Colorantes y tintes vegetales,

métodos de extracción,
caracterización y cuantificación

*
Las plantas utilizadas como colorantes se dividen en varios
grupos:

* Colorantes naturales: Se adicionan a los alimentos

* Tintes naturales: Se usan para teñir telas, madera y cuero
* Pigmentos naturales: Responsables del color visible de una planta

*
Es aquel que se sintetiza y acumula en las células de plantas.
De acuerdo con sus afinidades estructurales se han clasificado los colorantes
orgánicos en los siguientes grupos:

* Carotenoides: Colorantes amarillos y anaranjados

* Flavonoides: Colorantes amarillos y anaranjados
* Antocianos: (Subgrupo de los flavonoides) Colorantes azules y rojos.
* Quinonas: Colorantes púrpura, escarlata, anaranjado y rojo siena.
* Indigoides: Colorantes azul y púrpura (Sing, 1997).
*
* Maceración
El material vegetal entra en contacto con el solvente y reposa por tres o
más días con agitación frecuente a temperatura ambiente, se clarifica
por decantación o filtración.

* Infusión
Solución diluida de constituyentes fácilmente solubles de la droga cruda,
adecuada para las drogas aromáticas, se realiza sumergiendo las partes
a utilizar de la planta en agua hirviendo, reposar por 15 minutos y filtrar
mediante un tamiz o papel de filtro.

*
* Decocción : Hervir la droga en agua por 15 a 60 minutos (según
el p.a. a extraer) enfriar, filtrar y añadir suficiente agua fría
hasta obtener el volumen deseado. Útil para principios activos
que no sufran alteraciones con la temperatura.

* Digestión : Forma de maceración con ligero calentamiento

durante el proceso de extracción, y así lograr una mayor
eficiencia en la utilización del menstruo. La temperatura entre
35º y 40º C, no elevarse más de 50º C y usar en p.a. no
termolábiles.
Identificación y caracterización de la materia vegetal
* Características organolépticas
* Análisis fitoquímico para autenticar la identidad
* Identificación química utilizada en procedimientos cromatográficos
para detectar la presencia de metabolitos
* Métodos espectroscópicos: ultravioleta-visible (UV-Vis), el infrarrojo
(IR), masas (MS) y la resonancia magnética nuclear (RMN).
* Los métodos más utilizados son las pruebas colorimétricas,
cromatografía en capa fina o columna y espectro de absorción por UV.

*
* Densidad: Picnómetro de 10 mL a temperatura de 20°C,
relación g/mL.
* Índice de refracción: Refractómetro Abbe, limpiar con Xilol y se
vertir una gota del extracto tintóreo en el prisma, tomando
nota de la lectura del aparato (Calderón, 2007).
* Espectrofotométricamente: Absorción UV-Vis, longitud de onda
* Porcentaje de Rendimiento: Peso Inicial –peso final/peso inicial
*100

*
 Bixa orellana
Nombre común : Achiote
Pequeño arbusto indígena de la zona
subtropical andina y de Latinoamérica;
su fruto es una cápsula cuya semilla
contiene un colorante rojizo, en
concentraciones de alrededor de 3 %
en semillas de mejor calidad.

Bixia (carotenoide)
AGENTE
ACTIVO
Extracción del colorante natural
del arilo de la semilla de achiote
(Bixa orellana L.), utilizando la
técnica lixiviación con álcali
acuoso a escala laboratorio

Observaciones

El método de extracción por

lixiviación por medio de maceración
dinámica con álcali acuoso
proporciona los mayores
rendimientos.
 Procesar semillas de achiote lo
más frescas posibles postcosecha,
con humedad menor al 10 %.
 Secado : trabajar por debajo de
los 70 °C
 Caracterización del colorante de
Achiote por espectroscopia infrarroja

En Espectrofotómetro FT-IR Perkin Elmer® Spectrum BX con ATR

Miracle Pike; se colocó una pequeña cantidad de pigmento y se
realizaron 10 barridos bajo las siguientes condiciones:

Resolución : 4 cm-1

Rango : 4400 a 520 cm-1

Intervalo : 2 cm-1

Una vez obtenido el respectivo espectro y con ayuda del software

Spectrum se realizó la corrección de la línea base, normalización,
corrección de la reflectancia total atenuada (ATR, por sus siglas en
inglés) y suavizado automático.
Espectro infrarrojo del colorante del achiote
extraído con KOH acuoso al 2 %
 Determinación de los componentes activos del
extracto colorante seco de la semilla de achiote
(Bixa orellana L.) por medio de cromatografía líquida
de alta eficiencia
 Apertura de los manómetros de presión.
 Estabilizar por un tiempo de 20 minutos a 30 minutos.
 Conectar o comprobar los detectores.
 Colocar la columna adecuada para el ensayo C-18, si es que esta no
estaba ya colocada. Seleccionar la temperatura de columna.
 Comprobar el funcionamiento del circuito neumático.
 Estabilizar el sistema durante 15 min.
 Bombear 200 ml de agua de calidad de HPLC con caudal de 5
ml/min.
 Hacer pasar de 30 a 50 ml de acetonitrilo o disolvente apropiado.
 Comprobar la presión en la columna.
 Inyectar un patrón de calibración
 calcular el área y altura de pico y compararlo con los obtenidos en
curva de calibración.
 *Dactylopius
coccus
* Nombre común: Cochinilla
* Es un insecto hemíptero
parásito
de plantas perteneciente a la
familia Dactylopidae.
* Sereproduce en nopales o tunas y
de él se obtiene un extracto de
color rojo natural o carmesí, que al
ser mezclados con ácidos da otros
tonos rojos, pero al combinarse
con bases da tonos morados.
En la cultura prehispánica, era
sumamente cotizada por los
pobladores y se utilizaba para
teñir objetos diversos:
alimentos, plumas, madera,
textiles, algodón, piedras,
trajes, viviendas y códices.

Sus aplicaciones son diversas, un

ejemplo es la industria de
alimentos: mermelada, yogur,
helados y bebidas; también
ofrece perspectivas de
aprovechamiento en la industria
cosmética, textil y
farmacéutica.
El ácido carmínico es un ácido orto-fenoxi-carboxílico de
carácter hidrofílico. Este presenta una coloración roja la
cual puede variar hasta púrpura cuando el pH aumenta.

El grupo carboxílico –COOH y los cuatro

grupos –OH fenólicos, de las posiciones C-
3, C-5, C-6 y C-8 desprotonables,
contribuyen a los cambios de color y pH
del ácido carmínico; anaranjado a pH =
3.0, rojo a pH = 5.5 y púrpura a pH = 7.0.
Los extractos de cochinilla son colorantes naturales de color rojo,
que contienen principalmente acido carmínico y se obtienen por
extracción con agua o alcohol. Estos extractos se utilizan para la
preparación de concentrados líquidos o en polvo.
Métodos para la obtención de extracto alcohólico:
I. Extracto colorante con carbonato de potasio y II. Extracto
colorante con carbonato de sodio.
La mejor metodología para extracción es la extracción de ácido
carmínico con carbonato de potasio.

15.62 mL de agua desmineralizada, 0.17 g de carbonato

de potasio, 3.12 g de cochinilla molida, 9.37 mL de
alcohol etílico y 13 31.25 g de Jarabe (14.37 g de azúcar
y 16.88 g de agua)

A 15.62 mL de agua se le añade el carbonato de

potasio, alcohol y cochinilla. Se calienta a ebullición
por 7 minutos, se deja reposar, se decanta el líquido
y se filtra. A este extracto se le agrega el jarabe y se
mezcla.
Métodos para la caracterización y cuantificación del extracto de
Cochinilla
Espectroscopia electrónica UV-VIS
Los espectros UV fueron registrados en un espectrómetro
Perkin-Elmer Lambda 11, en celdas de cuarzo de 10 mm de
paso óptico
Las mediciones se realizaron a 494 nm de longitud de onda

Se utilizó la curva de trabajo para determinar el porcentaje de ácido carmínico

en las muestras; este consiste en colocar una muestra patrón en el
espectrofotómetro a 494 nm en concentraciones distintas para poder conocer el
comportamiento de la muestra
Esto confirma que se puede utilizar la muestra patrón como referencia
para poder determinar la concentración de ácido carmínico en las
nuestras
 Indigofera sp
Nombre común : Jiquilete o Xiquilete
Es un arbusto de 1 a 2 m de altura. Puede ser
una planta anual, bienal, o perenne,
dependiendo del clima donde crezca. Tiene
hojas verde claras pinnadas; y flores con
manchas rosas o violetas. Leguminosa de
mucha importancia por su característica
tintórea de azul o azul negro.

Indigotina
AGENTE
ACTIVO

Extracción del colorante natural
de (Indigofera sp)
El indigo se encuentra en el cultivo
de Jiquilite en forma de indican
C14H1706N+2H2O. Es un glucósido que
por hidrólisis (por fermentación o
con ácidos) se descompone en
glucosa e indoxil. Este último se
oxida al aire inmediatamente y
queda transformado en indigotina.
Observaciones
Existe diferencia en el porcentaje de indigotina obtenido:
• Tipo de secado de hoja: El secado en estufa sin
circulación de aire produce el comportamiento más
estable en comparación al contenido de indigotina a
temperaturas de 38 y 45 °C con respecto al secado solar
y secado el artificial de bandejas.
• Especie de la planta: La Indigofera guatemalensis
produce mayor rendimiento y mejor estabilidad en
cuanto a ambas características que la especie Indigofera
suffruticosa.
• Para la etapa de oxigenación, la temperatura óptima a
utilizar es la temperatura ambiente.
Temperatura que maximiza la respuesta para la etapa de
maceración es de 69 °C. Se recomienda realizar un
enfriamiento posterior a la etapa de maceración hasta una
temperatura de 50 °C o menos.
Caracterización del colorante de indigotina por
cromatografía líquida de alto rendimiento
(HPLC)
Se utilizaron bombas Waters 600 equipadas con un
procesador de muestras automático y un detector de matriz
de fotodiodos Waters 966. El análisis de los datos se realizó
con el software Millenium 2.0 bajo las siguientes condiciones:
Columna : TSK-gel ODS-80Ts de 150 mm x 4,6 mm i.d.

Fase movil : metanol:agua (73:27)

Volumen de inyección y longitude de onda: de 5 µl y longitud de onda de

cuantificación se estableció en 290 nm
 Análisis HPLC de FIGURA 1. indigotina e indirubina en el
extracto cloroformico natural; (1) indirubina (TR = 6,1 min)
e (2) indigotina (TR = 9,0 min). Los cromatogramas se
registraron a 290 nm.