Microscopia electrónica de barrido (SEM).

La microscopia electrónica de barrido o SEM se basa en el principio de la microscopia óptica

en la que se sustituye el haz de luz por un haz de electrones, con esto se consigue hasta
los 100 Å, resolución muy superior a cualquier instrumento óptico, su funcionamiento
consiste en hacer incidir un barrido de haz de electrones sobre la muestra. La muestra está
generalmente recubierta con una capa muy fina de oro o carbón, lo que le otorga
propiedades conductoras. La técnica de preparación de las muestras se denomina
“sputtering” o pulverización catódica. Cuando el haz alcanza la muestra se generan las
siguientes partículas:

 Electrones retrodispersados (e1)

 Electrones secundarios (e2)

Además de radiación electromagnética (rayos X) y otras partículas menos significativas.

El microscopio se encuentra internamente equipado con unos detectores que recogen la

energía y la transforman en las siguientes imágenes y datos:

 Detector de electrones secundarios: (SEI – Secundary Electron Image) con los que
obtenemos las imágenes de alta resolución.
 Detector de electrones retrodispersados: (BEI – Backscattered Electron Image) Con
menor resolución de imagen pero mayor contraste para obtener la topografía de la
superficie.
 Detector de energía dispersiva: (EDS – Energy Dispersive Spectrometer) detecta
los rayos X generados y permite realizar un análisis espectrográfico de la
composición de la muestra.

La microscopia electrónica de barrido es uno de los instrumentos más versátiles disponible

para el examen y análisis de la morfología de la microestructura y caracterizaciones de
composiciones químicas. Para esto es necesario conocer los principios básicos de la óptica
de luz para comprender los fundamentos de la microscopía electrónica.

El ojo sin ayuda puede discriminar objetos subtendiendo un ángulo visual de 1/60°,
correspondiente a una resolución de ~ 0.1 mm. La microscopía óptica tiene un límite de
resolución de ~ 2,000 Å al ampliar el ángulo visual a través de la lente óptica. La microscopia
de luz ha sido de gran importancia para la investigación científica. Desde el descubrimiento
que los electrones pueden ser desviado por el campo magnético en numerosos
experimentos en la década de 1890, la microscopía electrónica se ha desarrollado
reemplazando la fuente de luz con un haz de electrones de alta energía. La microscopía
proviene de dos fuentes diferentes. Muchos especímenes se envían desde laboratorios
establecidos que, aunque equipados con el equipamiento adecuado diseñado para el
estudio de todos los aspectos.

Las otras fuentes de especímenes son aquellas recolectadas directamente de el entorno

natural o desde instalaciones de fabricación y comerciales y centros públicos que carecen
de equipamiento para la investigación científica investigación; por lo tanto, la ropa para el
estudio forense, una tubería de aceite fallada, o una nueva los meteoritos descubiertos
requieren recolección y transporte a una instalación para tratamiento preliminar antes de su
preparación para microscopía.

Hay dos tipos de laboratorios de preparación de muestras SEM:

 Los que prestan un servicio general para cualquier tipo de muestra

 y aquellos dedicados sólo para el estudio de un tipo particular de muestra.

Es inadecuado proporcionar una larga lista de todas las herramientas, equipos y procesos
utilizados para el manejo de todo tipo de especímenes las muestras prospectivas deben ser
examinadas, primero en una institución para establecer la naturaleza del problema se debe
hacer una evaluación preliminar en términos de tamaño y forma de la muestra probable y
lo más importante de todo, debe determinar si el SEM es la forma más adecuada de
proporcionar información.

Las instituciones más especializadas pueden tener algunos, pero no todos de las
herramientas y equipos para microscopía. Así, un laboratorio metalúrgico tendría equipo
para manejar piezas bastante grandes de metal utilizando estiramiento, compresión, flexión,
fracturamiento, corte, y dispositivos de fusión, junto con sierras, amoldadoras y equipo de
pulido; se encontrarían algunos de los mismos tipos de equipos en un laboratorio que
manipula grandes muestras inorgánicas como rocas, fósiles y muestras más pequeñas
como partículas, polvo y semiconductores materiales orgánicos duros como madera, papel
y tela. Los estudios sobre material biológico requieren una amplia gama de herramientas y
equipos especializados: húmedos y líquidos, las muestras pueden requerir el uso del equipo
especializado desarrollado para microscopía y análisis de baja temperatura.
El punto de partida para considerar las herramientas y equipos esenciales necesaria para
la preparación de muestras SEM será con muestras que, por un medio u otro, se consideren
apropiados para se estudia en el SEM pero eso requiere la preparación especializada de
muestras las herramientas y equipos especializados necesarios para mantener y reparar el
microscopio, el microanalizador de rayos X y el procesamiento de imágenes y los
dispositivos de almacenamiento no se consideran.

Tamaño de la muestra

Es importante producir muestras que encajen dentro de un SEM, en algunos microscopios

electrónicos de barrido se pueden acomodar especímenes muy grandes usando etapas y
cámaras. La mayoría de los microscopios de escaneo no especializados, a pesar de que
pueden manejar especímenes de hasta 50 mm de diámetro y 20 mm de espesor, por lo
general examinan muestras mucho más pequeñas que pueden caber ya sea en el diámetro
de 12 mm.

Laboratorio general de preparación de muestras SEM

En el laboratorio de SEM, es útil considerar primero las diversas actividades que se llevarán
a cabo, pero los siguientes requisitos son importantes. Debe haber áreas húmedas y secas
separadas; una baja vibración área para equipos sensibles; una región reservada para
sputtering y recubrimientos evaporativos; Armarios de almacenamiento de humo sin
chispas, cámaras, hornos de secado y limpiadores ultrasónicos; armarios y estantes; Una
región reservada para cualquier pieza especial del equipo y lugares seguros para atar el
gas de alta presión, botellas, tales como las que contienen nitrógeno, dióxido de carbono y
argón. Todo el laboratorio debe estar bien iluminado, ventilado y equipado con un montón
de puntos de alimentación eléctrica adecuada y muebles de laboratorio, incluyendo sillas
cómodas, los contenedores de residuos deberán ser separados para vidrio y objetos
afilados, tóxicos y peligrosos, material y residuos generales. Todas estas piezas de
equipamiento, la disposición general y el funcionamiento del laboratorio deben cumplir las
normas de Seguridad y Salud vigentes, para algunos de los productos químicos y de las
operaciones involucradas en la preparación de la muestra potencialmente peligrosa en la
medida de lo posible, la preparación del espécimen debe llevarse a cabo en un banco firme
con una silla cómoda y ajustable, porque las herramientas pequeñas de mano deben
sujetarse con seguridad para muy pequeño especímenes puede ser necesario usar un
micromanipulador para sostener y mover las herramientas.
Equipo para facilitar la observación del proceso de preparación de muestras

Algunos equipos más grandes facilitan la preparación del espécimen particularmente para
muestras más pequeñas. Es útil tener una buena lente de calidad a mano de vidrio de 100
mm de diámetro con un aumento de × 5 que se puede fijar a un soporte ajustable y está
cerca de un par de fuentes de luz flexibles una lente de mano más pequeña con un aumento
de × 10. Es útil para inspeccionar la muestra más de cerca fácil acceso a un buen
microscopio de luz binocular es una ventaja adicional. Los proveedores de laboratorio
especializados proporcionan herramientas para SEM, pero dependiendo del tipo de
muestras que se manejen, herramientas adecuadas también se puede encontrar en tiendas
de bricolaje y ferretería, ópticas, dentistas y tiendas de modelos de construcción.

Herramientas para manipular muestras: sondas, agujas y cepillos de punta fina

 Las sondas dentales son adecuadas para exponer partes ocultas de la muestra.
 Las agujas de coser se pueden usar para recoger especímenes pequeños y
muévalos al porta muestras.
 Las agujas de punta muy fina y las finas agujas frescas utilizadas en la acupuntura
son estériles y tienen puntos muy finos pequeño desechable
 Las agujas se pueden sostener convenientemente en los soportes de metal además
de las agujas y sondas metálicas, aplicador de madera.
 Palos, palillos, agujas de vidrio fino, e incluso algunas plantas se pueden utilizar
espinas, para manipular muestras pequeñas.

Herramientas para sostener muestras grandes

Las muestras más grandes y duras se pueden sujetar en un mini vice, las muestras pueden
ser empaladas en finas puntas de metal. Las pinzas son una manera conveniente de
mantener temporalmente y mover las muestras pequeña y grandes pinzas quirúrgicas con
resorte son capaces de sostener muestras grandes y recogida y retención de muestras
pequeñas de punta fina. Las pinzas con resorte son adecuadas para recogerlas partículas
tan pequeñas como 100 μm.

Herramientas para ayudar a limpiar muestras

• Cepillos. Pequeño cabello natural o nylon de 2 a 4 mm de diámetro, los cepillos se pueden

utilizar para barrer el polvo y las partículas en la superficie de los especímenes, pero no
deben utilizarse para pintar lados de muestras no conductoras con pintura plata o carbono,
las púas de dientes de madera se adaptan mucho mejor a esta actividad, además de los
pinceles, es útil tener un recipiente pequeño de gas comprimido con una boquilla fina que
puede expulsar bien partículas secas.

• Pipetas. A veces es necesario enjuagar o irrigar una región del espécimen y pipetas de
plástico fino con un integrado las tetas son ideales para este propósito se pueden dibujar
pipetas de vidrio fino a medida de los tubos de vidrio calentados por llama, pero se debe
tener cuidado no dañar la superficie de muestras delicadas.

Aplicaciones de la microscopia electrónica de barrido.

La SEM ha sido aplicada en la caracterización de:

 Morteros y hormigones: Microestructura, fases cristalinas, impurezas, detección e

identificación de sales, microfisuración, etc.
 Materiales metálicos: Fases cristalinas, texturas, composición, tamaño de grano,
patologías y deterioro (corrosión, fatiga, defectos, fragilización, etc.)
 Análisis de fracturas en distintos materiales.
 Determinación de espesores.
 Productos cerámicos: Microestructura, evaluación de la temperatura de cocción,
fases cristalinas, impurezas, detección e identificación de sales y esflorescencias,
etc.
 Geología: Cristalografía, composición mineralógica, petrología, estudio de
composición de arcillas, etc.
 Patrimonio, Conservación y Rehabilitación: Análisis de materiales pétreos, morteros
y pinturas, grado y origen de alteración, estado, caracterización del sistema poroso,
biodeterioro, efecto de los tratamientos de limpieza y consolidación, análisis de sales
y costras, análisis de pigmentos.

Otra de las ventajas de la SEM es la escasa porción de muestra que se necesita para el
análisis, lo que lo convierte prácticamente en un ensayo no destructivo.

También se han realizado análisis de Micro y nano esferas de carbono sintetizadas por
deposición química fase vapor (CVD por sus siglas en inglés) usando naftaleno como
precursor fueron caracterizadas mediante el análisis de imágenes obtenidas por
microscopía de barrido en este análisis se observó la influencia de la temperatura de
reacción sobre el tamaño de las partículas. Esto debido a la variación de temperatura, si
esta es mayor; mayor será también la velocidad de deposición, dando lugar a un
reordenamiento estructural, originando como consecuencia materiales con mejor arreglo
cristalino. Esta técnica de análisis demostró ser muy versátil y efectiva para el estudio
morfológico de micro y nano estructuras de carbono.

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6. L.C. Díaz-Chacóna*, J.E. Arévalo-Festerb, E.V. Plaza-Pirelab y R. Atencio-
Fuenmayora,b, “Caracterización por microscopía electrónica de barrido de micro y
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