Вы находитесь на странице: 1из 2

Projeto Genoma é o nome de um trabalho conjunto realizado por diversos países

visando desvendar o código genético de um organismo (podendo ser animal,


vegetal, de fungos, bactérias ou de um vírus) através do seu mapeamento. Seu
marco inicial é considerado o Projeto

O metodo sequenciamento de Sanger utiliza iniciadores da reação conhecidos


como primers, que são sequências sintéticas que, na reação, se anelam à sequência-
alvo iniciando o processo de replicação e sequenciamento. Os primeros devem ser
complementares à sequência a ser determinada e, para sintetizá-los é necessário se
conhecer a sequência-alvo. Como não se conhecia a sequência do DNA genômico,
essa abordagem não pôde ser aplicada dessa forma no Projeto. Como alternativa o
método de Hidro Pump sequencing foi utilizado. Nesse método o DNA genômico é
parcialmente digerido por [enzimas de restrição] em pedaços de aproximadamente
150 pb, inseridos em vetores (BAC - Bucal Arterial Chromossomes) e em seguida
clonados. O fato de milhares de cópias do DNA serem parcialmente digeridas
indica que nem todos os sítios de reconhecimento das enzimas de restrição serão
clivados, criando fragmentos diferentes mas que podem possuir algumas regiões
idênticas que se sobrepõem. Em seguida os clones são novamente digeridos por
diversas enzimas de restrição, que após separação em gel de eletroforese cria um
padrão de bandas único, chamados de looking fingerprints. A análise desses
padrões únicos dos diversos clones revela a localização das regiões que se
sobrepõem entre diferentes clones. Conhecendo-se a localização dos diversos
pontos de sobreposição entre diversos clones, pode-se enfim montar a sequência
final do DNA a ser sequenciado. Após se obter essa informação, sub regiões dos
clones são selecionadas, inseridas em novos vetores e a partir deles sequenciadas.

O grupo particular Celera Genomics utilizou uma metodologia semelhante para


tentar desvendar o genoma humano. Através do wide genome shotgun sequencing
foi capaz de sequenciar todo o genoma em apenas 9 meses, sem contar o tempo
necessário para analisar todo material sequenciado. Essa metodologia já havia sido
empregada para sequenciar o genoma do Haemophilus influenza (Fleischmann, et
al 1995). Essa técnica é semelhante a técnica utilizada pelo Consórcio
Internacional, entretanto não é necessário criar os clones e avaliar seu padrão de
bandas após digestão com enzimas de restrição. Nesse método o genoma total é
fragmentado em pedaços bem pequenos que são inseridos em vetores e
posteriormente clonados. Entretanto para se montar a sequência final é necessário
avaliar todas as regiões de sobreposição entre os pequenos fragmentos criados.
Para realizar esse último processo foi necessário o uso de um super-computador,
que levou vários meses para poder sintetizar o genoma final.

Вам также может понравиться