ORGANIZACIÓN DE LAS NACIONES UNIDAS PARA LA AGRICULTURA Y LA

ALIMENTACIÓN (FAO)

Proyecto TCP/RLA/3014 (A)

“Desarrollo de un sistema integral de aseguramiento de calidad para laboratorios
de análisis de alimentos en América Central, Cuba, México, Panamá y República
Dominicana”

TALLER SUBREGIONAL SOBRE ASEGURAMIENTO DE CALIDAD Y

VALIDACIÓN DE LA METODOLOGÍA PARA LABORATORIOS DE
MICROBIOLOGÍA

1
Índice

I. ESTADO ACTUAL DEL ASEGURAMIENTO DE CALIDAD Y VALIDACIÓN DE LA

METODOLOGÍA PARA LABORATORIOS DE MICROBIOLOGIA DE NICARAGUA.... 3
Laboratorio de Diagnóstico Veterinario y Microbiología de Alimentos............................... 4
CENTRO NACIONAL DE DIAGNOSTICO Y REFERENCIA........................................ 16

II. PROPUESTA DE PLAN DE ACCIÓN NACIONAL PARA SU OPTIMIZACIÓN......... 31

Laboratorio de Diagnóstico Veterinario y Microbiología de Alimentos............................. 31
CENTRO NACIONAL DE DIAGNOSTICO Y REFERENCIA........................................ 32

2
 I. ESTADO ACTUAL DEL ASEGURAMIENTO DE CALIDAD Y
VALIDACIÓN DE LA METODOLOGÍA PARA LABORATORIOS DE
MICROBIOLOGIA DE NICARAGUA

HOMOLOGACIÓN NORMA ISO/IEC 17025 EN EL PAIS

Homologación de la norma en el país Sí No Observaciones

¿El país tiene homologada la norma
ISO/IEC 17025? x N TON – 4001 - 01
En caso afirmativo indicar su nombre y
número.

3
Formulario A: ASEGURAMIENTO DE CALIDAD Y VALIDACIÓN DE LA
METODOLOGÍA PARA LABORATORIOS DE MICROBIOLOGÍA.

Fecha: _____SEPTIEMBRE 18, 2005

Laboratorio: Laboratorio de Diagnóstico Veterinario y Microbiología de Alimentos

Director/Responsable del Laboratorio:_Dra. Sonia GarcíaVilchez________________

Dirección del laboratorio:_Km. 3 ½ carretera a Masaya__________________

Ciudad:__Managua ____________País:__Nicaragua________________________

Dependencia

Ministerio:_Agropecuario y Forestal_________________________________________

Institución:_Ministerio Agropecuario y Forestal________________________________

Organización:___________________________________________________________

Empresa:_______________________________________________________________

4
1. Ensayos:

1.1 Número total de ensayos microbiológicos que realiza el laboratorio:

1.2 ¿Cuáles? Listar

Nº Ensayos Listar Matrices Metodología usada

1 Coniformes T y F Cárnicos, Lácteos, NMP, Rto. Placas

2 E. coli género Productos del mar, agua Petrifim, AOAC – 2002
3 E. coli O157 – 7H “ Neogen 8, 20 h, AOAC
4 Salmonella “ BAM, AOAC -2002
5 Shiguella “ AOAC - 2002
6 Staphylococcus Aur. “ BAM, AOAC
7 Listeria monocytog. “ USDA – FSIS
8 Clostridum “ AOAC – 2002
9 Rto. Mesófilos “
10 Rto. Mohos y Lev. “

1.3 Indicar los ensayos, las matrices y las metodologías que planifica acreditar en el futuro:
TODOS

1.4 ¿Qué ventaja considera usted que le aportará dicha acreditación? Cumplir con los
requisitos internacionales, asegurar al consumidor nacional la inocuidad de los productos
que consume.
1.5 Indicar el número total de ensayos microbiológicos acreditados que realiza el laboratorio:
1.6 ¿Cuáles? Listar

Ensayos Listar Matrices Metodología usada

1.7 Estimar el número de ensayos que realiza el laboratorio de microbiología anualmente:

2. Sistema de calidad Sí %* No Observaciones

2.1 ¿El sistema de calidad está implementado en el x 20
área de microbiología?
2.2 Indicar la fecha de implementación del sistema 1996
2.3 La documentación del sistema de calidad:
a) ¿Es comunicada y entendida por el personal? 20
b) Indicar cómo se comunica la información relativa Verbal
al sistema de calidad.
c) ¿Está disponible para el personal?
d) ¿El laboratorio cuenta con un Manual de Calidad? X
2.4 ¿La organización ha elaborado y aprobado los
siguientes procedimientos?:
a) Procedimiento para Elaborar y Controlar X Falta documentar
Documentos. algunos
b) Procedimiento para Clasificar y Codificar X “
Documentos.

5
2. Sistema de calidad Sí %* No Observaciones
c) Procedimiento para Gestión y Control de X
Documentos.
d) Procedimiento para Control de Registros. X
e) Procedimiento para Proteger y Respaldar los X
Registros almacenados electrónicamente.
f) Procedimiento para Revisión de Pedidos, Ofertas X
y Contratos.
g) Procedimiento para Informe de Resultados. X 90
h) Procedimiento para Servicios al Cliente. X 40 No está documentado
i) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos. X
j) Procedimiento para Auditorias Internas X
k) Procedimiento para el Tratamiento de las No X
Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones
Autorizadas- Acciones Preventivas.
l) Procedimiento para la Revisión del Sistema de X No está implementado
Calidad.
m) Procedimiento para la Evaluación de Proveedores x 70
n) Procedimiento para la Compra de Servicios y x 70
Suministros.
2.5 ¿La organización ha implementado los
siguientes procedimientos?:
a) Procedimiento para Elaborar y Controlar X
Documentos.
b) Procedimiento para Clasificar y Codificar X
Documentos.
c) Procedimiento para Gestión y Control de X
Documentos.
d) Procedimiento para Control de Registros. X 90 No está documentado
e) Procedimiento para Proteger y Respaldar los X
Registros almacenados electrónicamente.
f) Procedimiento para Revisión de Pedidos, Ofertas X
y Contratos.
g) Procedimiento para Informe de Resultados. X 90
h) Procedimiento para Servicios al Cliente. X
i) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos. X
j) Procedimiento para Auditorías Internas. X
k) Procedimiento para el Tratamiento de las No X
Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones
Autorizadas- Acciones Preventivas.
l) Procedimiento para la Revisión del Sistema de X
Calidad.
m) Procedimiento para la Evaluación de X 70
Proveedores.
n) Procedimiento para la Compra de Servicios y X 70
Suministros.
* %: Grado de implementación en porcentaje
Nota: En la columna de observaciones se incluirán todas las aclaraciones o datos requeridos en esta encuesta.

6
3. Control de trabajo no conforme Sí %* No Observaciones
3.1 ¿Están asignadas las responsabilidades y X
autoridades para gestionar el trabajo no conforme?
3.2 ¿Cuándo se identifica un trabajo no conforme se X No está documentado
detiene la realización de los ensayos?
3.3 ¿Se evalúan las implicancias del trabajo no X No está documentado
conforme? Indicar en observaciones el cargo del
responsable de autorizar la reanudación del trabajo?
3.4 ¿Cuándo se identifica un trabajo no conforme se No se ha dado el caso
notifica al cliente y se pide la devolución del trabajo?

4. Personal Sí %* No Observaciones
4.1 ¿Cuántas personas trabajan en el área del 4
laboratorio de microbiología excluyendo las
funciones administrativas y de gestión?
4.2 ¿Están definidos y documentados los X
perfiles de puesto para cada nivel de
responsabilidad, personal directivo, técnico
y de apoyo clave afectado a los ensayos?
4.3 ¿Comprenden las descripciones del X 70
punto 4.2 las responsabilidades asociadas al
sistema de calidad?
4.4 ¿Cuál es el criterio para autorizar al Experiencia, evaluación al
personal a realizar una dada actividad? desempeño,
4.5 ¿El laboratorio tiene documentado el X
personal autorizado para cada ensayo?
4.6 ¿El laboratorio cuenta con un programa X Se planifica anualmente, por
de capacitación documentado que se razones de presupuesto no
confecciona en forma periódica? se cumple
4.7 ¿En dicho programa de capacitación el X
laboratorio incluye temas relativos a la
calidad? Detallar los temas en observaciones
4.8 ¿El laboratorio tiene un procedimiento X Se elaboran TDR para cada
para la capacitación del personal donde área a capacitar
describe los requisitos que debe cumplir
hasta considerarse competente?
4.9 ¿En la documentación del sistema, para X
cada cargo clave, está asignado un
reemplazante?
4.10 ¿El laboratorio se asegura que todo el X 70 Se llevan registros
personal técnico que trabaja en el laboratorio
de microbiología está capacitado o tiene un
adecuado manejo en técnicas de esterilidad y
manipulación de especimenes potencialmen­
te infecciosos? ¿Cómo? ¿Lo documenta?
4.11 ¿El laboratorio tiene un Procedimiento X No está documentado
para Capacitación del Personal?
4.12 ¿El laboratorio conserva los registros, X
los certificados de cursos realizados, títulos
y curriculum vitae de todo el personal?

7
5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones
5.1. ¿El acceso al laboratorio está restringido al X No documentadas
personal autorizado y existen reglas de uso de áreas
que afectan la realización de los ensayos?
5.2 Enumere las áreas separadas del laboratorio Recepción demuestras,
teniendo en cuenta las actividades que se llevan a preparación de medios y
cabo. soluciones, cuarto de
siembra
5.3 ¿Las actividades de preparación de medios de X Cada actividad se realiza
cultivo, preparación de muestras, descontaminación en áreas separadas
de las muestras y cultivos y la siembra son llevadas a
cabo en áreas separadas del laboratorio?
Detalle cómo realiza el laboratorio estas tareas.
5.4 ¿El laboratorio emplea procedimientos para X
prevenir la contaminación cruzada? ¿Cuáles? Indicar
la opción que corresponda.
a) Separando las actividades en tiempo y espacio. X
b) Mediante la construcción del laboratorio según un X
diseño “sin camino de regreso”.
c) Llevando a cabo los procedimientos de una manera X
secuencial, usando las precauciones apropiadas para
asegurar la integridad de la muestra y del ensayo. Por
ejemplo uso de recipientes herméticamente cerrados.
d) Otros
5.5 ¿El laboratorio cuenta con adecuada
infraestructura para:
a) La recepción de la muestra X
b) El almacenamiento de la muestra (espacio X
suficiente y temperaturas adecuadas de
almacenamiento en heladeras y congeladores).
c) La incubación de los medios de cultivo sembrados X
(estufas de incubación).
d) Almacenar los cultivos de referencia. X
5.6 ¿El laboratorio cuenta con procedimientos para X En algunos casos no son
eliminar los desechos químicos o biológicos los adecuados.
potencialmente peligrosos?
5.7 ¿El laboratorio cuenta con suficiente espacio de X 2 mts2
modo que el personal realice adecuadamente el
trabajo durante los ensayos?
Detallar el área estimada en m2 por analista
5.8 ¿El laboratorio cuenta con un sistema de x No es el adecuado
ventilación?
Especificar sus características (tipos de filtros, etc.).
5.9 ¿El laboratorio cuenta con iluminación e instala­ X
ción eléctrica adecuada para la realización de los
ensayos?
5.10 ¿El laboratorio cuenta con un sistema de energía X
eléctrica ininterrumpida?

8
5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones
5.11 ¿El laboratorio toma precauciones de modo que X La infraestructura noesla
en el área del laboratorio no haya polvo, corrientes de adecuada, la planta eléc­
aire o temperaturas extremas? trica no tiene capacidad
¿Cuáles? para abastecer todas las
áreas.
5.12 ¿El laboratorio lleva registros de la temperatura X
ambiente en el área del laboratorio?
5.13 MONITOREO AMBIENTAL DEL AIRE: ¿El X
laboratorio cuenta con un procedimiento para moni­
torear en cuanto a su carga microbiana el aire en la
sala de siembra y preparación de muestras?
(en caso afirmativo especificar la metodología, medio
de cultivo y diluyentes).
5.14 MONITOREO AMBIENTAL DE LAS X
SUPERFICIES: ¿El laboratorio cuenta con un
procedimiento para monitorear las superficies en la
sala de siembra y preparación de muestras?
a) En cuanto a su carga microbiana X Hisopados, Rto. en placas
(en caso afirmativo especificar la metodología, medio
de cultivo y diluyentes).
b) Presencia de microorganismos indicadores de X Pretrifilm, NMP
higiene (en caso afirmativo especificar la
metodología, medio de cultivo y diluyentes).
c) Presencia de patógenos X
(en caso afirmativo especificar la metodología, medio
de cultivo, diluyentes, y los microorganismos
patógenos investigados).
5.15 ¿En los procedimientos mencionados en los
puntos 5.13 y 5.14 se ha establecido?:
a) Lugar de toma de muestra (En caso afirmativo X Mesas de trabajo,
indicarlas en observaciones). paredes, equipos
b) Frecuencia de realización del monitoreo ambiental X Semanal
(En caso afirmativo indicarlas en observaciones).
c) Criterio de aceptación o límites de tolerancia (En
caso afirmativo indicarlas en observaciones).
d) Acciones correctivas en caso de desvío (En caso Se detiene el trabajo y se
afirmativo indicarlas en observaciones). hace una desinfección
total.
5.16 ¿El laboratorio cuenta con un programa X No está documentado, se
implementado de limpieza y de desinfección? realiza desinfección sema-
nal y desinsectación cada
2meses.
5.17 ¿Dicho programa la limpieza (5.16) qué zonas Recepción de muestras,
del laboratorio incluye? lavado y esterilizado,
Numerar en observaciones. preparación de medios
5.18 ¿El laboratorio tiene documentado, implementa­ X
do y disponible para el personal el plan de higiene o
los procedimientos operativos empleados durante la
realización del trabajo en el laboratorio destinados a
evitar la contaminación de las muestras y el personal?

9
5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones
5.19 ¿El personal técnico cuenta con la indumentaria X
apropiada (guardapolvo) que deja en el área del labo­
ratorio de microbiología antes de salir de dicha área?
5.20 ¿Las instalaciones cuentan con lavamanos pro­ X En todas las áreas
visto con jabón desinfectante y toallas descartables?
En caso afirmativo, indicar dónde están ubicadas
(sala de siembra, sala de preparación de muestra, sala
de lavado, etc.).
5.21 ¿En caso que las condiciones ambientales sean X
inadecuadas el laboratorio interrumpe los ensayos?
En caso afirmativo indicar en observaciones si el
laboratorio cuenta con un procedimiento.
5.22 ¿Utiliza desinfectantes para la limpieza de las X Penclorito 130 a 3 ppm
mesadas de trabajo antes y después de la realización
de la preparación del a muestra o la siembra? En caso
afirmativo indicar en observaciones qué
desinfectantes usa.
5.23 ¿El laboratorio cuenta con medidas para elimi­ X Bimensual
nar y prevenir la proliferación de insectos en el área
del laboratorio de microbiología? En caso afirmativo
indicar las medidas empleadas y si son efectivas.

6. Equipos Sí %* No Observaciones
6.1 ¿El laboratorio que realiza las calibraciones de X
los equipos críticos para los ensayos está acreditado
para dicha actividad?
6.2 ¿El laboratorio está provisto de todos los X
equipos necesarios para la correcta ejecución del
ensayo? En caso que no lo posea indicar en
observaciones cuáles.
Nota: Tener en cuenta en este punto los
requerimientos en cuanto a la exactitud requerida
para el ensayo y cumplimiento de las
especificaciones de los equipos.
6.3 ¿Antes de poner en servicio un equipo, el X
laboratorio, lo calibra o verifica con el fin de
asegurar que responde a las exigencias
especificadas del laboratorio y está conforme a las
especificaciones normalizadas pertinentes?
6.4 ¿Antes de su uso y a una frecuencia establecida X Autoclave c/ 6 meses,
los equipos críticos para los ensayos se calibran y/o termómetros c/ 6meses,
verifican? En caso afirmativo indicar en balanzas c/ 6 meses,
observaciones qué equipos y con qué frecuencia se incubadores c/ 2 meses,
calibran o verifican.
6.5 ¿El laboratorio documenta e implementa pro­ X A todos los equipos se les da
gramas para la limpieza, mantenimiento, calibra­ mantenimiento preventivo
ción y/o verificación y esterilidad de los equipos? cada 2 meses y correctivo
En caso afirmativo indicar para qué equipos. cuando es necesario.

10
6. Equipos Sí %* No Observaciones
6.6 ¿El laboratorio establece un programa para la X Balanzas, termómetros,
calibración y/o verificación de los equipos que pipetas,etc.
tengan una influencia directa en los resultados de
los ensayos? En caso afirmativo indicar los
equipos, la frecuencia de estas calibraciones y/o
verificaciones y en función de qué se estableció el
criterio de frecuencia.
6.7 ¿El mantenimiento de los equipos esenciales se X Hay un cronograma anual
realiza a intervalos especificados? En caso para el mantenimiento de
afirmativo indicar en observaciones los equipos, todos los equipos
tipo y la frecuencia de mantenimiento.
6.8 ¿Están disponibles las instrucciones actualiza­ X
das de uso y mantenimiento de los equipos (inclui­
do el manual suministrado por el fabricante) para el
uso del personal del laboratorio?
6.9 ¿Están inequívocamente identificado cada equi­ X
po con su soporte lógico utilizado para los ensayos
(incluido su estado de calibración)?
6.10 ¿Los resultados de la calibración y X
verificación quedan registrados?
6.11 ¿Cuándo un equipo arroja resultados erróneos Se saca de servicio y se
o está fuera de servicio se indica claramente para rotula como en mal estado
todo el personal? ¿Qué metodología usa? Explique
brevemente
6.12 ¿ Para los termómetros, display y/o equipos de X
registro continuo de temperatura usados en el regis­
tro de temperaturas para las estufas de incubación y
baños termostáticos se calcula el rango de acepta­
ción de la temperatura teniendo en cuenta la correc­
ción y la incertidumbre del instrumento y la especi­
ficación establecida en la metodología de ensayo?
En el caso de no efectuarse indicar en observacio­
nes qué procedimiento emplea el laboratorio.
6.13 ¿Con qué frecuencia se registran las X Mañana y tarde
temperaturas de estufas de incubación y, heladeras
y congeladores? Indicar en observaciones.
6.14 ¿El laboratorio cuenta con el perfil térmico del X
autoclave?
6.15 ¿Se realizan controles químicos y biológicos X Cintas indicadoras
periódicos para verificar la eficacia del proceso de
esterilización del autoclave y la estufa de
esterilización? ¿Cuáles y con qué frecuencia?
6.16 pH metro: ¿se ajusta su respuesta usando X
como mínimo dos buffers de calidad aceptable?
6.17 Pipetas automáticas: x Trimestral
¿Se verifica periódicamente la precisión y exactitud
del volumen distribuido?
6.18 ¿El laboratorio cuenta con un instructivo o X
procedimiento para el lavado del material usado en
los ensayos?

11
7. Rastreabilidad (Trazabilidad) Sí %* No Observaciones
7.1 ¿La calibración de los equipos es llevada a cabo por X
laboratorios de calibración que demuestran su competen­
cia y su capacidad de medición y rastreabilidad? ¿Estos
laboratorios de calibración tienen un programa de cali­
bración de los equipos diseñado y operado de modo de
asegurar que las calibraciones y las mediciones hechas
por el laboratorio de calibración sean rastreables al Siste­
ma Internacional de Unidades (SI)?
7.2 ¿El laboratorio tiene un programa y un procedimien­ X
to para la calibración de sus patrones de referencia?
7.3 ¿Los patrones de referencia son calibrados por un
organismo que pueda proveer la rastreabilidad?
7.4 ¿El laboratorio cuenta con cultivos de referencia? X Nacionales
7.5 ¿De qué colección nacional o internacional provienen Aislamientos de nues­
los cultivos de referencia? tro laboratorio
7.6 ¿Qué metodología usa el laboratorio para conservar Congelación
dichas cepas? Detallar (congelación, liofilización).
7.7 ¿El laboratorio cuenta con un procedimiento docu­ X
mentado para el manejo de los cultivos de referencia?
a) ¿Cuántos repiques permite para las cepas de reserva? Hasta que se agotan
b) ¿Cuántos repiques permite para las cepas de trabajo? 5–7
c) ¿Realiza controles de pureza y pruebas bioquímicas? X Mensual
¿Con qué frecuencia?
7.8 ¿Qué uso se le da a las cepas de referencia?

8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observaciones

8.1 ¿El laboratorio compra los medios de cultivos y X
reactivos a proveedores evaluados según un
procedimiento documentado?
8.2 ¿El laboratorio cuenta con los reactivos y los medios X
de cultivos necesarios para realizar los ensayos? En el
caso que su respuesta sea negativa indicar la causa.
8.3 Medio de cultivo: ¿El fabricante en el momento de X
la entrega del producto provee información y un
certificado acerca de las especificaciones de calidad?
8.4 ¿Las especificaciones de calidad (8.3) incluyen X
fecha de vencimiento del medio, condiciones de
almacenamiento, control de esterilidad, control del
crecimiento de los microorganismos de interés (target) y
de los microorganismos no deseados (no target) y
criterios de aceptabilidad y controles físicos y criterios
de aceptabilidad aplicados?
8.5 ¿Cada lote de medios de cultivo preparado por el X
laboratorio o listo para su uso está unívocamente
identificado?
8.6 ¿El laboratorio cuenta con un instructivo o X
procedimiento documentado para preparar los reactivos
y los medios de cultivo?

12
8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observaciones
a) ¿Está especificado el período de validez de los X
medios preparados y las condiciones de conservación
especificadas?
b) ¿Se determina el pH del medio de cultivo después del X
proceso de esterilización?
c) ¿Se realizan controles de esterilidad a los medios de X Cada lote una vez pre­
cultivos y diluyentes usados en el ensayo? parado se deja entre
Describir brevemente la metodología. 18 y 24 en incubación
8.7 ¿El laboratorio ha implementado el instructivo o X
procedimiento para preparar los reactivos y los medios
de cultivo?
8.8 ¿Se realizan controles con cepas de referencia de los X Nacionales
reactivos usados?
8.9 ¿El laboratorio registra y coloca una etiqueta en los X
medios de cultivo y reactivos indicando la identifica­
ción, la concentración, fecha de preparación, fecha de
vencimiento, el personal que los preparó?
8.10 ¿Se efectúan controles periódicos al agua destilada
usada en la preparación de medios y reactivos de modo
de asegurar su calidad?
a) Conductividad. X
b) pH. X
c) Contaminación microbiana. X
d) Presencia de sustancias bactericidas, inhibidoras o X
interferentes.
e) ¿El laboratorio lleva un registro actualizado de los X
mismos?
8.11 ¿El laboratorio evalúa la calidad de los medios de X
cultivos en cuanto a su productividad y selectividad? En
caso de una respuesta afirmativa especificar la
metodología empleada.
8.12 Ensayos cuantitativos: ¿El laboratorio verifica que X
no haya pérdidas significativas de volumen de los
diluyentes durante el proceso de esterilización en
autoclave? En caso de una respuesta afirmativa
especificar la metodología empleada.
8.13 ¿Está disponible, para el personal técnico, el X
diagrama de flujo correspondiente al ensayo a realizar?

9. Validación de la metodología Sí %* No Observaciones

9.1 ¿El laboratorio valida y/o verifica la metodología empleada X
para realizar los ensayos?
9.2 ¿Qué métodos valida y/o verifica? En cada caso indicar el X
ensayo**, qué matrices y qué parámetro establece y bibliografía
de referencia (sensibilidad, especificidad, límite de detección,
repetibilidad, reproducibilidad, etc.).
a) No normalizados.
b) Los métodos que diseña o desarrolla.
c) Los métodos normalizados empleados fuera del alcance
previsto.

13
9. Validación de la metodología Sí %* No Observaciones
d) Métodos normalizados.
9.3 ¿La información obtenida de la validación se documenta y
archiva?
9.4 ¿El laboratorio realiza un informe de validación?

10. Estimación de la incertidumbre Sí %* No Observaciones

10.1 ¿El laboratorio realiza la estimación de la X
incertidumbre de medición?
Especificar tipo de ensayo y metodología**.
10.2 ¿El laboratorio ha elaborado un procedimiento para la X
estimación de la incertidumbre de medición?
* %: Grado de implementación en porcentaje
** Indicar Nº de ensayo correspondiente al punto 1.2 del formulario A.

11. Control de los datos Sí %* No Observaciones

11.1 ¿Los cálculos y la transferencia de los datos están su­ X
jetos a verificaciones llevadas a cabo de una manera
sistemática?
11.2 ¿El software usado por el laboratorio está validado? X
En caso afirmativo especificar tipo de software y su uso.
11.3 ¿Se establecen e implementan procedimientos para X
proteger los datos? ¿Qué procedimientos?
11.4 ¿Se hace el mantenimiento de las computadoras y X
equipos automatizados con el fin de asegurar que
funcionan adecuadamente?

12. Manipulación de las muestras Sí %* No Observaciones

12.1 Para las muestras a ensayar, el laboratorio tiene
procedimientos para:
a) El transporte de las muestras. X No están documentados
b) La recepción de las muestras. X
c) La manipulación de las muestras. X
d) La protección de las muestras. X
e) El almacenamiento de las muestras. X
f) La conservación o la disposición final de las X
muestras.
12.2 ¿El laboratorio tiene un sistema para la X
identificación unívoca de las muestras a ensayar a lo
largo de la vida de la muestra en el laboratorio?
12.3 ¿El laboratorio tiene procedimientos e instalacio­ X
nes apropiadas de modo de evitar el deterioro, la
pérdida o daño de las muestras durante manipulación,
preparación y almacenamiento?
12.4 ¿Se verifican las condiciones especificadas para X
las muestras en el momento de su recepción en el
laboratorio y registran y comunican al cliente los
apartamientos de las mismas?
* %: Grado de implementación en porcentaje
Nota: En la columna de observaciones se incluirán todas las aclaraciones o datos requeridos en esta encuesta.

14
13. Aseguramiento de la calidad de los Sí %* No Observaciones
resultados
13.1 ¿El laboratorio usa cepas de referencia X Nacionales
durante la realización de los ensayos (control
positivo, negativo)?
13.2 ¿El laboratorio determina y documenta, X
para cada ensayo y matriz, la repetibilidad y
reproducibilidad de sus analistas en forma
periódica? Indicar la frecuencia.
13.3 ¿El laboratorio participa en forma X Agencia Canadiense de
periódica de ensayos de interlaboratorio? Inspección de Alimentos,
Indicar los ensayos, la frecuencia y las anual, salmonella, colifor-
matrices. mes, staphylococcus,
mesófilos, en leche, carnes
13.4 El laboratorio:
a) Analiza y documenta los resultados X
obtenidos durante los ensayos
intralaboratorios e interlaboratorios.
b) Establece un criterio de aceptación. Nos lo da la Agencia
c) Toma acciones correctivas en caso de X
desviación.
13.5 ¿El laboratorio analiza y documenta las X
tendencias de los resultados obtenidos
durante los ensayos intralaboratorios e
interlaboratorios?
13.6 ¿En el caso que el laboratorio tome una X
acción correctiva, dicha acción y su
fundamentación queda documentada?
* %: Grado de implementación en porcentaje
Nota: En la columna de observaciones se incluirán todas las aclaraciones o datos requeridos en esta encuesta.

15
Formulario A: ASEGURAMIENTO DE CALIDAD Y VALIDACIÓN DE LA
METODOLOGÍA PARA LABORATORIOS DE MICROBIOLOGÍA.

Fecha: 19 de Septiembre del 2005

Laboratorio: CENTRO NACIONAL DE DIAGNOSTICO Y REFERENCIA

Director/Responsable del Laboratorio: Dr. Alcides González Mairena

Dirección del laboratorio: Complejo Nacional de Salud, Dra. Concepción Palacios-

Pista La Sabana

Ciudad: Managua País: Nicaragua

Dependencia

Ministerio: Ministerio de Salud

Institución:

Organización:___________________________________________________________

Empresa:_______________________________________________________________

1. Ensayos:

1.1 Número total de ensayos microbiológicos que realiza el laboratorio:

1.2 ¿Cuáles? Listar

16
Nº Ensayos Listar Matrices Metodología usada

1 NMP Coliformes Aguas Fermentación de Tubos

totales Múltiples (FTM)
2 NMP Coliformes Aguas Fermentación de Tubos
fecales Múltiples (FTM)
3 NMP E. coli Aguas Fermentación de Tubos
Múltiples (FTM)
4 V. cholerae O1 Aguas Aislamiento en placas (método
(Presencia Ausencia) tradicional)
5 Salmonella spp Aguas Aislamiento en placas (método
(Presencia Ausencia) tradicional)
6 NMP Coliformes Alimentos Fermentación de Tubos
totales Múltiples (FTM)
7 NMP Coliformes Alimentos Fermentación de Tubos
fecales Múltiples (FTM)
8 Recuento mesofilos Alimentos Vertidos en placa
aerobios
9 Recuento Mohos y Alimentos Vertidos en placa
levaduras
10 Recuento Alimentos Estreado en superficie
Staphylococcus
aureus
11 Salmonella spp Alimentos Aislamiento en placas (método
(Presencia tradicional)
Ausencia)
12 V.cholerae O1 Alimentos Aislamiento en placas (método
(Presencia tradicional)
Ausencia)
13 Recuentos E. coli Alimentos Vertido en placa
14
15
16

1.3 Indicar los ensayos, las matrices y las metodologías que planifica acreditar en el futuro:
Ensayos Listar Matrices Metodología usada

NMP Coliformes totales Aguas Fermentación de Tubos

Múltiples (FTM)
NMP Coliformes fecales Aguas Fermentación de Tubos
Múltiples (FTM)
NMP E. coli Aguas Fermentación de Tubos
Múltiples (FTM)
NMP Coliformes totales Alimentos Fermentación de Tubos
Múltiples (FTM)
NMP Coliformes fecales Alimentos Fermentación de Tubos
Múltiples (FTM)

1.4 ¿Qué ventaja considera usted que le aportará dicha acreditación?

17
Confianza, seguridad en los resultados de los ensayos de los productos alimenticios a
comercializar, interna y externamente.

1.5 Indicar el número total de ensayos microbiológicos acreditados que realiza el laboratorio:
0

1.6 ¿Cuáles? Listar

Ensayos Listar Matrices Metodología usada

18
1.7 Estimar el número de ensayos que realiza el laboratorio de microbiología anualmente:
6,600 (Aguas y Alimentos)

2. Sistema de calidad Sí %* No Observaciones

2.1 ¿El sistema de calidad está 50 En proceso
implementado en el área de microbiología?
2.2 Indicar la fecha de implementación del 50 Enero 2005
sistema
2.3 La documentación del sistema de
calidad:
a) ¿Es comunicada y entendida por el X 60 Es comunicada
personal?
b) Indicar cómo se comunica la 70 Documento, reuniones
información relativa al sistema de calidad. charlas
c) ¿Está disponible para el personal? X 100
d) ¿El laboratorio cuenta con un Manual de X 50 En proceso revisión
Calidad?
2.4 ¿La organización ha elaborado y X
aprobado los siguientes procedimientos?:
a) Procedimiento para Elaborar y Controlar X
Documentos.
b) Procedimiento para Clasificar y X
Codificar Documentos.
c) Procedimiento para Gestión y Control de X
Documentos.
d) Procedimiento para Control de X
Registros.
e) Procedimiento para Proteger y Respaldar X
los Registros almacenados
electrónicamente.
f) Procedimiento para Revisión de Pedidos, X
Ofertas y Contratos.
g) Procedimiento para Informe de X 100
Resultados.
h) Procedimiento para Servicios al Cliente. X 50 Está en implementación
i) Procedimiento para Tratamiento de los X 50 En implementación
Reclamos.
j) Procedimiento para Auditorias Internas X 50 Implementándose
k) Procedimiento para el Tratamiento de las X Falta el procedimiento
No Conformidades- Acciones Correctivas-
Desviaciones Autorizadas- Acciones
Preventivas.
l) Procedimiento para la Revisión del X
Sistema de Calidad.
m) Procedimiento para la Evaluación de X 30 Se realiza a través de otra
Proveedores unidad del Ministerio
n) Procedimiento para la Compra de X No aplica
Servicios y Suministros.
2.5 ¿La organización ha implementado los X
siguientes procedimientos?:
a) Procedimiento para Elaborar y Controlar X

19
Documentos.
b) Procedimiento para Clasificar y X
Codificar Documentos.
c) Procedimiento para Gestión y Control de X
Documentos.
d) Procedimiento para Control de X
Registros.
e) Procedimiento para Proteger y Respaldar X
los Registros almacenados
electrónicamente.
f) Procedimiento para Revisión de Pedidos, X
Ofertas y Contratos.
g) Procedimiento para Informe de X
Resultados.
h) Procedimiento para Servicios al Cliente. X
i) Procedimiento para Tratamiento de los X
Reclamos.
j) Procedimiento para Auditorías Internas. X
k) Procedimiento para el Tratamiento de las X
No Conformidades- Acciones Correctivas-
Desviaciones Autorizadas- Acciones
Preventivas.
l) Procedimiento para la Revisión del X
Sistema de Calidad.
m) Procedimiento para la Evaluación de X
Proveedores.
n) Procedimiento para la Compra de X
Servicios y Suministros.
* %: Grado de implementación en porcentaje
Nota: En la columna de observaciones se incluirán todas las aclaraciones o datos requeridos en esta encuesta.

20
3. Control de trabajo no conforme Sí %* No Observaciones
3.1 ¿Están asignadas las responsabilidades X
y autoridades para gestionar el trabajo no
conforme?
3.2 ¿Cuándo se identifica un trabajo no X
conforme se detiene la realización de los
ensayos?
3.3 ¿Se evalúan las implicancias del trabajo X
no conforme? Indicar en observaciones el
cargo del responsable de autorizar la
reanudación del trabajo?
3.4 ¿Cuándo se identifica un trabajo no X
conforme se notifica al cliente y se pide la
devolución del trabajo?

4. Personal Sí %* No Observaciones
4.1 ¿Cuántas personas trabajan en el área 3 Analistas
del laboratorio de microbiología 2 Medios de cultivos
excluyendo las funciones administrativas y 3 lavado y esterilización
de gestión? total 8
4.2 ¿Están definidos y documentados los X 100 Fichas técnicas
perfiles de puesto para cada nivel de
responsabilidad, personal directivo, técnico
y de apoyo clave afectado a los ensayos?
4.3 ¿Comprenden las descripciones del X
punto 4.2 las responsabilidades asociadas al
sistema de calidad?
4.4 ¿Cuál es el criterio para autorizar al 50 Competencia falta
personal a realizar una dada actividad? documentos, procedimientos
4.5 ¿El laboratorio tiene documentado el X
personal autorizado para cada ensayo?
4.6 ¿El laboratorio cuenta con un programa 50 En proceso implementado
de capacitación documentado que se no documento
confecciona en forma periódica?
4.7 ¿En dicho programa de capacitación el 50 ISO-17025 Aseguramiento a
laboratorio incluye temas relativos a la la calidad
calidad? Detallar los temas en
observaciones
4.8 ¿El laboratorio tiene un procedimiento X
para la capacitación del personal donde
describe los requisitos que debe cumplir
hasta considerarse competente?
4.9 ¿En la documentación del sistema, para X 30
cada cargo clave, está asignado un
reemplazante?
4.10 ¿El laboratorio se asegura que todo el X
personal técnico que trabaja en el
laboratorio de microbiología está
capacitado o tiene un adecuado manejo en
técnicas de esterilidad y manipulación de

21
especimenes potencialmente infecciosos?
¿Cómo? ¿Lo documenta?
4.11 ¿El laboratorio tiene un Procedimiento X
para Capacitación del Personal?
4.12 ¿El laboratorio conserva los registros, X 100 Expediente, copias de
los certificados de cursos realizados, títulos certificados
y curriculum vitae de todo el personal?

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones

5.1. ¿El acceso al laboratorio está restringido al 30 Falta escribir las reglas de uso
personal autorizado y existen reglas de uso de áreas de área
que afectan la realización de los ensayos?
5.2 Enumere las áreas separadas del laboratorio te­ 50 Medios de cultivos, prepara­
niendo en cuenta las actividades que se llevan a ción, lavado, secado y esterili­
cabo. zación
5.3 ¿Las actividades de preparación de medios de 50 En ambientes separados solo
cultivo, preparación de muestras, descontaminación lo que no tenemos área de
de las muestras y cultivos y la siembra son llevadas preparación de muestras y área
a cabo en áreas separadas del laboratorio? de resiembra.
Detalle cómo realiza el laboratorio estas tareas.
5.4 ¿El laboratorio emplea procedimientos para pre­ X
venir la contaminación cruzada? ¿Cuáles? Indicar la
opción que corresponda.
a) Separando las actividades en tiempo y espacio. 30 Al menos en tiempo, el
espacio es el mismo
b) Mediante la construcción del laboratorio según X
un diseño “sin camino de regreso”.
c) Llevando a cabo los procedimientos de una ma­ X
nera secuencial, usando las precauciones apropiadas
para asegurar la integridad de la muestra y del
ensayo. Por ejemplo uso de recipientes hermética­
mente cerrados.
d) Otros X
5.5 ¿El laboratorio cuenta con adecuada infraestruc­
tura para:
a) La recepción de la muestra X En Proyecto
b) El almacenamiento de la muestra (espacio X 50 En proyecto
suficiente y temperaturas adecuadas de
almacenamiento en heladeras y congeladores).
c) La incubación de los medios de cultivo 50 En proyecto de ampliación
sembrados (estufas de incubación).
d) Almacenar los cultivos de referencia. X Las cepas de referencia son
manejadas en el departamento
de Bacteriología Clínica
5.6 ¿El laboratorio cuenta con procedimientos para X
eliminar los desechos químicos o biológicos
potencialmente peligrosos?
5.7 ¿El laboratorio cuenta con suficiente espacio de X Microbiología Aguas y
modo que el personal realice adecuadamente el Alimentos
trabajo durante los ensayos?
Detallar el área estimada en m2 por analista 3mts x (analista)

22
5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones
5.8 ¿El laboratorio cuenta con un sistema de X
ventilación?
Especificar sus características (tipos de filtros, etc.).
5.9 ¿El laboratorio cuenta con iluminación e X 50 Instalaciones eléctricas
instalación eléctrica adecuada para la realización de insuficiente
los ensayos?
5.10 ¿El laboratorio cuenta con un sistema de X 50 La planta de energía no cuenta
energía eléctrica ininterrumpida? con sistema automatizado
5.11 ¿El laboratorio toma precauciones de modo 50 Se han cerrado posibles
que en el área del laboratorio no haya polvo, fuentes pero no se han
corrientes de aire o temperaturas extremas? controlado totalmente
¿Cuáles?
5.12 ¿El laboratorio lleva registros de la X
temperatura ambiente en el área del laboratorio?
5.13 MONITOREO AMBIENTAL DEL AIRE: ¿El X Sedimentación por placa PCA
laboratorio cuenta con un procedimiento para mo­ 15´ BAM
nitorear en cuanto a su carga microbiana el aire en
la sala de siembra y preparación de muestras?
(en caso afirmativo especificar la metodología,
medio de cultivo y diluyentes).
5.14 MONITOREO AMBIENTAL DE LAS X
SUPERFICIES: ¿El laboratorio cuenta con un
procedimiento para monitorear las superficies en la
sala de siembra y preparación de muestras?
a) En cuanto a su carga microbiana X Sedimentación exposición de
(en caso afirmativo especificar la metodología, placas abiertas 15´
medio de cultivo y diluyentes).
b) Presencia de microorganismos indicadores de X
higiene (en caso afirmativo especificar la
metodología, medio de cultivo y diluyentes).
c) Presencia de patógenos X
(en caso afirmativo especificar la metodología,
medio de cultivo, diluyentes, y los microorganismos
patógenos investigados).
5.15 ¿En los procedimientos mencionados en los
puntos 5.13 y 5.14 se ha establecido?:
a) Lugar de toma de muestra (En caso afirmativo 50 Mesas de siembra con y sin
indicarlas en observaciones). mechero
b) Frecuencia de realización del monitoreo ambien­ 100 Cada vez que se realiza
tal (En caso afirmativo indicarlas en observaciones). ensayos
c) Criterio de aceptación o límites de tolerancia (En X 15 UFC BAM
caso afirmativo indicarlas en observaciones).
d) Acciones correctivas en caso de desvío (En caso X Limpieza y desinfección con
afirmativo indicarlas en observaciones). hipoclorito y alcohol etílico al
70%
5.16 ¿El laboratorio cuenta con un programa X Solo de limpieza
implementado de limpieza y de desinfección?
5.17 ¿Dicho programa la limpieza (5.16) qué zonas X
del laboratorio incluye?
Numerar en observaciones.

23
5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones
5.18 ¿El laboratorio tiene documentado, implemen­ X
tado y disponible para el personal el plan de higiene
o los procedimientos operativos empleados durante
la realización del trabajo en el laboratorio destina­
dos a evitar la contaminación de las muestras y el
personal?
5.19 ¿El personal técnico cuenta con la X 100 Gabachas
indumentaria apropiada (guardapolvo) que deja en
el área del laboratorio de microbiología antes de
salir de dicha área?
5.20 ¿Las instalaciones cuentan con lavamanos pro­ X 50 En sala de siembra
visto con jabón desinfectante y toallas descartables?
En caso afirmativo, indicar dónde están ubicadas
(sala de siembra, sala de preparación de muestra,
sala de lavado, etc.).
5.21 ¿En caso que las condiciones ambientales sean X 50 Falta procedimiento
inadecuadas el laboratorio interrumpe los ensayos?
En caso afirmativo indicar en observaciones si el
laboratorio cuenta con un procedimiento.
5.22 ¿Utiliza desinfectantes para la limpieza de las X 100 Alcohol etílico al 70%
mesadas de trabajo antes y después de la realización
de la preparación del a muestra o la siembra? En
caso afirmativo indicar en observaciones qué
desinfectantes usa.
5.23 ¿El laboratorio cuenta con medidas para elimi­ X 50 Fumigación efectividad parcial
nar y prevenir la proliferación de insectos en el área
del laboratorio de microbiología? En caso afirma­
tivo indicar las medidas empleadas y si son
efectivas.

6. Equipos Sí %* No Observaciones
6.1 ¿El laboratorio que realiza las calibraciones de X Están certificado en proceso
los equipos críticos para los ensayos está acreditado de acreditación son los únicos
para dicha actividad? que tienen la competencia en
el país
6.2 ¿El laboratorio está provisto de todos los equi­ 50 Balanzas certificadas
pos necesarios para la correcta ejecución del ensa­ Termómetros certificados para
yo? En caso que no lo posea indicar en observacio­ incubadores
nes cuáles. Cabina bioseguridad = Prueba
Nota: Tener en cuenta en este punto los de esterilidad
requerimientos en cuanto a la exactitud requerida
para el ensayo y cumplimiento de las
especificaciones de los equipos.
6.3 ¿Antes de poner en servicio un equipo, el X 100 El responsable de
laboratorio, lo calibra o verifica con el fin de mantenimiento
asegurar que responde a las exigencias
especificadas del laboratorio y está conforme a las
especificaciones normalizadas pertinentes?

24
6. Equipos Sí %* No Observaciones
6.4 ¿Antes de su uso y a una frecuencia establecida X 50 pH metro cada que se use
los equipos críticos para los ensayos se calibran y/o
verifican? En caso afirmativo indicar en observa­
ciones qué equipos y con qué frecuencia se calibran
o verifican.
6.5 ¿El laboratorio documenta e implementa pro­ X Existe un programa para limpie­
gramas para la limpieza, mantenimiento, calibra­ za, mantenimiento y calibración
ción y/o verificación y esterilidad de los equipos? pero no esta implementado. Solo
En caso afirmativo indicar para qué equipos. para esterilidad esta implementa­
do
6.6 ¿El laboratorio establece un programa para la X 50 Programa documentado no
calibración y/o verificación de los equipos que ten­ implementado
gan una influencia directa en los resultados de los Se hace de acuerdo al manual
ensayos? En caso afirmativo indicar los equipos, la de operación de cada equipo
frecuencia de estas calibraciones y/o verificaciones
y en función de qué se estableció el criterio de
frecuencia.
6.7 ¿El mantenimiento de los equipos esenciales se X Programa documentado no
realiza a intervalos especificados? En caso afirma­ implementado
tivo indicar en observaciones los equipos, tipo y la
frecuencia de mantenimiento.
6.8 ¿Están disponibles las instrucciones X 50 Los instructivos de uso están
actualizadas de uso y mantenimiento de los equipos en proceso y los manuales
(incluido el manual suministrado por el fabricante) solo tienen los equipos mas
para el uso del personal del laboratorio? recientes
6.9 ¿Están inequívocamente identificado cada 50 Están identificados pero
equipo con su soporte lógico utilizado para los registro de calibración no
ensayos (incluido su estado de calibración)? existe
6.10 ¿Los resultados de la calibración y X 100 En el expediente de cada
verificación quedan registrados? equipo
6.11 ¿Cuándo un equipo arroja resultados erróneos X 100 El equipo se envía a
o está fuera de servicio se indica claramente para mantenimiento
todo el personal? ¿Qué metodología usa? Explique
brevemente
6.12 ¿ Para los termómetros, display y/o equipos de X No se cuentan con estos tipos
registro continuo de temperatura usados en el regis­ de termómetros
tro de temperaturas para las estufas de incubación y
baños termostáticos se calcula el rango de acepta­
ción de la temperatura teniendo en cuenta la correc­
ción y la incertidumbre del instrumento y la especi­
ficación establecida en la metodología de ensayo?
En el caso de no efectuarse indicar en observacio­
nes qué procedimiento emplea el laboratorio.
6.13 ¿Con qué frecuencia se registran las X 100 Mañana y tarde
temperaturas de estufas de incubación y, heladeras
y congeladores? Indicar en observaciones.
6.14 ¿El laboratorio cuenta con el perfil térmico del X
autoclave?

25
6. Equipos Sí %* No Observaciones
6.15 ¿Se realizan controles químicos y biológicos X 50 Ampollas biológicas semanal
periódicos para verificar la eficacia del proceso de
esterilización del autoclave y la estufa de
esterilización? ¿Cuáles y con qué frecuencia?
6.16 pH metro: ¿se ajusta su respuesta usando X 100 En preparación medios de
como mínimo dos buffers de calidad aceptable? cultivos
6.17 Pipetas automáticas: X No usamos pipetas
¿Se verifica periódicamente la precisión y exactitud automáticas solo en Medios
del volumen distribuido? de Cultivos
6.18 ¿El laboratorio cuenta con un instructivo o X 50 En proceso
procedimiento para el lavado del material usado en
los ensayos?

7. Rastreabilidad (Trazabilidad) Sí %* No Observaciones

7.1 ¿La calibración de los equipos es llevada a Laboratorio Nacional de
cabo por laboratorios de calibración que demues­ Meteorología = LANAMET
tran su competencia y su capacidad de medición Solo hemos solicitado
y rastreabilidad? ¿Estos laboratorios de calibra­ X calibración de balanzas y
ción tienen un programa de calibración de los pesas (masas)
equipos diseñado y operado de modo de asegurar
que las calibraciones y las mediciones hechas por
el laboratorio de calibración sean rastreables al
Sistema Internacional de Unidades (SI)?
7.2 ¿El laboratorio tiene un programa y un X 30 El programa esta en proceso
procedimiento para la calibración de sus patrones de elaboración
de referencia?
7.3 ¿Los patrones de referencia son calibrados X 50 Patrones de masas
por un organismo que pueda proveer la
rastreabilidad?
7.4 ¿El laboratorio cuenta con cultivos de X Bacteriología Clínica
referencia?
7.5 ¿De qué colección nacional o internacional X Se cuentan con cepas ATCC y
provienen los cultivos de referencia? de colección Nacional
7.6 ¿Qué metodología usa el laboratorio para Congelación a -70 lo hacen en
conservar dichas cepas? Detallar (congelación, el departamento de
liofilización). Bacteriología
7.7 ¿El laboratorio cuenta con un procedimiento X Departamento de
documentado para el manejo de los cultivos de Bacteriología
referencia?
a) ¿Cuántos repiques permite para las cepas de
reserva?
b) ¿Cuántos repiques permite para las cepas de
trabajo?
c) ¿Realiza controles de pureza y pruebas
bioquímicas? ¿Con qué frecuencia?
7.8 ¿Qué uso se le da a las cepas de referencia? Evaluar medios de cultivos y
como parte Control de Cali­
dad, cuando se abre un nuevo
lote.

26
8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observaciones
8.1 ¿El laboratorio compra los medios de cultivos X
y reactivos a proveedores evaluados según un
procedimiento documentado?
8.2 ¿El laboratorio cuenta con los reactivos y los X 80 Hacen falta algunos reactivos
medios de cultivos necesarios para realizar los para identificación de cepas
ensayos? En el caso que su respuesta sea negativa aisladas
indicar la causa.
8.3 Medio de cultivo: ¿El fabricante en el X
momento de la entrega del producto provee
información y un certificado acerca de las
especificaciones de calidad?
8.4 ¿Las especificaciones de calidad (8.3) incluyen X Manuales de Medios de
fecha de vencimiento del medio, condiciones de Cultivos de los proveedores
almacenamiento, control de esterilidad, control del
crecimiento de los microorganismos de interés
(target) y de los microorganismos no deseados (no
target) y criterios de aceptabilidad y controles
físicos y criterios de aceptabilidad aplicados?
8.5 ¿Cada lote de medios de cultivo preparado por X
el laboratorio o listo para su uso está
unívocamente identificado?
8.6 ¿El laboratorio cuenta con un instructivo o X Manual de procedimientos
procedimiento documentado para preparar los
reactivos y los medios de cultivo?
a) ¿Está especificado el período de validez de los X Medios de Cultivo
medios preparados y las condiciones de
conservación especificadas?
b) ¿Se determina el pH del medio de cultivo X Medios de Cultivo
después del proceso de esterilización?
c) ¿Se realizan controles de esterilidad a los X Incubación, en otros casos como
medios de cultivos y diluyentes usados en el los medios utilizados para siem­
ensayo? bras de aguas no se usan el mis­
Describir brevemente la metodología. mo día y se guardan a tempera­
tura ambiente
8.7 ¿El laboratorio ha implementado el instructivo X Medios de Cultivo
o procedimiento para preparar los reactivos y los
medios de cultivo?
8.8 ¿Se realizan controles con cepas de referencia X 50
de los reactivos usados?
8.9 ¿El laboratorio registra y coloca una etiqueta X 10
en los medios de cultivo y reactivos indicando la 0
identificación, la concentración, fecha de prepara­
ción, fecha de vencimiento, el personal que los
preparó?
8.10 ¿Se efectúan controles periódicos al agua X 10
destilada usada en la preparación de medios y 0
reactivos de modo de asegurar su calidad?
a) Conductividad. X
b) pH. X
c) Contaminación microbiana. X

27
8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observaciones
d) Presencia de sustancias bactericidas, inhibidoras X
o interferentes.
e) ¿El laboratorio lleva un registro actualizado de X En Medios de cultivos y Físico
los mismos? Químico de Aguas
8.11 ¿El laboratorio evalúa la calidad de los X 50 Ecométrico uso de cepas
medios de cultivos en cuanto a su productividad y positivas y cepas negativas.
selectividad? En caso de una respuesta afirmativa
especificar la metodología empleada.
8.12 Ensayos cuantitativos: ¿El laboratorio verifi­ X 50 Medición posterior a la
ca que no haya pérdidas significativas de volumen esterilización o al momento de
de los diluyentes durante el proceso de esteriliza­ usar
ción en autoclave? En caso de una respuesta
afirmativa especificar la metodología empleada.
8.13 ¿Está disponible, para el personal técnico, el X
diagrama de flujo correspondiente al ensayo a
realizar?

9. Validación de la metodología Sí %* No Observaciones

9.1 ¿El laboratorio valida y/o verifica la metodología X Se usa metodología nor­
empleada para realizar los ensayos? malizadas BAM o APHA
9.2 ¿Qué métodos valida y/o verifica? En cada caso indi­ X
car el ensayo**, qué matrices y qué parámetro establece y
bibliografía de referencia (sensibilidad, especificidad,
límite de detección, repetibilidad, reproducibilidad, etc.).
a) No normalizados. X
c) Los métodos normalizados empleados fuera del X
alcance previsto.
d) Métodos normalizados. X
9.3 ¿La información obtenida de la validación se X
documenta y archiva?
9.4 ¿El laboratorio realiza un informe de validación? X

10. Estimación de la incertidumbre Sí %* No Observaciones

10.1 ¿El laboratorio realiza la estimación de la incertidumbre de X
medición?
Especificar tipo de ensayo y metodología**.
10.2 ¿El laboratorio ha elaborado un procedimiento para la X
estimación de la incertidumbre de medición?
* %: Grado de implementación en porcentaje
** Indicar Nº de ensayo correspondiente al punto 1.2 del formulario A.
Nota: En la columna de observaciones se incluirán todas las aclaraciones o datos requeridos en esta encuesta.

11. Control de los datos Sí %* No Observaciones

11.1 ¿Los cálculos y la transferencia de los datos están sujetos a X
verificaciones llevadas a cabo de una manera sistemática?
11.2 ¿El software usado por el laboratorio está validado? En caso X
afirmativo especificar tipo de software y su uso.
11.3 ¿Se establecen e implementan procedimientos para proteger X
los datos? ¿Qué procedimientos?

28
11. Control de los datos Sí %* No Observaciones
11.4 ¿Se hace el mantenimiento de las computadoras y equipos X
automatizados con el fin de asegurar que funcionan
adecuadamente?

12. Manipulación de las muestras Sí %* No Observaciones

12.1 Para las muestras a ensayar, el laboratorio
tiene procedimientos para:
a) El transporte de las muestras.
b) La recepción de las muestras.
c) La manipulación de las muestras.
d) La protección de las muestras.
e) El almacenamiento de las muestras.
f) La conservación o la disposición final de las
muestras.
12.2 ¿El laboratorio tiene un sistema para la i­
dentificación unívoca de las muestras a ensayar a
lo largo de la vida de la muestra en el
laboratorio?
12.3 ¿El laboratorio tiene procedimientos e insta­ X
laciones apropiadas de modo de evitar el deterio­
ro, la pérdida o daño de las muestras durante
manipulación, preparación y almacenamiento?
12.4 ¿Se verifican las condiciones especificadas X
para las muestras en el momento de su recepción
en el laboratorio y registran y comunican al
cliente los apartamientos de las mismas?
* %: Grado de implementación en porcentaje
Nota: En la columna de observaciones se incluirán todas las aclaraciones o datos requeridos en esta encuesta.
X En aguas
X Si hay Aguas y Alimentos
X
X 50 Hay procedimiento de resguardo
y almacenamiento de muestras
de Alimentos
X 50 Hay procedimiento de resguardo
y almacenamiento de muestras
de Alimentos
X 50 Solo se cuenta con un formato
de disposición de muestras falta
POE
X Registro único del ingreso
Si hay un POE almacenamiento
de muestras perecederas así
como períodos de retención
Si, se verifican que no lleguen
abiertos o dañados, los empa­
ques de las muestras y que las
muestras pertenezcan al mismo
lote. Y que la cantidad sea
suficiente

13. Aseguramiento de la calidad de los Sí %* No Observaciones

resultados
13.1 ¿El laboratorio usa cepas de referencia X 50
durante la realización de los ensayos (control
positivo, negativo)?
13.2 ¿El laboratorio determina y documenta, para X
cada ensayo y matriz, la repetibilidad y
reproducibilidad de sus analistas en forma
periódica? Indicar la frecuencia.
13.3 ¿El laboratorio participa en forma periódica X Dos veces por año: Con SPC,
de ensayos de interlaboratorio? Indicar los Coliformes y Salmonella (en
ensayos, la frecuencia y las matrices. leches y queso) muestras
liofilizadas

29
13. Aseguramiento de la calidad de los Sí %* No Observaciones
resultados
13.4 El laboratorio: X Quedan registra en libros
a) Analiza y documenta los resultados obtenidos X Los resultados se envían
durante los ensayos intralaboratorios e
interlaboratorios.
b) Establece un criterio de aceptación. X
c) Toma acciones correctivas en caso de X
desviación.
13.5 ¿El laboratorio analiza y documenta las X
tendencias de los resultados obtenidos durante los
ensayos intralaboratorios e interlaboratorios?
13.6 ¿En el caso que el laboratorio tome una X
acción correctiva, dicha acción y su
fundamentación queda documentada?
* %: Grado de implementación en porcentaje
Nota: En la columna de observaciones se incluirán todas las aclaraciones o datos requeridos en esta encuesta.

30
 II. PROPUESTA DE PLAN DE ACCIÓN NACIONAL PARA SU
OPTIMIZACIÓN

Laboratorio de Diagnóstico Veterinario y Microbiología de Alimentos

B. ESTRATEGIAS Y ACCIONES A DESARROLLAR:

Punto de Problema Estrategia Acciones a Responsable Fecha

la Norma hallado propuesta para desarrollar de su ejecución
ISO/IEC solucionar el para su
17025 problema optimización
Apoyo Concientizar a las Coordinador del Pro­
Institucional autoridades yecto y laboratorio
superiores miembros de la
RILAA
Recursos Identificar fuentes
Financieros de financiamiento
para la elaboración
e implementación
del Sistema de
Calidad.
Capacitación Gestionar convenios
de cooperación téc­
nica con Organis­
mos Internaciona­
les.

Participación en
talleres de estudio
de la Norma en
coordinación con el
Orga-nismo Rector
Nacional

31
CENTRO NACIONAL DE DIAGNOSTICO Y REFERENCIA

A. PROBLEMAS PARA IMPLEMENTAR EL ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD Y

VALIDACION DE METODOLOGIA EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
R =Falta de recursos técnicos-profesionales
Falta tecnologías modernas
Falta de capacitación del personal
Infraestructura inadecuada
Necesidades de patrones de referencia
Necesidades cepas de referencia
Necesidad de algunos medios de reactivos y medios de cultivos
Debilidades en el sistema eléctrico

B. ESTRATEGIAS Y ACCIONES A DESARROLLAR:

Punto de la Problema Estrategia Acciones a Responsable Fecha

Norma hallado propuesta para desarrollar de su ejecución
ISO/IEC solucionar el para su
17025 problema optimización
falta actualizar los Elaboración de un Escribir los Director específico IV Trimestre
procedimientos, de plan para transcribir procedimientos Responsable de 2005
Sistema de acuerdo al formato que todos los Departamento de
Calidad Uds. sugieren procedimientos Entregar manual de Microbiología de
procedimientos a Aguas y Alimentos
personal involucrado
Los procedimientos Solicitar materiales Aprobar los Director General Dic. 2005
serán implementando de oficina (papelería, procedimientos Centro de Calidad
después de su tinta para impresión) Director Especifico
aprobación Verificar el Responsable de
cumplimiento de la Departamento
aplicación de los
procedimientos
Control de Esta implementado, Documentar las Realizar supervisión Director Específico Dic.2005
trabajo no pero no se ha responsabilidades Controlar los Responsable de
conforme documentado las trabajos no conforme Departamento de
responsabilidades y y mantener registros Microbiología de
autoridades cuando se de los mismos Aguas de
presenta Alimentos
Personal Falta de procedimientos Elaborar plan de Escribir Director General, I, II, III, IV
para capacitación del capacitación procedimientos Director Específico, Trimestre del
personal Resp. de 2006
Ejecutar plan de departamento y
capacitación. Gerente de Calidad,
Administrador
Instalaciones y Las instalaciones no Presentar un auto Entregar planos Director General III Trimestre
Condiciones cumplen con los proyecto de Director Específico 2006
ambientales requisitos de la Norma construcción Administrados
para un Lab. de Fecha prevista de
Microbiología Estimar costos construcción
Equipos No existe un depar­ Garantizar la calibra­ Dar a calibrar las Director General, II Trimestre
tamento de calibración ción de al menos los balanzas y masas Gerente de Calidad 2006
y mantenimientos de equipos de mayor y Administrador
equipos uso
Rastreabilidad No se cuenta con Determinar los Solicitar a la Director General, II Trimestre
(Trazabilidad) patrones de referencia patrones de Dirección la compra Gerente de Calidad 2006
referencia de mayor de patrones y Administrador
importancia
Adquirir los patrones
de referencia
Muestreo No aplica

32
 Punto de la Problema Estrategia Acciones a Responsable Fecha
Norma hallado propuesta para desarrollar de su ejecución
ISO/IEC solucionar el para su
17025 problema optimización
Validación de la Los métodos de análisis Se aplican en méto­ Revisar y actualizar Director específico I Trimestre 2006
Metodología microbiológicos no han dos normalizados la referencia y Responsable de
sido validados se usan departamento
Estimación de la No tenemos personal Identificar un recurso Participar en el Director General, IV Trimestre
incertidumbre calificado para estimar para capacitación en Taller Director Específico 2005
incertidumbre incertidumbre
Control de datos No tenemos tecnología
o equipos con software
para que sean validados
Aseguramiento No se tiene documen­ Establecer un Dar a conocer al Responsable de I Trimestre 2006
de la calidad de tada la repetibilidad y determinado número personal involucrado departamento y
datos reproducibilidad por de análisis en el análisis Analista
analista

33