Pág/1

Trabajo de Revisión Toxicología Analítica

Determinación de psicofármacos en orina

Dr. Federico Contreras

Laboratorio Bioscreen, Rosario, Santa Fe, Argentina.

Correspondencia a:

E mail: fcontreras@bioscreen.com.ar

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm Sertox © Copyright 2004

 Pág/2

Resumen

Los psicofármacos comprenden un amplio número de sustancias química heterogéneas

que afectan el sistema nervioso central y pueden clasificarse por sus efectos sobre el

mismo. Muchas de estas sustancias (o sus metabolitos) pueden determinarse en orina,

análisis que a menudo posee implicancias legales y por eso el muestreo es crítica tanto

para asegurar los derechos del paciente como para prevenir la adulteración. La amplitud

de sustancias en cuestión obliga a recurrir a procedimientos analíticos especializados

como la extracción seguida de cromatografía y métodos inmunoquímicos.

Palabras claves: psicofármacos, orina

Palavras claves: psicofarmacos, urina

Keywords: psicoactive drugs, urine.

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm Sertox © Copyright 2004

 Pág/3

Introducción

La determinación de psicofármacos en orina se solicita frecuentemente a los pacientes

que ingresan en centros de emergencia con signos y síntomas toxicológicos o que se

sospecha los han utilizado, pero también se requiere dentro de controles laborales (tanto

ingresos como exámenes rutinarios o aleatorios) y finalmente para el seguimiento de

pacientes en tratamiento por el empleo de drogas de abuso. Esta determinación presenta

una serie de particularidades legales y analíticas

Exposición del tema

1. ¿Qué se entiende por psicofármacos?

Entre las particularidades de esta determinación figura en primer lugar la gran cantidad

de sustancias que pueden denominarse “psicofármacos”. En una clasificación de las

sustancias de interés toxicológico según su estructura química puede verse que el

número de compuestos llamados “drogas” es superior a la suma de los restantes

(aniones, metales, gases, volátiles, pesticidas). Desde el punto de vista toxicológico una

definición de droga es “toda aquella sustancia natural ó sintética que introducida en el

organismo modifican, alteran, o reparan sus funciones normales” mientras que podemos

definir a los psicofármacos como “sustancias con acción preferencial sobre el sistema

nervioso central”. Sólo los psicofármacos comercialmente disponibles suman docenas de

compuestos y por eso es natural que se los haya agrupado por sus efectos y su

estructura química. Una clasificación a la vez útil y sencilla es la de la Organización

Mundial de la Salud, que divide a los psicofármacos en agentes psicolépticos,

psicoanalépticos y psicodislépticos

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm Sertox © Copyright 2004

 Pág/4

Los agentes psicolépticos son depresores del sistema nervioso central y se utilizan como

anestésicos, antipsicóticos y tranquilizantes; dentro de los mismos tenemos hipnótic os

barbitúricos (fenobarbital, secobarbital) hipnóticos no barbitúricos (hidrato de cloral,

glutetimida), carbamatos (meprobamato, carisoprodol) benzodiazepinas (diazepam,

alprazolam, bromazepam, lorazepam) fenotiacinas (clorpromacina, trifluoperacina) y

compuestos derivados de la butirofenona (haloperidol) y reserpinoides (reserpina)

Los agentes psicoanalépticos son estimuladores del sistema nervioso central y se utilizan

en el tratamiento de algunas patologías como la depresión y en el alivio del dolor.

Algunos ejemplos son los inhibidores de la monoaminooxidasa (tranilcipromina, fenelzina

la cocaína y sus derivados (novocaína, procaína) la anfetamina y compuestos

relacionados (fenilpropilamina, fenilisopropilamina) la fluoxetina y sus derivados

(paroxetina) y los antidepresivos tricíclicos (imipramina, amitriptilina)

Los agentes psicodislépticos son perturbadores del sistema nervioso central. Este grupo

comprende los analgésicos opiodes (morfina, codeína, heroína. los cannabinoides

(marihuana, hashish) y agentes alucinógenos como las indolalquilaminas (LSD) y las

fenilalquilaminas (mescalina). También pueden incluirse en este grupo las drogas

anticolinérgicas atropínicas (atropina, escopolamina, alcaloides de la belladona)

Estas sustancias tan heterogéneas en lo químico, terapéutico y en el marco legal de su

uso son apenas una fracción de los psicofármacos: continuamente se liberan al mercado

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm Sertox © Copyright 2004

 Pág/5

nuevos compuestos pero eso no es todo ya que los psicofármacos, como la mayoría de

las drogas, sufren procesos de biotransformación luego de su ingreso al organismo y

puede darse el caso que en orina se encuentren los metabolitos y no la droga original,

con lo que resulta imprescindible conocer la metabolización de los fármacos que se desea

analizar. Las benzodiazepinas, por ejemplo, atraviesan procesos de desalquilación e

hidroxilación y mientras la vida media del flurazepam en plasma es de 2 a 3 horas la de

su metabolito más activo el N-desalquilflurazepam es de 50 horas. Otro ejemplo es el

caso de la cocaína, cuyos metabolitos son la benzoilecgonina y metilecgonina y en el caso

de una ingesta concomitante de alcohol aparece la etilbenzoilecgoninda (cocaetileno)

cuya vida media es de 3 a 4 veces mayor que la cocaína. Entonces podemos concluir que

la investigación en toxicología comprende la sustancia en cuestión y sus metabolitos para

lo que la orina (en todas aquellas sustancias con eliminación renal) es la muestra de

elección.

2. Aspectos legales de la toma de muestras

Si bien la toma de muestra es crítica en todas las determinaciones de laboratorio en la

psicofármacos en orina tiene características especiales que si no se cumplen pueden

invalidar un estudio completamente correcto desde el punto de vista técnico y tener

serias consecuencias legales. De hecho ciertos análisis sólo pueden realizarlos las

instituciones y los profesionales legalmente habilitados y el procedimiento de muestreo

se encuentra detallado en la misma legislación. Un ejemplo (en la Rep. Argentina) es la

ley 24819 del doping deportivo que comienza afirmando “corresponde a la Secretaría de

Deportes y Recreación del Ministerio de Desarrollo Social y Medio Ambiente, en forma

indelegable, la plena responsabilidad de los controles antidoping establecidos en la

presente” y luego detalla cómo realizar la toma de muestras, la forma de rotular y

conservar las mismas, entregar los resultados y el procedimiento a seguir en caso de

detectarse alguna de las sustancias comprendidas en la ley. En este caso y en el de las

pericias realizadas en el marco de las leyes 17818 (estupefacientes) 19303

(psicotrópicos) y 23737 (régimen penal de psicotrópicos) actúan las personas designadas

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm Sertox © Copyright 2004

 Pág/6

al efecto y conformes a las mismas, pero en otras circunstancias esta determinación

puede ser solicitada y realizada por otros profesionales y para eso es necesario conocer

la forma correcta para prevenir adulteraciones (las personas que consumen drogas de

abuso o sustancias ilícitas generalmente intentan ocultarlo) garantizar la calidad del

análisis y por último pero no por ello menos importante, garantizar en todo momento los

derechos del paciente.

Se entiende por “cadena de custodia” al procedimiento que asegura la trazabilidad e

inviolabilidad de las mismas. Lógicamente las acciones específicas a seguir varían según

el profesional o la institución que solicita la determinación y la encargada de realizar el

análisis, pero algo común a la mayoría de los procedimientos es la identificación

inequívoca e inmediata del colector con la muestra y el sellado de modo que no pueda

abrirse sin que se advierta. Una manera usual de hacerlo es cruzando la tapa del

recipiente con una etiqueta firmada por el paciente y el encargado de recolectar las

muestras. Las muestras deben estar en todo momento bajo la responsabilidad de una

persona cuyos datos, conformidad y observaciones si las hubiera se registrarán

igualmente de manera fidedigna. La manipulación de la orina se define como la alteración

intencional de su integridad con el propósito de falsear el resultado de pruebas

bioquímicas. La misma puede efectuarse de diferentes maneras, siendo las más comunes

la sustitución y la dilución. También puede producirse mediante la ingestión de

sustancias que modifiquen la función renal (diuréticos, inhibidores) o sustancias

“máscara” como probenecid y epitestosterona.

3. Aspectos técnicos de la toma de muestras

Lo ideal es que el profesional supervise al paciente mientras emite la muestra, que es

orina espontánea (por lo menos 100 ml) y que debe tomarse en un colector estéril y

conservarse refrigerada (debe tenerse en cuenta que el material plástico de los envases

puede absorber ciertos compuestos orgánicos). Como las muestras generalmente se

toman en baños es importante recordar cortar el suministro de agua y colorear el

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm Sertox © Copyright 2004

 Pág/7

remanente en inodoros y depósitos para prevenir su sustitución. Asimismo se aconseja

controlar que los pacientes no oculten líquidos en bolsos y/o prendas amplias.

Una vez recogida la muestra se controla la temperatura, que debe estar entre los 32º y

38º. Se debe medir el pH y anotar el color de la orina, si la misma tiene algún precipitado

o cualquier indicio de anormalidad. Se recomienda que el laboratorio efectúe una

determinación de creatinina en orina (rango normal de 0.5 a 3 gramos/litro, valores

menores a 0.3 gramos/litro indican una probable dilución)

4. Consideraciones analíticas

A grandes rasgos la metodología de trabajo se base en una primera etapa o screening

que permite descartar las muestras negativas y una segunda etapa o confirmatoria

empleando otra técnica para las positivas. Existen tres grandes grupos de técnicas

analíticas: las inmunológicas, las cromatográficas y las colorimétricas. Estas últimas

comprenden un gran número de reacciones químicas llevadas a cabo sobre la muestra

con reactivos relativamente asequibles (por ejemplo la de Trinder para salicilatos,

Fujiwara para hidrocarburos halogenados) y si bien han prestado y prestan un gran

servicio a la toxicología de urgencia y de recursos limitados su baja especifidad y

sensibilidad no permite recomendarlas para esta determinación.

Las técnicas inmunológicas se basan en la reacción antígeno-anticuerpo y comprenden el

mismo conjunto de técnicas empleadas en química clínica, especialmente los

enzimoinmunoensayos competitivos. Muchos psicofármacos pueden realizarse por

polarización de fluorescencia (FPIA) y multiplicación enzimática (EMIT) y existen

“casettes” con anticuerpos para los grupos de drogas usualmente encontrados en comas

o accidentes (benzodiazepinas, antidepresivos tricíclicos, opiodes, cannabinoides,

cocaína...) y si su rapidez y especificidad los hacen idóneos para situaciones de urgencia

su costo prohíbe emplearlos para determinaciones de rutina, convirtiéndose además su

especificidad en un inconveniente ya que es imposible incluir anticuerpos para todos los

compuestos que definimos como psicofármacos. Las técnicas cromatográficas, por otra

parte, se basan en la distinta solubilidad de los componentes de una muestra frente a

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm Sertox © Copyright 2004

 Pág/8

una fase móvil y permiten la separación de todos esos componentes para su posterior

identificación. Contrariamente a las técnicas anteriores el primer paso es una preparación

o “clean up” de la muestra, que tiene por objeto a la vez concentrar las sustancias

buscadas y eliminar las interferencias producidas por otros componentes de la orina. Este

procedimiento, a su vez, puede realizar por dos métodos clásicos: extracción líquido /

líquido solventes o extracción en columnas de fase sólida (SPE, por sus iniciales en

inglés). En el primero una alícuota de la muestra es extraída en ampolla mediante una

combinación de solventes orgánicos y ácidos / bases, mientras que el segundo se basa

en la interacción de los componentes de la muestra con las moléculas adheridas a la

columna (fase estacionaria). El primer procedimiento es sencillo y económico, aunque

suele emplear volúmenes relativamente grandes de muestra y solventes comparado con

la SPE, que generalmente permite recuperaciones mejores. En cuanto a los sistemas de

cromatografía la variedad es enorme; las clasificaciones se basan en la naturaleza de las

fases móviles y estacionarias y si los tres sistemas más populares son la cromatografía

en capa delgada (TLC), líquida de alta performance (HPLC ) y la gaseosa (CG) existe un

enorme número de fases estacionarias, móviles y detectores (por ejemplo ultravioleta,

fluorescencia o electroquímica para HPLC, captura de electrones, ionización de llama y

nitrógeno-fósforo para GC...) y si bien la cromatografía permite separar e identificar más

compuestos que otro método también es imposible detectar todas las sustancias con una

extracción o sistema cromatográfico.

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm Sertox © Copyright 2004

 Pág/9

Bibliografía

1. Aspectos analíticos de la determinación de drogas en fluidos biológicos. Sánchez

Bruzon, J. Técnicas básicas. Especialmente cromatográficas. The Journal of Analytical

Toxicology. Publicación donde se recogen los más importantes trabajos en toxicología

analítica en el ámbito mundial.

2. Clarke's isolation and identification of drugs in pharmaceuticals, body fluids, and post-

mortem material. Second edition. The pharmaceutical press - 1986. Compendio de

propiedades físicas y químicas de drogas y medicamentos

3. Recommended methods for the detection and assay of (…) in biological specimens.

Naciones Unidas, NY. Análisis de drogas de abuso.

4. Bedside Toxicology. Kaye, S. Pediatric Clinics of North America - Vol. 17, No. 3,

August, 1970. Técnicas colorimétricas de aplicación en toxicología de urgencia.

5. Química Clínica. Kaplan, L, Pesce, A. Ed Panamericana. Introducción a las diversas

metodologías inmunológicas y cromatográficas

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm Sertox © Copyright 2004