3 CARACTERIZACIÓN

DE LAS COLONIAS Y MEDIOS ESPECIALES

3.1 INTRODUCCIÓN
Al estudiar los microorganismos como las bacterias, hogos y otros para conocer su
interacción con el ambiente y los demás seres animados, nos enfrentamos a la necesidad
de observar y reconocer su estructura macroscópica y microscópica y su función
(fisiología) que, gracias a los descubrimientos e inventos científicos nos permiten conocer,
entender y aplicar la microbiología en la alimentación y la producción animal, el ambiente
y la industria, la salud y la enfermedad, etc.

3.2 OBJETIVOS
3.2.1 Objetivo general
Adquirir destreza en la caracterización morfológica de las bacterias, a partir de las
observaciones macroscópicas y microscópicas de bacterias aisladas del medio natural y
cultivadas en diferentes medios de cultivo

3.2.2 Objetivos específicos:

- Identificar las características macroscópicas de dos especies bacterianas
- Identificar las características microscópicas de dos especies bacterianas

3.3 MARCO TEÓRICO

La colonia bacteriana se define como el conjunto de células bacterianas o fúngicas que se
forma a partir de una célula madre por división (o fisión) binaria, con las mismas
características. De allí el término Unidad Formadora de Colonia (UFC).
Cada especie presenta unas características fenotípicas que, de acuerdo a la temperatura,
pH, disponibilidad de Oxígeno o CO2, presión osmótica, salinidad y la disponibilidad de
los nutrientes, expresará fenotípicamente (color, tamaño, exudados, etc.) su genotipo, es
decir, lo que está codificado en sus genes. Mientras no haya mutaciones o recombinación
con otras bacterias, se espera que estas características genotípicas se mantengan; sin
embargo, el fenotipo podrá variar en función de aquellas condiciones ambientales o
exógenas.
Cuando se aíslan microorganismos en medios de cultivo artificial, ya sea semisólido (agar)
las células irán quedando apiladas en forma compacta o densa formando la colonia,
creciendo y desarrollándose desde la periferia formando un límite o borde característico
de cada especie y, a menos que tengan una capacidad de motilidad o desarrollo en cadenas
que les permita su expansión a todo el medio. En el medio líquido (caldo) tendrán la
capacidad de dispersarse aprovechando los nutrientes en todo el volumen donde se hayan
incorporados.

Adriana Vallejo Isaza, Bióloga PhD. 25

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Así, cada especie presentará unas características típicas de su colonia en el medio de
cultivo enriquecido con los nutrientes específicos, las cuales pueden dejarse de expresar
cuando se encuentran en medios de cultivo mínimo para su desarrollo y aunque no cambia
su genética, dejarían de expresar sus colores y otras características visuales al ojo humano.
Estas características se mencionan en las Tablas 4.1, 4.2 y 4.3:
TABLA 4.1. Características morfológicas de las colonias en medios semisólido en caja de Petri
Propiedad Características de las colonias
Crema/
Color Blanca amarilla Naranja Roja Violeta
beige
Circular/ Alargada o
Forma puntiforme ameboide filamentosa rizoide
redonda fusiforme
Umbonada/
Elevación plana elevada convexa pulvinada
umbilicado
<1 mm 1 – 2 mm 2 – 3 mm – >5 mm
Tamaño
(puntiforme) (pequeña) (mediana) (grande)
enrollado o
Borde o margen entero ondulado lobulado aserrado filamentosa
festoneado
Superficie lisa rugosa
Aspecto húmeda seca
Consistencia mucosa blanda dura plegada costrosa polvorienta
Traslucida o
Carácter óptico opaca
transparente
Reflexión de la luz brillante mate.
Olor dulzón almizcle Fétido orines podrido
TABLA 4.2. Características morfológicas de las colonias en medios semisólido en tubo de ensayo
Propiedad Característica
Un filamento que se Tuno completamente
Cuerpos o masas Un solo filamento
expande hacia los bordes colonizado

TABLA 4.3. Características morfológicas de las colonias en medios líquido en tubo de ensayo
Propiedad Característica
Turbidez uniforme Precipitado (en el Nata (capa en la Filamentosa (de la
Cuerpos o masas
del medio líquido fondo) superficie) superficie al fondo)

3.4 MATERIALES Y MÉTODOS

3.4.1 Materiales para cada grupo de trabajo:
› Siete (7) cepas bacterianas variadas: E coli, Klebsiella, Staphylococcus, Bacillus,
Vibrio, Aeromonas y Pseudomonas, aisladas en los medios correspondientes.
› Seis (6) medios de cultivo diferentes (20 a 25 mL): Agar nutritivo, agar EMB, agar
Mc Conkey, agar TCBS, agar GSP y Cetrimide.
› Cuatro (4) cajas de agar nutritivo en cajas de Petri
› Cuatro (4) tubos de Caldo nutritivo
› Cuatro (4) asas de aro y 4 de aguja

26 Adriana Vallejo Isaza, Bióloga PhD.

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› Cuatro (4) mecheros con alcohol
› Toallas de papel, encendedor, rotulador, cinta de enmascarar

3.4.2 Procedimiento
3.4.2.1 Características de las colonias en los diferentes cultivos
Morfología colonial en medio semisólido.
› Observe en las cajas de Petri y en los diferentes tubos las colonias típicas aisladas que
han crecido.
› Describa las características morfológicas de las colonias típicas, de acuerdo con las
tablas 4.1, 4.2 y 4.3.
› Utilice el asa para determinar la consistencia y tome un inóculo.
› Siembre en un nuevo agar utilizando uno de los métodos aprendidos.
› Proceda a incubar a 37 ºC.
› Revisar el crecimiento de las bacterias a las 18, 24 y 48 horas
Cultivo en medio líquido.
› Con el asa de aro estéril y fría tomar un inóculo de una de las colonias.
› Inocular en el medio líquido, flameando cuidadosamente y sin exceso la boca del tubo.
Mantener la tapa cerca del área de seguridad del mechero.
› Incubar los tubos a 37 ºC durante 24 a 48 horas en posición vertical.

3.5 RESULTADOS ESPERADOS

Los resultados deben ser descritos en prosa y presentados en una tabla:
Dibujar y tomar registro fotográfico de la caracterización de las colonias bacterianas que
observaron en el día de la práctica y las que crecieron 24 horas después a partir de las que
sembraron.
Hacer una discusión de sus resultados, con base en las preguntas a continuación
formuladas
1) ¿Cuáles son las características de las colonias recibidas en el día de hoy?
2) Después de haber incubado a 37ºC por 48 horas ¿Cuáles son las características de
las colonias obtenidas en cada medio de cultivo utilizado? ¿Siguen siendo las
mismas?
3) Después de haber incubado a 37ºC por 48 horas ¿Cómo fue el crecimiento de las
bacterias en el medio semisólido en tubo y el medio líquido?
4) ¿Por qué es importante determinar la morfología colonial bacteriana?
5) Investigue ¿Por qué en un medio líquido, algunas bacterias crecen en el fondo del
tubo?
6) Investigue ¿Qué aspecto tendrá una colonia de E coli, sembrada en un medio
General, en agar EMB?
7) Investigue cuales son los medios generales empleados en microbiología, los

Adriana Vallejo Isaza, Bióloga PhD. 27

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 medios específicos (selectivos y diferenciales o ambos)
8) Investigue: ¿A qué se debe que las bacterias son conocidas como piógenas? E
algunos ejemplos
9) ¿Qué tipo de bacterias son encontradas con mayor frecuencia en el sistema de
biofloc de acuicultura?
10) ¿Qué tipo de bacterias son encontradas con mayor frecuencia en peces enfermos?

3.6 BIBLIOGRAFÍA
Brock TD, Madigan MT, Microbiologia. Pearson, Prentice Hall, 6ª. Ed. 1993
Carvaca CF. Manual práctico de bacteriología marina. Escuela Superior. ESPOL
Politécnica del Litoral, Facultad de Ingeniería Marítima y Ciencias del Mar,
laboratorio de larvas de camarón. Guayaquil, Ecuador; 1989. 78 p.
Collins CH. Métodos microbiológicos. Acribia, España. 32-39; 1969. 298-315.
García G, Velásquez LF; Gómez G; Pineda F, y Saldarriaga Y. Manual de laboratorio
de microbiología general. Universidad de Antioquia, Facultad de Ciencias
Exactas y Naturales, Opto. Biología, Medellín; 1982, 115 p
Gaviria S, Calderón CE. Manual de métodos analíticos para el control de calidad del
agua. ICONTEC, Guía técnica colombiana 2, Bogotá; 1988, 109 p.
Merck. Manual de medios de cultivo. Darmstadt, Alemania; 1994. 364 p.
Pelczar, Reid y Chan. Microbiología. McGraw-Hill. Cuarta ed., 1982.
Tortora GJ, Funke BR, Case CL. Introducción a la microbiología. Editorial Medica
Panamericana, 9 ed.; 2007, 959 p

3.7 MANEJO DE RESIDUOS QUÍMICOS Y PELIGROSOS

Descripción Morfológica en agar

Agua (250 mL)
macroscópica Microorganismos Descripción

Preparar agar
nutritivo (50 g / Esterilizar Servir Sembrar Incubar Observar
semana)

Residuo 1
Ingreso de materiales biológico

Continuidad del proceso

Residuo

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Descripción morfológica en medio líquido
Agua (100 mL)
macroscópica Microorganismos Crecimiento bacetriano

Preparar caldo
nutritivo (10 g Esterilizar Servir Sembrar Incubar Observar
semana)

Residuo 1
Ingreso de materiales biológico

Continuidad del proceso

Residuo

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