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Fundamento Teórico

Separación de
Cromatografía de
Mezclas de
Gases (GC)
compuestos
CROMATOGRAFIA DE GASES
CON DETECTOR DE GC-MS
Separación e
ESPECTROMETRIA DE MASAS Identificación

Deteccion e
Espectrometría Identificacion
Ing. Christian Lopez de Masas (MS) de
Reactivos Para Analisis S.A.C. Compuestos

1 3

Análisis Tridimensional

GC-MS nos brinda una análisis en tres dimensiones:

Primera dimensión: Tiempo de retención
Segunda dimensión: Intensidad de Pico Cromatografico
Tercera dimensión: Espectro de Masa del Pico Cromatografico

Fundamento Teorico

2 4

1
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GC-MS: Analisis Tridimensional Proceso en un GC-MS

• Analitos desde la columna GC son alimentadas a la fuente de iones

del MS donde las moléculas son ionizadas. (SEPARACION)
TIC
• Los iones molecular se rompen o “fragmenta”. (IONIZACION)

• Estos fragmentos son separados de acuerdo a su razón masa – carga

(m/z) y su intensidad (corriente de iones) de cada tipo de ion
registrado. (FILTRO DE MASAS: CUADRUPOLO)

• Se grafica la corriente de iones versus m/z – obteniéndose espectro

de masa. (IDENTIFICACION)

5 7

5 7

Procesos en Espectrometría de Masas ¿Qué materiales se pueden medir en GC-MS?

• Muchos compuestos se pueden medir, pero es

• Procesos involucrados son: más fácil mencionar que NO se puede medir en el
GC-MS:
• Separación de Moléculas de los Compuestos * Metales inorgánicos
• Conversión de las moléculas a iones moleculares *Compuestos térmicamente inestables y
(usualmente iones positivos) compuestos no volátiles (algo de ellos
• Separación de iones por la razón masa – carga (m/z)
pueden medirse usando la
• Medición de corriente de iones por el detector
derivatización).
*Compuestos con peso molecular
mayores a 1090.

6 8

6 8

2
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¿Qué obtenemos del MS? Bandeja de Analizador

• La moléculas de la muestra • El analizador de masas esta

separada en GC son ionizadas montado sobre una
por una fuente de iones (EI,CI). bandeja, deslizable desde
• Son alineadas por un sistema la parte frontal para
mantenimiento simplicado
de lentes, y la separación del
(solo hecho en casos muy
número de masas es hecho por raros)
el cuadropolo.
• Los iones son detectados por el
detector.
• La data obtenida se llama
Espectro de Masa.

9 11

9 11

GC Trace Ultra + Detector MS ISQ Óptica Ionica en GC-MS

La clave para ganar sensibilidad es generar el mayor número de iones
Posibles y transferirlos eficientemente al cuadrupolo.
Modos de Ionización :EI,CI,NCI (Energía 10 a 200 eV)

Bandeja de la Optica Ionica del iSQ Cartucho de

Fuente de Iones

10 12

10 12

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Optica de Iones dentro del iSQ Cartucho de Fuente de Iones ExtractaBrightTM

RF Lens/Lens 3

Lens 1

Repeller

Repeller Nut
Ion Cartridge Sleeve

Locking Ring
Lens 2

Ion Volume/ Ion Volume

Repeller Insulator
Repeller Spring

13 15

13 15

Cartucho de Fuentes de Iones ExtractaBrightTM Linea de Transferencia

14 16

14 16

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Conexion de Linea de Transferencia a la Fuente de

Guia de Iones
Iones

Linea de
Gas
Calibracion

Columna

CI Gas

17 19

17 19

Filamento Dual Filtro de Masas = Cuadrupolo

* 04 barras dispuestas simétricamente.

* Campos electromagnéticos que producen un camino estable para
una relación seleccionada de carga-masa

18 20

18 20

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Sistema de Vacio - Factor importante- Sistema de Inyección a un GCMS (cont.)

Solo en alto vacio, los iones pueden moverse desde • ¿Y los sólidos?
la fuente de iones hacia el detector. • Si el sólido orgánico tiene una alta presión de vapor entre
100 y 150 ºC, se puede pensar en puerto de inyección
calentado.
• Puede ocurrir problemas de condensación cuando ingresa
Alto vacio ( baja presión) al GCMS.
+
• Por lo tanto se inyecta sólidos directamente a la fuente de
ion air, water etc. iones llamado Sonda de Inyección Directa.
• Esta consiste de una barra metálica de corta distancia a la
fuente de iones, en el cual la punta tiene un agujero donde
+ Bajo Vacio (alto presión) la muestra sera calentada entre 50 y 200 ºC.

21 23

21 23

Sistema de Inyección a un GCMS Sistema de Inyección Directa

• En principio es el mismo que el de un sistema de

GC (Split, Splitless,etc.).
• Hay tres requisitos que debe de ser pensados antes • Para análisis de muestras refractarias e inestables térmicamente
de seleccionar el sistema de entrada al GCMS:
1. La muestra debe estar en fase vapor previa a la %

ionización. 100.0 608

2. La muestra no debe sufrir descomposición térmica 75.0

en la vaporización. 50.0 395

195
3. Cuando la muestra ingrese al espectrómetro de 25.0 251
381

593
masas la presión (10-5 mTorr) debe ser la menor
199 214 365
265 394 413 448 577 606
81 97109 137 152 227 297 321 337 369383
0.0 434 463 491 517 549 579

posible.
100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600

Análisis de Reserpino por Sistema de Inyección Directa

22 24

22 24

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Creacion del Ion Molecular - Impacto Electronico

 Transferencia de energia a una molecula neutra (en estado gaseoso) para

expulsar uno de sus electrones y producir un ion molecular (molecula cargada),
con una masa m y una carga z.

MODO DE
The world leader in serving science IONIZACION EN MS

25 27

Ionizacion de Impacto Electronico EI Reactions (Ions Created)

 El metodo mas comun de ionizacion para GC-MS  ABC + e- ABC+ + 2e- (Molecular ion formation)
 Usado para analisis cualitativo y cuantitativo  ABC + e- A+ + BC + 2e- (Fragmentation)
 Produce el espectro de masas de las moleculas  ABC + e- AB+ + C + 2e-
• Huella digital de Fragmentacion  ABC + e- ABC++ + 3e-
• Combinado con el tiempo de retencion para identificar
 ABC + e- A+ + BC- + e-
 Usa un ion para cuantificacion con uno o mas iones de
 ABC + e- AB+ + C- + e-
verificacion
 ABC + e- AC+ + B + 2e-
 ABC + e- B+ + AC + 2e- (Rearrangement)
 ABC + e- ABC-
 ABC + e- AB- + C

26 28

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Ionización de Impacto de Electrones (EI) Total Ion Chromatogram (TIC), Extracted Ion Chromatogram (EIC), and Mass Spectrum

Impacto de electrones excitados (70 eV),

proveniendo del filamento de la fuente son los
que impacta en las moléculas gaseosas de la
muestra formando el ion molecular.
En este método los iones se fragmentan a iones
moléculas más pequeños.
Cada compuesto tiene su singular manera de
fragmentar sus iones moleculares, este el
principio por el cual se usa la Librería.

29 31

Energia de Electrones Ionización de Impacto de Electrones (EI)

70eV
Yield (%)

50 100 150 200 250

Electron Energy
10
ABC = M M+ 20eV
70ev
A+
Abundance

100

A+ M+ 30ev 40eV
B+ Espectro de masas EI de Reserpino
1000
C+ B+ M+ 20ev 70eV
A+
(Compound Dependent)

32

30 32

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Fragmentación de las Moléculas Ionización Química (CI)

• Este método requiere el uso de un gas (metano,

isobutano o amoniaco).
• Este método involucra dos pasos:
1. El gas de reacción es ionizado por electrones excitados,
se forman los iones secundarios.
2. Los iones secundarios y las moléculas de muestra
reaccionan para formar el ion molecular. Esta reacción
genera solo el iones moleculares (no se fragmentan
como EI).
• Estos son los llamados iones seudo-molecular.

33 35

33 35

Fragmentación de las Moléculas Método de IonizaciónQuímica (CI)

Espectro de masas CI de Reserpino

34 36

34 36

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Diferencias entre EI y CI Dos Formas de Trabajar en MS

EI
La fuente de iones esta
abierta.
Se fragmentan a iones más
pequeños además del ion
molecular
Método más común de
ionización, porque los
espectros de masas obtenidos
se pueden comparar por
libreria
SIM:
CI
• Solo unos pocos iones moleculares son monitoreados.
La fuente de iones esta casi • Este modo tiene mejor sensibilidad y es el adecuado para
análisis cuantitativo.
cerrada.
Solo los iones seudo-
moleculares son formados
Método más útil para obtener
información sobre el peso
molecular

37 39

37 39

Dos Formas de Trabajar en MS SIM

• Existe dos modos SCAN y SIM
SCAN:
• iones moleculares con un rango de masas son monitoreados secuencialmente.
• Este modo nos da el espectro de masas, lo cual es importante para identificación. • Los compuestos son identificados basados en
• De sensibilidad moderada.
3 factores:
1. Tiempo de retención.
2. Número de masa.
3. Relación de intensidad relativa.
• Los iones a seleccionar en la cuantificación
debe tener las siguientes características:
1. El número de masa el más grande posible.
2. Intensidad de ion lo más grande posible.

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38 40

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Configurando ISQ

iSQ en Software Xcalibur

43

41 43

Instrument Configuration Verificando la Direccion de Red en la PC

1
2 3

42 44

42 44

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Alarma de Mantenimiento Automatizado Instrument Control

Seleccione los Items a
monitorear en Configuracion
Xcalibur le permite al
operador to monitorear los
Dias en Uso de los Items
seleccionados en ISQ
Configuration

45 47

45 47

Xcalibur Roadmap Pestaña Analyzer

Visualiza diferentes
parametros en tiempo
real

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46 48

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Pestaña Power Programando el Metodo del ISQ

• Usuario puede ver los

voltajes en tiempo real

2 3
49 51

49 51

Pestaña Maintenance Barrido en Tiempo Real

• Usuario puede ver el tiempo de

uso de los diferentes
componentes
• La barra de Progreso pasara de
verde a amarillo y de amarillo a
rojo cuando este al limite de los
dias de uso.

1. Verifique que el vacio este debajo de 60 mTorr en

Xcalibur Roadmap en ISQ status.
2. Ingrese los parametros en la segunda linea para
barrer desde 10 -100 u
3. Clic derecho en la ventana para iniciar el barrido

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50 52

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Barrido Tipico Aire/Agua

Centroid mode

Proceso de Autotune

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53 55

Espectro Full scan del Gas de Calibracion ¿Qué es el Tune?

1. Cambiar rango de • Tune:

barrido desde 50-550
Es el proceso de calibración y optimización de un espectrómetro de
masas.
Para este propósito se utiliza el Gas de Calibración (PFTBA).
2. Clic derecho en la
barra ploma para abrir
el tipo de datos. Cambia
entre Centroid y Profile

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54 56

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Items que se calibran con el Tune Gas de Calibracion (PFTBA = FC 43)

Quad Entrance Lens

Ion Guide - DC
- RF
- DC Offset

Quadrupole
- Mass assignment
- Resolution
- DC Offset
Source
- Repeller
- Lens 1, 2, 3

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57 59

Orden de los Procesos en Tuning ¿Donde encuentro el icono Tuning?

• Verifica los valores de RF y los recalibra si es necesario

• El sistema realiza un diagnostico
• Sintoniza la Ganancia del Detector
• Realiza la Resolucion de Masas
• Realiza la Calibracion de Masas
• Sintoniza los Lentes O
• Realiza la verificacion de fuga

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58 60

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Tipo de Reporte Tipico de Tune

Items de interes
•Frecuencia de la Guia
de Iones
•Frecuencia Q1 Mantenimiento de Fuente de Iones
•Ganancia de
Multiplicador
Tipicamente >1100 V a
3e5

61

61 63

Typical Qual Browser Results of 1 pg OFN ExtractaBrightTM Ion Source Cartridge

No esta en paso de muestra.

No requiere limpieza frecuente.
En el paso de muestra.
Sobar con oxido de aluminio,
enjuagar y sonicar
No en el paso de muestra.
Reemplazar si esta contaminado.

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62 64

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Parametros comunes en todos los barridos en el

metodo

Programando el MS
• Temperatura de Linea de Transferencia y Fuente de Iones
• Umbral de Adquisicion
• Modo Ionizacion
• Tipo de gas CI y flujo
• Tiempo de corrida en MS

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65 67

Programacion de Metodo Parametros de Barrido

1
• Rango del Tiempo
• Nombre de Barrido

2 3 • Rango de Masa
• Dwell
• Ancho de SIM
• Archivo Tune
• Polaridad de Iones
• Tipos de Datos
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66 68

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Parametros de Grupo Seleccionando el Archivo de Tune Apropriado

• Tiempo Total de Barrido Calculado en segundos

• Filtro Cromatografico
• Estado del Filamento
• Corriente de Emision
• Ganancia del Detector
• Flujo de gas CI
• Gas de Calibracion

69 71

69 71

Metodo Basico Dos Formas de Programar un Metodo SIM

70 72

70 72

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