COLEGIO DE

POSTGRADUADOS
CAMPUS CÓRDOBA
Laboratorio de
Cultivo de Tejidos Vegetales

INNOVACIONES BIOTECNOLÓGICAS PARA

AUMENTAR LA PRODUCTIVIDAD DEL CULTIVO
DE CAÑA DE AZÚCAR PARA EL CAMPO
PRESENTA
Dr. Jericó Bello
MEXICANOjericobello@gmail.com
PAÍSES PRODUCTORES DE CAÑA DE AZÚCAR

PAÍSES PRODUCTORES DE CAÑA DE AZUCAR

PAÍS % MUNDIAL
1.-BRASIL 20.8
2.-INDIA 14.7
3.-UNION EUROPEA 11.9
4.-CHINA 7
5.-ESTADOS UNIDOS 4.6
6.-TAILANDIA 3.7
7.-MÉXICO 3.6
8.-AUSTRALIA 3.1

Brasil utiliza 50% de su producción de caña para

producir etanol, mientras que el resto es ocupado
para la producción de azúcar.
(FAO, 2016
Los ingenios azucareros demandan caña de mayor calidad, de tal forma que se
incremente tanto su rendimiento en campo (ton caña/ha), rendimiento
agroindustrial (ton azúcar/ha) y rendimiento en fábrica (%)

Rendimiento agroindustrial de las principales economías azucareras

 SISTEMA DE SIEMBRA
Los sistemas convencionales de siembra por yemas no garantizan el saneamiento y
rejuvenecimiento de las variedades comerciales seleccionadoras en campo.

No expresa su potencial productivo

Una de las alternativas más utilizada para el
saneamiento y rejuvenecimiento de esta
especie es mediante el uso de las técnicas de
Cultivo de Tejidos Vegetales (CTV).
 BIOTECNOLOGÍA

La biotecnología es la tecnología basada en la biología.

"toda aplicación tecnológica que utilice sistemas biológicos y organismos

vivos o sus derivados para la creación o modificación de productos o
procesos para usos específicos”
 Biotecnología

Bioindustria Ciencias marítimas Agricultura Veterinaria Biomedicina Biorremediación

Cultivo de Tejidos Vegetales

Roca 2003
 BIOTECNOLOGÍA VEGETAL

MICROPROPAGACIÓN MEJORAMIENTO
GENÉTICO

Cultivo de Tejidos Vegetales

CONSERVACIÓN DE
PRODUCCIÓN IN VITRO GERMOPLASMA
DE METABOLITOS

SANIDAD
VEGETAL
Estrategias biotecnológicas para:

Transformación Hibridación
genética somática

Líneas Variación
isogénicas somaclonal
 Mejoramiento genético en plantas por medio de
biotecnología

plantas resistentes plagas y enfermedades.

plantas con tolerancia a efectos abioticos.
plantas con rutas metabólicas modificadas.
plantas mejoradas en cuanto a composición de proteínas, aceites, etc.
Estrategias biotecnológicas para:

Transformación Hibridación
genética somática

Líneas Variación
isogénicas somaclonal
 Líneas isogénicas

Se refiere a líneas puras con el mismo genotipo para el o los caracteres considerados.

La colchicina es un fármaco antimitótico que detiene o inhibe la división celular en

metafase o en anafase.
 Métodos para generar variabilidad

Condiciones in vitro Agentes mutagénicos

Agentes físicos Agentes químicos

Genotipo -Ultraviolet radiation (UV) -Alkylating agents:

Fuente de explante
Condiciones de incubación
Composición del medio de cultivo
Tiempo de cultivo
Vía de regeneración
-Ionizing radiation: ethyl methanesulphonate (EMS)
X-rays, gamma-rays, alpha and diethyl sulphate (dES)
beta particles,protons and 2,4-D( dichlorophenoxyacetic acid )
neutrons). -Colchicine.

El cultivo in vitro incrementa la eficiencia de los tratamientos

mutagénicos (Predieri, 2001).
Pruebas de radiosensibilidad
Dosis de irradiación con fuente de Co 60 en diferentes tejidos vegetales.
Dosis en tejidos Dosis en tejidos
Tratamiento deshidratados (Gy) hidratados (Gy)
0 0 0
1 10 1
2 20 3
3 30 5
4 40 7
5 50 9
6 60 11
7 70 13
8 80 15
9 90 18
La variación somaclonal puede alterar el color, vigor, rendimiento, etc.
Figure 1. Effect of subculturing on the number of shoots of sugarcane cv. Mex 69-290
using temporary immersion bioreactors after 30 d between each subculture. (a–j)
Subcultures 1 to 10, respectively. Bar = 1 cm.
 Conservación in vitro de germoplasma

Conservación in vitro de caña de azúcar (Saccharum sp.). Dosis de izquierda a derecha a) manitol 0, 15, 30 y 45
g L-1 ,b) sorbitol 0, 15, 30 y 45 g L-1 ,c) paclobutrazol 0, 1, 2 y 3 mg L-1 y d) ácido abscísico 0, 1, 2 y 3 mg L-1.
Crioconservación
 Sanidad vegetal
Cultivo de meristemos

El cultivo de meristemos es un método efectivo para la eliminación de infecciones

virales y es el material preferido para la conservación de germoplasma.

El meristemo carece de tejidos vasculares,

que es por donde se propagan los virus
que van contaminando a la planta
 Cultivo de meristemos

El cultivo de meristemos es un método efectivo para la eliminación de

infecciones virales , hongos y bacterias.
Meristemo apical de caña
Hidrotermoterapia Electroterapia
(50°C durante 1 hr ) (0, 5,10,15 y 20 V, por 5-15 min)
 MICROPROPAGACIÓN

La micropropagación o clonación in vitro es la

propagación asexual de plantas utilizando las
técnicas de cultivo in vitro de tejidos vegetales.
 En México, la micropropagación es una de las técnicas
de la Biotecnología Vegetal que más desarrollo ha
mostrado en los últimos años.
 Esquema general de la propagación in vitro de plantas

Planta madre Cultivo in vitro Multiplicación Plantas ¨hijas¨

 VENTAJAS
Se trata de un sistema de propagación clonal.
Se obtienen un número ilimitado de plantas dependiendo de la capacidad del
laboratorio.

El espacio que se requiere es mínimo y el tiempo en que puede realizarse el

proceso es relativamente corto.

Las plantas que se obtienen están libres de plagas y/ó enfermedades.

Se logra la revigorización del cultivo debido al el rejuvenecimiento in vitro.

Debido a sus ventajas, las plántulas producidas mediante

sistemas de micropropagación presentan una mayor calidad.
La micropropagación ha tenido como tarea fundamental producir
vitroplantas sanas y rejuvenecidas de variedades locales de caña de
azúcar, así como las introducidas de otros países.
Técnicas para el establecimiento
in vitro de caña de azúcar
 Banco de donantes en caña de azúcar

Selección de semilla en trozos (2-3 yemas) Hidrotermoterapia (50°C durante 1 hr )

Se sumergen en una solución con fungicidad

más enraizador (1g/l durante 16 hrs.)
 PROTOCOLO DE PROPAGACIÓN DE LA CAÑA DE AZÚCAR EN BIT

Proliferación en BIT

Banco de donantes Corte de ápices Establecimiento

Elongación y enraizamiento en BIT Separación de brotes

Figure 1. Effect of subculturing on the number of shoots of sugarcane cv. Mex 69-290
using temporary immersion bioreactors after 30 d between each subculture. (a–j)
Subcultures 1 to 10, respectively. Bar = 1 cm.
 Hormetic response by silver nanoparticles on in vitro multiplication of sugarcane
(Saccharum spp. cv. Mex 69-290) using a temporary immersion system

Effect of silver nanoparticles concentration on in vitro shoot multiplication of sugarcane var. Mex 69-290 after 30 days
of culture in Temporary Immersion Bioreactors. a-e): 0, 25, 50, 100 and 200 mg/L of AgNPs, respectively. Bar= 1 cm.

(Bello-Bello et al. 2017)

 Sugarcane - Technology and Research

Figure 1. Sugarcane micropropagation by temporary immersion systems. (a) Recipient for automated
temporary immersion (RITA™), (b) gravity immersion bioreactor (GIB), (c) Temporary Immersion
Bioreactor (TIB) and (d) SETIS™ bioreactor, after 30 d of incubation.

(Bello-Bello et al. 2018)

NPsAg
 Aclimatización de la caña de azúcar

Tratamiento con
enraizador

Siembra en invernadero Aspersión (3 min cada 6 h)

Endurecimiento
Invernadero
 SIEMBRA EN CAMPO

1.20 -1.40
SIEMBRA EN CAMPO
RIEGO DE VITROPLANTAS
 Semilleros de plántulas ex vitro de caña de azúcar

Sistema de producción de semillas utilizando vitroplantas para el establecimiento de semilleros

básicos y producción de semilleros comerciales hasta obtener un cultivo comercial por unidad de
área (UA).
SEMILLERO BÁSICO

Semillero básico Var. ITV 92-1424 con 6 meses de desarrollo

Como resultado del efecto combinado del saneamiento
y el rejuvenecimiento in vitro se espera incrementar los
rendimientos en azúcar entre el 10 y 15%.
 Micropropagación.

Semilla sintética ó artificial

Embriones somáticos encapsulados en una testa sintética

protectora.
 Bionanotecnología

Biotecnología Nanotecnología
 Nanopartículas de plata (NPaAg)

Partículas inferiores a 100 nm

 CONTAMINACIÓN in vitro

Los contaminantes pueden ser hongos, levaduras o bacterias, aunque los

tejidos pueden además contener virus, viroides y micoplasmas.
Esterilización del
medio de cultivo
 Hormetic response by silver nanoparticles on in vitro multiplication of sugarcane
(Saccharum spp. cv. Mex 69-290) using a temporary immersion system
Jericó J. Bello-Bello1*, Rocío A. Chavez-Santoscoy2, Carlos A. Lecona-Guzmán3, Nina Bogdanchikova4, Josafhat Salinas-
Ruíz5, Fernando Carlos Gómez-Merino5, Alexey Pestryakov6

Effect of silver nanoparticles concentration on in vitro shoot multiplication of sugarcane var. Mex
69-290 after 30 days of culture in Temporary Immersion Bioreactors. a-e): 0, 25, 50, 100 and 200
mg/L of AgNPs, respectively. Bar= 1 cm
Registro de una marca comercial ante el IMPI sobre el uso de
nanoplata aplicado al Cultivo de Tejidos Vegetales.

AgROVIT
Microbicida elaborado a base de nanopartículas de plata utilizado en
el Cultivo de Tejidos Vegetales
Método para la esterilización de medios de
cultivo utilizandos en la micropropagación
comercial de plantas

Tramite de patente:. (IMPI: Expediente: MX/a/2015/002587 Folio: MX/E/2015/014807).

Método para estimular el crecimiento
vegetal
Laboratorio de
Cultivo de Tejidos Vegetales
Invernadero
PROCEDIMIENTO PARA OBTENER
LA
CERTIFICACIÓN
Plagas y enfermedades cuarentenarias reglamentadas en la NOM-016-FITO-1995 de las que debe estar libre el material vegetal producido.

Nombre Común Nombre científico

Escama de la caña de azúcar Aulascaspis tegalensis

Chicharrita de la caña de azúcar Perkinsiella sacharicida

Cicadela de la caña de azúcar Pyrilla perpusilla

Barrenador manchado del tallo Chilo partellus

Barrenador de la caña de azúcar Eldana saccharina

Barrenador púrpura del tallo de la caña de azúcar Sesamia inferens

Piojo harinoso de Kenya Planococcus kenyae

Taladrador gigante de la caña de azúcar Castnia licoides

Mildiú suave de la caña de azúcar Peronosclerospora sacchari

Gomosis de la caña de azúcar Xanthomonas campestris pv. vasculorum

Raquitismo de las socas Leifsonia xyli ssp.xyli

Cancro bacteriano Dickeya chrysanthemi

Marchites bacteriana Pantoea stewartii

Escaldadura de la hoja Xanthomonas albilineans

Virosis Sugar Cane Streak Virus.

Virosis Sugarcane Sereh virus

Cuervo de la caña de azúcar Sphacelotheca erianthi

Cuervo de la caña de azúcar Sphacelotheca macrospora

Carbón de la caña de azúcar Ustilago scitaminea

PRODUCCIÓN DE PLANTAS
RESULTADOS
 Resultados fitosanitario de muestras de plántulas in vitro
Nombre científico Método de detección Diagnóstico
Xanthomonas axonopodis pv. Aislamiento+ Patogenicidad+ bioquímicas
Negativo
vasculorum PCR
Leifsonia xyli ssp.xyli Aislamiento+ Patogenicidad+ bioquímicas Negativo
Aislamiento+ Patogenicidad+ bioquímicas
Xanthomonas albilineans PCR+ Secuenciación Negativo
ELISA
Dickeya chrysanthemi Aislamiento Negativo
Aislamiento
Pantoea stewartii Negativo
ELISA
Cámara húmeda-PDA+ Monosporicos+
Ustilago scitaminea Esteromicroscopio y compuesto+ claves Negativo
taxonómicas
PDA+ Monosporicos+ Esteromicroscopio y
Peronosclerospora sacchari Negativo
compuesto+ claves taxonómicas
PDA+ Monosporicos+ Esteromicroscopio y
Sphacelotheca erianthi Negativo
compuesto+ claves taxonómicas
PDA+Monosporicos+ Esteromicroscopio y
Sphacelotheca macrospora Negativo
compuesto+ claves taxonómicas
Sugar Cane Streak Virus. RT-PCR Negativo
Sugarcane Sereh virus RT-PCR Negativo
Biofábricas en México: Caso caña de azúcar
Laboratorios certificados en México
PROYECTO PILOTO PARA LA PRODUCCIÓN DE PLÁNTULAS DE CAÑA DE
AZÚCAR POR CULTIVO DE TEJIDOS
IMPORTANCIA DE UN LABORATORIO CERTIFICADO

 Micropropagación

 Mejoramiento genético

 Saneamiento de plantas

 Conservación de germoplasma
 PROYECTO

INNOVACIONES BIOTECNOLÓGICAS PARA AUMENTAR LA

PRODUCTIVIDAD DEL CULTIVO DE CAÑA DE AZÚCAR
PARA EL CAMPO MEXICANO
 OBJETIVO GENERAL

Aplicar herramientas biotecnológicas modernas para la propagación de

variedades sobresalientes de caña de azúcar, que aseguren alta calidad genética
y fitosanitaria de los materiales, e implementar paquetes tecnológicos innovadores y
sustentables para el establecimiento y manejo del cultivo, con fin de establecer
semilleros certificados, en beneficio de este sector en el país.
 OBJETIVOS PARTICULARES

(1) Obtener vitroplántulas certificadas de variedades sobresalientes de caña de

azúcar (CP 72-2086, MotzMex 92-207 y COLPOSCTMEX 05-204) a bajo costo
mediante la optimización de un protocolo de micropropagación empleando
biorreactores semiautomatizados de inmersión temporal.

(2) Desarrollar un sistema de siembra de semillero básico para el

establecimiento de vitroplantas de caña de azúcar con la mayor capacidad de
sobrevivencia en campo.

(3) Establecer parcelas demostrativas de semilleros básicos certificados de las

variedades promisorias de caña de azúcar seleccionadas.

(4) Desarrollar un paquete tecnológico para la siembra, supervivencia,

mantenimiento y cosecha del semillero básico mediante un manejo biológico de
plagas y enfermedades y manteniendo las buenas prácticas de cultivo.
 PAQUETE INTEGRAL BIOTECNOLÓGICO

Bio-Root
(Trichoderma harzianum y Bacillus subtilis)

Bio-CNPR
(Metarhizium anisopliae, Beauveria
bassiana, Trichoderma harzianum, Bacillus
thuringiensis, Bacillus subtilis y Rhizobium
spp).
 PAQUETE INTEGRAL
BIOTECNOLÓGICO

+ +

VITROPLANTAS TRICHOGRAMMA Bio-Root y Bio-CNPR

CONSERVACIÓN IN VITRO DE GERMOPLASMA
PRODUCCIÓN DE SEMILLAS ARTIFICIALES SELECCIÓN DE VARIEDADES TOLERANTES A
ESTRÉS HÍDRICO
CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
Gracias por su
atención!!!!