DESTINOS METABÓLICOS DEL PIRUVATO

Phosphoenolpyruvate
Pyruvate Kinase
Lactate Dehydrogenase

Pyruvate
Carboxylase Alanine Aminotransferase

Pyruvate
Dehydrogenase

•  El piruvato es una molécula encrucijada importantísima que

liga el metabolismo de carbohidratos con el de los lípidos y
aminoácidos.
Rosario A. Muñoz Clares
FORMACIÓN DE ACETIL CoA A PARTIR DE
PIRUVATO

•  El piruvato formado en la glucolisis

es convertido a acetil CoA por el
complejo multienzimático de la
piruvato deshidrogenasa.

Rosario A. Muñoz Clares

 COMPLEJOS MULTIENZIMÁTICOS
•  Un complejo multienzimático es un grupo de enzimas asociadas
no covalentemente que catalizan dos o más pasos secuenciales
en una ruta metabólica.
•  Constituyen un avance en la evolución de la eficiencia catalítica
de las enzimas.
•  Poseen las siguientes ventajas mecanísticas sobre las enzimas
individuales:
–  La distancia entre los sitios activos a través de la cual los sustratos
deben difundir se hace mínima, lo que lleva a un incremento de
velocidad de las reacciones. Incluso en ocasiones los productos de
una reacción son sustratos de la siguiente sin necesidad de que
salgan al medio.
–  Los intermediarios metabólicos se canalizan entre los sitios activos
de enzimas sucesivas, lo que lleva a una minimización de
competencia con otras reacciones por estos intermediarios.
–  Todas las reacciones catalizadas por estos complejos pueden ser
reguladas en forma coordinada. Rosario A. Muñoz Clares
REACCIÓN DE LA PIRUVATO DESHIDROGENASA
•  La formación de acetil CoA a
partir de piruvato ocurre en tres
etapas: descarboxilación,
oxidación y transferencia del
acetilo a la CoA.

•  El grupo carboxilo del piruvato

TPP se pierde, su grupo ceto se oxida
Lipoamida a carboxilo, la energía de esta
oxidación queda atrapada en un
FAD
enlace tioéster con la CoA y los
electrones pasan al NAD+
formando NADH.

•  La descarboxilación de un α-
cetoácido requiere al TPP. Se
requieren además otras
coenzimas de oxidoreducción
(lipoamida y FAD).
Rosario A. Muñoz Clares
REACCIÓN DE LA PIRUVATO DESHIDROGENASA

•  La reacción se lleva a cabo

por un complejo
multienzimático formado por
tres diferentes enzimas que
usan cinco cofactores.

TPP •  Este complejo está

Lipoamida localizado en la matriz
FAD mitocondrial de los
organismos eucariontes.

•  Por ello el piruvato debe

entrar a la mitocondria
mediante un transportador
específico de la membrana
interna mitocondrial.
Rosario A. Muñoz Clares
COMPLEJO MULTIENZIMÁTICO DE LA PIRUVATO
DESHIDROGENASA

Rosario A. Muñoz Clares

 COMPLEJO MULTIENZIMÁTICO DE LA
PIRUVATO DESHIDROGENASA de E. coli

Rosario A. Muñoz Clares

 COMPLEJO MULTIENZIMÁTICO DE LA
PIRUVATO DESHIDROGENASA DE E. coli

•  E2 forma el núcleo del

complejo multienzimático.

•  El complejo de mamíferos
es mucho mayor que el de
E. coli.

Rosario A. Muñoz Clares

REACCIÓN DE LA PIRUVATO DESHIDROGENASA
•  La reacción global de la piruvato deshidrogenasa se
divide en cinco reacciones parciales:
–  I. Descarboxilación del piruvato por la E1, que tiene como grupo
prostético al TPP. Esta reacción forma un intermediario
hidroxietil-TPP.
–  II. Oxidación del intermediario hidroxietil-TPP mediante su
transferencia a la E2, que tiene como grupo prostético a la
lipoamida. El hidroxietilo es oxidado a acetilo con la
concomitante reducción de la lipoamida. Se forma acetil-
lipoamida y se regenera la E1 activa.
–  III. Transacilación, es decir, transferencia del grupo acetilo al
CoA, catalizada por E2. Se forma acetil CoA y E2-dihidrolipoamida
–  IV. Oxidación de la dihidrolipoamida por el FAD unido a la E3. Se
forma FADH2.
–  V. Oxidación de la E3 reducida por NAD+. Se forma NADH y se
regenera la E3 activa.
IV y V son para regenerar la forma oxidada de los grupos
prostéticos
Rosario A. Muñoz Clares
 DESCARBOXILACIÓN DEL PIRUVATO

•  Esta reacción es catalizada por la E1 y requiere TPP como

cofactor, porque involucra la ruptura de un enlace α al carbonilo.

•  Para que esto ocurra se le adiciona la coenzima TPP al carbonilo

del piruvato, de manera que se genera un “pseudocarbonilo” (el N+
del anillo que es un atractor de electrones) y el enlace a romper
queda ahora en posición β respecto a este “pseudocarbonilo”.

Rosario A. Muñoz-Clares
 ÁCIDO LIPOICO

•  La lipoamida es un derivado del ácido lipoico.

•  El ácido lipoico posee un disulfuro cíclico que puede participar en
reacciones de óxido-reducción, y un grupo carboxilo que puede
formar un enlace amida con un grupo amino de la proteína (formando
la lipoamida que es un grupo prostético).

Grupos
reactivos

Ácido lipoico Rosario A. Muñoz Clares

LIPOAMIDA
•  La lipoamida consiste en ácido lipoico
unido por un enlace amida al grupo amino
de la cadena lateral de un residuo de lisina
de la E2.

•  El disulfuro cíclico de la lipoamida se

reduce a un ditiol al tiempo que el sustrato
se oxida.

•  El largo brazo de la lipoamida le permite

moverse entre los sitios activos de E1 y
E2, y entre los sitios activos de E2 y E3.

•  Esto permite que una E1 pueda

acetilar numerosas lipoamidas de las
enzimas E2, y que una E3 pueda oxidar
numerosos grupos
dihidrolipoamida de las enzimas E2.

Rosario A. Muñoz Clares

 COENZIMA A (CoA o CoA-SH)

•  La coenzima A (CoA o CoA-SH) es la molécula acarreadora de grupos

acilo (la letra A indica acilación).
•  El grupo acilo se une al CoA mediante un enlace tioéster. Se convierte
entonces en un grupo acilo activado.

Rosario A. Muñoz Clares

FLAVÍN ADENÍN DINUCLEÓTIDO
(FAD)

•  En la reacción de la piruvato
deshidrogenasa el FAD oxida a
dos tioles formando un disulfuro
y convirtiéndose en FADH2

Rosario A. Muñoz Clares

FLAVÍN ADENÍN DINUCLEÓTIDO (FAD y
FADH2)

FAD FADH2

Rosario A. Muñoz Clares

 NICOTÍN ADENÍN DINUCLEÓTIDO
(NAD+)

•  El NAD+ es el aceptor final

de los electrones de la
reacción de oxidación de la
piruvato deshidrogenasa.

•  El NAD+ oxida al FADH2

formándose NADH + H+.

•  El NADH se oxidará
después cediendo sus
electrones al O2 mediante la
cadena de transporte de
electrones mitocondrial.
H
R = H en NAD+
R = PO32- en NADP+ Rosario A. Muñoz Clares
ESQUEMA DE LA REACCIÓN DE LA
PIRUVATO DEHIDROGENASA

Rosario A. Muñoz Clares

ESQUEMA DE LA REACCIÓN DE LA
PIRUVATO DEHIDROGENASA

α β

Rosario A. Muñoz Clares

 PAPEL FISIOLÓGICO DE LA
PIRUVATO DESHIDROGENASA
•  La piruvato deshidrogenasa cataliza un
paso clave irreversible que conecta la
glucólisis con el ciclo del ácido cítrico y
permite así la oxidación total de la glucosa
hasta CO2.

•  Además, esta reacción permite obtener

triglicéridos y otros lípidos a partir de
glucosa, ya que el acetil CoA es la molécula
precursora de los ácidos grasos y de otros
lípidos.

•  La reacción de la piruvato deshidrogenasa

por tanto puede jugar un papel catabólico o
anabólico. Se dice que posee un papel
anfibólico.
Rosario A. Muñoz Clares
 REGULACIÓN DE LA PIRUVATO DESHIDROGENASA

•  La formación de acetil CoA a partir de piruvato es un paso

irreversible clave para animales, porque no pueden convertir
de regreso el acetil CoA en glucosa.

•  La actividad de este complejo multienzimático está por ello

muy regulada.

•  Su regulación se lleva a cabo por:

–  inhibición por producto (por NADH y acetil CoA).
–  modificación covalente (fosforilación/desfosforilación) de
las moléculas E1. Esta modificación ocurre sólo en células
eucarióticas y las enzimas involucradas están sujetas
también a regulación.

Rosario A. Muñoz Clares

 REGULACIÓN POR PRODUCTO DE LA PIRUVATO
DESHIDROGENASA
•  El acetil CoA y el NADH son productos de la oxidación
de ácidos grasos, de manera que la inhibición de la
piruvato deshidrogenasa por estos compuestos evita la
oxidación de glucosa cuando se dispone de
combustibles lipídicos.
Insulina
•  La degradación activa de ácidos grasos ocurre o porque
+
en la dieta se ingieren grasas o porque se utilizan las
reservas de triglicéridos del tejido adiposo cuando el
organismo necesita energía, lo que usualmente se
relaciona con niveles bajos de glucosa en sangre.

+
•  Recordar que el acetil CoA es un activador de la
piruvato carboxilasa, por tanto los niveles de acetil CoA
mitocondriales deciden el destino del piruvato en el
hígado, si son bajos se produce acetil CoA, si son altos
se produce OAA.

•  En hígado, si hay mucho acetil CoA el piruvato (que

bajo estas condiciones no proviene de glucosa sino de
lactato o alanina) forma OAA y entra a gluconeogénesis.
Rosario A. Muñoz Clares
 REGULACIÓN POR FOSFORILACIÓN DE LA PIRUVATO
DESHIDROGENASA
•  La E1 fosforilada en un residuo de serina es la forma inactiva.
•  La piruvato deshidrogenasa cinasa y la piruvato deshidrogenasa
fosfatasa también forman parte del complejo multienzimático en animales.

Insulina

Rosario A. Muñoz Clares

 REGULACIÓN POR FOSFORILACIÓN DE LA PIRUVATO
DESHIDROGENASA
•  La E1 fosforilada en un residuo de serina es la forma inactiva.
•  La piruvato deshidrogenasa cinasa y la piruvato deshidrogenasa
fosfatasa también forman parte del complejo multienzimático en animales.

Insulina

Rosario A. Muñoz Clares

 REGULACIÓN POR FOSFORILACIÓN DE LA PIRUVATO
DESHIDROGENASA
•  La E1 fosforilada en un residuo de serina es la forma inactiva.
•  La piruvato deshidrogenasa cinasa y la piruvato deshidrogenasa
fosfatasa también forman parte del complejo multienzimático en animales.

Insulina

Rosario A. Muñoz Clares

 REGULACIÓN POR FOSFORILACIÓN DE LA PIRUVATO
DESHIDROGENASA
•  La E1 fosforilada en un residuo de serina es la forma inactiva.
•  La piruvato deshidrogenasa cinasa y la piruvato deshidrogenasa
fosfatasa también forman parte del complejo multienzimático en animales.

Insulina

Rosario A. Muñoz Clares

 REGULACIÓN POR FOSFORILACIÓN DE LA PIRUVATO
DESHIDROGENASA
•  La E1 fosforilada en un residuo de serina es la forma inactiva.
•  La piruvato deshidrogenasa cinasa y la piruvato deshidrogenasa
fosfatasa también forman parte del complejo multienzimático en animales.

Insulina

Rosario A. Muñoz Clares

 REGULACIÓN POR FOSFORILACIÓN DE LA PIRUVATO
DESHIDROGENASA
•  La E1 fosforilada en un residuo de serina es la forma inactiva.
•  La piruvato deshidrogenasa cinasa y la piruvato deshidrogenasa
fosfatasa también forman parte del complejo multienzimático en animales.

Insulina

Rosario A. Muñoz Clares

SIGNIFICADO FISIOLÓGICO DE LA ACTIVACIÓN DE LA
PIRUVATO DESHIDROGENASA
•  Mucho ADP o NAD+ significa una carga energética baja y por tanto
la necesidad de oxidar totalmente el piruvato.

•  Niveles altos de CoA indican que existe poco acetil-CoA y debe

producirse más.

•  El Ca2+ es un segundo mensajero que señala la necesidad de

energía (por ejemplo, para la contracción muscular). Por ello
promueve la forma activa de la enzima.

•  La insulina activa indirectamente a la piruvato deshidrogenasa

fosfatasa. De esta forma promueve la forma desfosforilada activa
de la enzima y, por consiguiente, la síntesis de acetil CoA, que es el
precursor de los ácidos grasos.

La insulina en hígado y tejido adiposo por tanto favorece la síntesis

de triglicéridos a partir de glucosa via glucolisis.
Rosario A. Muñoz Clares