFI). Las técnicas moleculares no se
han utilizado por el momento.

Paragonimus peruvianus:

Características morfológicas:

– Huevos:
Los huevos son de 60-80 µ de largo por 50-60µ. de ancho, ovalados,
operculados; que deben encontrar colecciones de agua dulce. En el interior del
huevo se desarrolla un embrión o miracidio ( Figura 18)

– Miracidio:
Emerge en busca de caracoles. Estos caracoles son pequeños,
pulmonados, en nuestro país la especie involucrada es el Aroapyrgus
colombiensis (primer hospedero intermediario).

– Esporoquistes y redias:
En el caracol, 1º hospedero intermediario, se desarrollará el
esporoquiste, luego las redias de las que emergerán las cercarias que
abandonan al caracol

– Metacercarias:
Las penetran al cangrejo, el 2º hospedero intermediario del Género
Hypolobocera donde adquieren el estadio de metacercaria Las metacercarias
que se caracterizan por carecer de envoltura quística y miden aprox 1.5 µm
por 0,7 µm, se halla libre en su hepatopancras. La ingesta del cangrejo
infectado, crudo o insuficientemente cocido, por el hospedero definitivo, animal
o humano, permite el ingreso de la metacercaria, la que atraviesa la pared de
las partes altas del tubo digestivo y se traslada a los músculos intercostales y
luego de un periodo de aparente maduración, migran al parénquima pulmonar
donde harán sus cavidades

- Adulto:
Es un gusano ovalado, más que aplanado, de 8 a l5 mm. de largo por 4-
5 mm de ancho, de color rosado, hermafrodita. Presenta dos ventosas . El
adulto se localiza en cavidades, en pleno parénquima pulmonar. ( Figura 19)

Diagnóstico parasitológico:

La demostración microscópica de los huevecillos es la base del diagnóstico. Se


recomienda realizar exámenes de esputo colectado por 24 horas y tratado con
hidróxido de sodio. Si la muestra de esputo resulta negativa, se pueden buscar los
parásitos en heces o aspirados gástricos, exámenes radiográficos o biópsias
pulmonares.

53
FMH-USMP-Parasitología 2018

También puede utilizarse el diagnóstico indirecto para detectar coproantígenos


con la ayuda de las técnicas de intradermorreacción, inmunoensayo enzimático
(ELISA), inmunofluorescencia indirecta (IFI) y hemoaglutinación indirecta (HAI).
Las técnicas moleculares no se han utilizado por el momento.

Schistosoma spp

El género Schistosoma posee gran cantidad de especies, parásitas de


mamíferos silvestres y domésticos, incluido el hombre. Al menos tres especies
parasitan al hombre: Schistosoma mansoni, Schistosoma japonicum y Schistosoma
haematobium ( Figura 18)

- S. mansoni:
Trematodo sanguíneo de Manson, se localiza en la mayor parte de
África; también se encuentra en el continente americano, introducido con
los esclavos africanos infectados. Los adultos viven en las venas
mesentéricas del intestino grueso de muchos mamíferos, tanto silvestres
como domésticos, incluido el hombre (hospedador definitivo).

- S. japonicum:
Trematodo sanguíneo oriental, se encuentra en el continente asiático.
El adulto vive en las venas mesentéricas del intestino delgado y a veces
en las venas del sistema porta del hombre y otros mamíferos
(hospedador definitivo).

- S. haematobium:
Trematodo sanguíneo de la vejiga se distribuye por gran parte de África
y por ciertas zonas de Asia. Los adultos viven en las venas que rodean
la vejiga urinaria (venas vesicales) del hombre y otros primates
(hospedador definitivo).

El ciclo vital es similar en todas las especies. Los huevos, ya embrionados,


eclosionan en el agua; surge un miracidio que penetra activamente en un caracol
acuático (hospedador intermediario) (Biomphalaria spp. para S. mansoni, Oncomelania
spp. para S. japonicum y Bulinus spp. para S. haematobium), donde se transforma en
esporoquiste, que origina esporoquistes hijos, de donde surgen cercarias (no se
producen redias). Las cercarias salen del caracol y penetran activamente, a través de
la piel, en su hospedador definitivo cuando se sumerge en aguas con caracoles
infectados.
Durante la entrada en el hospedador definitivo, la cercaria pierde la cola y se
transforma en esquistosómula, que se dirigirá al sistema hepático, donde evolucionará
hasta adulto, para posteriormente dirigirse a su hábitat específico.

Una de las características de las esquistosomiasis es la producción de


granulomas alrededor de los huevos que quedan entre los tejidos del hospedador
cuando se desplazan tratando de salir a la luz intestinal o a la vejiga urinaria.

54
FMH-USMP-Parasitología 2018

S. mansoni:

Características morfológicas:

– Huevo:
Son alargados, con cubierta transparente, de unos 114-180 μm x 45-73
μm, con un característico espolón lateral nítido cerca de la extremidad posterior y
apuntando hacia atrás. Cada huevo contiene un miracidio ( Figura 18).

– Miracidio:
Es una larva ciliada embironaria que mide unos 180 x 62 μm, se mueve
en busca del hospedador más no se alimenta. En contacto con el agua, apenas
viven unas horas cuando son liberadas de los huevos y no encuentran a su
hospedador intermediario.

- Esporoquistes y redias:
Las larvas de miracidio se transforman en esporoquistes dentro del
caracol. Redias: la 1ª generación de esporoquistes ( suceden en unas 3
semanas)

– Cercaria:
Es el último estadio larvario; es nadadora, libre, caracterizada por tener
una larga cola bifurcada en el extremo distal, una cabeza de unos
200 μm equipada con espinas y papilas sensoriales, y recubiertas
por tegumento trilaminado, denso y refráctil. Las cercarias tienen
diferenciación sexual, con cercarias machos y hembras. No se alimentan,
perdiendo su energía de reserva en 96 horas. Las glándulas de la cabeza
contienen enzimas que le permiten penetrar la piel del humano; al hacerlo
pierden la cola.

– Adulto:
La hembra, larga y delgada, se encuentra parcialmente introducida en el
canal ginecóforo del macho. Los machos son gruesos de 6‐15 mm de longitud y
1,5 mm de diámetro; poseen 3‐7 testículos y el tegumento puede estar
ornamentado con tubérculos espinosos ricos de glucógeno. Las hembras son
delgadas, de tegumento liso y poseen un sólo ovario, situado en el tercio
anterior del cuerpo; el útero es corto ( Figura 20).

Diagnóstico parasitológico:

La demostración microscópica de los huevecillos es la base del diagnóstico.

En el caso de las personas que viven en zonas no endémicas o de baja


transmisión, las pruebas serológicas podrían ser útiles para determinar la exposición a
la infección y la necesidad de realizar un examen, una tratamiento y su seguimiento, a
fondo.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

ESQUEMAS (PRÁCTICA 9)

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FMH-USMP-Parasitología 2018

PRÁCTICA 10-11
IDENTIFICACIÓN DE CÉSTODES INTESTINALES Y TISULARES

I. INTRODUCCIÓN

Estos parásitos pertenecen al Phylum Platelminto, se caracterizan por


ser parásitos aplanados dorso-ventralmente, segmentados y hermafroditas.
Carecen de aparato digestivo, se nutren por difusión desde el exterior. Su cuerpo
se divide en tres regiones: Cabeza o escólex, escolex, esta destinado a la fijación;
El cuello o zona de crecimiento; y El estróbilo, constituido por una cadena de
proglótidos o segmentos

La mayoría de los cestodos parásitos del hombre requieren uno o más


hospedadores intermediarios, que ingieren los huevos con el agua de bebida o
alimentos y desarrollan las larvas en sus tejidos. El hospedador definitivo
desarrolla la forma adulta del parásito en su tubo digestivo tras ingerir carne que
contiene larvas enquistadas. Los gusanos adultos ocupan el tubo digestivo de
los vertebrados y sus larvas se encuentran en los tejidos de vertebrados e
invertebrados. Los cestodos tienen un ciclo biológico complejo que incluye
estadios de huevo, larva (cisticerco, cisticercoide, procercoide, plerocercoide e
hidátide) y gusano adulto.

. II. MATERIALES:

– Láminas coloreadas y montadas


– Microscopio.

III. PROCEDIMENTO:

Cada lámina debe ser observarla con aumento de 10 , 40 X.

IV. CESTODES DE IMPORTANCIA MEDICA:

Taenia spp:

La teniasis es una infección intestinal provocada por dos especies de


cestodos: T. solium (tenia del cerdo) y T. saginata (tenia del vacuno). El ser
humano se infecta con T. saginata cuando consume carne de vacuno que
No ha sido cocinada adecuadamente. La teniasis por T. saginata tiene poca
repercusión en la salud humana. La infección también se produce en el ser
humano cuando come carne de cerdo cruda o poco cocinada (T. solium).

57
FMH-USMP-Parasitología 2018

El ser humano también puede ser infectado al ingerir agua o


alimentos contaminados con huevos de T. solium produciéndole la
cisticercosis humana . Las larvas de tenia (cisticercos) se desarrollan en
los músculos, la piel, los ojos y el sistema nervioso central. En el cerebro,
los quistes pueden producir neurocisticercosis, una enfermedad
potencialmente mortal cuyos síntomas consisten en epilepsia, cefaleas
intensas y ceguera..

Taenia solium:

Características morfológicas:

– Huevos:
Miden 31 x 43 µm, esféricos o sub-esféricos, con cáscara gruesa y
estrías radiales prominentes. Oncósfera embrionada con tres pares de ganchos
(Embrión hexacanto) dentro del embrióforo, que es la forma diagnóstica del
género Taenia. La ingesta de huevos ocasiona cisticercosis. (Figura 21).

– Adulto:
Mide de 3 a 6 m. Sus Proglótidos son mas largos que anchos. Los
segmentos grávidos tienen un tallo uterino central con 7 – 10 ramas laterales.
Escólex: presenta cuatro ventosas características del género, con un rostelo
armado de doble corona de ganchos quitinosos (Figura 22).

– Cisticerco:
Forma infectante y estadio larvario. La ingesta de la larva cisticerco
(Cysticercus cellulosae), presente en el músculo de porcino, ocasiona en el
hombre teniasis intestinal.(Figura 21).

Taenia saginata:

Características morfológicas:

– Huevos:
Semejantes a T. solium.

– Adulto:
Mide de 6 a 12 m. Sus Proglótidos son mas largos que anchos.
Los segmentos grávidos tienen un tallo uterino central con 15 – 20
ramificaciones uterinas a cada lado. Son móviles cuando están recién
eliminados. Escólex presenta cuatro ventosas características del género,
con una corona inerme, desprovista de rostelo sin ganchos y mide 2 mm
de diámetro (Figura 22).

58
FMH-USMP-Parasitología 2018

– Cisticerco:
Forma infectante y estadio larvario. La ingesta de la larva
cisticerco (Cysticercus bovis) presente en el músculo de vacuno,
ocasiona en el hombre teniasis intestinal.

Diagnóstico parasitológico:

Teniasis: El método más utilizado en la búsqueda de huevos en las materias


fecales. La observación de proglótidos o escólex permite algunas veces identificar el
agente etiológico

Cisticercosis: Estudiosde imágenes que incluyen radiografías, tomografía axial


computarizada y resonancia magnética. Entre los métodos inmunológicos, el de
preferencia es el Inmunoblot, por su alta sensibilidad y especificidad. El ELISA, se
utiliza con frecuencia, tiene buena sensibilidad, pero baja especificidad.

Echinococcus granulosus:

Características morfológicas:

– Adulto:
Mide de 3 a 6 mm. Cuello corto y delgado de 1 mm.
Estróbilo consta de 3 – 4 proglótidos, con poros genitales
regularmente alternos; el último segmento mide aproximadamente
la mitad del largo total del parásito. Anatomía interna semejante a
las tenias. Su escólex es pequeño, globular, mide 300 µm de
diámetro, Posee cuatro ventosas y un rostelo armado con doble
corona de ganchos de 25 – 30 ganchos El parasito adulto se
encuentra en el perro infectado (Hospedero definitivo) (Figura 23).

– Huevo:
Forma infectante. Presenta un embrión hexacanto
semejante a los de Taenia spp

– Quiste hidatídico o hidátide:


Estadio larvario. Tiene forma más o menos esférica,
pudiendo alcanzar hasta 10 cm. de diámetro. Esta constituida por
una membrana que consta de dos capas: Externa o cutícula (1
mm de espesor) e interna, germinativa o prolifera (25 mm de
espesor); esta ultima da lugar a la formación de escólices,
vesículas proliferas e hijas; presenta un contenido formado por un
liquido estéril incoloro o amarillo claro y un sedimento denominado

59
FMH-USMP-Parasitología 2018

“arenilla hidatídica” constituido por ganchillos, escólices y


vesículas que se desprenden de la capa germinativa.

La presencia de la forma larvaria en el hospedero intermediario (Humano


Ovinos, vacunos, porcinos….) produce la hidatidosis que es una enfermedad
que se adquiere al ingerir accidentalmente los huevos del Echinococcus
granulosus. La hidatidosis puede afectar a animales, tanto salvajes
como domésticos. El ser humano es un hospedero intermediario "accidental".

Diagnóstico parasitológico:

El diagnostico en el humano generalmente se realiza por observación de los


quistes en cirugías o autopsias y se confirma con examen microscópico que muestra
escólex y ganchos. Algunos estudios de imágenes permiten presumir el diagnostico.
Las pruebas inmunológicas son útiles en el diagnóstico y seguimiento después del
tratamiento.

Diphyllobothrium spp

La difilobotriosis es la parasitosis humana producida por cestodos del


género Diphyllobothrium, cuya especie más conocida es D. latum y D. pacificum.

Diphyllobothrium pacificum

Características morfológicas:

– Huevos:
Miden 60 x 75 µm de largo a 40 x 50 µm de ancho, ovales
o elípticos. Se observa un opérculo inconspicuo, sin hombros, en
uno de los extremos laterales, con un pequeño botón terminal en
el otro. La cáscara es delgada y lisa. El clivaje interno no esta
organizado y se extiende hasta la cáscara llenando
completamente el área interna. (Figura 24).

– Adulto:
Miden de 1 a 2 m. Proglótidos mas largos que anchos.
Conteniendo una estructura uterina indefinida en el centro del
proglótido, con aspecto de roseta. Escólex de forma lanceolada
con una hendidura longitudinal poco profunda, rodeada en ambos
lados por pliegues semejantes o labios, denominados botrias.
(Figura 24).

– Plerocercoide:

60
FMH-USMP-Parasitología 2018

Forma infectante. Se encuentra en la carne de pescado de


agua salada.

Diagnóstico parasitológico:

El método más utilizado en la búsqueda de huevos en las materias fecales. La


observación de proglótidos o parásitos adultos permite también identificar el agente
etiológico.

Hymenolepis spp:

La himenolepiasis es una parasitosis cosmopolita causada por la tenía


enana Hymenolepis nana e Hymenolepis diminuta. Ambas son mucho más
frecuentes en niños que en adultos.

Hymenolepis nana

Es el único cestodo del humano cuyo ciclo biológico no requiere


de hospederos intermediarios, cuyo mecanismo de transmisión habitual
es el oral-fecal;. Puede ocurrir la infección endógena cuando los huevos
eliminados en el intestino liberan la oncosfera que penetra
inmediatamente en las vellosidades.

Características morfológicas:

– Huevo:
Forma infectante: Huevo (Ciclo directo). Mide 40 x 60 µm. Son
ovales o subesféricas. La cáscara se compone de dos membranas, la
externa es relativamente delgada y tiene una superficie lisa; la interna
tiene dos polos opuesto de los que nacen 4 – 8 filamentos polares, que
se extienden entre las dos membranas (características diferenciales de
H. diminuta que carece de filamentos polares). Dentro de la membrana
interna se encuentra la oncósfera con tres pares de ganchos
denominada hexacanto (Figura 25).

– Adulto:
Rara vez se encuentra en muestras fecales, donde puede
confundirse con hilos delgados de moco. Mide menos de 40 mm de largo
y tiene proglótidos imprecisos. Mas anchos que largos. Su escólex es
pequeño con cuatro ventosas y un rostelo saliente con un anillo de 20 –
30 ganchos (Figura 25).

– Cisticercoide:
Estadio larvaria. Las oncosferas se liberan de los huevos y
penetran la lámina propia de las vellosidades intestinales, donde se
desarrollan las larvas cisticercoides, las cuales regresan a la luz

61
FMH-USMP-Parasitología 2018

intestinal transcurridos unos 5 o 6 días y se fijan a la mucosa mediante el


escólex. Se caracterizan por ser una estructura de forma alargada, con
un extremo anterior engrosado que contiene un escólex invaginado.

Diagnóstico parasitológico:

El método más utilizado en la búsqueda de huevos en las materias


fecales. La observación de proglótidos o parásitos adultos permite también
identificar el agente etiológico

Hymenolepis diminuta (accidental en el hombre)

Es un parásito de roedores, e infecta de manera accidental al humano,


mediante la ingesta de artrópodos hospederos intermediarios infectados con la
forma larvaria llamada cisticercoide.

Características morfológicas:

– Huevo:
Mide 70 - 85 µm de longitud, 60 – 80 µm de ancho, redondos o
vales. Tiene apariencia semejante a los huevos de H. nana. No posee
filamentos polares (Figura 25).

– Adulto:
Rara vez se encuentra en muestras fecales. Los proglótidos no
son precisos. Su escólex es pequeño y esférico, tiene cuatro ventosas
esféricas profundas y un rostelo redondeado sin ganchos (Figura 25).

– Cisticercoide:
Forma infectante y estadio larvario, Presente en varias especies
de pulgas, cucarachas y gorgojos, que son inadvertidamente ingeridas
por el hombre (Ciclo Indirecto).

Diagnóstico parasitológico:

El método más utilizado en la búsqueda de huevos en las materias


fecales. La observación de proglótidos o parásitos adultos permite también
identificar el agente etiológico

Dipylidium caninum (accidental en el hombre)

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FMH-USMP-Parasitología 2018

Denominada la tenia del perro, ya que es común en ellos, pero ocasionalmente


también encontramos en gatos y en algunos animales salvajes como los zorros. Puede
infectar a seres humanos, sobre todo a niños.

Características morfológicas:

– Huevo:
En general se observa paquetes de huevos, que son sacos que
contienen 5 – 15 huevos esféricos (Cápsula ovígera). Cada huevo mide 35 x 40
µm, son esféricos y encierran una oncosfera interna con seis ganchos delicados
(Figura 26).

– Adulto:
Puede medir hasta 60 cm. Sus Proglótido son mas largos que anchos,
con forma de barril, con un doble juego de estructuras reproductoras que tienen
dos poros genitales para cada segmento, uno a cada lado (otras especies de
Taenia sp. tienen solo un poro genital). Su escólex presenta un rostelo cónico u
ovoide con 30 – 150 ganchos pequeños, semejantes a espinas, dispuestas en
varias hileras. El róstelo puederetraerse en una depresión en la porción
superior del escólex (Figura 26).

– Cisticercoide
Forma infectante y estadio larvario. Se desarrollan en la cavidad
corporal de las pulgas del perro o el gato, que son inadvertidamente ingeridas
por el hombre (Ciclo Indirecto).

Diagnóstico parasitológico:

El método mas utilizado en la búsqueda de huevos en las materias fecales. La


observación de proglótidos o parásitos adultos permite también identificar el agente
etiológico.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

ESQUEMAS (PRÁCTICA 10-11)

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FMH-USMP-Parasitología 2018

PRÁCTICA 12- 13
IDENTIFICACIÓN DE NEMÁTODOS INTESTINALES

I. INTRODUCCIÓN

Los nematodos son gusanos cilíndricos, alargados, su cuerpo no se divide en


regiones. Presentan aparato digestivo completo. En su extremo anterior algunas
especies poseen papilas, ganchos, placas o dientes. Su ciclo biológico incluye estadios
de huevo, larva que después de cuatro mudas dan lugar al adulto. Su fecundación es
interna. Presentan dimorfismo sexual y la gran mayoría son ovíparos aunque también
pueden ser vivíparos (Trichinella) u ovovivíparos (Strongyloides).

En los nemátodos intestinales (Áscaris, Trichuris y Enterobius) la forma


infectante es el huevo larvado (Figura 17) y la forma diagnostica es la observación de
huevos o del adulto. En otro grupo de nematodos (Ancylostoma, Necator y
Strongyloides) la forma infectante es la larva filariforme mientras que la forma
diagnóstica es la larva rabditiforme (Strongyloides) y huevos (Uncinarias o
Anquilostomideos). La vía de infección de la mayoría de los nemátodos es la oral y el
mecanismo de transmisión es la ingestión de agua o alimentos contaminados con el
estadio infectante del parasito..

II. MATERIALES:

– Láminas coloreadas y montadas


– Microscopio.

III. PROCEDIMENTO:

Cada lámina debe ser observarla con aumento de 10 o 40 X.

IV. NEMATODES DE IMPORTANCIA MEDICA:

Ascaris lumbricoides:

Características morfológicas:

- Huevos:
Miden alrededor de 45 a 75 µm de longitud por 35 a 50 µm de diámetro.
Presentan forma: Redondos u ovoides, color amarillo oscuro, con una
membrana envolvente: Una externa festoneada, una media y otra interna lisa.
Cuando los huevos son infecundos están deformados y tienen un aspecto
vacuolar. Los huevos son eliminados con las heces fecales. En los huevos
fértiles se desarrollan los estadios larvarios 1 y 2, convirtiéndose asi en la forma
infectante (Figura 27).

65
FMH-USMP-Parasitología 2018

- Adulto:
Se caracterizan por presentar una boca con tres labios provistos de
papilas sensoriales. las características de identificación útiles son rayas
longitudinales blancas sobre ambos lados del cuerpo y la falta de segmentos
musculares. Presentan una longevidad aproximada de 1-2 años. La hembra
adulta, alargada, cilíndrica, de color cremoso, mide en promedio 30 cm de
longitud y 5 mm de diámetro, con aparato reproductor que se abre en la vulva,
ventral, con ano independiente. El macho mide unos 15 - 20 cm, y presenta un
extremo posterior enroscado, en el que se encuentran el reproductor con cloaca
(unión del vaso deferente y recto) y espículas utilizadas en la cópula.

Diagnóstico parasitológico

La demostración microscópica de los huevos es la base del diagnóstico. Se


recomienda realizar exámenes seriados de heces y utilizar métodos de concentración
(técnica de Faust o de Ritchie). Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar
los parásitos por aspirado duodenal o se pueden realizar estudios radiológicos

Se puede estimar la intensidad de la infección (número de huevos por gramo


de heces) utilizando las técnicas de Stoll o Kato-Katz.
.
Trichuris trichiura:

Características morfológicas:

- Huevo:
Miden alrededor 50-55 µm por 22-23 µm y tienen cáscara gruesa.
Necesitan de 10-14 días a 20°-30° C para completar su desarrollo. Tienen
forma de “barril” en cuyos extremos se distinguen un par de tapones polares
(Figura 27).

El huevo puede estar en el suelo aproximadamente entre 10 - 14 días,


durante este tiempo se desarrolla dentro de el una larva (L1),que será la forma
infectante de este parásito. Si estos huevos larvados son ingeridos, a nivel del
duodeno la maquinaria enzimática hace que estos huevos eclosionen, liberando
a la luz del intestino delgado la larva de primer estadio (L1) del parásito, esta
larva realiza varias mudas y progresivamente se va formando el estadio adulto
del parásito, cuyo hábitat definitivo sera el ciego

- Adulto:
Se caracterizan por presentar una boca sin labios provista de un estilete
bucal. Presentan una longevidad aproximada de 6-8 años. Tienen forma de
“látigo”, con el tercio anterior más delgado. Las hembras miden aprox. 3-5 cm.
mientras que los machos miden entre 2- 4 cm. y se caracterizan por la
presencia de una espícula copulatoria. Cada hembra llega a ovipositar un
promedio de 3-7 mil huevos diarios. Presentan una viabilidad aproximada de 1
año (Figura 28).

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FMH-USMP-Parasitología 2018

Diagnóstico parasitológico

La demostración microscópica de los huevos es la base del diagnóstico. Se


recomienda realizar exámenes seriados de heces y utilizar métodos de concentración
(técnica de Faust o de Ritchie). Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar
los parásitos por aspirado duodenal o se pueden realizar estudios radiológicos. Las
técnicas serológicas y moleculares no son de mucha utilidad.

Se puede estimar la intensidad de la infección (número de huevos por gramo de


heces) utilizando las técnicas de Stoll o Kato-Katz.

Enterobius vermicularis

Características morfológicas

- Huevo:
Miden alrededor de 50-60 µm por 20-30 µm, son de forma oval, y tienen
cáscara delgada. Necesitan de 4-6 horas a 20°-30° C para completar su
desarrollo. Los huevos recién depositados por las hembras no se encuentran
embrionados. Presentan una viabilidad aproximada de 30-50 días (Figura 27)

Son la forma infectiva. Se adquiere habitualmente por contaminación


fecal - oral, a través de fómites. A continuación de la ingestión de huevos
infectivos, la larvas eclosionan en el intestino delgado y los adultos se
establecen en el colon.

- Adulto:
Se caracterizan por presentar una boca con tres labios provistos de
papilas sensoriales y una par de aletas cervicales. Presentan una longevidad
aproximada de 2-3 meses. Las hembras miden entre 8-12 mm mientras que los
machos miden entre 3-5 mm y se caracterizan por la presencia de un par de
espículas copulatorias. Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 10 mil
huevos durante su vida (Figura 29).

Diagnóstico parasitológico:

La demostración microscópica de los huevos es la base del diagnóstico,


utilizando la técnica de Graham (“cinta engomada”) por cinco días sucesivos. Los
exámenes seriados de heces y los métodos de concentración son de poca utilidad.

También se puede recurrir al uso de hisopados anales. Las técnicas serológicas


y moleculares no son de mucha utilidad.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

Toxocara canis/ Toxocara felis

Características morfológicas

- Huevo:
Miden 80 μm Tras la excreción de los huevos en las heces, las larvas se
desarrollan en su interior hasta el estadio L-II en 10 a 15 días, convirtiéndose
asi en la forma infectante. Dadas las condiciones adecuadas, los huevos
pueden sobrevivir de 2-4 años.

- Adultos:
Su hábitat es el intestino delgado. El hospedero definitivo es el perro y
gato, hospedero accidental el hombre. Producen la larva migrans visceral,
síndrome clínico que resulta de la invasión de vísceras humanas por larvas de
nemátodos, cuyos adultos son por lo general parásitos de animales inferiores El
adulto macho puede medir hasta 10 cm. y la hembra hasta 12 cm.

Diagnóstico parasitológico:

En el humano se puede diagnosticar por técnicas serológicas: ELISA, Western


Blot. La demostración microscópica de los huevos es la base del diagnóstico en el
hospedero definitivo

Ancylostoma duodenale y Necator americanus

Características morfológicas

- Huevo:
No se pueden diferenciar a nivel de especie. Se manejan como “ huevo
de uncinarias o Anquilostomideos” para generalizarlo. Tienen una cascara muy
delgada, membrana vitelina, capa quitinosa pero no poseen una capa proteica
como Ascaris. En el interior se ven blastómeros. Los huevecillos no salen
embrionados, pero embrionan muy rápido, aproximadamente en 24 horas
(Figura 27).

- Larva Rabditiforme:
Es la que se encuentra en una muestra de heces guardada (recogida 1-
2 días antes) en una persona que está infectada con uncinarias. Tienen un
vestíbulo bucal largo y el primordio genital no visible.

- Larva filariforme:
Forma infectante, exhiben una gran movilidad, miden alrededor de 500
µm de longitud. No se aprecia en ellas la cápsula bucal. El esófago es recto o
filiforme y presenta una pequeña protuberancia en su unión con el intestino. No

68
FMH-USMP-Parasitología 2018

se alimenta; vive de las reservas de glucógeno por lo que están desesperadas


por un hospedero.

- Adulto:

Ancylostoma duodenale:
Se caracteriza por presentar una cápsula bucal con dos pares de
dientes. Presentan una longevidad aproximada de 6-8 años. Las hembras
miden entre 10-13 mm, los machos miden entre 8-11 mm y se caracterizan por
la presencia de un par de espículas copulatorias y una bolsa copulatriz (Figura
30).

Necator americanus :
Se caracteriza por presentar una cápsula bucal con un par de placas
cortantes. Presentan una longevidad aproximada de 4-5 años. Las hembras
miden entre 9-11 mm, los machos miden entre 7-9 mm y se caracterizan por la
presencia de un par de espículas copulatorias y una bolsa copulatriz (Figura 30).

Diagnóstico parasitológico:

La demostración microscópica de los huevos es la base del diagnóstico. Se


recomienda realizar exámenes seriados de heces y utilizar métodos de concentración
(técnica de Faust o de Ritchie). Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar
los parásitos por aspirado duodenal o se pueden realizar estudios radiológicos. Las
técnicas serológicas y moleculares no son de mucha utilidad

Se puede estimar la intensidad de la infección (número de huevos por gramo de


heces) utilizando las técnicas de Stoll o Kato-Katz.

Para identificar y diferenciar las larvas rabditiformes se requiere de su cultivo a


través de la técnica de Harada-Mori.

Strongyloides stercoralis:

Características morfológicas:

- Huevo:
Miden 55-60 µm por 28-32 µm. Son de forma oval y tienen cáscara
delgada (normalmente NO se eliminan con las heces). Necesitan de 12 horas a
20°-30° C para completar su desarrollo. Cada hembra llega a ovipositar un
promedio de 15-50 huevecillos diarios. No se conocen datos acerca de su
viabilidad.

69
FMH-USMP-Parasitología 2018

- Larvas rabditiforme:
Forma diagnostica. (Son eliminadas en las heces) Son de forma
alargada y miden apros 250 µm de longitud. Se caracterizan por la presencia de
un bulbo esofágico.

- Larva filariforme:
Forma infectante, Son de forma alargada y miden entre 500-700 µm de
longitud. Se caracterizan por la ausencia del bulbo esofágico. Tienen una
viabilidad de 45-50 días.

- Gusanos adultos:
Se caracterizan por presentar una boca con tres labios provistos de
papilas sensoriales. No se conocen datos acerca de su longevidad. Las
hembras miden entre 2,1-2,7 mm. No se ha logrado hallar a los machos, por lo
que se considera que la hembra se reproduce por partenogénesis.

Diagnóstico parasitológico:

La demostración microscópica de larvas rabditiformes es la base del


diagnóstico. Se recomienda realizar exámenes seriados de heces y utilizar métodos de
concentración (técnica de Ritchie o de Baermann). Para identificar y diferenciar las
larvas rabditiformes se requiere de su cultivo a través de la técnica de Harada-Mori.

También puede utilizarse el diagnóstico indirecto para detectar coproantígenos


con la ayuda de la técnica de inmunoensayo enzimático (ELISA). Las técnicas
moleculares no son de mucha utilidad.

Trichinella spiralis:

Características generales:

La triquinelosis es una enfermedad zoonotica causada por T. spiralis, la cual es


de forma cilíndrica y delgada. Se pueden identificar tres estadios: Estadio adulto
(hembras y machos) , larva recién nacida y la larva de musculo enquistada o larva
infectante.

El adulto de este gusano parasita el intestino delgado del hombre, cerdo y otros
mamíferos. Los machos miden hasta 1.5 mm y las hembras hasta 3 mm

Diagnóstico parasitológico:

Clínicamente es necesario hacer el diagnóstico diferencial con otros síndromes


Infecciosos que produzcan síntomas generales y mialgias.

Las pruebas de mayor sensibilidad y especificidad son ELISA y hemaglutinación


indirecta.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

ESQUEMAS (PRÁCTICA 12-13)

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FMH-USMP-Parasitología 2018

PRÁCTICA 14
IDENTIFICACIÓN MORFOLÓGICA DE ARTRÓPODOS

I. INTRODUCCIÓN:

El Phylum Artrópodo comprende el mayor número de especies del Reino


Animal, caracterizadas por tener básicamente un exoesqueleto quitinoso, cuerpo y
apéndices segmentados. A este Phylum pertenecen los ectoparásitos.

Los artrópodos son animales segmentados, en su mayoría presentan una


cabeza, tórax y abdomen. La anatomía interna de los artrópodos es un espacio lleno
de hemolinfa, llamado hemocele. Los artrópodos juegan el papel de vectores en la
transmisión de enfermedades. El vector es el portador viviente, por diseminación o
inoculación o ambas a la vez del agente causal de la enfermedad.

El Phylum Artrópodo incluye a las siguientes clases de interés médico: Clase


insecta y Clase Arácnida.

II. MATERIALES:

– Láminas montadas.
– Especímenes biológicos macroscopicos:
• Larvas de moscas: Dermatobia hominis.
• Arañas adultas: Loxoceles laeta y Latrodectus mactans
– Microscopio.
– Estereoscopio.

III. PROCEDIMENTO:

Cada lámina debe ser observarla con aumento de 10 o 40 X. En los especímenes


biológicos la observación es macroscópica o con ayuda del esteroscopio

IV. ARTROPODOS DE IMPORTANCIA MEDICA:

4.1 CLASE INSECTA

Comprende a todos los insectos. Respiran por traqueas que llevan aire a los
tejidos por medio de unas traqueolas finamente ramificadas. Su cuerpo está dividido
en tres regiones: cabeza, tórax y abdomen.

- Cabeza:
Sus apéndices principales son un par de antenas, los ojos compuestos y
los ojos simples u ocelos, las piezas bucales.
- Tórax:
Formado por tres segmentos, cada uno con un par de patas y dos pares
de alas.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

- Abdomen:
Se compone por un número variable de segmentos, el 8vo y 9no. Llevan
los órganos sexuales externos usados para la copula en el macho el oviscato o
pieza para poner huevos en las hembras.

A. ORDEN SIPHONAPTERA

Características morfológicas

Las pulgas son insectos hematófagos que presentan el cuerpo aplanado


lateralmente, carecen de alas, un cuerpo recubierto de una gruesa capa de quitina, con
un color marrón oscuro. Son holometábolos. Son transmisores de enfermedades
infecciosas.

Su cuerpo esta dividido en: Cabeza, la cual es estrecha y cuneiforme. Las


antenas son cortas y gruesas. Los ojos ausentes con frecuencia presentan 2 ocelos.
Aparato bucal picador-chupador. Con un peine o ctenidios (peine genal o pronotal).
Algunas especies no presentan. Tórax, presenta tres segmentos, cada uno con un
estigma y un par de patas y Abdomen, presenta 10 segmentos, 8 con un par de
espiráculos. (Figura 31). En un espécimen hembra se observa la espermateca situada
en el 7mo esternito de forma variable, según las especies. Observe en la parte
posterior, una placa porosa con numerosas cerda llamada Pygidium, es una estructura
sensorial. La genitalia del macho es más compleja (Figura 32).

Especímenes representantes:

- Ctenocephalides canis:
Ctenidias genales y pronotales. Cabeza corta y alta. Primer diente
genal es corto (Figura 33).

- Ctenocephalides felis:
Cabeza baja y alargada. Primer y segundo diente genal tienen la
misma altura (Figura 33).

- Xenopsylla cheopis:
Carecen de ctenidias. Cerda ocular delante del ojo. Mesopleura
dividida (Figura 33).

- Pulex irritans:
Carecen de ctenidias, Cerda ocular debajo del ojo. Mesopleura
entera (Figura 33).

- Tunga penetrans:
No presenta peines. Su cabeza es angular (Figura 34).

73
FMH-USMP-Parasitología 2018

Diagnóstico parasitológico:
Con ayuda de pinzas se deben desprender las pulgas del hospedador y
preservarlo en alcohol de 96‫ ס‬para su identificación.

B. ORDEN ANOPLURA

Características morfológicas

Los piojos son insectos que miden 2 y 4 mm de longitud, siendo las hembras de
mayor tamaño que los machos. Tienen el cuerpo achatado en sentido dorsoventral, el
color grisáceo, son hemimetabolos, eminentemente hematófagos específicos. Son
transmisores de enfermedades infecciosas.

Su cuerpo esta dividido en: Cabeza, con ojos simples laterales. Piezas bucales
retráctales tipo sucto picador. Tórax, dividido en Pro, meso y metatórax. Phthirus
pubis no presenta la característica constricción torácica-abdominal que si esta presente
en Pediculus. Estigma respiratorio torácico. Tres pares de patas: coxa, trocánter, fémur,
tibia, la cual presenta un apéndice terminal, el tarso de un solo segmento que termina
en una garra opuesta a la tibia, funcionando como una pinza que facilita su adherencia
a pelos y ropa y Abdomen, con 8 segmentos visibles y 6 pares de estigmas
respiratorios. La hembra se diferecian del macho por presentar la c extremidad
abdominal bilocada; en el macho es redondeada y se observa la espícula. Los huevos
llamados liendres son blancos, ovoides, de 0.8 mm y presentan en el polo libre un
opérculo mamelonado.

Especímenes representantes:

- Pediculus humanus variedad capitis (Figura 35).


- Pediculus humanus variedad corporis.
- Phthirus pubis (“piojo cangrejo, ladilla”) (Figura 36).

Diagnóstico parasitológico
Para remover piojos es utilizando peines especiales para desprenderlos del
hospedador. Preservarlo en alcohol de 96‫ ס‬para su identificación.

C. ORDEN DIPTERA

Existen múltiples especies de dípteros que causan MIASIS (parasitismo por larva de un
insecto). Si bien la mayoría de los casos ocurre sobre ganado vacuno o bovino y la
infestación en el hombre es accidental. Dermatobia hominis tiene al ser humano como
blanco principal.
Es la infestación de animales vertebrados y humanos por larvas de dípteros
(moscas). Las larvas se alimentan de los tejidos vivos o muertos del hospedero.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

Larvas biontófagas :

– Dermatobia hominis (Figura 37).


– Cochliomya hominivorax
– Oestrus ovis

Larvas necrobiontófaga:

– Sarcophaga haemorrhoidalis

No especifica: Accidentales :

– Musca domestica.

Diagnóstico parasitológico:

Ante la sospecha de la infestación por larvas de mosca (personas o animales)


observar con una lupa, que la larva ingresa y sale parcialmente de las lesiones de la
piel o de algún órgano afectado. Las larvas pueden ser extraídas en forma mecánica o
quirúrgica para que no continúen dañando los tejidos. Larvas de moscas extraídas de
pacientes conservadas en alcohol de 70% para su posterior identificación.

4.2. CLASE ARACNIDA:

Formado por artrópodos que poseen 4 pares de patas, cabeza y tórax están
unidos formando el cefalotórax, carecen de alas y antenas.

La taxonomía de los acarina es compleja y no esta aun resuelta. De manera


tradicional, los acarina han sido considerados un orden de la clase arácnidos, orden
Acarina o Acari, pero en la mayoría de estudios recientes, los acarina se consideran
una subclase que puede dividirse en 3 superórdenes que incluyen diversos órdenes.

A. ORDEN ACARINA

Son pequeños, con larvas hexápodas (de seis patas), y


tres estadios ninfales de ocho patas (el ciclo está abreviados en grupos derivados).
El cuerpo está dividido en dos regiones. La región anterior, llamada gnatosoma, que
es pequeña y está delimitada posteriormente por una sutura; lleva los quelíceros y
los pedipalpos, las coxas (primer artejo de la pata, por el cual esta se une al tórax) de
los cuales están fusionadas centralmente para formar el hipostoma. La region posterior,
conocido como idiosoma que lleva las patas y ha perdido todo rastro externo
de segmentación

75
FMH-USMP-Parasitología 2018

Especímenes representantes:

Sarcoptes scabiei

Características morfológicas:

Son ovalados , la hembra mide 350 µm y el macho 250. No tiene ojos y en su


tegumento blando y delgado se dibujan líneas ondulantes paralelas y presentan cerdas
o pelos salientes. Como en todos en los arácnidos el equivalente a la cabeza esta
constituido por el cefalotórax. En la parte anterior sobresale el capitulo provisto del
aparato bucal fuerte, que le permite penetrar la epidermis. Posee cuatro pares de pata
muy atrofiadas que terminan en filamentos largos (Figura 38)

La hembra adulta es la que parasita la epidermis produciendo el surco o túnel


acarino, en las zonas delgadas de la piel, como los pliegues interdigitales de manos y
pies, muñecas y otras partes del cuerpo, pero no en cuero cabello, ni palma de manos
y pies. La hembra coloca huevos en el túnel y las larvas que eclosionan emergen en la
superficie de la piel y se transforman en ninfas y adultos . Las hembras juveniles son
fecundadas y comienzan a labrar el surco.

Diagnóstico parasitológico:

Debe sospecharse ante una dermatosis muy pruriginosa. La visualización de


surcos de 5 a 20 mm de longitud, es diagnóstica, pero a menudo la dificultan las
polimorfas lesiones superpuestas. Puede facilitarse mediante su tinción con azul de
metileno. En caso de duda, el examen microscópico del material obtenido por raspado
de surcos intactos es confirmatorio.

Demodex folliculorum:

Características morfológicas:

Los Demodex son ácaros microscópicos implicados en el desarrollo de varias


enfermedades oculares y dérmicas. Atendiendo a su localización Demodex folliculorum
se localiza en el folículo piloso y Demodex brevis en las glándulas sebáceas.

Es un ácaro de la familia Demodicidae. Presenta un cuerpo fusionado,


pudiéndose diferenciar dos partes: El gnatosoma o parte anterior donde se localizan
las piezas bucales, y El idiosoma que se corresponde con la porción posterior del
cuerpo. Esta se divide en podosoma (4 pares de patas cortas) y opistosoma la cual
presenta una estriación transversal característica. El tamaño es de 250-300 µm, siendo
la hembra de mayor tamaño que el macho (Figura 39).Los huevos de Demodex poseen
una morfología en punta de flecha.

Diagnóstico parasitológico:

Para su diagnóstico se han de arrancar unas 8-10 pestañas del parpado afecto,
o extraer la materia grasa de los folículos por compresión del borde palpebral y

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FMH-USMP-Parasitología 2018

sebáceo de la piel, colocarlos sobre un portaobjeto, con una gota de xilol en el segundo
caso y observarlos al microscopio, 100 X, 400 X.

Garrapatas

Características morfológicas:

Ectoparásitos que se alimentan de sangre de sus hospederos. Son las formas


gigantes de los ácaros, en ayunas pueden ser pequeñas sin embrago cuando se
encuentran repletas de sangre succionada, alcanza un mayor tamaño. Los adultos
miden entre 2 y 30 mm de largo, dependiendo de la especie, y del grado de ingesta de
sangre en su alimentación (Figura 40).

Las garrapatas se diferencian de los demás Acari por poseer en el dorso de la


primera pata un visible poro sensorial, conocido como órganos de Halle, y la mayoría
presenta un prominente hipostoma dentado. Las garrapatas están en dos familias: los
argásidos (Argasidae, garrapatas blandas, hipostoma cubierto) y los ixódidos (Ixodidae,
garrapatas duras, hipostoma libre).

Especímenes representantes:

Garrapatas blandas: Argas persicus, Otobuis megnini


Garrapatas duras: Ixodes ricinus, Boophilus microplus, Rhipicephalus
sanguimeus

Diagnóstico parasitológico:

Para remover garrapatas es utilizando pinzas finas de acero y tirar firmemente


para desprenderla del hospedador. Preservarlo en alcohol de 96‫ ס‬para su identificación.
El diagnóstico de las especies de garrapatas dependerá de varios factores, como lugar
de colecta, hospedador, nombre vulgar del parásito, por lo que se recomienda solicitar
asesoramiento de expertos en el tema para estos casos.

ORDEN ARANEAE:

Se distinguen por tener ocho patas, no presentan antenas, su cabeza no esta


diferenciada del cuerpo, sino que esta dividido tipicamente en dos regiones principales:
El cefalotórax (prosoma) y el abdomen (opistosoma).

Especies representativas:

Loxosceles laeta: “Araña casera”:

Características morfológicas

Tamaño: 8-15 mm . El cefalotórax es ligeramente aplanado dorso ventralmente,


con un surco longitudinal. De color marrón claro. Quelícero, formados por dos

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FMH-USMP-Parasitología 2018

segmentos: uno basal y otro distal en forma de garra encorvada, con un orificio
subterminal, para la salida del veneno. Pedipalpos, de la misma estructura que una
pata, en los machos se modifican y constituyen órganos de cópula. Seis ojos y su
disposición en tres filas. Cuatro pares de patas: coxa, trocánter, fémur, patella, tibia y
tarso. El abdomen es de forma ovoide, de color grisáceo, con pelos. En la parte
posterior y ventral, observe una hilera de seis estructuras por donde salen los hilos
secretados por las glándulas de seda.

Posee un fuerte poder citotóxico y proteolítico, causa severa alteración de los


endotelios vasculares, hemolisis y puede matar a un ser humano.

Latrodectus mactans: “Viuda negra” o “Lucacha”.

Características morfológicas

Tamaño: Adultos 1.5 cm. Todo el cuerpo aterciopelado. El cefalotórax


presenta quelíceros, pedipalpos y ocho ojos, su disposición en dos hileras horizontales.
Cuatro pares de patas: coxa, trocánter, fémur, patella, tibia y tarso. El abdomen en
especímenes vivos, se observa, en la parte ventral una mancha de color rojizo, reloj de
arena.

Posee potente acción neurotóxica, no causa lesión local cutánea y,


clásicamente, hay dolor intenso, contracturas musculares, sudoración, salivación y
puede llevar a la parálisis respiratoria y la muerte.

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ESQUEMAS (PRÁCTICA 14)

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ANEXOS

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Figura 1. Morfología de protozoarios parásitos

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Diferencias entre Entamoeba histolytica y Entamoeba dispar

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Claves para la identificación de amebas comensales

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Clave para la identificación de flagelados

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Figura 3. Amebas intestinales

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Figura 4. Amebas de vida libre

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Figura 5. Flagelados intestinales

Figura 6. Ciliado intestinales

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Figura 7. Esporozoarios intestinales

Figura 8. Taquizoitos de Toxoplasma gondii

Figura 9. Sarcoquiste de Sarcocystis sp.

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Figura 10. Diferentes estadios evolutivos de Leishmania spp.

Figura 11. Lutzomya spp (Vector de Leishmania peruvianus)

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Figura 12. Diferentes estadios evolutivos de Trypanosoma cruzi.

Figura 13. Caracteristicas morfológicas de los triatominos

92
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Figura 14. Cabezas de los género: Panstrongylus, Triatoma y Rhodnius


(Vectores de Trypanosoma cruzi)

Figura 15. Trofozoito de Trichomonas .

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FMH-USMP-Parasitología 2018

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Figura 16. Diferencias morfológicas de Plasmodium en sangre periférica

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Figura 17. Características morfológicas. Adulto hembra de Anopheles

Figura 18. Huevos de trematodes

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Figura 19. Características morfológicas de tremades adultos:


A) Fasciola hepática. B) Paragonimus spp.

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101
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Figura 20. Esquema de Schistosoma mansoni – adulto

Figura 21. Taenia sp: A) Huevo embrinado B) Embrio libre (oncosfera)


C) Cisticerco D) Cisticerco con escólex devaginado

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Figura 22. Esquema de Taenia solium, Taenia saginata y Taenia asiatica

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Figura 23. Esquema de Echinococcus granulosus

Figura 24. Esquema de Diphyllobothrium spp.


A) Escolex b) Proglotido C) Huevo

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Figura 25. Esquema: Hymenolepis nana: A) Escolex B) Huevo;


Hymenolepis diminuta: C) Escolex D) Huevo

Figura 26 . Esquema de Dipylidium caninum.


A. Capsula ovigera B. Escólex C. Proglótido maduro D. Proglótido grávido

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Figura 27. Esquema de los diferentes huevos de nematodes

Figura 28. Esquema de Trichuris trichura - Macho

Figura 29. Esquema de Enterobius vermicularis

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Figura 30. Esquema de Uncinarias - Adulto

Figura 31. Esquema de una pulga

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113
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Figura 32. Genitalia del macho

Figura 33. Esquema de la cabeza y protórax de algunas pulgas

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Figura 34. Esquema de Tunga penetrans

Figura 35. Esquema de Pediculus humanus

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Figura 36. Esquema de Pthirus pubis

Figura 37. Larva de la mosca Dermatobia hominis

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Figura 38. Esquema de Sarcoptes scabiei

Figura 39. Esquema de Demodex folliculorum

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FMH-USMP-Parasitología 2018

Figura 40. Esquema de una garrapata.

GLOSARIO

AGENTE INFECCIOSO: Organismo (bacteriano, rickettsioso, viral, micótico,


protozoario o helmíntico) capaz de producir una infección o una enfermedad
infecciosa.
ARTROPODOS: Invertebrado con patas articuladas y esqueleto quitinoso.
AXOSTILO: Estructura rígida de posición axial que constituye el sostén de algunos
protozoos flagelados.
BOTRIUM: Surco longitudinal que sirve como elemento de fijación en el escólex de
cestodos pseudofilideos. Plural: botria.
COMENSALISMO: Relación simbiótica en la cual una especie, el comensal, vive a
expensas de otra especie, el hospedero, sin ocasionarle ningún daño.
CRUSTÁCEO: Artrópodo con 5 pares de patas.
CTENIDIO: Peine característico de la cabeza y porción anterior del tórax en las
pulgas.
CONTACTO: Individuo (humano o animal) que ha estado en asociación con un
individuo infectado, teniendo la oportunidad de adquirir la infección.

118
FMH-USMP-Parasitología 2018

CONTAGIO: Transferencia directa del agente infeccioso desde la fuente de


infección al nuevo huésped.
ECTOPARÁSITO: Parásito que vive en la superficie externa del hospedero.
EMBRIOFORO: Cubierta que rodea a la oncósfera de los platelmintos.
ENDOPARÁSITO: Parásito que vive en el interior del hospedero.
ENFERMEDAD: Conjunto de fenómenos que se producen en un organismo a
consecuencia de la acción de una causa patógena, reaccionando contra ella.
ESCÓLEX: Órgano de fijación o "cabeza" de un cestodo.
ESTRÓBILA: Conjunto de proglótidos de un cestodo.
EXUVIA: Muda resultante de las ecdisis.
ENDEMIA: Prevalencia elevada y mantenida de una enfermedad humana
determinada dentro de un área geográfica.
EPIDEMIA: Producción, en una comunidad o región, de casos similares en un
determinado período, en número claramente superior a la frecuencia habitual y
derivados de una fuente común o por diseminación.
EPIZOOTIA: Lo mismo que epidemia, pero referido a animales.
INESPECIFICIDAD. Porcentaje de casos en que la reacción resulta falsamente
positiva.
ESPOROZOO: Protozoo parásito que se reproduce por esporogonia.
ESPOROZOÍTO: Elemento resultante de la esporogonia de los esporozoos.
ESQUIZOGONIA: Ciclo de reproducción asexuada de los esporozoos.
ESQUIZONTE: Elemento resultante del ciclo esquizogónico.
ESTROBILA: Conjunto total de proglótidos que constituyen el cuerpo de un
cestodo.
FOMITE: Objeto (agua, aire, toalla, etc.) que contiene elementos infectantes y
pasivamente puede ser vehículo mecánico en su transmisión indirecta.
FORMA INFECTANTE: Fase del parásito capaz de infectar el huésped.
GAMETOGONIA: proceso de reproducción sexuada de los esporozoos.
HÁBITAT: Lugar donde en forma natural vive un ser biológico.
HUÉSPED DEFINITIVO: Hospedero en el cual el parásito alcanza su madurez
sexual.
HUÉSPED INTERMEDIARIO: Hospedero en el cual el parásito desarrolla parte de
su ciclo evolutivo, sin alcanzar su madurez sexual.
IMAGO: Artrópodo adulto. Se usa especialmente en el caso de insectos.
INFECCIÓN: Entrada y desarrollo o multiplicación de un agente infeccioso en el
organismo de una persona o animal.
INFESTACIÓN: Alojamiento, desarrollo y reproducción de artrópodos en la
superficie del cuerpo, pelos, ropas objetos e incluso ambientes. Se emplea también
en el caso de roedores.
INSECTO: Artrópodo con 3 pares de patas.
INCIDENCIA: Número de casos nuevos de una enfermedad que se presentan
durante un período determinado, en relación con la población donde ocurren.
Generalmente se expresa en forma de tasa.
INSECTICIDA: Sustancia química, natural o sintética, utilizada en el exterminio de
artrópodos. Se puede aplicar en forma de polvo, líquido, pulverizado, o aerosol.
LARVA: Forma inmadura en el ciclo evolutivo de helmintos y artrópodos.
MEROZOITO: Célula resultante del proceso de esquizogonia o división múltiple que
presentan algunos protozoos.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

METAZOO: Animal Pluricelular.


MORBILIDAD: Relación entre el número de afectados de una enfermedad
determinada y la población total de una zona.
MORTALIDAD: Relación entre el número de muertos por todas las causas y la
población total de una zona.
MUDA: (ECDISIS): Vaina o tegumento que envuelve a artrópodos y a algunos
gusanos (nematodos) y que en las etapas juveniles, de crecimiento, se desprende
dando lugar a una nueva envoltura que puede desprenderse a su vez o ser
definitiva.
MUTUALISMO: Tipo de simbiosis en la cual se benefician recíprocamente
hospedero y simbionte.
MIASIS: Parasitación de órganos o tejidos humanos o animales por larvas de
mosca.
NINFA: Estadios juveniles tanto de insectos con metamorfosis incompleta como de
ácaros y garrapatas.
ONCÓSFERA: Larva con seis ganchitos que emerge de los huevos de los
eucestodos. También se llama hexacanto.
OOQUISTE: Forma quística que contiene el cigoto resultante de la esporogonia en
los Apicomplexa y los cuales pueden estar cubiertos por una envoltura translúcida
(Cystoisospora) o estar desnudos (Plasmodium).
PARÁSITO ACCIDENTAL: Parásito que se encuentra en un huésped no habitual.
PARÁSITO FACULTATIVO: Es aquel que desarrolla algunos protozoarios y hongos
que viven sobre materias orgánicas en descomposición, pero en ocasiones
parasitan sobre heridas, ulceraciones, etc.
PARÁSITO OBLIGADO: Es aquel que necesariamente en alguna etapa o
permanentemente ejerce su acción parasitaria.
PARÁSITO PERIODICO: Parásito que cumple parte de su ciclo en el ambiente y en
el huésped.
PARÁSITO PERMANENTE: Parásito que vive toda su existencia en o sobre su
hospedero.
PARÁSITO TEMPORAL: Parásito que intermitentemente depende de un hospedero
para subsistir y luego lo abandona.
PERIODO PREPATENTE: Etapa de la infección parasitaria comprendida desde el
momento de la infección hasta la aparición de la sintomatología o la presencia del
parásito.
PROGLÓTIDO: Segmento de la estróbilo de los cestodos, la cual contiene los
órganos reproductores masculinos y femeninos.
PERIODO DE INCUBACIÓN: Intervalo que transcurre entre la infección de un
sujeto susceptible (persona o animal) y el momento que presenta las primeras
manifestaciones de la respectiva enfermedad.
PUPA: Etapa en la metamorfosis de los dípteros, caracterizada por la existencia de
un pupario en cuyo interior se producen importantes cambios que culminan con la
formación del imago o insecto adulto.
QUISTE: Forma inmóvil de resistencia y de multiplicación, envuelta por una doble
membrana formada por los protozoos.
SP: Término usado cuando se diagnóstica el género de un parásito y no se puede
identificar la especie.

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FMH-USMP-Parasitología 2018

SUSCEPTIBLE: Persona o animal que carece de resistencia contra un agente


patógeno y que en consecuencia puede contraer la enfermedad si se expone a la
infección por dicho agente.
TROFOZOITO: Forma vegetativa activa y que se alimenta, entre los protozoos.
VECTOR: organismo animal, generalmente artrópodo, que puede transportar
activamente un agente desde la fuente infectante hasta un susceptible.
VECTOR MECÁNICO: Es el vector que lleva en el exterior de su cuerpo o en
interior agentes patógenos.
VIA DE INFECCIÓN: Sitio (s) a través de los cuales se introduce el agente
etiológico en el organismo del huésped.
XENO: Huésped.
ZOONOSIS: Infección que se transmite en forma natural entre el hombre y
animales vertebrados y viceversa.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Botero, D. y Restrepo, M. 2012. Parasitosis Humanas. Texto y Atlas. Quinta


Edición. Colombia.
2. Córdova, E., Neira, M., Liu, M., Vásquez, L., Martínez, E., Ayaqui, R., y Ruelas,
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Segunda edición.
3. ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD. Ginebra 1994. Medios auxiliares
para el diagnóstico de las parasitosis intestinales.
4. INSTITUTO NACIONAL DE SALUD: Manual de procedimientos de laboratorio
para el diagnóstico de los parásitos intestinales del hombre. Serie de normas
técnicas N° 37. Lima – 2003.
5. ZAMAN, V. Atlas color de Parasitología clínica. Editorial Panamericana, Buenos
Aires 1991.

DIRECCIONES DE CORREOS ELECTRÓNICOS


1. American Journal of Tropical Medicine and Hygiene. USA.
http://www.astmh.org/Zaiman_Slides.htm.
2. DPDx-CDC: http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/Default.htm
3. Atlas of Medical Parasitology: http://www.cdfound.to.it/HTML/atlas.htm
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5. Journal of Medical Entomology:
http://www.ingentaconnect.com/content/esa/jme
6. Revista: Memorias do Instituto Oswaldo Cruz (Brasil):
http://memorias.ioc.fiocruz.br/

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FMH-USMP-Parasitología 2018

7. Revista: Annals of Tropical Medicine & Parasiytology:


http://www.maney.co.uk/search?fwaction=show&fwid=142
8. Organización Mundial de la Salud (OMS): http://www.who.int/es/index.html

REVISTAS

- American Journal of Tropical Medicine and Hygiene. USA.


- Atlas de la Sociedad de Biologia de Rio de Janeiro. Rio de Janeiro. Brazil
- Boletin Chileno de Parasitologia. Santiago. Chile
- Revista Peruana da Biología. Lima, Perú.
- Revista Peruana de Medicina Tropical de la UNMSM. Lima. Perú

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