10 de agosto de 2018.

FECHA

Título de la Investigación:

Obtención de Capsaicina y oleorresinas del Capsicum chinense, ingrediente

principal de productos fitofarmacéuticos y alimenticios.

Investigador Principal:

Nombre: Eliazar Miranda, Emails: gta4ver03@hotmail.com

José Guerra totito1311guerra@gmail.com

Fechas:

Fecha de Presentación del Informe: 16/03/2018

Inicio del Proyecto 17/01/2018
Finalización del Proyecto Octubre
Inicio de la etapa 24 /05/2018
Finalización de la etapa: 06/08/2018

Informe de Avance No. 3

Objetivos Específicos de la Etapa

 Deshidratar las muestras de Ají Chombo

 Procesar las muestras en el molino
 Extraer la capsaicina a través de la prueba de extracción Soxhlet y extracción
directa, usando acetona y etanol.
 Comparar el porcentaje de rendimiento de ambos procesos de extracción.
 Cuantificar las muestras de capsaicina

1
Resumen de Avance y Resultados

En esta etapa se colocaron las muestras de Ají chombo en el horno, estas estuvieron
durante seis días en el horno, durante los dos primeros días a 40°C y los cuatros días
restantes 60°C, estas muestras pueden estar hasta un máximo de 65°C en el horno, se
mantiene a esta temperatura para que la perdida de agua sea efectiva y no se vea alterada
los capsanoides presentes. En el horno se colocaron dos kilos de la muestra, en recipientes
separados.

Después de secas las muestras se procesaron en el molino, de esto se obtuvo 170g de ají
chombo deshidratado.

Se colocaron 20g de la muestra seca en el cartucho de material poroso y a continuación

se introdujo en la cámara de extracción Soxhlet1. El solvente, etanol se colocó en el balón
de ebullición que estaba situado debajo de la cámara de extracción. Cuando se evaporó el
etanol, el vapor llegó al condensador y se condensó. El etanol líquido cayó sobre el cartucho
que contenía el ají en polvo y de esta manera se inició la extracción. Cada vez que la cámara
se encontraba llena con la mezcla de oleorresina y etanol, regresaba nuevamente al balón
a través del sifón lateral que se encuentra en la parte superior de la cámara. El proceso de
extracción, que demoró aproximadamente 6 horas durante varios ciclos, a una temperatura
aproximada de 70°C, ya que el etanol hierve a esta temperatura, lo que la concentración
de la oleorresina en el balón y la recirculación del solvente. Conforme avanzaba la
extracción de la oleorresina, se observaba un color rojizo en el solvente en la cámara de
extracción. La extracción finalizó cuando se notó solamente el etanol (incoloro) en la
cámara.

Para las muestras húmedas se utilizó el método de extracción directa y se utilizaron dos
solventes, acetona y etanol puro.
Se realizaron tres extracciones.
En la primera extracción se utilizó un kilo de ají chombo fresco en cada balón, con dos
diferentes solventes, acetona y etanol, durante una semana estuvieron en los solventes, en
maceración, este proceso es extenso, tuvo una duración de 7 días, luego fueron filtradas
y colocadas en el rota vapor, para evaporar los líquidos como el agua y los solventes, al
finalizar se obtiene un concentrado de oleorresina 2 , que contiene capsaicina y otros
compuestos.
La extracción con el equipo soxhlet, tiene un alto entendimiento en comparación con la
extracción directa3.
Durante esta etapa se realizó una segunda recolección de muestras de ají.

A continuación, se presentan los resultados obtenidos de los procesos de extracción tanto

directa como Soxhlet y los rendimientos de oleorresina obtenidos.

1
Chinn, M., Sharma-Shivappa, R., y Cotter, J. (2011)
2
Revista Lasallista, 2018/06/06 http://www.redalyc.org/pdf/695/69530208.pdf
3
Vásquez, F., Miranda, M., Monforte, M., Gutiérrez, G., Velásquez, C., y Nieto, Y. (2007). La biosíntesis de
capsaicinoides, el principio picante del chile. Revista Fitotecnia Mexicana, 30(4), 353-360.
2
 Obtención del Lavado del material Selección del material
material con agua

Colocar las muestras Abrir los ají a la mitad

Pesar la masa vegetal
en bandejas

Secado del material

Pesar la muestra
Molido del material
A una temperatura
20g
de 40° a 60° C

Colocar el Agregar el solvente Montar equipo

refrigerante agua Soxhlet
200 ml – 250ml

Inicio del proceso de

extracción de
oleorresina

Diagrama1. Procedimiento de la obtención de la oleorresina. Extracción

Soxhlet

3
 Obtención del material Lavado del material Selección del material
con agua

Colocar las muestras Abrir los ají a la mitad

Pesar la masa vegetal
en los solventes

Maceración Filtración Evaporación de

líquidos

Obtención de
oleorresina

Diagrama 2. Procedimiento de extracción de oleorresina. Extracción directa

4
Métodos de extracción Ventajas Desventajas
El solvente y la muestra Es un proceso lento, no
están en contacto íntimo se puede acelerar.
y repetido. Esto mejora la
extracción ya que
siempre se utiliza un
Extracción Soxhlet solvente limpio.
No se requiere de Se requiere gran cantidad
filtración posterior. de solvente.
Gran capacidad de Se requiere de una etapa
recuperación. final de evaporación.
Instrumento sencillo de
utilizar.
El proceso se realiza Requiere gran cantidad
temperatura ambiente de disolvente
No hay degradación de Necesidad de una etapa
Extracción Directa compuestos final de evaporación
Se logra extraer todas la
propiedades de la
muestra

Tabla 1. Ventajas y desventajas de los métodos de extracción (Soxhlet y

extracción directa)

5
 Extracción de oleorresina: muestra fresca

Para obtener el porcentaje de rendimiento de la muestra se aplicó la siguiente

fórmula:
𝑴𝒂𝒔𝒂 𝒅𝒆 𝒐𝒍𝒆𝒓𝒓𝒆𝒔𝒊𝒏𝒂 𝒐𝒃𝒕 (𝒈).
%𝒓𝒆𝒏𝒅 = 𝒙 𝟏𝟎𝟎
𝑴𝒂𝒔𝒂 𝒅𝒆 𝒂𝒋𝒊 𝒄𝒉𝒐𝒎𝒃𝒐 𝑰𝒏𝒊𝒄𝒊𝒂𝒍 (𝒈)

Las muestras vegetales se colocaron en los solventes en las siguientes

proporciones: Solvente Etanol de 200ml a 250ml y Acetona 150ml

Solvente etanol Solvente acetona

Muestra Masa del Balón Oleorresina %rend Masa del Balón Oleorresina %rend
fresca balón + vacío obtenida 1 balón + vacío obtenida
oleorresina oleorresina
1000g 312.57g 269.30g 43.1 g 4.31 318.26g 286.30g 32g 3.2
101.80 g 129.69 g 123.90 g 5.79g 5.68 N/R
102.4g 129.27 g 123.90 g 5.37g 5.24 N/R
101.80 121.69g 123.90 5.4g 5.3 N/R
Promedio 5.13
N/R: no realizado (Después de la primera extracción, se observó que la extracción en etanol era mejor, por lo que las 2
extracciones restantes se hicieron solo con ese solvente)
Tabla 2. Extracción de oleorresina: muestra fresca
Los balones con los residuales de oleorresina se pesaron para determinar los
porcentajes de extracto presente en las muestras. Inicialmente se planteó un
modelo experimental

Concentración de oleorresina* Variedad Solvente: Etanol y acetona. Los valores

están expresados en % de rendimiento de oleorresina. Para corroborar los efectos
del solvente sobre el porcentaje de oleorresina obtenido se aplicó la siguiente
𝑴𝒂𝒔𝒂 𝒅𝒆 𝒐𝒍𝒆𝒓𝒓𝒆𝒔𝒊𝒏𝒂 𝒐𝒃𝒕 (𝒈).
formula: 𝑴𝒂𝒔𝒂 𝒅𝒆 𝒂𝒋𝒊 𝒄𝒉𝒐𝒎𝒃𝒐 𝑰𝒏𝒊𝒄𝒊𝒂𝒍 (𝒈) 𝒙 𝟏𝟎𝟎. Con lo cual se obtuvo el promedio que se
observa en la tabla 2

6
Por cada gramo de muestra seca se agregó 20 ml de solvente

Peso del Peso del Peso de % de

Muestra de ají Balón+Oleorresina Balón oleorresina rendimiento
seco (Soxhlet) Vacío obtenida
20.04g 130.19 g 126.32 g 3.87 g 19.3%
20.00g 130.16 g 126.32 g 3,84 g 19.2%
20.00g 130.40g 126.32g 4.08g 20,4%
22.03 g 126.47g 121.90g 4.57g 20.7%
23.05g 126.47g 121.90g 4.48g 19.4%
23.07g 126.47g 121.90g 4.90g 21.2%
27.03g 132.76g 126.32g 6.43g 23.8%

Promedio 20.6%

Tabla 3. Extracción de oleorresina: muestra seca

Porcentaje de Rendimiento de las Muestras

25 23.8

21.2
20.4 20.7
19.3 19.2 19.4
20
Porcetanje de rendimiento

15

10

5.68 5.24 5.3

4.31
5

0
1000 g 101.8 g 102.4 g 101.8 g 20.04 g 20.00 g 20.00 g 22.03 g 23.05 g 23.07 g 27.03 g
% de Rend 4.31 5.68 5.24 5.3 19.3 19.2 20.4 20.7 19.4 21.2 23.8
Extracción Directa vs Extracción Soxhelt

Gráfico 1. Porcentaje de rendimiento según el método utilizado.

7
Los balones con los residuales de oleorresina se pesaron para determinar los
porcentajes de extracto presente en las muestras. Inicialmente se planteó un
modelo experimental con dos métodos de extracción: directa y Soxhlet, para este
se utilizó etanol como solvente. Por cada gramo de muestra se agregó 20 ml de
solvente

Los valores están expresados en % de rendimiento de oleorresina. Para corroborar

los efectos del solvente sobre el porcentaje de oleorresina obtenido se aplicó la
𝑀𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑜𝑙𝑒𝑟𝑟𝑒𝑠𝑖𝑛𝑎 𝑜𝑏𝑡 (𝑔).
siguiente formula: 𝑀𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑎𝑗𝑖 𝑐ℎ𝑜𝑚𝑏𝑜 𝐼𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 (𝑔) 𝑥 100. En la grafica 1 se muestra que
el método de mayor rendimiento en la extracción de oleorresinas es el método
soxhlet, con un promedio de extracción de 20.6%

Propiedades organolépticas

La oleorresina es un aceite que se obtiene por extracción con solventes orgánicos

polares (acetona y etanol), los cuales luego se evaporan para obtener un extracto
aceitoso concentrado. La oleorresina es de naturaleza oleosa, viscosa, de color rojo
intenso y con un aroma característico, según la procedencia del ají4.

Después de la extracción se obtuvieron dos muestras de oleorresinas con las

siguientes características:

Acetona Etanol

Color Rojo oscuro Naranja

Olor Dulzón A salsa de tomate

Textura Mas liquida Aceitosa

Tabla 4. Propiedades Organolépticas de las muestras

En las muestras secas molidas que se utilizaron para el soxhelt, estas presentan un
color café claro, además de que el olor a picante que se percibe a través del olfato.

4
(Salazar, 2016; Fernández-Trujillo, 2007).

8
Cuantificación de la muestra

Se realizaron determinaciones espectrofotométricas, utilizándose metanol para la

disolución del patrón de capsicina.5

Se pesaron los extractos obtenidos por ambos procesos de extracción. Para la cuantificación
de capsaicionoides expresados como capsaicina, se trabajó con una solución patrón de
capsaicina preparada de la siguiente forma:
- Se preparó una dilución del patrón de capsaicina, 10mg en 10 mL de metanol
- se prepararon diluciones de capsaicina a las siguientes concentraciones: 0.2 µ/mL,
0.4 µ/mL, 06 µ/mL, 08 µ/mL 1 mg/mL

Las cuales fueron leídas en el espectrofotómetro a la longitud de onda de máxima

absorbancia, con el fin de obtener una curva de calibración.
Se preparó una dilución de los dos extractos obtenidos (por Soxhlet y muestra fresca), 10mg
en 10 mL de metanol, se tomaron 1 mL de esta solución y se determinó su absorbancia en
el espectrofotómetro UV, a la longitud de onda determinada previamente, tomando como
blanco metanol.
De la muestra fresca se preparó una dilución de 0,6 mg/mL, igualmente de la muestra seca
Este valor de absorbancia obtenido se debe interpolar en la curva de calibración para
calcular la cantidad de capsaicinoides presentes en cada una de las oleorresinas obtenidas.

Resultados obtenidos
Solución patrón

Solución de Capsaicina [C] Absorbancia [A]

0,2 µg/mL -0,059
0,4 µg/mL -0,056
0,6 µg/mL -0,047
0,8 µg/mL -0,030
1 mg/mL 0,033
Para muestra fresca
0,6 µg/mL -0,046
Para muestra seca
0,6 µg/mL -0,063

5
UNIVERSIDAD JUÁREZ AUTÓNOMA DE TABASCO Memorias de la Semana de Divulgación y Video Científico
2011 69 Extracción y cuantificación espectrofotométrica de capsaicina a partir de chile habanero. 2018/08/09
http://www.archivos.ujat.mx/dip/divulgacion_videocientifico2011/dac-bas.pdf
9
 Sesiones Experimentales en el Laboratorio

Figura 1. Equipo Soxhlet utilizado para extracción de oleorresina.

Figura 2. Preparación del equipo Soxhlet por la Doctora Laura Patiño.

10
Figura 3. Muestra en el equipo Soxhlet

11
 Figura 4. Muestra deshidratada

Figura 5. Oleorresina obtenida por el método de Soxhlet

12
Extracción de la Oleorresina con el Método de Extracción directa

Figura 6. Filtrado de las muestras de extracción directa

13
Figura 7. Extractos obtenidos después de filtrar. A la izq. Muestra en etanol y a la
der. Muestra en acetona

.
Figura 8. Secado de la Muestra de Extracción Directa

Figura 9. Preparación de las muestras, para cuantificar

14
 Fig. 10 muestras de solución patrón y de las muestras obtenidas

ACTIVIDADES REALIZADAS DURANTE ESTA ETAPA

• Se prepararon las muestras secas

• Se utilizo el método de extracción directa para muestra fresca
• Se utilizo método Soxhlet para muestra seca.
• Se extrajo la oleorresina presente en el Ají Chombo con muestras
fresca y seca.
• Se verificaron los porcentajes de rendimiento de las muestras
• Cuantificación de la muestra

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CUADRO DE AVANCE DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS

ESTADO DE
AVANCE
OBJETIVO PROPUESTO BAJO INDICADOR VERIFICABLE
MEDIO
ALTO
Obtención de oleorresinas Alto Se realizó la extracción en los
laboratorios de la UNACHI
Verificación de los Ato Se realizaron los cálculos
porcentajes de rendimiento pertinentes
Cuantificación de las Medio Se realizaron los cálculos, debe
muestras realizarse el procedimiento
nuevamente

En la ejecución del proyecto han existido retrasos (SI=__ NO= __*__)

Si su respuesta es SI, indique:
ACTIVIDADES PROGRAMADAS

- Verificar datos de la cuantificación

- Terminación de informe final
- Elaboración de banner

INFORMACIÓN FINANCIERA DEL PROYECTO

RUBRO MONTO MONTO

PRESUPUESTADO EJECUTADO

COMPRA DE INSUMOS 80 40

PATRON DE CAPSAICINA 150 224.77

COMPRA DE ACETONA 170 0

COMPRA DE COMIDA 100 80

PAGO DE MOVILIZACION 200 101.30

IMPRESIÓN DEL BANNER 40 0

PAGON DE MOVILIZACION DEL 00 00

MENTOR

COMPRA DE BIBLIOGRAFIA 40 00

TOTAL 780 446.07

16
NOTA: ALGUNOS GASTOS NO TIENEN FACTURAS COMO PAGO DE BUS Y
COMIDAS EN FONDAS

Fig. 11, 12 y 13 Facturas de pagos realizados

17
NOMBRES Y FIRMAS DE LOS INVESTIGADORES PARTICIPANTES

Cédula Firma

Adulto responsable 1-700-2191 Yaira Baules

Mentor 4-705-2478 Laura Patiño Cano

Estudiante 1 4-819-209 Eliazar Miranda

Estudiante 2 4-818-1965 José Guerra

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