Grey et al, Potensi Antimikroba Ekstrak Kopi Kaya Melanoidin Terhadap Kiebsiella Pneumoniae

POTENSI ANTIMIKROBA EKSTRAK KOPI KAYA MELANOIDIN

TERHADAP KlEBSELLA PNEUMONIAE
THE ANTIMICROBIAL POTENTIAL OF MELANOIDINE COFFEE
EXTRACT ON KlEBSELLA PNEUMONIAE
Achmad Syarifudin Noor
UNIVERSITAS NEGERI JEMBER

Jalan Kalimantan no 37 kampus tegalboto sumbersari, krajan timur, sumbersari, jember, jawa timur 68121
ach_syarif17@gmail.com

Abstract

Indonesia is one of the largest coffee producers in the world. Coffee suppliers are one of the main
processes in the process of making coffee. Melanoidin is a reaction to the Maillard reaction that occurs
during roasting of coffee beans. This compound has been actively proven against several bacteria both
from gram positive (Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Bacillus cereus) and gram
negative (Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa). Therefore, this research will be conducted to fight
the disease of coffee rich in melanoidin against Klebsiella pneumonia in vitro by using agar diffusion.
From the results of the study on 6 data groups, where there were 4 treatment groups extract with a
concentration of 2.5 mg / mL; 5 mg / mL; 10 mg / mL and 20 mg / mL, one group with negative control
(aquadest) and one group again. Positive rice (streptomycin). The results obtained are at a concentration
of 20 mg / mL. High histamine also becomes the optimal concentration of KIebsiella pneumoni bacteria.
Therefore the use of coffee extract containing melanoidin is sufficiently needed or can even be used as
an antibacterial against Kiebsiella pneumoni.
Keywords: coffee, melanoidin, diffusion, kiebsiella pneumoni

Abstrak
Indonesia termasuk salah satu penghasil kopi terbesar di dunia. Penyanggraian biji kopi
merupakan satu tahap utama dalam proses pembuatan kopi. Melanoidin merupakan senyawa hasil
reaksi Maillard yang terjadi selama penyanggraian biji kopi. Senyawa inilah yang telah dibuktikan aktif
terhadap beberapa bakteri baik dari gram positif (Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis,
Bacillus cereus) maupun gram negatif(Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa). Oleh karena itu,
penelitian ini akan menguji aktivitas penghambatan ekstrak kopi kaya melanoidin terhadap Klebsiella
pneumoniae secara in vitro menggunakan metode difusi agar. Dari hasil penelitian terhadap 6
kelompok data, dimana terdapat 4 kelompok perlakuan ekstrak kopi dengan seri konsentrasi 2,5
mg/mL; 5 mg/mL; 10 mg/mL dan 20 mg/mL, satu kelompok uji berisi kontrol negatif (aquadest) dan satu
kelompok uji lagi berisi kontrol positif (streptomycin). Hasil yang didapatkan yaitu pada konsentrasi 20
mg/mL didapatkan zona hambat tertinggi sekaligus menjadi konsentrasi optimum terhadap bakteri
KIebsiella pneumoni. Oleh karena itu penggunaan dari ekstrak kopi yan mengandung melanoidin
dikatakan cukup berpotensi atau bahkan dapat digunakan sebagai antibakteri terhadap Kiebsiella
pneumoni.

Keywords: kopi , melanoidin, difusi, kiebsiella pneumoni

e-Jurnal Pustaka Kesehatan, vol. (no.), bulan, tahun

Grey et al, Potensi Antimikroba Ekstrak Kopi Kaya Melanoidin Terhadap Kiebsiella Pneumoniae
Pendahuluan
Indonesia termasuk salah satu penghasil
kopi terbesar di dunia. Produksi kopi Indonesia
dalam tahun 2012 mencapai 750.000 ton (AEKI,
2017a). Kopi juga merupakan komoditas yang
dikonsumsi secara luas oleh masyarakat
Indonesia. Kopi seduh termasuk jenis minuman
yang digemari masyarakat di berbagai kalangan.
Konsumsi kopi di Indonesia pada tahun 2016
sebesar 1,15 Kg per kapita per tahun (AEKI,
2017b). Kopi yang umum dikonsumsi
masyarakat diperoleh melalui serangkaian
proses pengolahan biji kopi hingga menjadi
bubuk atau serbuk kopi siap pakai.
Penyanggraian biji kopi merupakan satu
tahap utama dalam proses pembuatan kopi.
Proses ini menghasilkan perubahan karakteristik
aroma, rasa, dan warnanya. Selama proses
penyanggraian juga terjadi perubahan komposisi
kandungannya. Kandungan utama seperti
karbohidrat, lemak, protein, asam klorogenat,
mineral, asam alifatik, kafein, trigonellin, dan
asam amino bebas mengalami penurunan.
Uniknya, di dalam proses ini terbentuk senyawa
melanoidin sebagai hasil transformasi selama
proses penyanggraian (Moreira dkk., 2012).
Keberadaan senyawa baru tersebut yang
muncul setelah proses penyanggraian menarik
perhatian untuk diteliti lebih lanjut bagaimana
efek biologisnya terhadap kesehatan.
Melanoidin merupakan senyawa hasil
reaksi Maillard yang terjadi selama
penyanggraian biji kopi. Melanoidin memiliki
sifat atau aktivitas mikrobiologis yang
menguntungkan. Melanoidin bersifat
antikariogenik yang ditunjukkan dengan
kemampuannya menghambat Streptococcus
mutans yang berperan dalam pembentukan
karies gigi (Moreira et al., 2012).Melanoidin juga
diketahui bersifat antibakteri terhadap beberapa
bakteri baik dari gram positif (Staphylococcus
aureus, Staphylococcus epidermidis, Bacillus
cereus) maupun gram negatif (Escherichia coli,
Pseudomonas aeruginosa)(Moreira et al., 2012).
Di sisi lain, melanoidin memiliki aktivitas
antioksidan dan memberikan efek proteksi
terhadap stress oksidatif sel (Bekedam, Loots,
et al., 2008). Melanoidin juga memiliki toksisitas
yang rendah terhadap cell line manusia (Runti
et al., 2015). Sifat antioksidannya dan
toksisitasnya yang rendah ini sangat
menjanjikan sebagai calon atau bahan obat.
Dengan demikian melanoidin sangat berpotensi
sebagai agen antibakteri yang aktif dan non-
toksik.
e-Jurnal Pustaka Kesehatan, vol. (no.), bulan, tahun
Kemampuan melanoidin dalam
memberikan aktivitas antibakteri terkait dengan
sifatnya yang mampu mengelat logam. Pada
konsentrasi rendah, melanoidin memberikan
sifat bakteriostatik dan mampu menurunkan
virulensi bakteri patogenik yang memproduksi
siderophore. Pada konsentrasi tinggi,
melanoidin dapat menjadi bakterisida dengan
merusak membran luar, mendisrupsi membran
sel, dan menyebabkan kebocoran molekul
intraseluler (Rufián-Henares and De La Cueva,
2009). Secara umum, ada perbedaan
sensitivitas antara bakteri gram positif dan gram
negatif terhadap melanoidin. Namun demikian
belum diketahui secara pasti mekanisme yang
menjelaskan perbedaannya(Moreira et al.,
2012).
Melanoidin telah dibuktikan aktif terhadap
beberapa bakteri baik dari gram positif maupun
gram negatif sebagaimana dijelaskan
sebelumnya. Namun demikian, sejauh ini belum
ada uji aktivitas dan uji potensi antibakterinya
terhadap Klebsiella pneumoniae. K. pneumoniae
merupakan bakteri yang berperan dalam banyak
kasus infeksi termasuk pneumonia, infeksi
saluran kemih, bakteriemia, dan abses liver. K.
pneumoniae termasuk patogen oportunistik
yang menimbulkan infeksi serius pada individu
yang mengalami gangguan imun. Bakteri ini
bersifat gram negatif, terenkapsulasi, nonmotil,
dan berdiam di lingkungan seperti tanah dan air
serta alat kesehatan (Clegg and Murphy, 2016).
Oleh karena itu, penelitian ini akan
menguji aktivitas penghambatan ekstrak kopi
kaya melanoidin terhadap Klebsiella
pneumoniae secara in vitro menggunakan
metode difusi agar. Potensi antimikrobanya
dievaluasi lebih lanjut dengan metode
mikrodilusi untuk mendapatkan nilai kadar
penghambatan minimum 50% (MIC50). Nilai
MIC50 memberikan ukuran yang lebih deskriptif
pada pengujian potensi antibakteri (Cos et al.,
2006). Namun demikian, pengujian aktivitas
penghambatan dengan metode difusi agar perlu
dilakukan terlebih dahulu sebagai skrining awal
atau landasan untuk pengukuran potensi
antibakteri secara mikrodilusi. Adapun proses
ekstraksi biji kopi menggunakan pelarut air yang
kemudian dipekatkan menggunakan freeze-dry.
Hasil penelitian ini diharapkan bisa berkontribusi
dalam pengembangan diversifikasi olahan kopi
untuk perawatan tubuh dan kesehatan
sebagaimana tercantum dalam Rencana Induk
Penelitian (RIP) Universitas Jember tahun 2016-
2020.
Klebsiella pneumoniae merupakan
Grey et al, Potensi Antimikroba Ekstrak Kopi Kaya Melanoidin Terhadap Kiebsiella Pneumoniae
Enterobacteria yang berperan dalam banyak
kasus infeksi termasuk pneumonia, infeksi
saluran kemih, bakteriemia, dan abses liver. K.
pneumoniae termasuk patogen oportunistik
yang menimbulkan infeksi serius pada individu
yang mengalami gangguan imun. Bakteri ini
bersifat gram negatif, fakultatif anaerob,
terenkapsulasi, nonmotil, dan berdiam di
lingkungan seperti tanah dan air serta alat
kesehatan(Clegg and Murphy, 2016). Bakteri ini
tumbuh dengan baik pada suhu 37° C di media
Nutrient Agar atau Nutrient Broth pada suasana
aerobik (ATCC, 2017). K. pneumoniae juga
dikenal sebagai Friedlander’s pneumobacillus.
Bakteri ini berreaksi negatif indol, positif lisin
dekarboksilase, positif urease dan beta-
galaktosidase, dan tidak memproduksi H2S.
MIC suatu ekstrak tanaman memberikan
ukuran kuantitatif potensinya dalam
mengendalikan pertumbuhan mikroorganisme.
Ekstrak tanaman yang memiliki nilai MIC kurang
dari 150 μg/mL dinilai prospektif sebagai agen
antibakteri. Nilai MIC lebih dari kadar 150 μg/mL
meningkatkan kejadian positif palsu antibakteri
(LimaFilho dan de Aguiar Cordeiro, 2014).
Pilihan media merupakan faktor kritis yang
dapat mempengaruhi nilai MIC. Oleh karena itu
pembandingan suatu agen antibakteri harus
dengan media yang jelas sama. Media Mueller-
Hinton memberikan pertumbuhan yang baik
untuk kebanyakan bakteri dan merupakan
media standar untuk uji secara dilusi(Cos et al.,
2006).
Penelitian ini akan menggunakan ekstrak
kopi dan tanpa proses fraksinasi maupun isolasi
lebih lanjut. Proses ekstraksi dengan pelarut air
akan menghasilkan ekstrak kopi yang kaya
dengan kandungan melanoidin. Sebagaimana
diketahui bahwa melanoidin merupakan
senyawa utama yang terdapat pada biji kopi
tersangrai dan bersifat larut air. Ekstrak kopi
tersebut diujikan terhadap bakteri K.
pneumoniae dengan metode difusi dan
dilanjutkan diuji secara mikrodilusi. Kedua
metode tersebut memberikan informasi kualitatif
(ada/tidak hambatan) dan kuantitatif (potensi)
namun tidak memberikan informasi mengenai
mekanisme kerja antibakterinya.
Dengan demikian maka permasalahan
dalam penelitian ini dapat dirumuskan sebagai
berikut:
1. Apakah sampel ekstrak kopi memiliki
aktivitas antibakteri terhadap Klebsiella
pneumoniae?
e-Jurnal Pustaka Kesehatan, vol. (no.), bulan, tahun
2. Seberapa besar potensi sampel ekstrak
kopi sebagai agen antibakteri terhadap
Klebsiella pneumonia ?
Adapun tujuan penelitian ini yaitu
mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak kopi
terhadap Klebsiella pneumoniae.
Metode Penelitian
3.1 Rancangan Penelitian
Penelitian ini merupakan true
experimental laboratories. Percobaan dalam
penelitian ini dilakukan secara post test only
control group design. Aktivitas antimikroba
ekstrak kopi diamati setelah inkubasi pada
media agar yang ditumbuhi bakteri K.
pneumonia. Bakteri uji akan diberi perlakuan
berbagai konsentrasi ekstrak kopi dan antibiotik
standar.
3.2 Variabel Penelitian
Variabel bebas dan variabel terikatnya
dalam penelitian ini yaitu konsentrasi ekstrak
kopi dan aktivitas hambatan pertumbuhan
ekstrak kopi terhadap K. pneumonia. Variabel
yang dikendalikan antara lain metode ekstraksi
sampel, kultur dan inokulum bakteri, suhu dan
lama inkubasi, dan prosedur penelitian secara
umum.
3.3 Waktu dan Lokasi Penelitian
Penelitian akan dilakukan di Laboratorium
Fitokimia dan Laboratorium Mikrobiologi
Fakultas Farmasi Universitas Jember pada
bulan Juli 2017 hingga Nopember 2017.
3.4 Bahan Penelitian
Bahan sampel yang digunakan yaitu biji
kopi (Arabika/Robusta) tersangrai yang
diperoleh dari Pusat Penelitian Kopi dan Kakao
Jember. Bahan lainnya yaitu Klebsiella
pneumonia, Nutrient Agar (NA) (Oxoid), Nutrient
Broth (NB) (Oxoid), Mueller-Hinton Agar/Broth
(MH) (Oxoid), Etanol absolut, NaCl fisiologis,
Streptomycin, Air Steril, Akuades, Mc.Farland
0,5; Spiritus, Clorox, Microplate 96- well, Kertas
payung, Benang, Kapas, Kasa, Blue Tips, Yellow
Tips, White Tips, Kertas Whatman 40, Plastik
wrap, alumunium foil, perlengkapan
perlindungan diri disposable, dan membran filter
0,45 mikrometer.
3.5 Alat Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian
adalah seperangkat alat gelas, jarum ose,
inkubator (Clifton), pipet tetes, autoklaf (ALP),
Grey et al, Potensi Antimikroba Ekstrak Kopi Kaya Melanoidin Terhadap Kiebsiella Pneumoniae
pipet mikro (Socorex), pinset, hot plate-stirer
(Thermo Scientific), tabung mikro, jangka
sorong, timbangan analitik (Pioneer), Freeze-
Dryer (Zibbus Vaco), LAF cabinet (Airtech),
microplate reader (Dialab), spektrofotometer uv-
vis, dan lemari pendingin.
3.6 Tahapan Penelitian
Tahapan pelaksanaan penelitian ini secara
ringkas yaitu:
1. Pembuatan ekstrak kopi kaya melanoidin,
2. Pengukuran absorbansi ekstrak,
3. Penyiapan alat, media dan kultur bakteri,
4. Skrining aktivitas antibakteri secara difusi
agar,
5. Uji potensi antibakteri secara mikrodilusi, dan
6. Analisis data hasil pengamatan.
Tahapan penelitian tersebut dapat digambarkan
dalam skema berikut:
3.7 Cara Kerja Penelitian
3.7.1 Pembuatan Ekstrak Kopi Kaya Melanoidin
Cara ekstraksi biji kopi tersangrai untuk
mendapatkan ekstrak kopi yang kaya dengan
kandungan melanoidin mengacu pada metode
yang dipakai oleh (Nunes and Coimbra, 2007)
dengan sedikit modifikasi. Serbuk biji kopi
tersangrai sebanyak 50 gram diekstraksi dengan
1 liter akuades pada suhu 80° C selama 20
menit menggunakan hot-plate stirer. Selama
ekstraksi dilakukan pengadukan secara konstan.
Ekstrak cair tersebut kemudian disaring dengan
gelas penyaring (whatman 40) sebanyak dua
kali penyaringan. Ampas hasil penyaringan
dibilas dengan akuades panas bersuhu 80° C.
Filtrat kemudian didiamkan hingga mendingin
sendiri. Filtrat tersebut secara bertahap di
sentrifugasi selama 10 menit pada putaran 1600
rpm. Supernatan yang diperoleh selanjutnya
difilter dengan membran 0,45 mikrometer.
Seluruh supernatan dipekatkan menggunakan
freeze-dryer. Ekstrak kopi hasil freezedry
kemudian disimpan pada suhu 4° C hingga
digunakan untuk tahap selanjutnya.
3.7.2 Pengukuran Absorbansi Ekstrak
Data absorbansi digunakan sebagai
kontrol kandungan melanoidin dalam ekstrak.
Melanoidin berkontribusi pada warna coklat dari
ekstrak yang absorbansinya dapat diamati pada
405 nm. Absorbansi ekstrak kopi diukur secara
spektrofotometri uv-vis menurut (Bekedam,
Roos, et al., 2008)
3.7.3 Sterilisasi Alat dan Bahan
Alat (seperti peralatan gelas dan tip) dan
e-Jurnal Pustaka Kesehatan, vol. (no.), bulan, tahun
bahan (seperti media, NaCl fisiologis serta
aquades) dibungkus dengan kertas cokelat
untuk kemudian disterilisasi memakai autoklaf
pada suhu 121˚C tekanan 15 psi selama 15
menit. Alat yang tidak tahan panas dapat
dilakukan sterilisasi dengan alkohol 70%. Ose
disterilisasi dengan pemijaran sesaat sebelum
dipakai.
3.7.4 Penyiapan Media dan Kultur Bakteri
Media yang diperlukan dalam penelitian
yaitu media agar (NA) miring untuk kultur
bakteri, media agar (NA) petri disk untuk uji
difusi, dan media cair (NB atau MH) untuk
pembuatan inokulum dan uji mikrodilusi.
Pembuatan media (agar miring) untuk
penanaman dan peremajaan bakteri dilakukan
dengan cara melarutkan 1 gram NA dalam 50 ml
akuades. Suspensi yang dihasilkan dipanaskan
sampai mendidih di dalam erlenmeyer 100 ml
tersebut kemudian disterilkan dalam autoklaf
pada 121°C dengan tekanan 15 psi selama 15
menit. Media selanjutnya dituang ke dalam 10
tabung reaksi yang sudah steril masing-masing
5 ml dan tabung dimiringkan hingga terbentuk
agar miring.
Pembuatan media untuk uji difusi
dilakukan dengan cara melarutkan 4,56 gram
MH dalam 120 ml akuades. Suspensi yang
dihasilkan dipanaskan sampai mendidih di
dalam erlenmeyer 250 ml tersebut kemudian
disterilkan dalam autoklaf pada 121°C dengan
tekanan 15 psi selama 15 menit. Media
selanjutnya dituang ke dalam 6 cawan petri
yang sudah steril masing-masing 20 ml.
Bakteri K. pneumoniae dikultur ulang
dalam media agar (NA) miring. Stok bakteri
murni diambil dari kemasannya, dimana bagian
ujung pada bakteri murni ini berbentuk loop,
sehingga bisa langsung di goreskan pada media
agar miring. Cara menggoreskannya bisa
dengan empat sisi dimana modelnya zig-zag.
Bakteri kemudian disimpan di inkubator suhu
37° C selama 18-24 jam untuk melihat tumbuh
atau tidaknya.
3.7.5 Preparasi Inokulum Bakteri
Sejumlah bakteri yang diambil dari kultur
agar miring diambil dan dimasukkan ke dalam
10 ml NaCl fisiologis. Jumlah bakteri yang akan
digunakan untuk pengujian menggunakan
standar McFarland 0,5. Kekeruhan inokulum
bakteri disamakan dengan standar McFarland
0,5 secara visual atau menggunakan metode
turbidimetri.
Grey et al, Potensi Antimikroba Ekstrak Kopi Kaya Melanoidin Terhadap Kiebsiella Pneumoniae
3.7.6 Skrining Aktivitas Antibakteri Secara Difusi
Uji antibakteri dengan metode difusi
dilakukan pada 6 kelompok. Dimana 4 kelompok
merupakan kelompok perlakuan ekstrak kopi
dengan seri konsentrasi 2,5 mg/mL; 5 mg/mL;
10 mg/mL dan 20 mg/mL, kemudian satu
kelompok uji berisi kontrol negatif (aquadest)
dan satu kelompok uji lagi berisi kontrol positif
(streptomycin). Media padat Mueller Hinton Agar
(MH) diusap dengan biakan bakteri. Media
dibuat sumuran (diameter 10 mm) dan diberi
perlakuan serta kontrol. Tiap-tiap konsentrasi
dipipet 40 µL dimasukkan dalam masing-masing
lubang sumuran yang berisi media MH. Kontrol
negatif diisi dengan aquadest sebanyak 40 µL.
Kontrol positif diisi dengan streptomycin
sebanyak 40 µL dengan konsentrasi 10 mg/mL.
Media bakteri yang sudah diberi bahan
antibakteri diinkubasi pada suhu 37°C selama
18-24 jam.
Diameter hambatan yang terbentuk diukur
menggunakan jangka sorong dalam satuan
milimeter. Zona hambat diukur dengan cara
mengukur diameter keseluruhan tanpa dikurangi
dengan diameter sumuran
3.7.7 Uji Potensi Antibakteri Secara Mikrodilusi
Pengujian potensi antibakteri
menggunakan microtiter plate (microplate).
Semua sumuran diberi 100 µl inokulum K.
pneumoniae yang telah disesuaikan
kekeruhannya dengan McFarland 0,5 kecuali
sumuran untuk kontrol media. Sumuran uji diberi
dengan perlakuan 100 µl sampel ekstrak kopi
berbagai konsentrasi sehingga konsentrasi
akhirnya menjadi setengahnya. Sampel ekstrak
kopi dibuat dalam tujuh konsentrasi yaitu 12,5
μg/mL, 25 μg/mL, 50 μg/mL, 100 μg/mL, 200
μg/mL, dan 400 μg/mL, dalam media MH.
Sebagai kontrol, di beberapa sumuran diberikan
100 μL larutan sampel setiap konsentrasi dan
100 μL media tanpa bakteri, kontrol bakteri uji
digunakan sebanyak 200 μL bakteri uji, kontrol
positif digunakan larutan streptomisin 10 mg/mL,
dan kontrol pelarut digunakan 10 µL DMSO
0,5%. Microplate kemudian diinkubasi selama
18-24 jam menit pada suhu 37°C. Microplate
ditutup dengan parafilm dan di bawah microplate
diberi tisu basah untuk menjaga
kelembabannya.
Optical density (OD) tiap sumuran
kemudian diukur menggunakan microplate
reader pada 595 nm. Data absorbansinya lalu
dikonversi menjadi persen hambatan
menggunakan persamaan berikut.
e-Jurnal Pustaka Kesehatan, vol. (no.), bulan, tahun
Nilai MIC yang ditentukan adalah nilai
MIC50 dan MIC90. Nilai MIC50 dan MIC90
didapatkan dengan membuat grafik antara kadar
isolat (absis) dengan persen penghambatan
pertumbuhan bakteri (ordinat) dan dianalisis
menggunakan metode Litchfield dan Wilcoxon
(analisis probit).
Penentuan nilai Kadar Bunuh Minimum
(MBC) dilakukan dengan mengambil cairan dari
tiap microtiter plate 96-well sebanyak 3 μL lalu
digoreskan pada media NA steril tanpa
penambahan mikroba dan senyawa uji. Goresan
pada media NA yang terlihat jernih setelah
inkubasi (suhu 37° C selama 18-24 jam)
ditetapkan sebagai nilai MBC.
3.7.8 Analisis Data
Data dinyatakan dalam rerata ±
kesalahan baku rerata (Standar Deviasi). Data
pada masing-masing perlakuan dianalisis
statistik ANOVA diikuti uji TukeyHSD berikut uji
asumsinya menggunakan aplikasi statistik R
3.3.1 / RCommander 2.3-2 (Fox, 2005; R Core
Team, 2015). Perbedaan bermakna dinyatakan
dengan P.
Hasil Penelitian
4.1 Preparasi
Ekstrak kopi yang kaya dengan
kandungan melanoidin diperoleh dengan proses
sangrai. Selanjutnya dilakukan proses ekstraksi
dengan pengadukan secara konstan sampai
terbentuk filtrat yang diinginkan. Filtrat tersebut
di sentrifugasi kemudian dan diperoleh
supernatan yang nantinya dipekatkan untuk
tahap selanjutnya.
4.2 Pengukuran Absorbansi Ekstrak
Absorbansi yang diperoleh dari ekstrak
kopi yang mengandung Melanoidin dapat
diamati pada 405 nm. Hasil mask dalam rentang
yang sesuai dengan pengamatan menurut
(Bekedam, Roos, et al., 2008). Absorbansi
ekstrak kopi ini diukur secara spektrofotometri
uv-vis.
4.3 Skrining Aktivitas Antibakteri Secara Difusi
Dari 6 kelompok data, dimana terdapat 4
kelompok perlakuan ekstrak kopi dengan seri
konsentrasi 2,5 mg/mL; 5 mg/mL; 10 mg/mL dan
20 mg/mL, satu kelompok uji berisi kontrol
negatif (aquadest) dan satu kelompok uji lagi
berisi kontrol positif (streptomycin). Dari ke 6
variabel tersebut diketahui mampu membentuk
Grey et al, Potensi Antimikroba Ekstrak Kopi Kaya Melanoidin Terhadap Kiebsiella Pneumoniae

zona hambat pada bakteri K. pneumonia. [2] Bekedam, E. K., Loots, M. J., et al.
(2008) ‘Roasting effects on
Pembahasan formation mechanisms of coffee
brew melanoidins’, Journal of
Dari 6 kelompok data, dimana terdapat 4 Agricultural and Food Chemistry,
kelompok perlakuan ekstrak kopi dengan seri
56(16), pp. 7138–7145. doi:
konsentrasi 2,5 mg/mL; 5 mg/mL; 10 mg/mL dan
20 mg/mL, satu kelompok uji berisi kontrol 10.1002/btpr.506.
negatif (aquadest) dan satu kelompok uji lagi
berisi kontrol positif (streptomycin). Dari ke 6 [3] Clegg, S. and Murphy, C. N. (2016)
variabel tersebut diketahui mampu membentuk ‘Epidemiology and Virulence of
zona hambat pada bakteri K. pneumonia. Klebsiella pneumoniae’,
Dari hasil penelitian menunjukan bahwa Microbiology Spectrum, 4(1). doi:
diameter zona hambat terbentuk dimulai pada 10.1128/microbiolspec.UTI-0005-
konsentrasi 2,5 mg/mL adalah sebesar 7,00
2012.
mm, kemudian pada konsentrasi 5 mg/mL
sebesar 8,30 mm, konsentrasi 10 mg/mL yaitu
9,60 mm, konsentrasi 20 mg/mL yaitu 11,00 mm [4] Cos, P. et al. (2006) ‘Anti-infective
sedangkan perlakuan kontrol positif dengan potential of natural products: How to
menggunakan cara sumuran yang berisi larutan develop a stronger in vitro “proof-of-
streptomycin, zona hambat yang terbentuk concept”’, Journal of
sebesar 11,00 mm. Ethnopharmacology, 106(3), pp.
290–302. doi:
Simpulan dan Saran 10.1016/j.jep.2006.04.003.

Dari hasil tersebut dapat diambil [5] Daglia, M. et al. (2007) ‘Isolation,
kesimpulan bahwa pada konsentrasi 20 mg/mL
identification, and quantification of
didapatkan zona hambat tertinggi sekaligus
menjadi konsentrasi optimum terhadap bakteri roasted coffee antibacterial
KIebsiella pneumoni. Selain itu pada konsentrasi compounds’, Journal of Agricultural
yang sama memberikan hasil yang cukup baik and Food Chemistry, 55(25), pp.
karena memiliki aktivitas yang sama dengan 10208–10213. doi:
kontrol positif yang digunakan pada penelitian 10.1021/jf0722607.
kali ini.
Oleh karena itu penggunaan dari ekstrak [6] Farah, A. and Dos Santos, T. F.
kopi yan mengandung melanoidin dikatakan
(2014) The Coffee Plant and Beans:
cukup berpotensi atau bahkan dapat digunakan
sebagai antibakteri terhadap Kiebsiella An Introduction, Coffee in Health
pneumoni. and Disease Prevention. Elsevier
Beberapa saran dar peneltian in yaitu Inc. doi: 10.1016/B978-0-12-
perlu dilakukan optimasi mengenai ekstrak kopi 409517-5.00001-2.
kaya melanoidin terhadap bakteri Kiebsiella
pneumonia. [7] Kleinwächter, M., Bytof, G. and
Selmar, D. (2014) Coffee Beans
and Processing, Coffee in Health
Daftar Pustaka
and Disease Prevention. Elsevier
[1] Bekedam, E. K., Roos, E., et al. Inc. doi: 10.1016/B978-0-12-
(2008) ‘Low molecular weight 409517-5.00009-7.
melanoidins in coffee brew’, Journal
of Agricultural and Food Chemistry, [8] Moreira, A. S. P. et al. (2012) ‘Coffee
56(11), pp. 4060–4067. doi: melanoidins: Structures,
10.1021/jf8001894. mechanisms of formation and
potential health impacts’, Food and

e-Jurnal Pustaka Kesehatan, vol. (no.), bulan, tahun

Grey et al, Potensi Antimikroba Ekstrak Kopi Kaya Melanoidin Terhadap Kiebsiella Pneumoniae

Function, 3(9), pp. 903–915. doi: 10.1016/B978-0-12-409517-

10.1039/c2fo30048f. 5.00020-6.

[9] Nunes, F. M. and Coimbra, M. A. [12]Runti, G. et al. (2015) ‘Arabica

(2007) ‘Melanoidins from coffee coffee extract shows antibacterial
infusions. Fractionation, chemical activity against Staphylococcus
characterization, and effect of the epidermidis and Enterococcus
degree of roast’, Journal of faecalis and low toxicity towards a
Agricultural and Food Chemistry, human cell line’, LWT - Food
55(10), pp. 3967–3977. doi: Science and Technology. Elsevier
10.1021/jf063735h. Ltd, 62(1), pp. 108–114. doi:
10.1016/j.lwt.2014.12.039.
[10]Rufián-Henares, J. A. and De La
Cueva, S. P. (2009) ‘Antimicrobial [13]Wei, F. and Tanokura, M. (2014)
activity of coffee melanoidins - A Chemical Changes in the
study of their metal-chelating Components of Coffee Beans
properties’, Journal of Agricultural during Roasting, Coffee in Health
and Food Chemistry, 57(2), pp. and Disease Prevention. Elsevier
432–438. doi: 10.1021/jf8027842. Inc. doi: 10.1016/B978-0-12-
409517-5.00010-3.
[11] Rufián-Henares, J. A. and Pastoriza,
S. (2014) Melanoidins in Coffee,
Coffee in Health and Disease
Prevention. Elsevier Inc. doi: .

e-Jurnal Pustaka Kesehatan, vol. (no.), bulan, tahun