Ramírez Alpizar Alejandro 3IM76.

Yair Cruz Narváez.

PRÁCTICA N° 1: Partes del HPLC Y Preparación de la Muestra

Objetivos:
 Conocer como está conformado un HPLC.
 Conocer la preparación de la fase móvil.

Cromatografía líquida de
alta resolución (HPLC)

Es

Utiliza un entorno más presurizado para propulsar las

muestras líquidas a través de la densa columna de manera
más eficiente.

Partes De un HPLC

Reservorios Detector
columna
Sist. Bomba
Desgasificador

Contiene

Este Es La muestra se La
Del tipo carga y luego separación Dos
Es un sistema diafragma es enviada al se lleva a lámparas un
Contienen la encargado de donde se sistema, esta cabo dentro de
fase móvil y se mezclan los
eliminar gases entra al de la tungsteno
encuentran por flujos
disueltos en el sistema sin columna al que detecta
lo general en la
disolvente, mediante el interrumpir el material de la parte
parte superior
mediante el uso uso de flujo relleno que (visible) y
del equipo para
de ultrasonidos pulsaciones se utiliza es una lámpara
que la fuerza de
gravedad dirija de gel de de deuterio
el solvente al sílice o de que detecta
sistema. Pulsaciones La muestra polímeros la parte uv.
Evitando que
abatidas con es
estos gases
un sistema empujada
entren a la
amortiguador mediante
Se coloca un bomba y la
y el uso de la fase Soportan de
quemen. Contiene
filtro con una válvula de móvil. 2000 a 2500 dos celdas
porosidad purga inyecciones, de cuarzo
para evitar el
ingreso de separa de en donde
partículas al analito en uno reside
sistema. analito el blanco y
la otra la
muestra.
La
medición
de hace de
3000 mABS
a una
longitud
fija
 Ramírez Alpizar Alejandro 3IM76.
Yair Cruz Narváez.

HPLC ESQUEMA GENERAL

  TRATAMIENTO DE LA FASE MOVIL.

El matraz Kitazato junto con el vacío creado con la bomba, elimina las
partículas y gases de los solventes y otros componentes de fase móvil.

Pinza de pato
Filtro

INDICADORES
DE PRESION
Membrana

BOMBA

Matraz kitasato Residuos

  TIPOS DE MEMBRANAS

Referencia Membrana Tamaño Poro Diametro Pk

Nylon 0,45 μm 47 mm D pk/50

TR-200140

Nylon 0,20 μm 47 mm D pk/50

TR-200150
Nylon L.E. 0,45 μm 47 mm D pk/50
TR-200450

Nylon L.E. 0,20 μm 47 mm D pk/50

TR-200455

PTFE 0,45 μm 47 mm D pk/50

TR-200200
PTFE 0,20 μm 47 mm D pk/50
TR-200210

M.E. Celulosa 0,45 μm 47 mm D pk/50

TR-200260

M.E. Celulosa 0,2 μm 47 mm D pk/50

TR-200270
PVDF 0,45 μm 47 mm D pk/50
TR-200320

PVDF 0,20 μm 47 mm D pk/50

TR-200330

PP 0,45 μm 47 mm D pk/50
TR-200380
PP 0,20 μm 47 mm D pk/50
TR-200390

Celulosa regenerada 0,45 μm 47 mm D pk/50

TR-200420

Celulosa regenerada 0,20 μm 47 mm D pk/50

TR-200425
Microfibra de Vídrio 1 μm 47 mm pk/50
TR-200 457G

Acetato celulosa 0,45 μm 47 mm D pk/50

TR-200 458
  DISCUCIÓN:

Al término de la práctica se pudo comprender las diferentes partes del HPLC, así
como sus diferentes funciones, ya que conocer dichas partes podremos manejar de
una manera correcta el equipo como también el tratamiento de la fase móvil por el
cual se va a transportar nuestra muestra, hasta llegar a la columna donde se llevara
a cabo la separación de analito en analito. Las ventajas de conocer perfectamente el
equipo son:

I. Evitar la contaminación de la muestra.

II. La descompostura de alguna parte de nuestro equipo.
III. El mantenimiento al término del análisis.
IV. Las medidas de precaución que se deben de tomar en su manejo.

 REFERENCIAS

 Barquero Quirós, M. (2004). Mecanismos y aplicaciones de la cromatografía

líquida de alto desempeño (1.a ed.). San José, Costa Rica: Editorial De la

Universidad de Costa Rica.

 Química Analítica. D.A. Skoog, D.M. West y F.J. Holler 6ª Ed. Mc Graw Hill,
1995.