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virus Zika
Finalidad
Contribuir a prevenir, controlar la transmisión del dengue, chikungunya, zika y otras arbovirosis y a mitigar el
ingreso de estas enfermedades en escenarios donde no hay transmisión en el Perú.
Objetivo general
Fortalecer las acciones de vigilancia epidemiológica y diagnóstico para la detección temprana de los arbovirus
emergentes y remergentes, así como el monitoreo de brotes y epidemias
Objetivos específicos
• Establecer los procedimientos para la captación de casos, registro, notificación e investigación de los
casos de dengue, chikungunya, zika y otras arbovirosis, sus secuelas y complicaciones en el Sistema
Nacional de Vigilancia Epidemiológica.
• Establecer las estrategias de vigilancia epidemiológica de dengue, chikungunya, zika y otras arbovirosis,
sus secuelas y complicaciones.
• Estandarizar los procedimientos de obtención, conservación y transporte de muestras biológicas para su
procesamiento, así como para el diagnóstico de dengue, chikungunya, zika y otras arbovirosis en el Perú.
RM 982-2016 - NTS 125-MINSA/2016/CDC-INS “Normativa Técnica de Salud para la vigilancia epidemiológica y diagnostico de laboratorio de dengue, chikungunya, zika y otras arbovirosis”
• Uso de muestras biológicas alternativas, adicionales al suero, como orina, LCR y otros
tejidos.
Importante esta
información para
calcular el número de
días de enfermedad.
Tipos de Tejidos:
Aislamiento viral:
A. Placenta (Cara
fetal y materna)
Vero / C6-36 B. Restos
placentarios.
(Suero, LCR, tejidos) C. Sémen.
D. Cerebro, etc.
MUESTRAS PACIENTE
(Orina)
(6 a 15 días)
1. Directa: Búsqueda del material genético del virus, zika (Acido Ribonucleico,
ARN)
CONFIANZA
Adaptado de la Guía Técnica OMS/OPS
4. HAI zika
- Primers: Secuencias de nucleótidos (de 18 a 30 bases) que flanquean una región del
genoma para su amplificación.
- Ct: Valor teórico que corresponde al ciclo de amplificación, en la que una reacción se
hace positiva. Es inversamente proporcional a la carga viral.
Ciclos de:
1. Desnaturalización (95oC)
2. Apareamiento (50-65oC)
3. Elongación (60-72oC)
Observaciones:
1) Cuando la nueva hebra tiene
contacto con la sonda, se
libera el Fluoróforo.
2) Muy rápidamente se libera el
“Quencher” que “silencia el
Fluoróforo.
Resultado: La amplificación de 1
hebra produce un pulso
cuantificable y proporcional al
numero de amplificaciones.
INS
- Verificación y Reproducibilidad de la
prueba RT-PCR.
-Protocolos estandarizados y validados.
West Africa
Genotype East Africa Asian
Genotype
1947 Genotype
Africa Este
Africa Oeste
Asiático
a.-Extracción de ARN
b.-Preparación de Mix de PCR
c.-RT-PCR tiempo real.
• Controles Negativos
– Controles de extracción Negativos.
• Extraer ARN de algunas muestras de negativas.
• Controles Positivos
– Control de extracción Positivo.
• Extraer ARN de muestras Positivas
• Todos los resultados predictivos de los Controles Positivos, deben tener un Valor
Ct adecuado.
Hemaglutinación
Anticuerpos anti-ZIKA
Antígenos de ZIKV
Anticuerpos no específicos
Hematies de Ganso
Inhibición de la Hemaglutinación
• RT-LAMP es una técnica de amplificación isotérmica que usa primers muy específicos
Muestra
Extracción ARN
Amplificación LAMP
• Equipos calibrados
• Proceso lavado
• Tiempo
• Temperatura
• pH
• Humedad