На правах рукописи

ЛОМТЕВА НАТАЛЬЯ АРКАДЬЕВНА

ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ БИОЛОГИЧЕСКИ

АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ЛОТОСА ОРЕХОНОСНОГО НА
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СИСТЕМЫ ОРГАНИЗМА

03.03.01 – физиология

АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
доктора биологических наук

Астрахань-2016
 2
Работа выполнена на кафедре физиологии, морфологии, генетики и
биомедицины Федерального государственного бюджетного образовательного
учреждения высшего образования «Астраханский государственный
университет»

Научный консультант: доктор биологических наук, профессор

Кондратенко Елена Игоревна

Официальные оппоненты:

Джандарова Тамара Исмаиловна, доктор биологических наук, профессор,

ФГАОУ ВПО «Северо-Кавказский федеральный университет», Институт
живых систем, кафедра анатомии и физиологии, профессор

Семячкина-Глушковская Оксана Валерьевна, доктор биологических

наук, доцент, ФГБОУ ВО «Саратовский национальный исследовательский
государственный университет имени Н.Г. Чернышевского», кафедра
физиологии человека и животных, заведующий кафедрой

Котельникова Светлана Владимировна, доктор биологических наук,

доцент, ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный технический
университет», кафедра гидробиологии и общей экологии, доцент

Ведущая организация:
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Институт
биологии Карельского научного центра Российской академии наук»,
г.Петрозаводск

Защита состоится «22» октября 2016 г. в 10:00 часов на заседании

объединенного диссертационного совета ДМ 212.009.01 при ФГБОУ ВО
«Астраханский государственный университет» по адресу: 414000,
г.Астрахань, пл. Шаумяна, 1, ауд. 101.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВО

«Астраханский государственный университет» по адресу: г. Астрахань, ул.
Татищева, 20а и на сайте http://www.asu.edu.ru

Автореферат разослан «______» __________ 2016 г.

Ученый секретарь
диссертационного совета Курьянова Евгения Владимировна
 3
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность исследования. Многочисленными исследованиями
показаны антиоксидантные (Jung H.A. et al., 2003; Choe J.H. et al., 2010;
Huang B. et al., 2010; Ahn Y.J. et al., 2014), гиполипидемические (Du H. et al.,
2010; Lin M.C. et al., 2009; Guo F. et al., 2013; Sharma B.R. et al., 2016),
гипогликемические (Sharma B.R. et al., 2016), гипохолестеринемические
(Ohkoshi E. et al., 2007; Lin M.C. et al., 2009), антипролиферативные (Nishkruti
R.M. et al., 2013), антиишемические (Kim J.M. et al., 2006),
антикоагуляционные (Zhou Y.J. et al., 2013), противоопухолевые (Arjun P. еt
al., 2012; Yoon J.S. et al., 2013; Poornima P. et al., 2013),
противовоспалительные (Liao C.H et al., 2011; Lin J.Y. et al., 2006),
антидепрессантные (Kang M. et al., 2005b), гепатопротекторные (Кондратенко
Е.И. и др., 2015), гипотензивные (Venkatesh B., Dorai A., 2011),
антиаритмические (Li G.R., et al., 1989a; 1989b; 1990; Guo F. et al., 2013;
Durairaj B., Dorai A., 2014), антиамнезические (Jung H.A. et al., 2010) и другие
эффекты биологически активных веществ (БАВ) лотоса орехоносного,
однако отсутствуют целостные концептуальные представления о действии
биологически активных веществ, выделенных из разных частей лотоса
орехоносного, на функциональные системы организма.
Содержание в лотосе орехоносном комплекса биологически активных
веществ с различной химической структурой (алкалоиды, фенольные
соединения и др.) определяет широту физиологических эффектов.
Ведущую роль в физиологических эффектах БАВ растительного
происхождения отводят нейрофизиологическим и иммуномодулирующим
эффектам (Willams R.J. et al., 2012; Spencer J.P. 2008; 2009; Цыдендамбаева
П.Б. с соавт., 2006). Однако экспериментальные данные, показывающие
дозозависимые эффекты биологически активных веществ, очень
немногочисленны (Krishnamoorthy G. et al., 2009; Zhou T. et al., 2009;
Trongtorsak P. et al., 2007). В литературе приводятся разрозненные сведения
об используемых для экстракции частей растения, способах экстракции,
растворителе. Не изучена продолжительность введения экстрактов, что также
имеет значение для выявляемых физиологических эффектов. Приводятся
неоднозначные, а порой и противоречивые, данные об основных
действующих веществах растительных экстрактов, определяющих
физиологические эффекты.
В зарубежной литературе приводятся экспериментальные исследования
по влиянию биологически активных веществ лотоса орехоносного как
выделенных и действующих изолированно, так и в виде экстрактов,
полученных из разных частей растения на функциональные системы
организма и процессы метаболизма (Mukherjee P.K. et al., 1996a; 1996b; 2009;
Velusami C.C. et al., 2013; Sohn D.H. et al., 2003.). В России проводились
единичные исследования по изучению физиологических эффектов лотоса
орехоносного (Тюренков И.Н. и др., 1995). Однако среди многочисленных
весьма разрозненных результатов экспериментов отсутствуют комплексные
исследования по влиянию биологически активных веществ лотоса
 4
орехоносного на организм млекопитающих, раскрывающие механизмы
действия алкалоидов, флавоноидов, гликозидов и других классов веществ
исследуемого растения на нейро-иммуно-метаболические функциональные
взаимосвязи целостного организма.
В настоящее время накоплено значительное число экспериментальных
доказательств функциональной зависимости иммунологических показателей
от нейропсихологического статуса организма (Самотруева М.А. с соавт.,
2009; Абрамов В.В., 1991; Ветлугина Т.П., Иванова С.А., 2000). Нейро-
иммунно-метаболические функциональные взаимосвязи в настоящее время
могут рассматриваться на уровне многокомпонентной
морфофункциональной регуляторной системы млекопитающих (Акмаев
И.Н., 1998). При этом большое внимание исследователи обращают на тот
факт, что именно активность антиоксидантной и иммунной систем
определяет устойчивость клеток к повреждающим экзо- и эндогенным
факторам и осуществляют общий иммунологический надзор за состоянием
организма (Цыденбаев П.Б. и др., 2006; Duan Y. et al., 2010).
Цель исследования – изучить нейрофизиологические, иммунно-
метаболические, антиоксидантные эффекты биологически активных веществ
лотоса орехоносного и разработать концептуальную модель
физиологических механизмов действия.
Достижение поставленной цели осуществлялось путем решения
следующих задач:
1. Изучить химический состав экстрактов лотоса орехоносного,
полученных из лепестков, семян, коробочек и листьев растения.
Выявить ведущие классы биологически активных веществ в каждом
типе экстрактов.
2. Изучить влияние экстракта семян лотоса орехоносного на структуру
ориентировочно-исследовательского поведения и уровень тревожности
при разной продолжительности введения экстракта.
3. Проанализировать дозозависимое влияние экстрактов лепестков,
семян, листьев и коробочек лотоса орехоносного на поведение
животных в тесте Порсолт и Суок-тесте и изучить изменение
поведенческих реакций крыс в условиях хронического введения
экстрактов на фоне экспериментальной дислипидемии.
4. Исследовать влияние биологически активных веществ семян лотоса
орехоносного на волновые характеристики вариабельности сердечного
ритма.
5. Выявить влияние экстракта семян лотоса орехоносного на показатели
лейкоцитарной формулы и фагоцитарной активности нейтрофилов и их
зависимость от длительности введения экстракта.
6. Изучить дозозависимые эффекты экстрактов лепестков, семян,
коробочек и листьев лотоса орехоносного на показатели
лейкоцитарной формулы, фагоцитарную активность нейтрофилов и
уровень интерлейкина-1β и изучить действие различных экстрактов
 5
лотоса орехоносного в условиях их хронического введения на фоне
экспериментальной дислипидемии.
7. Оценить влияние экстракта семян лотоса орехоносного на
свободнорадикальный гомеостаз и выявить периоды наиболее
эффективного антиоксидантного действия биологически активных
веществ экстракта.
8. Оценить влияние экстрактов лотоса орехоносного на про- и
антиоксидантный баланс у крыс, его зависимость от дозы и вида
экстракта, определить наиболее эффективные из них в условиях
экспериментальной дислипидемии.
9. Выявить функциональную взаимосвязь между
нейрофизиологическими, иммунно-метаболическими и
антиоксидантными эффектами БАВ лотоса орехоносного и разработать
концептуальную модель их физиологического механизма действия.
Научная новизна. Впервые на основе исследованных
физиологических эффектов биологически активных веществ лотоса
орехоносного выявлены закономерности их влияния на регуляторные
системы организма (нервную соматическую и вегетативную, эндокринную и
иммунную) и некоторые метаболические процессы. Установлено, что
модальность и степень выраженности физиологических эффектов влияния
биологически активных веществ лотоса орехоносного зависят от
продолжительности введения экстракта. Впервые установлено, что
физиологические эффекты действия биологически активных веществ
обусловлены типом и дозой экстракта. Впервые показано, что максимальной
физиологической эффективностью по влиянию на высшую нервную
деятельность, висцеральную и эндокринную регуляцию, иммунологический
контроль и свободнорадикальные процессы обладают экстракты лепестков
лотоса орехоносного.
Установлено, что экстракты лотоса орехоносного усиливают
ориентировочно-исследовательские паттерны поведения, снижают
эмоциональность и уровень тревожности. Установлено, что влияние
экстракта семян лотоса орехоносного на вариабельность сердечного ритма
обусловлено типологическими особенностями, связанными с исходной
волновой структурой спектра и гендерными признаками.
Показано, что биологически активные вещества лотоса орехоносного
проявляют иммуностимулирующие свойства, впервые установлена
дозозависимость в проявлении этих свойств и выявлено усиление
фагоцитарной активности нейтрофилов, изменение лейкоцитарной формулы
и повышения уровня интерлейкина-1β под действием экстрактов лотоса
орехоносного и при экспериментальной дислипидемии.
Установлено, что проявление антиоксидантных эффектов
биологически активных веществ лотоса обусловлено видом ткани и
продолжительностью воздействия биологически активных веществ лотоса
орехоносного. Выявлено, что проявление и выраженность антиоксидантных
 6
свойств экстракта семян лотоса определяется продолжительностью его
введения крысам.
Теоретическая и практическая значимость работы. Разработана
теоретическая основа для концептуальных представлений о закономерностях
влияния и механизмах действия биологически активных веществ лотоса
орехоносного, раскрывающих механизмы действия алкалоидов,
флавоноидов, гликозидов и других классов веществ исследуемого растения
на нейро-иммуно-метаболические функциональные взаимосвязи целостного
организма. Результаты исследования существенно дополняют теоретическую
основу для развития направления в физиологии по изучению механизмов
модулирующего, регулирующего, корригирующего действия веществ
растительного происхождения на физиологические процессы в организме
человека и животных. Разработанные концептуальные представления
изучения физиологических эффектов экстрактов лотоса может стать основой
для оценки эффективности биологически активных веществ других
растительных экстрактов.
Получено экспериментальное обоснование для расширения спектра
практического применения экстрактов лотоса орехоносного в медицине и
фармации. Изучение физиологических эффектов биологически активных
веществ лотоса орехоносного является перспективным для создания на их
основе новых оригинальных фитопрепаратов комплексного действия.
Результаты работы могут быть использованы в учебном процессе в
рамках дисциплин «Физиология», «Биологически активные вещества
растительного происхождения» и «Биохимия». Запатентованы:
анксиолитические, антидепрессивные иммунотропные, антиоксидантные и
гиполипидемические эффекты БАВ лотоса орехоносного (патент на
изобретение № 2497538 «Средство, обладающее анксиолитическим и
антидепрессивным действием, на основе экстракта семян лотоса
орехоносного (Nelumbo nucifera)»; патент на изобретение № 2496508
«Средство, обладающее иммунотропной и антиоксидантной активностью, на
основе экстракта семян лотоса орехоносного (Nelumbo nucifera)»; патент на
изобретение № 2480230 «Средство, обладающее гиполипидемическим
действием, на основе экстракта семян лотоса орехоносного (Nelumbo
nucifera)»).
Методология и методы исследования
Исследования проведены на 442 белых беспородных крысах обоего
пола, средней массой 220 г. Животные содержались в стандартных
лабораторных условиях вивария, при свободном доступе к воде и пище. Все
работы с лабораторными животными проводили с соблюдением принципов
биоэтики (Международные рекомендации по проведению медико-
биологических исследований с использованием животных, 1993) и правил
лабораторной практики (Правила лабораторной практики в РФ, 2003).
Декапитацию животных осуществляли под эфирным наркозом. Были
проведены 5 серий экспериментов.
 7
В первой серии проводили химический анализ полученных экстрактов
лотоса орехоносного и изучали их токсичность при внтурижелудочном
введении экспериментальным животным. При этом проводили
стандартизацию экстрактов по группе флавоноидов (рутину, кверцетину),
изучали влажность и общую золу в экстрактах.
Во второй серии изучали влияние экстракта семян лотоса орехоносного
на сердечный ритм крыс. Экспериментальным животным вводили экстракт
семян лотоса орехоносного в дозе 50 мг/кг массы тела внутрижелудочно с
помощью зонда ежедневно в течение 14 дней. Контрольным животным
вводили физиологический раствор по той же схеме.
В третьей серии изучали физиологические эффекты экстракта семян
лотоса орехоносного и их зависимость от длительности введения на
показатели ориентировочно-исследовательского поведения и уровень
тревожности крыс в Суок-тесте, показатели лейкоцитарной формулы,
фагоцитарной активности нейтрофилов, уровень ТБК-активных веществ и
каталазную активность в ткани печени, плазме и миокарде. При этом
экстракт семян лотоса орехоносного в дозе 50 мг/кг массы тела вводили в
течение 7, 14, 21, 28 и 42 дней.
В четвертой экспериментальной серии изучали дозозависимое влияние
экстрактов листьев, лепестков, семян и коробочек лотоса орехоносного в
дозах 50, 100, 200 и 400 мг/кг на поведенческие и психофизиологические
показатели (структуру ориентировочно-исследовательского поведения,
эмоциональность, двигательную активность, уровень тревожности в Суок-
тесте и поведение отчаяния в тесте Порсолт), показатели крови и иммунные
реакции (лейкоцитарную формулу, фагоцитарную активность нейтрофилов и
уровень ИЛ-1β), свободнорадикальный гомеостаз (скорость спонтанного и
аскорбатзависимого ПОЛ, исходный уровень МДА и каталазная активность в
ткани печени и семенниках). Экстракты вводили животным
внутрижелудочно в течение 14 дней.
В пятой серии экспериментов изучали влияние хронического введения
(9 недель) экстрактов семян, листьев, лепестков и коробочек лотоса
орехоносного в дозе 50 мг/кг массы тела в условиях экспериментальной
дислипидемии: обогащения рациона крыс триглицеридами животного
происхождения и внутрижелудочном введении масляного раствора
холестерина – на поведенческие и психофизиологические показатели
(структуру ориентировочно-исследовательского поведения,
эмоциональность, двигательную активность, уровень тревожности в Суок-
тесте и поведение отчаяния в тесте Порсолт), показатели крови
(лейкоцитарную формулу, фагоцитарную активность нейтрофилов и общее
количество лейкоцитов), интенсивность свободнорадикального окисления
(уровень ТБК-активных продуктов и каталазную активность в ткани печени,
семенниках, миокарде, эритроцитах, селезенке, гипоталамусе коре),
активность ферментативного звена антиоксидантной системы (уровень
церулоплазмина в эритроцитах и плазме крови, активность СОД в плазме).
Дислипидемию моделировали введением крысам масляного раствора
 8
холестерина в дозе 100 мг/кг массы тела (Коренская И.М. и др., 2004).
Холестерин растворяли в растительном масле и вводили животным
внутрижелудочно с помощью зонда в течение 9 недель. В корм животным
добавляли 30% животных жиров.
Изотонический раствор NaCl и экстракт семян лотоса орехоносного
вводили внутрижелудочно с помощью зонда. Внутрижелудочное введение
изотонического раствора NaCl производилось для анализа влияния стресса,
получаемого животными во время процедуры введения экстракта.
Для исключения влияния гормонального фона самок на исследуемые
показатели, материал на анализ брали только в стадию диэструса. Для этого
определяли стадии эстрального цикла с помощью влагалищных мазков по
стандартной методике (Кабак Я.М., 1968).
Водно-спиртовой экстракт семян лотоса орехоносного (Nelumbo
nucifera) был приготовлен согласно протоколу WHO CG-04. Для этого 500 г
семян высушивали, измельчали до порошкообразного состояния и
подвергали спиртовому экстрагированию 50%-ным этиловым спиртом в
аппарате Сокслета, затем отгоняли спирт в ротационном испарителе. В итоге
получали около 5% вязкого смолообразного вещества. Семена, коробочки,
лепестки и листья лотоса орехоносного отдельно измельчали до
порошкообразного состояния. 20 г каждого порошка помещали в 500 мл
60%-ного этанола на 3 часа при 60oС в термостате. Спиртовые экстракты
фильтровали, затем отгоняли спирт в ротационном испарителе при 60°С.
Растворы экстрактов вводили животным внутрижелудочно с помощью зонда.
Перед экспериментом и по окончании введения экстрактов
анализировали изменения массы тела экспериментальных животных.
В работе использовали химические, физиологические, биохимические
методы и методы статистического анализа данных.
В полученных водно-спиртовых экстрактах лотоса орехоносного
определяли общее содержание флавоноидов методом ТСХ с
хроматоденситометрией.
ЭКГ регистрировали у бодрствующих нефиксированных животных на
аппаратно-программном комплексе «Варикард» («Рамена», Россия) по
методике (Курьянова Е.В., 2009; 2011). Данные обрабатывали в
компьютерной программе «ИСКИМ6» («Рамена», Россия) на отрезках ЭКГ
из 300 интервалов R-R. Рассчитывали частоту сердечных сокращений (ЧСС),
индекс напряжения на основе формулы Баевского (Баевский Р.М. и др., 2001)
при ширине класса гистограммы 7,8 мс:
ИН=(50/7,8)*(АМо/(2*Мо*ΔХ))*1000,
где SD (мс) – среднее квадратическое отклонение кардиоинтервалов, RMSSD
(мс) – квадратный корень из суммы квадратов разности величин
последовательных пар RR-интервалов, абсолютную мощность волн в
диапазонах: HF (0,9-3,5 Гц), LF (0,32-0,9 Гц), VLF (0,17-0,32 Гц), индекс
централизации IC (IC=(LF+VLF)/HF). ВСР анализировали до начала
введения и через 1 ч после последнего введения препаратов.
 9
Для функциональной оценки поведенческих и психофизиологических
показателей у животных применялись тесты стандартной модификации:
«Суок-тест» (СТ) (Калуев А.В., Туохимаа П., 2005), тест «Вынужденное
плавание» («Порсолт») (Эпштейн О.И., Молодавкин Г.М., Воронина Т.А.,
2003; Porsolt R.D., 1978).
Функциональную активность иммунной системы животных оценивали
на основании стандартных тестов: реакции гиперчувствительности
замедленного типа (РГЗТ) с определением индекса реакции, латексного теста
по изучению фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови,
изучения лейкоцитарной формулы и уровню интерлейкина-1β (Хаитов Р.М.,
Гущин И.С., Пинегин Б.В., Зебров А.И., 2005). Для определения
фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови применяли
латексный тест. Рассчитывали следующие показатели, отражающие
фагоцитарную активность нейтрофилов (Шигина Ю.В., 2006): фагоцитарный
индекс (ФИ) – процент фагоцитирующих нейтрофилов от общего их числа
(100 клеток): фагоцитарное число (ФЧ) – среднее число латекса и,
поглощенное одной клеткой. Уровень сывороточных ИЛ-1β тестировали
твердофазным иммуноферментным методом «сэндвича». Процедура
выполнения ИФА проводилась с использованием наборов фирмы «Bender
Medsystems».
Интенсивность окислительно-восстановительных процессов в
гомогенатах органов и крови оценивали посредством определения
интенсивности ПОЛ, уровня ТБК-активных продуктов и каталазной
активности. Об активности ПОЛ судили по исходному содержанию МДА, а
также по скорости спонтанного и аскорбатзависимого ПОЛ (Стальная И.Д.,
Горишвили Г.Т., 1977). В эритроцитах и плазме крови изучали уровень
церулоплазмина и активность СОД. Для определения активности СОД в
биологических материалах использовался метод, предложенный С. Чевари и
соавт. (1984). Метод основан на способности СОД конкурировать с
нитросиним теетразолием за супероксидные анионы. Определение
активности церулоплазмина проводили по методике, предложенной Э.В. Тен
(2007). В основе определения активности каталазы в гомогенате органов
лежит способность перекиси водорода образовывать с солями молибдена
стойкий окрашенный комплекс (Королюк М.А. с соавт., 1988).
Все полученные в ходе исследования данные статистически
обработаны с помощью критерия Стьюдента с поправкой Бонферонни,
различия считали достоверными при p<0,05.
Основные положения, выносимые на защиту.
1. Комплексный методологический подход к изучению физиологических
эффектов растительных экстрактов лотоса орехоносного позволяет
выявить широкий спектр изменений в деятельности нервной системы,
поведенческих характеристиках, иммунном и свободнорадикальном
статусе организма.
2. Биологически активные вещества лотоса орехоносного оказывают
выраженное влияние на двигательную и эмоциональную активность,
 10
исследовательское поведение, уровень тревожности и поведение отчаяния
у крыс, то есть оказывают выраженное анксиолитическое,
антидепрессивное, усиливающее ориентировочно-исследовательское
поведение эффекты, степень и направленность которых зависят от срока
введения, типа экстракта и проявляются дозозависимо.
3. Биологически активные вещества лотоса орехоносного обладают
выраженным иммунотропным действием. При этом экстракты усиливают
фагоцитарную активность нейтрофилов в зависимости от длительности
введения, типа и дозы экстракта и повышают уровень интерлейкина-1β.
4. Биологически активные вещества лотоса орехононосного обладают
антиоксидантными свойствами, проявления которых имеют
тканеспецифические особенности и определяются продолжительностью
введения, типом и дозой экстракта. В ткани печени антиоксидантные
свойства проявляются при всех исследуемых дозах, сроках введения и
типах экстракта.
Степень достоверности и апробация результатов. Достоверность
результатов выполненного исследования определяется статистически
значимыми объемами исследованных материалов (442 белых беспородных
крысах обоего пола, 5 экспериментальных серий), использованием
унифицированных химических, физиологических и биохимических методов
исследований; статистической обработкой результатов, выявление
достоверности различий по критерию Стьюдента с поправкой Бонферрони.
Апробация работы. Материалы диссертации апробированы на 7-й
международной научно-практической конференции «Достижения
фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины»
(Астрахань, 5-8 мая 2010); World Congress on Biotechnology (2011); второй
Международной научн. конф., посвященной 80-летию академика РАЕН,
заслуженного работника высшей школы РФ, доктора биологических наук,
профессора Д.Л. Теплого «Свободные радикалы, антиоксиданты и старение»
(Астрахань, 2011); XXX Международной научно-практической конференции
«Современная медицина и фармацевтика: актуальные проблемы и
перспективы развития» (Украина, 2012); Четвертой международной научно-
практической конференции «Высокие технологии, фундаментальные и
прикладные исследования в физиологии и медицине» (Санкт-Петербург,
2012); Международной научно-практической конференции «Актуальные
проблемы естественных и математических наук» (Новосибирск, 2013); IX
Международной научно-практической конференции «Достижение
фундаментальных наук и возможности трансляционной медицины в решении
актуальных проблем практического здравоохранения» (Астрахань, 2013);
Всероссийской научной конференции с международным участием
«Биотехнологии: наука и практика, инновации и бизнес» (Астрахань 2013);
Всероссийской научной конференции «Молекулярно-генетические и
фармакологические аспекты изучения ценных биологически активных
компонентов» (Астрахань, 24-25 апреля 2014 г.); II Международной научно-
практической конференции «Современная биология: актуальные вопросы»
 11
(17-18 октября 2014 г., Санкт-Петербург); IV Съезде физиологов СНГ (Сочи-
Дагомыс, 8-12 октября 2014 г.); Международной научно-технической
конференции «Продовольственная безопасность: научное, кадровое и
информационное обеспечение» (Воронеж, 13-14 ноября 2014 г.); 12th
International Conference on Chemistry and its Role in Development (ICCRD'12) –
(Mansoura & Sharm El-Sheikh, Egypt, 16-20 March 2015); VIII Московском
Международном Конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы
развития» (2015); Международной научной конференции, посвященной 75-
летию Адыгейского государственного университета «Механизмы
функционирования нервной, эндокринной и висцеральных систем в процессе
онтогенеза» (Адыгея, 2015); Keystone Symposia on Molecular and Cellular
Biology «New Therapeutics for Diabetes and Obesity» (17 April, 2016, California
USA).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 45 работ, общим
объемом 10,4 п.л. (авторский вклад 7,14 п.л.), в том числе статьи в научных
изданиях, рекомендованных ВАК для докторских диссертаций – 16, патентов
на изобретение – 3, статьи в прочих рецензируемых журналах – 3, статьи в
материалах международных и всесоюзных конференций – 21.
Благодарности. Автор выражает благодарность Курьяновой Е.В. и
Жуковой Ю.Д. за помощь в изучении влияния БАВ лотоса орехоносного на
вариабельность сердечного ритма.
Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора
литературы, описания материала и методов исследований, результатов
исследований и их обсуждения, заключения, выводов и библиографического
списка. Диссертация изложена на 265 страницах, содержит 38 таблиц и 50
рисунков. Список литературы включает 324 источника, в том числе 169
иностранных.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Химический состав экстрактов лотоса орехоносного

Полученные растворы с осадком были разделены на две фракции:
жидкую (G) и осадок. Из осадка проводили экстракцию флавоноидов
метанолом в течение 30 минут, получив метанольные экстракты для анализа
(MeOH).
Анализ флавоноидов в экстрактах показал, что экстракты, полученные
из разных частей растений, отличались по концентрации рутина и кверцетина
(табл.1). В жидкой фазе набольшая концентрация рутина была характерна
для экстракта лепестков, далее экстракты расположились в следующем
порядке: листья – коробочки. В жидкой фазе экстракта семян лотоса
орехоносного рутина не было. Концентрация кверцетина в жидкой фазе была
примерно одинаковой в экстрактах коробочек, листьев и лепестков лотоса
орехоносного, тогда как в экстракте семян концентрация кверцетина была
несколько ниже.
 12
В осадке МеОН рутин был обнаружен только в экстракте лепестков.
Содержание кверцетина было максимальным в экстракте листьев лотоса
орехоносного, а затем несколько снижаясь в экстрактах лепестков, коробочек
и семян.
Таблица 1
Концентрации кверцетина и рутина в экстрактах, мг/л
Экстракты лотоса Флавоноид Rf X (average)
орехоносного
рутин 0.33 4.893 мг
Коробочки G кверцетин 0.77 27.26 мг
рутин 0.30 16.63 мг
Листья G кверцетин 0.77 25.64 мг
рутин 0.28 29.50 мг
Лепестки G кверцетин 0.76 29.28 мг
рутин - -
Семена G кверцетин 0.77 15.01 мг
рутин - -
Коробочки MeOH кверцетин 0.78 14.85 мг
рутин - -
Листья MeOH кверцетин 0.78 43.12 мг
рутин 0.36 14.55 мг
Лепестки MeOH кверцетин 0.77 16.64 мг
рутин - -
Семена MeOH кверцетин 0.78 12.21 мг

Эффекты биологически активных веществ лотоса орехоносного на

поведение и вариабельность сердечного ритма

Поведенческие реакции в Суок-тесте в зависимости от

длительности введения. Изучение поведенческой и психофизиологической
активности экстракта семян лотоса орехоносного проводили на основании
изучения поведения лабораторных животных в Суок-тесте (СК) (в светлом и
темном отсеках), что позволило выявить наиболее значимые изменения у
особей, получавших экстракт семян лотоса орехоносного в динамике
(табл.2).
Наиболее значимые изменения поведенческих реакций были
характерны для животных, получавших экстракт семян лотоса орехоносного
в течение 21 дня. У животных данной группы наблюдалось достоверное
снижение латентации выхода из центральной зоны СТ и количества
остановок, а также увеличение числа стоек и посещенных сегментов в
светлом отсеке Суок-теста в сравнении с аналогичными показателями у
контрольных животных. Время, проведенное в светлом отсеке Суок-теста,
было больше, по сравнению с показателями у контрольных животных
(табл.2).
 13
Таблица 2
Влияние экстракта семян лотоса орехоносного (50 мг/кг) на поведение
животных в светлом отсеке Суок-теста
Изучаемые параметры Группы Динамика введения экстракта
M±m животных 7 дней 14 дней 21 день
ЛП выхода из центра, контроль 6,0±1,76 3,5±0,67 23,0±7,81 °
с экстракт 3,9±0,56 2,7±0,47 4,0±0,60 *
Длительность контроль 22,6±1,01 28,1±10,42 27,6±22,26
остановки, с экстракт 61,2±24,45 34,5±9,81 33,7±11,38
Число посещенных контроль 22,0±7,52 22,3±4,41 4,4±3,97 °
сегментов экстракт 14,0±5,01 16,5±3,39 16,2±4,99*
Стойки контроль 0 0,6±0,27 0
экстракт 0 0,3±0,15 0,2±0,22
Остановки контроль 2,7±1,01 2,3±0,62 0,2±0,13
экстракт 1,9±0,70 2,4±0,65 1,7±0,48 *
Заглядывания вниз контроль 2,4±0,87 7,6±1,76 ° 2,9±0,95
экстракт 3,3±0,99 5,3±1,18 5,4±1,95
Направленные контроль 1,7±0,69 2,2±0,55 1,1±0,48
движения головой экстракт 0,4±0,31 3,1±0,71 °° 1,2±0,36 °
Проведенное время в контроль 116,7±37,47 156,2±30,55 38,4±27,36 °
отсеке, с экстракт 64,9±18,76 139,3±29,6° 117,2±24,4*
Кратковременный контроль 7,9±7,28 4,5±3,01 3,7±2,56
груминг, с экстракт 12,0±6,41 11,5±3,99 18,6±5,44*
Продолжительность контроль 27,1±16,23 41,4±13,32 29,0±26,85
остановок, с экстракт 21,0±9,9 51,3±17,89 60,6±24,14
Падения контроль 0 0,2±0,13 0
экстракт 0 0 0
Соскальзывания лап контроль 1,1±0,54 2,3±0,58 1,1±0,46
экстракт 0,7±0,42 0,6±0,29* 1,2±0,32
Условные обозначения: * - достоверность различий между группами животных по сравнению с
интактным контролем; ° - достоверность различий по сравнению с предыдущей группой; *(°) -
p<0,05; ** (°°) - p<0,01; *** (°°°) - p<0,001 (по Стьюденту с поправкой Бонферрони); ЛП –
латентный период.
Наиболее значимые изменения поведения были характерны при 14-21-
дневном введении экстракта семян. При этом происходило увеличение
двигательной активности (количество посещенных животными сегментов)
при одновременном усилении ориентировочно-исследовательской
составляющей (число направленных движений головой и заглядываний
вниз). Так как показатели груминга и количества остановок животными
значительно не изменялись, полученные данные характеризуют усиление
ориентировочно-исследовательского поведения и снижение
эмоциональности у животных. Кроме того, результаты, полученные в работе,
указывают на наличие у экстракта семян лотоса орехоносного
анксиолитической активности. Так, в светлом отсеке Суок-теста во всех
экспериментальных группах происходило снижение показателя
 14
соскальзывания лап у животных в сравнении с контролем, а также показатель
падений у животных был равен нулю.
Дозозависимые поведенческие и психофизиологические эффекты
экстрактов листьев, лепестков, семян и коробочек лотоса орехоносного.
Экстракты лотоса орехоносного, вводимые в разных дозах, изменяли
поведение животных в Суок-тесте, при этом степень выраженности
изменения поведенческих реакций зависела от вида и дозы экстрактов.
Экстракт эхинацеи, выбранный в качестве препарата сравнения, приводил к
повышению ориентировочно исследовательской активности при снижении
уровня реактивности у животных.
Экстракт семян, вводимый животным в дозе 100 мг/кг, способствовал
более значимым изменениям поведенческих реакций. При этом в Суок-тесте
происходило увеличение количества заглядываний вниз и направленных
движений головой, возрастало время, проведенное животными в светлом
отсеке теста, длительность и количество остановок в сравнении с
показателями у контрольных животных.
Экстракт лепестков лотоса орехоносного имел общую сходную
направленность влияния на поведенческие реакции в Суок-тесте, но сила
влияния имела дозозависимый характер. Под действием экстракта лепестков
лотоса орехоносного в дозе 100 мг/кг происходило значительное увеличение
числа остановок и времени, проведенном животными в светлом отсеке теста,
кроме того, несколько увеличивалось количество заглядываний вниз,
направленных движений головой и переходов между отсеками аллеи
относительно аналогичных показателей у контрольных животных.
Внутрижелудочное введение экстракта лепестков лотоса орехоносного в
дозах 200 и 400 мг/кг приводило к сходным, но менее значимым изменениям
поведения.
Влияние экстракта коробочек лотоса орехоносного на поведение
животных в Суок-тесте было наиболее выражено в дозах 100 и 200 мг/кг.
Введение экстракта коробочек лотоса орехоносного в дозе 100 мг/кг
приводило к существенному увеличению числа заглядываний вниз и
направленных движений головой, возрастанию количества остановок при
небольшом снижении их длительности, увеличению времени, проведенном в
светлом отсеке Суок-теста, и числа переходов между отсеками, а также
возрастанию процента горизонтальной активности в сравнении с
показателями в контроле.
Внутрижелудочное введение экстракта листьев лотоса орехоносного в
дозе 100 мг/кг приводило к сходным, но более значимым по сравнению с
другими дозами изменениям. При этом увеличилось время латентации,
возрастало количество остановок при небольшом снижении их длительности,
увеличивалось число заглядываний вниз, возрастало количество переходов
между отсеками в сравнении с показателями в контроле. Под действием
экстракта листьев лотоса орехоносного концентрацией 200 мг/кг
наблюдалось значимое увеличение числа коротких остановок, возрастание
количества направленных движений головой, небольшое повышение
 15
времени латентного периода первого перемещения относительно показателей
у контрольных животных. Экстракт листьев лотоса орехоносного, вводимый
животным в дозе 400 мг/кг, приводил к значительному повышению времени,
проведенном животными в светлом отсеке теста, некоторому увеличение
ориентировочной активности в виде количества заглядываний вниз и
направленных движений головой, а также числу коротких остановок в
сравнении с показателями в контроле.
Таким образом, биологически активные вещества коробочек,
лепестков, листьев и семян лотоса орехоносного имели общую
направленность влияния на поведение животных в Суок-тесте. При этом
происходила активизация ориентировочно-исследовательского поведения на
фоне снижения эмоциональности и уровня тревожности крыс под действием
БАВ лотоса орехоносного, но степень выраженности изменений зависела от
дозы и вида экстракта. Наиболее выраженное действие экстрактов
проявлялось при дозах 100-200 мг/кг, по видам экстрактов наиболее
эффективное влияние на психофизиологические показатели в Суок-тесте
было характерно для БАВ лепестков и коробочек лотоса орехоносного.
Как показали наши исследования, экстракт эхинацеи не оказывал
существенного влияния на поведение животных в тесте Порсолт, все
изучаемые параметры практически не отличались от показателей у
контрольных животных. Внутрижелудочное введение экстракта семян в
дозах 50-200 мг/кг приводило к снижению поведения отчаяния, то есть имела
место антидепрессивная направленность (табл.3). Наиболее значительные
изменения поведения отчаяния были характерны для экстракта в дозе 50
мг/кг, который способствовал снижению времени латентного периода до
первого движения, значительно увеличивал время активного плавания в
цилиндре и одновременно снижал время, затрачиваемое животным на
иммобилизацию, тогда как остальные показатели изменялись менее значимо
в сравнении с аналогичными показателями у контрольных животных.
Экстракт листьев тоже имел антидепрессивные свойства в тесте
Порсолт в дозах 50 и 400 мг/кг, но их проявление было менее выраженным.
При этом происходило снижение времени, затрачиваемого животными на
иммобилизацию (табл.3), относительно аналогичного показателя у
контрольных животных. Экстракт листьев в начальной дозе также
способствовал небольшому снижению времени до первой иммобилизации и
числу подныриваний животными в сравнении с контрольными показателями.
Под действием экстракта коробочек лотоса орехоносного происходило
снижение поведения отчаяния в тесте Порсолт, наиболее выраженным – для
начальной дозы экстракта 50 мг/кг. Так, в этой группе происходило
значительное повышение времени активного плавания, снижение времени
иммобилизации и времени до первой иммобилизации в сравнении с
аналогичными показателями в контрольной группе.
Экстракт лепестков лотоса орехоносного приводил к неоднозначным
результатам влияния на поведение отчаяния в тесте Порсолт. Так, под
действием дозы экстракта 50 мг/кг происходило снижение времени
 16
латентного периода до первого движения, снижение времени пассивного
плавания, времени иммобилизации животными и числа подныриваний
относительно аналогичных показателей в контроле.
Таблица 3
Изменение поведения отчаяния в тесте Порсолт в зависимости от вида и дозы
получаемого животными экстракта
Время до 1-
Активное Пассивное Иммобили
Группы ЛП ой иммо-
движение движение зация
билизации
Контроль 1,3±0,28 63,1±16,7 16,9±2,10 4,8±1,13 87,0±15,41
Экстракт
2,0±0,51 67,5±8,69 18,1±4,07 3,8±1,01 72,4±17,04
эхинацеи
50 мг/кг 1,0±0 136,6±19,96* 13,6±2,26 0,5±0,32** 38,8±25,46
100 мг/кг
ЭСЛ

1,1±0,14 88,6±22,11 15,0±1,34 2,6±0,92 ° 72,7±22,01

200 мг/кг 1,4±0,24 96,4±24,49 15,7±2,45 1,6±0,64 * 64,4±23,58
400 мг/кг 3,0±0,73*° 113,9±19,23 15,6±3,3 3,0±1,21 44,5±19,19
50 мг/кг 1,4±0,16 64,6±17,71 11,6±2,17 2,0±0,47 * 60,1±16,60
ЭЛиЛ

100 мг/кг 1,9±0,88 54,2±15,20 19,0±2,31 ° 3,2±0,75 101,4±14,56

200 мг/кг 2,1±0,62 60,2±24,67 15,4±3,82 2,6±0,65 99,6±22,64
400 мг/кг 1,4±0,30 67,7±22,60 11,0±1,76 1,7±0,53 * 76,7±22,50
50 мг/кг 3,0±1,21 156,5±6,62** 14,4±2,60 0,7±0,67** 12,7±12,66*
100 мг/кг
ЭКЛ

1,4±0,26 95,3±22,49 ° 14,4±2,69 1,5±0,46 * 67,2±21,02 °

200 мг/кг 0,7±0,12 ° 106,6±24,21 25,2±14,55 0,8±0,36** 37,7±16,92
400 мг/кг 1,5±0,26 ° 121,1±24,47 10,2±2,34 0,8±0,36** 46,4±23,44
50 мг/кг 0,7±0,18 68,0±23,80 9,3±2,51 * 2,0±0,86 54,7±21,48
ЭЛеЛ

100 мг/кг 0,8±0,16 86,5±27,06 12,4±3,41 2,0±1,00 33,3±19,20 *

200 мг/кг 0,8±0,25 57,5±25,28 9,1±2,85 1,2±0,56 * 43,8±23,25
400 мг/кг 0,7±0,31 69,1±27,62 6,8±2,56 1,5±0,75 * 32,2±19,58 *
Условные обозначения: * - достоверность различий по сравнению с контрольной группой, ° -
достоверность различий по сравнению с физиологическим раствором (по Стьюденту с поправкой
Бонферрони); * (°) – р≤0,05; ** (°°) – р≤0,01; *** (°°°) – р≤0,001.
Таким образом, под действием экстрактов лотоса орехоносного
происходили значительные изменения поведения отчаяния животных в тесте
Порсолт. При этом все виды экстракта имели антидепрессивную
направленность, но наиболее выраженные свойства характерны для
экстракта коробочек лотоса орехоносного по сравнению с остальными
видами экстрактов. Максимально эффективной дозой оказалась доза
экстракта коробочек 50 мг/кг.

Эффекты биологически активных веществ экстрактов лотоса

орехоносного при экспериментальной дислипидемии на поведенческие и
психофизиологические показатели. В тесте «вынужденного плавания»
длительное введение экстрактов лотоса орехоносного при
экспериментальной дислипидемии не только не приводило к снижению
поведения отчаяния, а даже отдельные виды усиливали, что было характерно
для экстракта коробочек, экстрактов лепестков и коробочек на фоне
 17
экспериментальной дислипидемии. При этом происходило значительное
увеличение времени иммобилизации животных на фоне снижения времени,
приходящегося на активное и пассивное плавание (табл.4).
Таблица 4
Влияние экстрактов семян, листьев, лепестков и плодов лотоса орехоносного
на поведение отчаяния в тесте Порсолт при экспериментальной
дислипидемии
ЛП до 1 ЛП до 1 Активное Пассивное Иммобилизация
движения иммобили- Плавание плавание (сек)
(сек) зации(сек) (сек) (сек)
Контроль 5,2±0,87 59,2±8,07 120,3±4,93 41,3±3,86 16,7±2,25
Физ р-р 16,4±2,48** 60,5±8,02 117,4±7,63 60,0±8,27 18,8±1,87
ЭЛеЛ 8,9±1,49*° 85,6±10,81 126,4±5,02 28,7±4,94°° 24,9±7,12
ЭЛеЛ+ЭДЛ 9,4±2,06*° 76,0±9,10 98,4±9,15 43,6±8,90 40,0±2,97 *** °°
ЭЛиЛ 6,0±0,98°° 63,7±6,05 122,1±3,59 42,0±6,67 18,7±2,64
ЭЛиЛ+ЭДЛ 4,3±0,81 °° 75,4±7,44 132,6±4,24 31,9±2,65°° 15,6±3,67
ЭСЛ 7,8±2,65° 87,8±16,07 131,2±6,74 27,4±5,84°° 21,4±3,06
ЭСЛ +ЭДЛ 4,1±0,67 °° 82,6±14,92 122,0±7,62 43,1±6,46 14,6±4,03
ЭКЛ 11,4±2,51* 69,0±14,11 107,5±11,0 32,6±5,18 ° 38,6±7,61 ** °
ЭКЛ+ЭДЛ 9,8±3,00° 71,5±10,33 94,8±17,85 42,3±6,10 42,7±8,36 ** °
ЭДЛ 5,4±1,89 °° 68,3±9,64 106,3±8,81 30,9±4,68°° 42,9±8,85 **°
Условные обозначения: * - достоверность различий по сравнению с контрольной группой, ° -
достоверность различий по сравнению с физиологическим раствором (по Стьюденту с поправкой
Бонферрони); * (°) – р≤0,05; ** (°°) – р≤0,01; *** (°°°) – р≤0,001;
В Суок-тесте результаты получились иной направленности: под
действием экстрактов семян и лепестков лотоса орехоносного происходило
снижение уровня тревожности. Ориентировочно-исследовательское
поведение более значимо активизировалось под действием экстракта листьев
лотоса орехоносного, далее влияние экстрактов на исследовательскую и
двигательную активность располагались в следующей последовательности:
коробочки, лепестки и семена лотоса орехоносного.

Волновые характеристики вариабельности сердечного ритма при

введении растительного экстракта семян лотоса. Частота сердечных
сокращений самцов и самок крыс контрольной и опытной групп до начала
введения экстракта колебалась в пределах 330-365 уд/мин, что
соответствовало состоянию спокойного бодрствования. В спектре ВСР
доминировали HF-волны средней мощности. Значения показателей
вариабельности ритма (SDNN и RMSSD) и ИН находились в пределах,
характерных для состояния вегетативного баланса (Курьянова Е.В. и соавт.,
2014).
После введения экстракта семян лотоса у самцов крыс среднее
значение ЧСС в группе выросло на 8% (р<0,01), SDNN сократилось на 25%
(р<0,05), RMSSD снизился на 37% (р<0,001), при этом ИН возрос на 54%
(р<0,05) (табл. 10). Ригидность сердечного ритма определялась почти
двукратным ослаблением мощности HF-волн (р<0,01). То есть, у самцов
 18
крыс, получавших экстракт семян лотоса, отмечалось ослабление
доминирующей роли автономного контура в формировании вариабельности
кардиоинтервалов, что может свидетельствовать о повышении
симпатоадреналовых влияний, согласно Баевскому Р.М. (2001). Но поскольку
у самцов, принимавших плацебо, наблюдались аналогичные, хотя и не столь
существенные сдвиги ЧСС и ВСР, то изменения показателей ВСР у опытных
самцов крыс следует рассматривать как неспецифические.
На фоне приема экстракта семян лотоса ЧСС самок крыс практически
не изменилась, но SDNN снизилось (на 28%, р<0,05), ИН увеличился (на
68%, р<0,01). Снижение вариабельности и рост напряженности сердечного
ритма опытных самок, в отличие от самцов, определялись падением
мощности волн LF (р<0,05) и VLF (р<0,05).
Таблица 5
Показатели ВСР самцов и самок нелинейных крыс, получавших и не
получавших экстракт семян лотоса орехоносного (M±m)
Контроль
Экстракт семян лотоса орехоносного
(физиологический раствор)
Показатели
Пол Пол
ВСР До После До После
животных животных
введения введения введения введения
(n) (n)
ЧСС, ♂(4) 349,8±14,4 386,3±24,6 ♂(14) 360,8±7,2 390,1±5,7 **
уд/мин ♀(4) 356,8±19,2 363,3±20,4 ♀(15) 361,0±8,4 372,3±5,7
♂(4) 4,2±1,0 1,8±0,4 ♂(14) 5,7±0,9 2,8±0,3 **
HF, мс2
♀(4) 5,1±1,7 4,0±1,2 ♀(15) 3,8±0,7 2,4±0,3
♂(4) 1,6±0,7 0,5±0,2 ♂(14) 2,0±0,5 2,0±0,6
LF, мс2
♀(4) 1,3±0,3 1,1±0,5 ♀(15) 1,6±0,4 0,7±0,2 *
♂(4) 2,5±1,5 0,5±0,2 ♂(14) 1,5±0,5 1,6±0,5
VLF, мс2
♀(4) 0,6±0,1 0,7±0,1 ♀(15) 2,3±0,8 0,6±0,1 *
♂(4) 57,8±4,7 65,1±8,9 ♂(14) 61,1±6,0 52,6±6,4
HF%
♀(4) 68,6±8,5 68,8±8,2 ♀(15) 64,8±5,4 69,1±2,7
♂(4) 16,7±4,7 16,4±4,2 ♂(14) 23,6±4,6 27,6±4,8
LF%
♀(4) 21,1±6,0 18,7±4,0 ♀(15) 17,3±2,1 15,5±1,9
♂(4) 25,4±10,6 18,5±6,2 ♂(14) 15,3±3,0 19,8±2,5
VLF%
♀(4) 10,3±2,8 12,5±4,1 ♀(15) 18,0±5,9 15,5±1,9
♂(4) 1,5±1,1 0,6±0,2 ♂(14) 0,8±0,2 1,1±0,3
IC, отн.ед.
♀(4) 0,6±0,2 0,6±0,2 ♀(15) 1,4±0,6 0,6±0,06
RMSSD, ♂(4) 4,5±0,6 2,8±0,3 * ♂(14) 4,6±0,4 2,9±0,2 ***
мс ♀(4) 4,3±0,7 5,3±1,4 ♀(15) 3,6±0,3 3,0±0,2
♂(4) 3,8±0,5 2,8±0,8 ♂(14) 5,1±0,4 3,9±0,3 *
SDNN, мс
♀(4) 3,8±0,4 4,3±0,4 ♀(15) 4,7±0,5 3,4±0,2 *
ИН, отн. ♂(4) 37,6±5,1 105,0±23,9* ♂(14) 46,5±4,9 71,6±9,5 *
ед. ♀(4) 58,9±8,8 56,8±9,8 ♀(15) 53,4±8,0 89,4±9,4 **
Условные обозначения: *, **, *** – р<0,05, р<0,01, р<0,001 по сравнению с исходным состоянием.
В этом случае можно заключить, что у самок крыс, получавших
экстракт семян лотоса, отмечался рост напряженности сердечного ритма при
значительном ослаблении активности центрального контура и тенденции к
снижению влияний автономного контура регуляции.
 19
Таким образом, в данной главе мы получили результаты исследования
влияния БАВ лотоса орехоносного на поведенческие и
психофизиологические показатели. Показали, что биологически активные
вещества лотоса способствуют активизации ориентировочно-
исследовательского поведения при уменьшении эмоциональности, уровня
тревожности и поведения отчаяния.
При этом найденные эффекты БАВ зависят от вида экстракта, его дозы
и длительности введения.
Во многих работах показана тесная связь нервной системы и
поведенческих реакций с активностью нейромедиаторных систем мозга
(Исмайлова Х.Ю. и др., 2007; Майоров О.Ю., 2011; Ellison G., 1975;
Каркищенко Н.Н. и др., 2011). Приводятся медиаторы, которые связывают с
контролем за поведением катехоламины: дофамин, норадреналин, адреналин,
диоксифенилаланин (Сеин О.Б. и др., 2012). Депрессивные состояния также
связывают с нейромедиаторными системами мозга – низким содержанием
норадренергической, дофаминергической, серотонинергической системами
(Перленбетов М.А., 2005; Sugimoto Y. et al., 2010).
Снижение поведения отчаяния под действием экстрактов лотоса
орехоносного может быть связано с содержащимися в их составе
алкалоидами. Показано, что алкалоид неферин оказывает антидепрессивные
эффекты у мышей, сравнимые с типичными антидепрессантами (Sugimoto Y.
et al., 2010). Эти эффекты опосредованы 5-НТ 1А рецепторами, центральные
эффекты неферина связаны с серотонинергической системой. Содержащийся
в семенах лотоса алкалоид неферин проявляет антидепрессивные свойства за
счет повышения плотности 5-HT 1A рецепторов к серотонину, влияет на
обмен серотонина и серотониновую трансмиссию в мозге (Kang M., 2005;
Sugimoto Y. 2010). Другим классом химических веществ, опосредующих
физиологические эффекты являются флавоноиды. В работе A. Roohbakhsh и
соавт. (2014) показаны антидепрессивные и нейропротекторные эффекты
флавоноидов: флавоноиды ослабляли тревожное поведение, проявляли
антидепрессивное действие, опосредованное серотонинергической
активностью 5-НТ 1А рецепторов, при участии каппа-опиоидных
рецепторов, а также улучшали обучение и память у животных в
эксперименте.
В наших экспериментах снижение уровня тревожности в Суок-тесте
происходило под действием экстрактов семян и лепестков лотоса
орехоносного, в которых, по данным химического анализа, флавоноидов
содержится больше. Неферин имеет успокоительные эффекты, аналогичные
диазепаму. Показано значительное снижение уровня тревожности под
действием алкалоида неферина, который в большом количестве содержится в
семенах, в нашем исследовании экстракт семян показал высокие
анксиолитические свойства.
Флавоноид гесперидин является лигандом для бензодиазепина,
серотонина и глутамата. На ориентировочно-исследовательское поведение
все виды экстрактов оказывали стимулирующее действие. По интенсивности
 20
активизации поведения экстракты располагались следующим образом:
лепестки – коробочки – семена – листья.
Результаты анализа ВСР контрольных и опытных крыс
свидетельствуют о том, что введение экстракта семян лотоса может
модулировать регуляторные влияния на сердце и приводить к повышению
напряженности сердечного ритма. Согласно Р.М. Баевскому и соавт. (2001),
рост напряженности сердечного ритма может определяться усилением
симпатических или снижением парасимпатических влияний. Вероятно, в
нашем случае изменения ЧСР и ВСР самцов крыс, получавших экстракт
семян лотоса, носят неспецифический характер, поскольку у крыс
контрольной группы (особенно самцов) наблюдались аналогичные
изменения сердечного ритма.
Возможными причинами роста ЧСС и напряженности сердечного ритм
могут быть БАВ семян лотоса орехоносоного. Как показали некоторые
исследования (Li G.R. et al., 1990), основной алкалоид семян лотоса –
неферин – снижает амплитуду потенциалов действия миокарда, угнетает
медленные входящие Na+- и Ca2+-токи, что способствует снижению ЧСС.
Вместе с тем, неферин влияет на обмен серотонина, способствует росту
плотности 5-HT 1A рецепторов (Kang M. et al., 2005; Sugimoto Y. et al., 2010).
Серотонинергическая система имеет периферическое звено и
рассматривается сейчас как один из отделов вегетативной нервной системы
(Лычкова А.Э., 2005), эффекты которого могут быть синергичны эффектам
симпатического отдела, особенно, если возникает некоторый дефицит
симпатоадреналовых влияний. Возможно, на начальных сроках введения
экстракта имело место урежение ЧСС, что могло спровоцировать усиление
симпатических и серотонинергических влияний.

Иммуностимулирующие эффекты биологически активных веществ

лотоса орехоносного

Определение периода наиболее выраженного эффекта экстракта

семян лотоса орехоносного на лейкоцитарную формулу крови и
фагоцитарную активность нейтрофилов. Анализ изменений
лейкоцитарной формулы под влиянием экстракта семян лотоса орехоносного
в течение 7 дней показал нарастание относительного количества моноцитов и
нейтрофилов (p<0,05) и (p<0,001) соответственно на фоне снижения числа
лимфоцитов (p<0,001). При оценке показателей крови у животных 2-ой
экспериментальной группы (14 дней введения экстракта) был также выявлен
сдвиг лейкоцитарной формулы в сторону увеличения числа нейтрофилов
(p<0,05) и моноцитов при одновременном снижении числа лимфоцитов
(p<0,01), но изменение количества моноцитов носило недостоверный
характер (p>0,05) (табл.6).
Полученные результаты указывают на вовлечение в реализацию
иммунотропного действия экстракта семян лотоса орехоносного при
 21
применении курсом 7-14 дней макрофагально-фагоцитарного звена
иммунитета.
Таблица 6
Влияние экстракта семян лотоса орехоносного в динамике его
внутрижелудочного введения на показатели лейкоцитарной формулы
Экспериментальные Нейтрофилы, Лимфоциты, Эозинофилы Моноциты,
группы M±m, % M±m, % M±m, % M±m, %
Контроль 1
28,9±2,20 66,6±2,07 2,2±0,32 2,2±0,33
(интактный), n=12
7 дней (n=10) 27,1±2,97 67,4±2,61 3,1±0,80 2,4±0,34
орехоносного (физ. раствор)
Экстракт лотоса Контроль 2

14 дней (n=10) 37,2±2,91* ° 57,2±2,94* ° 2,7±0,49 2,9±0,61

21 день (n=10) 41,0±2,99** 51,6±5,22** 0,9±0,31**°° 6,4±2,32
28 дней (n=10) 27,3±3,40° 52,8±4,30 3,6±1,00° 16,2±3,25***
42 дня (n=15) 28,5±4,43 46,5±3,54*** 2,8±0,64** °22,2±5,84**
7 дней (n=10) 51,2±4,97***## 43,8±5,12***### 2,0±0,51 3,9±0,65* °°
14 дней (n=10) 44,6±3,80** 50,3±4,09** 1,6±0,42 3,4±0,58
21 день (n=10) 40,1±3,52* 55,6±3,18** 2,1±0,71 6,2±2,00
28 дней (n=10) 19,5±2,24*°°° 71,0±2,91## °° 4,6±0,64**° 5,0±1,33* ###
42 дня (n=15) 25,4±2,39 61,0±3,35 # ° 5,0±0,78*# 8,6±2,87*###
Условные обозначения: * - достоверность различий между группами животных по сравнению с
интактным контролем; # - достоверность различий между животными, получавшими экстракт
семян лотоса орехоносного и контролем 2 (животными, получавшими физиологический раствор);
° - достоверность различий по сравнению с предыдущей группой; *(#, °) - p<0,05; ** (##, °°) -
p<0,01; *** (###,°°°) - p<0,001 (по Стьюденту с поправкой Бонферрони).
При введении экстракта семян лотоса орехоносного в течение 21 дня
показатели крови стабилизировались, приближаясь к значениям в контроле 2
(p>0,05) (табл.6), отличаясь от показателей интактных животных, при этом
количество нейтрофилов увеличивалось при одновременном снижении числа
лимфоцитов. *#
*#
100 % *# *# °° 12 * ° °° *#
80
°°° # # 10 ° # ° *
° * 8 *# ° °°° °
60
°° *
* * 6
40
20 4
2
0
7 дней 14 21 28 42дня 0
дней день дней 7 дней 14 дней 21 день 28 дней 42 дня

контроль контроль 2 ЭСЛ контроль контроль 2 ЭСЛ

Рис.1. Влияние экстракта семян лотоса Рис.2. Влияние экстракта семян лотоса
орехоносного при разной орехоносного при разной
продолжительности введения на ФИ продолжительности введения на ФЧ, ед.
Условные обозначения: * - достоверность различий между группами животных по сравнению с интактным
контролем; # - достоверность различий между животными, получавшими экстракт семян ЛО и контролем 2
(животными, получавшими физ.раствор); ° - достоверность различий по сравнению с предыдущей группой;
*(#, °) - p<0,05; ** (##, °°) - p<0,01; *** (###,°°°) - p<0,001 (по Стьюденту с поправкой Бонферрони).
Внутрижелудочное введение экстракта семян лотоса орехоносного в
течение 7 дней приводило к некоторому подавлению фагоцитарной
 22
активности нейтрофилов по сравнению с аналогичным показателем у
животных контрольной группы 2, при этом наблюдалось снижение и
фагоцитарного числа, и фагоцитарного индекса (p<0,001) (рис.1,2).
Применение экстракта на протяжении 14 дней сопровождалось увеличением
числа активных фагоцитов практически в 1,5 раза (p<0,001) при усилении
напряженности фагоцитоза не более чем на 15% (p<0,05).
Введение экстракта семян лотоса орехоносного в течение 21 дня
сопровождалось небольшим увеличением фагоцитарной активности
нейтрофилов (p>0,05). Увеличение продолжительности введения изучаемого
средства (28-42 дня) приводило к значительному усилению фагоцитарной
активности нейтрофилов, что проявлялось увеличением числа
фагоцитируемого материала и количества активных клеток в 1,3-2 раза
(p<0,001) (рис.1,2).
Таким образом, полученные результаты показали зависимость
изменения разных звеньев лейкоцитарной формулы в зависимости от
длительности введения экстракта семян лотоса орехоносного. Так, через 7-14
дней введения экстракта активизируется макрофагально-фагоцитарное звено
иммунитета, тогда как после 28-42 дней – специфическое звено иммунитета.
Фагоцитарная активность нейтрофилов значительно возрастает на 14-42 дни
введения экстракта семян лотоса орехоносного. Эти данные указывают на
наличие у экстракта семян лотоса орехоносного иммунотропного действия,
проявление которого зависит от продолжительности введения экстракта.

Эффекты экстрактов лотоса орехоносного на лейкоцитарную

формулу, фагоцитарную активность нейтрофилов и уровень ИЛ-1β в
зависимости от дозы. Все изучаемые экстракты лотоса орехоносного
изменяли показатели лейкоцитарной формулы, сдвигая ее в сторону
повышения неспецифического иммунитета, но интенсивность влияния
зависела от вида и дозы экстракта. Это выражалось в увеличении числа
нейтрофилов при снижении количества лимфоцитов. Экстракт коробочек
лотоса орехоносного изменял показатели лейкоцитарной формулы в
конечных дозах – 200 и 400 мг/кг, экстракт лепестков, напротив, в дозах 50,
100 и 200 мг/кг, тогда как экстракты семян и листьев лотоса орехоносного в
дозах 50 и 400 мг/кг (табл.7).
Влияние экстрактов лепестков, листьев, семян и коробочек лотоса
орехоносного разной концентрации на фагоцитарную активность
нейтрофилов имело свои особенности. Представляло интерес и наличие
иммунотропного действия экстрактов лотоса орехоносного в принципе, его
направленность (иммуностимуляция или иммуносупрессия) и интенсивность
в сравнении с экстрактом эхинацеи. При энтеральном введении крысам
экстракта эхинацеи был получен ожидаемый нами эффект усиления
фагоцитарной функции. Полученные результаты свидетельствуют о наличии
у экстракта коробочек лотоса орехоносного положительного
иммунотропного действия в отношении фагоцитарных иммунных реакций,
преимущественно ФИ. Увеличение ФЧ показательно только лишь под
 23
влиянием больших доз (эквивалентных 200 и 400 мг/кг) экстракта коробочек
лотоса орехоносного. То есть максимальный иммуннотропный эффект
наблюдался при максимальных дозах экстракта 200 и 400 мг/кг.
Таблица 7
Влияние экстрактов лепестков, листьев, семян и коробочек лотоса
орехоносного разной концентрации на лейкоцитарную формулу
Группы животных Нейтрофилы, % Лимфоциты, % Моноциты, % Эозинофилы, %
Контроль 29,4±2,38 46,0±1,53 22,3±1,99 1,57±0,429
Экстракт эхинацеи 26,4±4,52 45,2±1,86 23,6±3,50 4,80±0,860**
Экстракт коробочек лотоса орехоносного в разной концентрации (ЭКЛ)
ЭКЛ-1 – 50 мг/кг 27,0±3,21 53,2±3,57 17,0±1,05 * 1,60±0,250
ЭКЛ-2 – 100 мг/кг 26,4±3,12 55,0±5,68 16,4±2,75 2,40±0,680
ЭКЛ-3 – 200 мг/кг 38,3±3,12 * ° 47,2±3,28 13,5±1,23 ** 1,17±0,401
ЭКЛ-4 – 400 мг/кг 40,8±4,06 * 36,3±3,17 * ° 23,2±1,74 °°° 1,33±0,422
Экстракт лепестков лотоса орехоносного в разной концентрации (ЭЛеЛ)
ЭЛеЛ-1 – 50 мг/кг 43,8±3,65 ** 40,4±1,75 * 15,2±1,93 * 0,75±0,250
ЭЛеЛ-2 – 100 мг/кг 37,0±1,93 * 41,7±1,91 19,8±0,79 ° 1,50±0,619
ЭЛеЛ-3 – 200 мг/кг 36,6±1,33 * 45,8±0,20 ° 16,0±1,52 * ° 1,60±0,510
ЭЛеЛ-4 – 400 мг/кг 31,2±1,39 44,2±5,95 22,6±4,32 1,80±0,374
Экстракт семян лотоса орехоносного в разной концентрации (ЭСЛ)
ЭСЛ-1 – 50 мг/кг 37,3±2,23 * 40,7±1,17 * 20,0±2,24 2,00±0,447
ЭСЛ-2 – 100 мг/кг 24,7±2,81 48,7±1,73 °° 25,0±3,17 1,67±0,333
ЭСЛ-3 – 200 мг/кг 25,7±2,78 42,0±1,79 ° 30,7±3,82 1,67±0,5600
ЭСЛ-4 – 400 мг/кг 39,2±1,72 ** °° 36,2±2,99 * 22,3±2,11 2,33±0,422
Экстракт листьев лотоса орехоносного в разной концентрации (ЭЛиЛ)
ЭЛиЛ-1 – 50 мг/кг 41,8±3,52 * 31,0±2,25 *** 26,0±3,45 1,17±0,401
ЭЛиЛ-2 – 100 мг/кг 31,8±1,38 ° 46,0±1,92 °°° 20,5±2,28 1,67±0,560
ЭЛиЛ-3 – 200 мг/кг 25,8±3,40 42,6±2,06 30,0±4,60 1,60±0,678
ЭЛиЛ-4 – 400 мг/кг 41,0±1,00 *** °° 31,8±2,75 **°° 26,2±3,26 1,00±0,447
Условные обозначения: * - достоверность различий по сравнению с контрольной группой, ° -
достоверность различий по сравнению с физиологическим раствором (по Стьюденту с поправкой
Бонферрони); * (°) – р≤0,05; ** (°°) – р≤0,01; *** (°°°) – р≤0,001.
Результаты свидетельствуют о наличии так же и у экстракта лепестков
лотоса орехоносного стимулирующего влияния на фагоцитоз. Кроме того,
положительные эффекты при использовании экстрактов лепестков и
коробочек лотоса орехоносного оказались сходными и сопоставимыми с
максимумом эффективности при наиболее высокой дозе введения экстракта
животным – 400 мг/кг.
Влияние экстракта семян лотоса орехоносного на фагоцитарную
активность нейтрофилов также оказалось стимулирующим, хотя и не в такой
степени, как для экстрактов коробочек и лепестков.
Исследование влияния экстракта листьев лотоса орехоносного на ФАН
дало, таким образом, противоречивые результаты. Его
иммуностимулирующее действие, хотя и имело место, но значительно
слабее, чем у экстракта эхинацеи и других экстрактов лотоса орехоносного, а
максимальных эффект завершался на дозе 200 мг/кг введения экстракта.
Таким образом, при анализе иммуностимулирующего влияния
экстрактов лотоса орехоносного выявляется высокая активность экстрактов
 24
коробочек, семян и лепестков как по сравнению с контрольной группой, так
и с группой животных, находившихся под влиянием экстракта эхинацеи.
Наиболее эффективный иммуностимулирующий эффект проявляется при
максимальной дозе экстрактов (400 мг/кг). Иммуностимулирующий эффект
экстракта листьев лотоса орехоносного выявлен, но, хотя и отмечен в целом,
был менее выражен, чем у экстракта эхинацеи.
16
* *
* * *°
14 *°
12
°
*
10
°
8
° ° °
6 °
*
4

0
Контроль ЭСЛ ЭЛиЛ ЭКЛ ЭЛеЛ
100 мг/кг 200мг/кг 400 мг/кг

Рис. 3. Уровень сывороточного ИЛ-1β, пкг/мл

Условные обозначения: * - достоверность различий по сравнению с контрольной группой, ° - по
отношению к предыдущей группе (по Стьюденту с поправкой Бонферрони); * (°) – р≤0,05; ** (°°)
– р≤0,01; *** (°°°) – р≤0,001.
Уровень сывороточного ИЛ-1β под действием БАВ лотоса
орехоносного изменялся в зависимости от вида и дозы экстрактов (рис.3).
Экстракт семян лотоса орехоносного приводил к значительному возрастанию
показателя в дозе 100 мг/мл, экстракты листьев и коробочек увеличивали
уровень ИЛ-1β в дозе 200 мг/кг, тогда как БАВ лепестков в минимальной
дозе 100 мг/кг приводили к снижению изучаемого показателя, а при 200-400
мг/кг массы тела значительно повышали уровень ИЛ-1β в сравнении с
аналогичными показателями у контрольных животных.

Показатели крови при введении экстрактов из разных частей

лотоса орехоносного в условиях экспериментальной дислипидемии.
Введение экстрактов из разных частей лотоса орехоносного при
экспериментальной дислипидемии приводило к изменению лейкоцитарной
формулы (табл.8). При этом экспериментальная дислипидемия
способствовала незначительному снижению количества нейтрофилов и
моноцитов на фоне повышения количества лимфоцитов и эозинофилов.
Экстракты семян лотоса орехоносного способствовали значительному
снижению количества нейтрофилов и моноцитов на фоне повышения числа
лимфоцитов и эозинофилов. Введение экстрактов лепестков, листьев и семян
лотоса орехоносного на фоне экспериментальной дислипидемии приводило к
снижению количества нейтрофилов при одновременном повышении числа
лимфоцитов, изменение остальных клеток белой крови было менее
 25
значительным в сравнении с аналогичными результатами контрольных
животных.
Таблица 8
Влияние экстрактов лотоса орехоносного при экспериментальной
дислипидемии на лейкоцитарную формулу
Нейтрофилы, Лимфоциты, % Эозинофилы, Моноциты,
% % %
Контроль 58,8 ±2,69 31,9 ±2,68 1,69±0,422 7,6±0,82
Физиологический раствор 54,5±2,62 37,7±2,86 1,86 ±0,626 6,0±1,40
ЭДЛ 55,9 ±2,33 35,2±3,17 2,57±0,663 6,5±0,89
Экстракт лепестков 54,7±2,46 37,7±2,97 1,07±0,266 6,1±0,22
Экстракт лепестков + ЭДЛ 45,5±3,10 ** 47,0±1,94 *** 1,58±0,486 6,0±1,20
Экстракт листьев 55,5±1,33 33,8±2,08 2,00±0,398 8,6±1,74
Экстракт листьев + ЭДЛ 44,1±4,21 * 46,9±4,75 * 1,36±0,377 7,3±0,87
Экстракт семян 47,9±3,01 * 42,8±2,49 * 2,00±0,418 7,0±0,97
Экстракт семян + ЭДЛ 45,5±3,42 * 43,2±4,19 * 1,75±0,244 9,5±1,07
Экстракт коробочек 60,4±2,44 31,1±2,72 1,47±0,285 7,3±0,68
Экстракт коробочек + ЭДЛ 58,4±5,13 33,5±4,70 1,36±0,298 6,8±1,25
Условные обозначения: *- достоверность различий между группами животных контроля и остальными
группами животных (по Стьюденту с поправкой Бонферрони); * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001; ЭДЛ –
экспериментальная дислипидемия
Экстракты лотоса орехоносного и экспериментальная дислипидемия
способствовали изменению фагоцитарной активности нейтрофилов. При
этом происходило возрастание фагоцитарного индекса у групп животных с
экспериментальной дислипидемией и экспериментальной дислипидемией
при одновременном введении экстрактов лотоса орехоносного относительно
аналогичного показателя у контрольных животных (рис.4).
Максимальное возрастание числа нейтрофилов с латексными
частицами было характерно для группы, получавшей экстракт плодов лотоса
орехоносного на фоне экспериментальной дислипидемии, относительно
контрольных животных.
Аналогичные результаты были характерны для животных, получавших
экстракт плодов лотоса орехоносного: происходило значительное повышение
ФИ в сравнении с контрольной группой. Остальные виды экстрактов лотоса
орехоносного изменяли показатель ФИ менее значительно.
Влияние экстрактов лотоса орехоносного на ФЧ было менее значимым.
Происходило небольшое повышение ФЧ у животных групп с
экспериментальной дислипидемией, животных, получавших экстракт
листьев, лепестков и коробочек лотоса орехоносного при экспериментальной
дислипидемией и животных, получавших только экстракт листьев и
коробочек в сравнении с аналогичными показателями у контрольных
животных.
 26

70
%
60 °*
° ° *° °°
50
°
40

30

20

10

0
листья лепестки семена коробочки
контроль физ. раствор экстракт ЭДЛ

Рис. 4. Влияние экстрактов семян, листьев, лепестков и коробочек лотоса орехоносного на

фагоцитарный индекс в условиях экспериментальной дислипидемии
Условные обозначения: * - достоверность различий по сравнению с контрольной группой, ° -
достоверность различий по сравнению с физиологическим раствором; * (°) – р≤0,05; ** (°°) –
р≤0,01 (по Стьюденту с поправкой Бонферрони)
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о влиянии
экстрактов лотоса орехоносного на показатели лейкоцитарной формулы и
фагоцитарной активности нейтрофилов в зависимости от вида экстракта. Так,
при длительном введении экстрактов лотоса орехоносного происходило
изменение лейкоцитарной формулы. Фагоцитарная активность нейтрофилов
возрастала под действием всех экстрактов лотоса орехоносного на фоне
экспериментальной дислипидемии и экстракта коробочек лотоса
орехоносного.
При изучении иммуностимулирующего влияния БАВ лотоса
орехоносного было показано, что экстракты семян, лепестков, коробочек и
листьев лотоса активизируют макрофагально-нейтрофильное звено
лейкоцитарной формулы, усиливают фагоцитарную активность нейтрофилов
и повышают уровень ИЛ-1β. Иммуностимулирующее влияние биологически
активных веществ лотоса орехоносного зависело от вида экстракта,
длительности введения и вводимой дозы.
По данным L. Zhao et al.(2010), воспалительный ответ частично
опосредован эндогенными и мигрирующими лейкоцитами. Эти
активированные лейкоциты могут синтезировать и секретировать различные
цитокины, хемокины и реактивные формы кислорода и протеазы, что
приводит к пролиферации мезенхимальных клеток и отложению
внеклеточного белка. Введение неферина значительно уменьшает
воспалительные эффекты. Неферин служит в качестве поглотителя
свободных радикалов, повышая активность СОД и ингибируя уровень
перекисного окисления липидов. Показано, что кверцетин активирует
клеточный иммунитет, рутин – гуморальный и клеточный (Лупанова И.А.,
2011).
 27
Антиоксидантные эффекты экстрактов лотоса орехоносного

Свободнорадикальный гомеостаз при разной продолжительности

введения экстракта семян лотоса орехоносного. Принимая во внимание
доказанную во многих работах важную роль антиоксидантной системы в
регуляции гомеостаза, наш интерес привлекло изучение возможного влияния
экстракта семян лотоса орехоносного на показатели перекисного окисления
липидов в тканях печени, миокарде, а также в плазме крови, что отражает
общий физиологический статус организма.
Таблица 9
Влияние экстракта семян лотоса орехоносного при разной
продолжительности введения на содержание ТБК-активных продуктов в
тканях печени, миокарде и плазме крови
Экспериментальные группы ТБК-активные ТБК-активные ТБК-активные
продукты в ткани продукты в продукты в
печени; миокарде; плазме крови;
M±m, нмоль/мг M±m, нмоль/мг M±m, нмоль/мл
Контроль 1 (интактный), n=12 2,8 ±0,47 1,6± 0,12 2,4±0,11
7 дней (n = 10) 2,6 ±0,22 1,9±0,38 2,8±0,23
Контроль 2

14 дней (n = 10)
раствор)

4,5 ±0,68 * ° 1,9±0,30 2,9±0,09 *

(физ.

21 день (n = 10) 2,2 ±0,21 °° 1,7±0,12 3,2±0,26 *

28 дней (n = 10) 3,1±0,73 2,7±0,34 ** ° 2,5±0,21
42 дня (n = 15) 2,4±0,13 5,2±0,73 *** °° 1,9±0,10 * °
7 дней (n = 10) 2,3±0,16 2,0±0,30 1,6±0,11 ** ## °
орехоносного

14 дней (n = 10) 1,7 ± 0,22 * ## ° 1,8±0,28 2,0±0,09 * ### °

Экстракт
лотоса

21 день (n = 10) 1,9 ±0,12 2,1±0,41 2,7±0,16 °°

28 дней (n = 10) 2,1±0,23 7,5±0,65 *** ### 2,4±0,18
°°°
42 дня (n = 15) 1,8±0,15 * # 4,5±0,70 *** °° 2,5±0,16 #
Условные обозначения: * - достоверность различий между группами животных по сравнению с
интактным контролем; # - достоверность различий между животными, получавшими экстракт
семян лотоса орехоносного и контролем 2 (животными, получавшими физиологический раствор);
° - достоверность различий по сравнению с предыдущей группой; *(#, °) - p<0,05; ** (##, °°) -
p<0,01; *** (###,°°°) - p<0,001 (по Стьюденту с поправкой Бонферрони).
Полученные данные говорят о тканеспецифических особенностях
влияния экстракта семян лотоса орехоносного. В печени антиоксидантный
эффект экстракта семян лотоса орехоносного выражен с 14 по 42 день
введения, в плазме крови данный эффект характерен при непродолжительном
введении экстракта на 7-14 дни, тогда как в миокарде антиоксидантного
эффекта не возникало на протяжении всего периода введения экстракта
семян, и даже наблюдался прооксидантный эффект экстракта семян при его
введении в течение 28 дней.

Дозозависимые эффекты экстрактов лотоса орехоносного на

свободнорадикальный гомеостаз. При изучении влияния экстрактов лотоса
орехоносного на протекание процессов свободнорадикального окисления в
семенниках крыс были получены следующие результаты (табл.10).
 28
Таблица 10
Влияние экстрактов лотоса орехоносного на ПОЛ в семенниках крыс
Исходное
Скорость Скорость
содержание МДА
спонтанного ПОЛ, аскорбатзависимого
в печени, М±м,
М±м, нмоль/час ПОЛ, М±м, нмоль/час
нмоль/0,5 г ткани
Контрольная группа 155,6 ± 15,94 340,2 ± 58,24 21,5 ± 3,07
Экстракт эхинацеи 140,7 ± 13,52 278,8 ± 25,70 24,6 ± 2,09
Экстракт 50 мг/кг 89,5 ± 24,21** 322,8 ± 124,76 10,7 ± 2,39**
семян 100 мг/кг 95,9 ± 17,37** 267,1 ± 46,29 11,2 ± 2,16**
200 мг/кг 59,7 ± 12,39*** 155,2 ± 52,14** 6,8 ± 1,29***
400 мг/кг 95,6 ± 8,97*** ° 331,6 ± 16,74 °° 11,0 ± 0,72*** °
Экстракт 50 мг/кг 178,2 ± 5,03 310,4 ± 12,12 29,0 ± 1,10*
листьев 100 мг/кг 96,2 ± 20,71** °° 238,0 ± 26,20 ° 11,2 ± 1,82** °°°
200 мг/кг 98,5 ± 20,28* 305,2 ± 81,56 12,3 ± 1,80**
400 мг/кг 251,8 ± 39,11** °° 492,6 ± 40,99* 51,3 ± 17,40 °
Экстракт 50 мг/кг 83,6 ± 3,82*** 147,8 ± 13,81*** 11,2 ± 0,87***
коробочек 100 мг/кг 179,0 ± 21,81 °°° 368,4 ± 73,18 ° 20,0 ± 2,14 °°
200 мг/кг 239,0 ± 15,00 *** ° 324,3 ± 15,61 40,0 ±2,10*** °°°
400 мг/кг 73,0 ± 6,46*** °°° 149,2 ± 12,63*** °°° 7,7 ± 0,64*** °°°
Экстракт 50 мг/кг 59,7 ± 6,01*** 151,8 ± 13,89** 6,3 ± 0,61***
лепестков 100 мг/кг 89,6 ± 5,52*** °° 218,1 ± 9,92* °° 10,5 ± 0,34***°°°
200 мг/кг 123,7 ± 4,66 °°° 337,1 ± 25,84 °° 12,1 ± 0,46** °
400 мг/кг 189,7 ± 12,11 °°° 364,7 ± 47,54 23,9 ± 1,97 °°°
Условные обозначения: * - достоверность различий по сравнению с контрольной группой, ° -
достоверность различий по сравнению с физиологическим раствором (по Стьюденту с поправкой
Бонферрони); * (°) – р≤0,05; ** (°°) – р≤0,01; *** (°°°) – р≤0,001.
При исследовании влияния экспериментальных экстрактов лотоса
орехоносного антиоксидантный эффект выявлен только у экстрактов семян
лотоса орехоносного для всех исследуемых концентраций, причем
максимально эффективным оказался экстракт концентрацией 200 мг/кг. При
этом происходило снижение скорости спонтанного и аскорбатзависимого
ПОЛ и исходного уровня МДА на фоне повышения каталазной активности в
сравнении с аналогичными показателями в контроле (табл. 10).
Экстракты листьев, плодов и лепестков лотоса орехоносного проявляли
как антиоксидантный, так и прооксидантный эффекты на накопление МДА в
тканях семенников крыс в зависимости от концентрации.
Так, БАВ листьев лотоса приводили к снижению уровня липидной
пероксидации и увеличению каталазной активности в дозах 100-200 мг/кг,
тогда как максимальная доза экстракта проявляла прооксидантный эффект,
увеличивая скорость спонтанного и аскорбатзависимого ПОЛ.
Экстракт коробочек лотоса орехоносного проявлял антиоксидантные
свойства в своих крайних дозах – 50 и 400 мг/кг, что демонстрировалось как
снижение скорости спонтанного, аскорбатзависимого ПОЛ и исходного
уровня МДА при возрастании каталазной активности относительно
контрольных показателей, доза экстракта 100 мг/кг практически не изменяла
данные параметры, а 200 мг/кг даже усиливала липидную пероксидацию.
 29
БАВ лепестков лотоса орехоносного приводили к снижению уровня
перекисного окисления липидов и увеличения каталазной активности в дозах
50-100 мг/кг.
Максимальное снижение уровня МДА было отмечено у крыс из групп,
получавших экстракт лепестков лотоса орехоносного концентрацией 50
мг/кг, скорости спонтанного ПОЛ – для двух исследуемых экстрактов –
семян ЛО концентрацией 200 мг/кг и лепестков ЛО концентрацией 50 мг/кг.
Максимальное снижение скорости аскорбатзависимого ПОЛ зафиксировано
у группы, получавшей экстракт коробочек ЛО концентрацией 50 мг/кг
(табл.10).
В ткани печени влияние БАВ лотоса орехоносного на процессы ПОЛ
имело свои особенности, но проявляло только антиоксидантный эффект,
степень выраженности которого зависела от вида и дозы экстракта.
Введение животным экстракта эхинацеи, препарата сравнения,
приводило к снижению скорости спонтанного и аскорбатзависимого ПОЛ и
увеличению каталазной активности в сравнении с контрольными
животными.
БАВ семян лотоса орехоносного приводили к снижению скорости
спонтанного и аскорбатзависимого ПОЛ и исходного уровня МДА в ткани
печени, при этом более значимо в дозах 200-400 мг/кг относительно
показателей у контрольных животных.
Введение экстракта листьев лотоса орехоносного выявило следующее:
происходило снижение липидной пероксидации и повышение каталазной
активности под действием экстракта в дозах 100-400 мг/кг.
Экстракт коробочек лотоса проявлял антиоксидантные эффекты при
введении в дозах 50-200 мг/кг, при этом происходило снижение скорости
спонтанного и аскорбатзависимого ПОЛ и исходного уровня МДА и
повышение каталазной активности в ткани печени.
БАВ лепестков приводили к снижению скорости спонтанного и
аскорбатзависимого ПОЛ и возрастанию каталазной активности во всех
изучаемых дозах относительно аналогичных показателей в контроле.
Полученные результаты свидетельствуют о наличии у экстракта семян,
коробочек и лепестков лотоса орехоносного выраженных антиоксидантных
свойств. Наиболее выраженные антиоксидантные свойства были характерны
для экстракта лепестков ЛО, наиболее значимые дозы экстрактов,
способствующих антиоксидантному эффекту, проявлялись при 200 мг/кг.

Эффекты экстрактов из разных частей лотоса орехоносного при

экспериментальной дислипидемии на свободнорадикальный гомеостаз.
Каталазная активность повышалась в группах животных, получавших
экстракты листьев, семян и коробочек лотоса орехоносного, а также у
животных, получавших экстракты листьев и коробочек лотоса орехоносного
на фоне экспериментальной дислипидемии, тогда как экспериментальная
дислипидемия и экспериментальная дислипидемия одновременно с
введением экстрактов лепестков и семян лотоса орехоносного и экстракта
 30
лепестков лотоса орехоносного, напротив, несколько снижали уровень
каталазной активности в сравнении с аналогичным показателем у
контрольных животных.
Уровень церулоплазмина возрастал у животных, получавших экстракт
лепестков лотоса орехоносного при экспериментальной дислипидемии, в
сравнении с аналогичным показателем в контроле. Животные с
экспериментальной дислипидемией также показали несколько повышенный
уровень церулоплазмина в сравнении с контрольной группой, тогда как
группа животных, получавших экстракт семян при экспериментальной
дислипидемии, напротив, обнаружила пониженный уровень белка.
12 * *
10
*
8
6
4
2
0
контр физ р-р лист леп сем кор ЭДЛ

экстракты ЭДЛ контр

Рис.5. Влияние экстрактов семян, листьев, лепестков и коробочек лотоса орехоносного на

активность СОД в плазме крови в условиях экспериментальной дислипидемии, %
блокирования
Условные обозначения: *- достоверность различий между группами животных контроля и остальными
группами животных (по Стьюденту с поправкой Бонферрони); * - р<0,05.
Таким образом, влияние длительного введения экстрактов лотоса
орехоносного на свободнорадикальное окисление и антиоксидантную
активность было неоднозначным и зависело от ткани и вида экстракта. В
эритроцитах происходило повышение ТБК-активных продуктов под
действием экстракта коробочек лотоса орехоносного, экстракта лепестков
при экспериментальной дислипидемии. В плазме крови активность СОД
возрастала при введении экстракта листьев, лепестков и коробочек при
экспериментальной дислипидемии. Уровень церулоплазмина в плазме крови
снижался под действием экстрактов лепестков, семян, коробочек и экстракта
коробочек лотоса орехоносного при экспериментальной дислипидемии. В
ткани печени был найден хорошо выраженный антиоксидантный эффект
независимо от вида экстракта. В семенниках эффект действия экстрактов
лотоса орехоносного был также антиоксидантным, при этом снижение
уровня ТБК-активных продуктов происходило под действием экстракта
лепестков лотоса орехоносного и экстрактов листьев, семян и коробочек при
экспериментальной дислипидемии. В коре головного мозга антиоксидантный
эффект проявил экстракт листьев лотоса орехоносного, а для миокарда и
гипоталамуса был характерен прооксидантный эффект действия экстрактов.
Влияние экстрактов лотоса орехоносного на процессы
свободнорадикального окисления зависело от длительности введения
 31
экстрактов, вида экстракта и его дозы, а также имело четкие
тканеспецифические особенности.
Таким образом, результаты проведенного комплексного исследования
позволили сформировать следующую концепцию (рис. 6). Основными
действующими группами биологически активных веществ лотоса
орехоносного являются алкалоиды и флавоноиды, причем лепестки, семена,
коробочки и листья лотоса различаются качественно и количественно по
содержанию входящих в их состав БАВ. Попадая в организм через ЖКТ, они
подвергаются химическим изменениям и запускают целый каскад реакций на
клеточном, тканевом и молекулярном уровнях, так как биологически
активные вещества имеют несколько мишеней действия.
Ловушки Свободноради-
семена свободных кальный
Ф радикалов гомеостаз
А
Л Хелатирование Высшая нервная
А коробочки Л ионов металлов деятельность и
К
В висцеральная
А
О Сигнальные регуляция
Н
листья Л
системы клетки
О
О Метаболизм
И
И лепестки Д Медиаторные
Д системы клетки
Ы
Ы
Экспрессия генов Иммунная
система

Рис. 6. Концептуальная схема физиологических эффектов БАВ лотоса орехоносного

Первый блок мишени действия БАВ лотоса – сигнальные системы
клетки. Это происходит через взаимодействие со специализированными
рецепторами на поверхности мембраны, выступая в качестве внеклеточных
сигнальных молекул. В результате такого взаимодействия образуются
вторичные мессенджеры, которые передают сигнал внутрь клетки.
Флавоноиды влияют на функционирование рецепторов ФНО и ИЛ, тирозин-
киназы, а также рецепторов, связанных с G-белком и широкого класса
трансмембранных белковых переносчиков сигналов, названных интегринами.
При этом происходит регуляция экспрессии их уровня, которая может
сопровождаться как усилением, так и снижением уровня цитокинов. Кроме
того, мишенями могут быть рецепторы, активирующие пролиферацию
пероксисом (PPAR), алкалоиды и полифенолы взаимодействуют с
рецепторами на поверхности нервных клеток и нейроглии, оказывая действие
на нервную систему.
После связывания с поверхностными рецепторами вторичные
мессенджеры передают сигнал в ядро, регулируя экспрессию генов. Поэтому
второй блок мишени, на который действую БАВ лотоса – это уровень
экспрессии генов, так как изменение данного процесса приводит к
изменению уровня регуляторных белков в клетке, что, в свою очередь будет
 32
менять физиологические процессы. Алкалоиды экстракта семян лотоса
подавляют продукцию ФНО-α и стимулируют противовоспалительные
цитокины ИЛ-10. Полисахариды лотоса орехоносного снижают экспрессию
генов ФНО, ИЛ-6 и соотношения ФНО/ИЛ-10 или ИЛ-6/ИЛ-10. Флавоноиды
повышают секрецию инсулина и уровень внутриклеточного кальция, а также
усиливают фосфорилирование внеклеточной сигнал-регулирующей
протеинкиназы и протеинкиназу С. Алкалоиды листьев лотоса орехоносного
подавляют экспрессию синтетазы жирных кислот, увеличивают
фосфорилирование АМФ-активированной протеинкиназы. Алкалоид листьев
лотоса нуциферин повышает экспрессию генов, связанных с липогенезом,
цитохрома Р-450 и ФНО. Флавоноиды подавляют экспрессию мРНК ренина.
Третий блок действия биологически активных веществ лотоса
орехоносного это медиаторные системы, при этом оказывают влияние и
алкалоиды и флавоноиды. Неферин влияет на обмен серотонина, способствуя
росту плотности 5-HT 1A рецепторов, влияет на обмен серотонина и
серотониновую передачу в мозге (Kang M., 2005; Sugimoto Y., 2010).
Флавоноиды также влияют на серотонинергическую активность 5-НТ 1А
рецепторов при участии каппа-опиоидных рецепторов. Флавоноиды могут
модулировать ГАМК А и d-опиоидные рецепторы. Недавнее исследование
экстрактов лепестков лотоса орехоносного показало значительную
агонистическую и антагонистическую активность по отношению к
серотониновым 5НТ 2С рецепторам, при этом неферин проявляет
агонистическое действие к серотониновым рецепторам (Velusami C.C. et al.,
2013). Флавоноид гесперидин является лигандом для бензодиазепина,
серотонина и глутамата. Гесперидин имеет антагонистическое действие на 5-
НТ 2β рецепторы.
БАВ лотоса орехоносного оказывают действие через хелатирование
ионов металлов и являются ловушками свободных радикалов, что определяет
четвертый блок влияния. Наличие сопряженных структур в молекулах
флавоноидов позволяет им выступать в качестве улавливателей свободных
электронов – гасителей цепных реакций свободнорадикального окисления
(Кравченко Л.В. и др., 2005). Антирадикальное действие флавоноидов
связанно с наличием в их структуре фенольных гидроксилов, участвующих в
окислительно-восстановительных реакциях радикального типа. В этих
реакциях флавоноиды выступают в роли восстановителей – доноров
электронов по отношению к какому-либо радикальному агенту, переходя в
свою окисленную форму – флавоксильный радикал (Farag R.S. et al., 2007;
Suzuki H. et al., 2008). Прежде всего, это связано с тем, что они контролируют
целостность и функциональную активность важнейших клеточных структур
– мембран. Необходимо отметить, что фенольные антиоксиданты являются
главными восстановителями гидроксил радикала − наиболее реакционно-
активного продукта перекисного окисления. Алкалоиды могут также
проявлять антиоксидантные свойства. Так, показана подавляющая
перекисное окисление липидов и белков активность неферина, алкалоида, в
большом количестве содержащегося в лотосе орехоносном (Jung, H.A. 2010).
 33
После запуска каскада реакций через действие на рассматриваемые
мишени активизируются физиологические процессы. Воздействие БАВ на
медиаторные системы приводит к изменению регуляторных процессов ВНД
и висцеральных систем. Действие на сигнальные системы клетки и, как
следствие, изменение экспрессии генов повлечет за собой влияние на
психофизиологические и поведенческие, иммунно-метаболические процессы,
свободнорадикальный гомеостаз. Участие БАВ в про- и антиоксидантных
механизмах влияет на свободнорадикальный гомеостаз, иммунную систему.
Таким образом, комплексное и многоуровневое воздействие БАВ лотоса
орехоносного приводит к изменению нейро-иммуно-метаболической
регуляции и свободнорадикального гомеостаза.

ВЫВОДЫ
1. Физиологическая активность экстрактов лотоса орехоносного
определяется биологически активными веществами, относящимися к классам
флавоноидов и алкалоидов. В составе экстрактов лотоса орехоносного
преобладают фенольные и флавоноидные соединения. Анализ флавоноидов в
экстрактах показал, что экстракты, полученные из разных частей растений,
отличались по концентрации рутина и кверцетина. Наиболее высокое
содержание рутина и кверцетина характерно для экстракта лепестков.
2. Биологически активные вещества лотоса орехоносного способствуют
увеличению двигательной активности при одновременном усилении
ориентировочно-исследовательской составляющей и снижению уровня
тревожности. Наиболее значимые изменения показателей поведения
характерны при 14-21-дневном введения экстракта семян.
3. Биологически активные вещества лотоса орехоносного уменьшают
паттерны поведения отчаяния в тесте Порсолт при 14-дневном введении,
тогда как длительное введение экстракта при экспериментальной
дислипидемии усиливает поведенческий паттерн отчаяния. Наиболее
выраженное действие экстрактов лотоса проявлялось при введении в дозах
100-200 мг/кг и было характерно для лепестков и коробочек. Все
исследуемые экстракты лотоса усиливают ориентировочно-
исследовательское поведение и снижают уровень тревожности в Суок-тесте.
4. Введение экстракта семян лотоса орехоносного снижает
вариабельность сердечного ритма лабораторных крыс. Изменения ВСР на
фоне введения экстракта семян лотоса орехоносного имеют гендерные
особенности: у самцов крыс сильнее выражен рост ЧСС и ИН при снижении
активности автономного контура регуляции, у самок происходит рост ИН и
снижение централизации управления ритмом сердца.
5. Выявлено наличие у экстракта семян лотоса орехоносного
иммуностимулирующего действия, проявление которого зависит от
продолжительности введения экстракта: через 7-14 дней введения экстракта
активизируется макрофагально-фагоцитарное звено иммунитета, возрастает
фагоцитарная активность нейтрофилов.
 34
6. Биологически активные вещества лотоса орехоносного усиливают
фагоцитарную активность нейтрофилов при одиночном введении и при
экспериментальной дислипидемии, максимальное увеличение характерно для
высоких доз экстрактов – 400 мг/кг. Под действием экстрактов лотоса
происходит сдвиг лейкоцитарной формулы в сторону усиления
неспецифического звена иммунитета и возрастает уровень интерлейкина-1β.
7. Выявлены тканеспецифические особенности влияния экстракта
семян лотоса орехоносного. В печени антиоксидантный эффект экстракта
семян лотоса орехоносного выражен с 14 по 42 день введения экстракта, в
плазме крови антиоксидантный эффект характерен при непродолжительном
введении экстракта на 7-14 дни, тогда как в ткани сердца наблюдался
прооксидантный эффект экстракта семян.
8. Высокие антиоксидантные свойства в ткани печени характерны для
экстракта лепестков, в семенниках – для экстракта семян. В ткани печени
эффективные антиоксидантные свойства проявляются при введении
экстракта в дозах 200-400 мг/кг, в семенниках – экстракт коробочек в дозах
50 и 400 мг/кг, экстракт лепестков – 50-100 мг/кг, листьев – 100-200 мг/кг.
Влияние длительного введения экстрактов лотоса орехоносного на
свободнорадикальное окисление и антиоксидантную активность было
неоднозначным и зависело от ткани и вида экстракта.
9. Физиологические эффекты биологически активных веществ лотоса
орехоносного выражаются активацией ориентировочно-исследовательского
поведения, снижением уровня тревожности, поведения отчаяния,
проявлением иммуностимулирующих и антиоксидантных свойств; показаны
механизмы действия на молекулярном (через изменение экспрессии генов,
отвечающих за данные реакции, и сигнальные системы клетки), клеточном
(через медиаторные системы, ловушки свободных радикалов) и
организменном (через регуляторные системы организма: соматическую и
вегетативную нервную, эндокринную и иммунную системы) уровнях, что
можно заключить на основе собственных результатов и данных литературы.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

В рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК РФ
1. Ломтева, Н.А. Ориентировочное поведение самок белых крыс в динамике
эстрального цикла и его зависимость от хэндлинга / Н.А. Ломтева, Е.И.
Кондратенко // Журн. высш. нерв. деят. – 2003. – Т. 53. – № 3. – С. 376-378.
2. Ломтева, Н.А. Динамика параметров липидного обмена крыс при
внутрижелудочном введении экстракта семян Лотоса орехоносного (Nelumbo
nucifera) / Е.И. Кондратенко, Н.А. Ломтева, А.Э.А. Мухаммад, С.К.
Касимова, Н.Ю. Липсон, Н.В. Марченко // Известия Самарского научного
центра Российской академии наук, 2010. – Т. 12. – № 1 (8). – С. 2062-2064.
3. Ломтева, Н.А. Динамика показателей крови крыс при внутрижелудочном
введении экстракта семян лотоса орехносного (Nelumbo nucifera) / Н.Ю.
Липсон, Е.И. Кондратенко, Н.А. Ломтева, А.А. Бони, С.К. Касимова, Н.В.
 35
Марченко // Известия Самарского научного центра Российской академии
наук, 2010. – Т. 12. – № 1 (8). – С. 2073-2075
4. Ломтева, Н.А. Changes in lipid profile of blood plasma by extract of Nelumbo
nucifera (sacred lotus) seeds in rats / Е.И. Кондратенко, Н.А. Ломтева, А.Э.А.
Мохамад // Естественные науки. – 2011. – №3(36). – С.114-119
5. Ломтева, Н.А. Иммунотропные и антиоксидантные свойства экстракта
лотоса орехоносного / Н.А. Ломтева, Е.И. Кондратенко, А.А. Бони, М.А.
Самотруева, Н.Ю. Липсон // Фармация. – 2012. – №1. – С.40-42.
6. Ломтева, Н.А. Химический состав и антиоксидантная активность
экстрактов семян Nelumbo nucifera / Е.И. Кондратенко, А.В. Великородов,
Н.А. Ломтева, А.Э.А. Мохамад, К.Н. Кондратенко // Химия растительного
сырья. – 2012. – №3. – С.115-120.
7. Ломтева, Н.А. Зависимость поведения и уровня тревожности от пола и
гормонального статуса крыс / Н.А. Ломтева, Е.И. Кондратенко, С.К.
Касимова // Проблемы репродукции. – 2013. – №3. – С.17-20
8. Ломтева, Н.А. Фармакогностическая оценка и фармакологические
свойства экстракта семян лотоса орехоносного / Е.И. Кондратенко, М.В.
Мажитова, Н.А. Ломтева, Н.В. Нетипанова, М.В. Губанова, А.А. Бони, А.Э.А
Мохамад // Естественные науки. – 2013. – №2 (43). – С.112-119
9. Ломтева, Н.А. Влияние экстрактов лотоса орехоносного на показатели
лейкоцитарной формулы и фагоцитарной активности нейтрофилов
периферической крови лабораторных животных / Н.А. Ломтева, Е.И.
Кондратенко, А.А. Бони, М.А. Самотруева // Астраханский медицинский
журнал. – 2014. – Т.9. – №2. – С.59-63
10. Ломтева, Н.А. Иммунотропные, психотропные и антиоксидантные
свойства экстракта семян лотоса орехоносного / Н.А. Ломтева, Е.И.
Кондратенко // Фармация. – 2014. – №5. – С. 39-42.
11. Ломтева, Н.А. Изучение протекторных и антиоксидантных свойств
экстракта плодов-коробочек лотоса орехоносного (Nelumbo nucifera) у самок
крыс с индуцированным CCl4-повреждением печени и почек / Е.И.
Кондратенко, М.С. Абделхамид, Н.А. Ломтева // Технология и товароведение
инновационных пищевых продуктов. – 2014. – № 6(29). – С. 21-27.
12. Ломтева, Н.А. Сравнительный анализ гиполипидемической активности
экстрактов лотоса орехоносного / Н.А. Ломтева, Е.И. Кондратенко, М.А.
Самотруева, М.В. Мажитова // Химико-фармацевтический журнал. – 2015. –
Т.49, №7. – С.36-38
13. Ломтева, Н.А. Изучение психотропных свойств экстракта семян лотоса
орехоносного / Н.А. Ломтева, Е.И. Кондратенко, М.В. Самотруева //
Биомедицина. – 2015. – №3. – С. 95-100.
14. Ломтева, Н.А. GC-MS analysis of phytocomponents in the ethanolic extract
of Nelumbo nucifera seeds from Russia / Е.И. Кондратенко, М.С. Абделхамид,
Н.А. Ломтева // Journal of Applied Pharmaceutical Science. – 2015. – Vol. 5(04).
– P.115–118.
15. Ломтева, Н.А. Изучение протекторных и антиоксидантных свойств
экстракта семян лотоса орехоносного (Nelumbo nucifera) у самок крыс с
 36
индуцированным CCl4 повреждением печени и почек / Е.И. Кондратенко,
М.С. Абделхамид, Н.А. Ломтева // Биофармацевтический журнал. – 2015. –
Т.7.– №5. – С. 35-39.
16. Ломтева, Н.А. Влияние экстрактов лотоса орехоносного (Nelumbo
nucifera) на свободнорадикальное окисление миокарда самок крыс / Н.А.
Ломтева, Л.А. Яковенкова, Е.И. Кондратенко // Естественные науки.
2016. № 1 (54). С. 77-81.
Патенты
17. Ломтева, Н.А. Пат. 2497538 Рос. Федерация, Средство, обладающее
анксиолитическим и антидепрессивным действием, на основе экстракта
семян лотоса орехоносного (nelumbo nucifera) / Е.И. Кондратенко, Н.А.
Ломтева, М.В. Самотруева, Т.К. Сережникова. – 2011147430/15; заявл.
22.11.2011; опубл. 10.11.2013 Бюл. № 31.
18. Ломтева, Н.А. Пат. 2496508 Рос. Федерация, Средство, обладающее
иммунотропной и антиоксидантной активностью, на основе экстракта семян
лотоса орехоносного (nelumbo nucifera) / Н.А. Ломтева, Е.И. Кондратенко,
М.В. Самотруева, Т.К. Сережникова. – 2011147457/15 завл. 22.11.2011;
опубл. 10.06.2013 Бюл. №16.
19. Ломтева, Н.А. Пат. 2480230 Рос. Федерация, Средство, обладающее
гиполипидемическим действием, на основе экстракта семян лотоса
орехоносного (nelumbo nucifera) / Е.И. Кондратенко, Н.А. Ломтева, М.В.
Самотруева, Т.К. Сережникова. – 2011146494/15 завл. 16.11.2011; опубл.
27.04.2013 Бюл. № 12.
Статьи в других изданиях
20. Ломтева, Н.А. Динамика показателей крови и ориентировочно-
исследовательского поведения самок старых крыс при внутрижелудочном
введении экстракта семян лотоса орехоносного / Н.А. Ломтева, Е.И.
Кондратенко, Э.А.М. Ахмед, С.К. Касимова, Н.Ю. Липсон, Г.А. Екимова,
О.А. Петрова // Астраханский медицинский журнал: Материалы 7-й
международной научно-практической конференции «Достижения
фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (5-8 мая
2010). 2010. – Т.5. – №1. Астрахань: Астраханская государственная
медицинская академия. – С. 252-255.
21. Ломтева, Н.А. Влияние экстракта семян лотоса орехоносного на степень
перекисного гемолиза эритроцитов самок крыс / Е.И. Кондратенко, Н.А.
Ломтева, А.Э.А. Мохамад, С.К. Касимова, Н.Ю. Липсон, Г.А. Екимова,
О.Ю.Петрова // Кислород и антиоксиданты 2010. – №2. – С.85-87.
22. Lomteva, N.A. Effect of Nelumbo nucifera seed extract on biochemical,
hematological and reproductive parameters in female rats / E.I. Kondratenko, N.A.
Lomteva, N.V. Marchenko, A.E.A. Mohamad, A.A. Boni, M.V. Gubanova, A.G.
Babicheva // World Congress on Biotechnology. – 2011.
23. Ломтева, Н.А. Антиоксидантная активность экстрактов семян Nelumbo
nucifera / Н.А. Ломтева, Е.И. Кондратенко, А.В. Великородов, А.Э.А.
Мохамад, К.Н. Кондратенко // Материалы второй международной научной
конференции, посвященной 80-летию академика РАЕН, заслуженного
 37
работника высшей школы РФ, доктора биологических наук, профессора Д.Л.
Теплого «Свободные радикалы, антиоксиданты и старение». Астрахань, изд.
дом «Астраханский университет» – 2011. – С. 145-147.
24. Ломтева, Н.А. Determination of in vitro antioxidant activity of ethanolic
extracts of lotus (Nelumbo nucifera Gaertn.) seeds / Е.И. Кондратенко, А.Э.А.
Мохамад, Н.А. Ломтева // Материалы второй международной научной
конференции, посвященной 80-летию академика РАЕН, заслуженного
работника высшей школы РФ, доктора биологических наук, профессора Д.Л.
Теплого «Свободные радикалы, антиоксиданты и старение». Астрахань, изд.
дом «Астраханский университет» – 2011. – С. 130-131.
25. Ломтева, Н.А. Влияние экстракта семян Лотоса орехоносного (Nelumbo
nucifera Gaertn.) на про- и антиоксидантный гомеостаз самок крыс / Н.А.
Ломтева, Е.И. Кондратенко, А.Э.А. Мохамад, А.А. Бони // Материалы второй
международной научной конференции, посвященной 80-летию академика
РАЕН, заслуженного работника высшей школы РФ, доктора биологических
наук, профессора Д.Л. Теплого «Свободные радикалы, антиоксиданты и
старение». Астрахань, изд. дом «Астраханский университет» – 2011. – С. 124-
126.
26. Ломтева, Н.А. Влияние экстрактов лотоса орехоносного на
свободнорадикальный гомеостаз / Н.А. Ломтева, Е.И. Кондратенко //
Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. –
2012. – №10. – С.94-95.
27. Ломтева, Н.А. Изучение анксиолитического действия экстракта семян
лотоса орехоносного (nelumbo nucifera) / Н.А. Ломтева, Е.И. Кондратенко //
XXX Международная научно-практическая конференция «Современная
медицина и фармацевтика: актуальные проблемы и перспективы развития»,
Украина, 2012.
28. Ломтева, Н.А. Экспериментальное изучение влияние экстракта семян
лотоса орехоносного на психоэмоциональный статус / Н.А. Ломтева, Е.И.
Кондратенко // Сборник статей Четвертой международной научно-
практической конференции «Высокие технологии, фундаментальные и
прикладные исследования в физиологии и медицине», 2012. – СПб.: Изд-во
Политехн. ун-та. – Т.1. – С.147-149.
29. Ломтева, Н.А. Изменение показателей крови и поведенческих реакций
самок крыс при воздействии экстрактов лотоса орехоносного / Н.А. Ломтева,
К.В. Баганина, Л.А. Гребенник, М.А. Ефимцева // «Актуальные проблемы
естественных и математических наук»: материалы международной научно-
практической конференции. – 2013. – Новосибирск: Изд. «СибАК». – С. 100-
103.
30. Ломтева, Н.А. Экспериментальное изучение влияния экстракта семян
лотоса орехоносного на метаболические показатели в условиях
дислипидемии / Н.А. Ломтева, К.В. Баганина, Л.А. Гребенник, М.А.
Ефимцева // «Научное сообщество студентов XXI столетия. Естественные
науки»: материалы VIII студенческой международной научно-практической
конференции. – 2013. – Новосибирск: Изд. «СибАК». – С. 6-11.
 38
31. Ломтева, Н.А. Изучение фармакологической активности лотоса
орехоносного / Н.А. Ломтева, Е.И. Кондратенко, М.А. Самотруева //
Материалы IX Международной научно-практической конференции
Достижение фундаментальных наук и возможности трансляционной
медицины в решении актуальных проблем практического здравоохранения.
Астрахань, 2013. – С.56-57.
32. Ломтева, Н.А. Иммунотропное действие экстрактов лотоса орехоносного
на фоне экспериментальной дислипидемии / Н.А. Ломтева, А.А. Бони, Е.И.
Кондратенко // Материалы IX Международной научно-практической
конференции Достижение фундаментальных наук и возможности
трансляционной медицины в решении актуальных проблем практического
здравоохранения. Астрахань, 2013. – С.80-81.
33. Ломтева, Н.А. Влияние экстрактов лотоса орехоносного на
иммунологические показатели на фоне экспериментальной дислипидемии /
Н.А. Ломтева, А.А. Бони, Е.И. Кондратенко // Биотехнологии: наука и
практика, инновации и бизнес материалы Всероссийской научной
конференции с международным участием. Издатель: Сорокин Роман
Васильевич, Астрахань. – 2013. – С.4-5
34. Ломтева, Н.А. Влияние экстрактов лотоса орехоносного (nelumbo
nucifera) на поведение животных в Суок-тесте / Н.А. Ломтева, А.С.
Чуприкова, В.Х. Андрешева // Успехи современного естествознания. – 2013.
– №8. – С.17-18
35. Ломтева, Н.А. Влияние экстрактов лотоса орехоносного на показатели
белой крови в эксперименте / Н.А. Ломтева, Е.И. Куклина, Ю.О. Ахилова //
Успехи современного естествознания. – 2013. – №8. – С.18-19
36. Ломтева, Н.А. Влияние экстрактов лотоса орехоносного на
поведенческие реакции и уровень тревожности крыс / Н.А. Ломтева, А.С.
Чуприкова, Э.А. Досмуханова // Молекулярно-генетические и
фармакологические аспекты изучения ценных биологически активных
компонентов: Материалы Всероссийской научной конференции 24-25 апреля
2014 г. – Астрахань: Издатель: Сорокин Роман Васильевич, 2014.
37. Ломтева, Н.А. Влияние биологически активных веществ лотоса
орехоносного на показатели лейкоцитарной формулы и фагоцитарную
активность нейтрофилов / Н.А. Ломтева, Е.И. Кондратенко, С.К. Касимова,
Л.А. Яковенкова // Научные труды IV Съезда физиологов СНГ / под ред. А.И.
Григорьева, Ю.В. Наточина, Р.И. Сепиашвили. – М.: Медицина – Здоровье
(Сочи-Дагомыс, 8-12 октября), 2014. – 276 с.
38. Ломтева, Н.А. Изучение протекторных и антиоксидантных свойств
экстракта семян Лотоса Орехоносного (Nelumbo nucifera) у самок крыс с
индуцированным CCl4 повреждением печени и почек / М.С. Абделхамид,
Е.И. Кондратенко, Н.А. Ломтева // II Международная научно-практическая
конференция «Современная биология: актуальные вопросы», 17-18 октября
2014 г., Санкт-Петербург, Россия.
39. Ломтева, Н.А. Оценка биологической активности растительных
экстрактов, богатых флавоноидами, для использования в продуктах
 39
функционального питания / Н.А. Ломтева, С.К. Касимова, Е.И. Кондратенко,
Л.А. Яковенкова // Материалы Международной научно-технической
конференции «Продовольственная безопасность: научное, кадровое и
информационное обеспечение». Воронеж, 13-14 ноября 2014 г.
40. Lomteva, N.A. Evaluation of the Protective Activity of the Extract of Nelumbo
nucifera Seedpod Against CCl4-induced Hepatic-Renal Toxicity in Rats /
Кондратенко Е.И., М.С. Абделхамид, Н.А. Ломтева // Materials of the 12th
International Conference on Chemistry and its Role in Development (ICCRD'12) –
Mansoura & Sharm El-Sheikh, Egypt, 16-20 March 2015.– P. 425.
41. Ломтева, Н.А. Влияние биофлавоноидов лотоса орехоносного на
фагоцитарную активность нейтрофилов / Кондратенко Е.И., Касимова С.К.,
Яковенкова Л.А., Кондратенко К.Н. // Материалы VIII Московского
Международного Конгресса «Биотехнология: Состояние И Перспективы
Развития» 17-20 марта 2015 г., С.116-117
42. Ломтева, Н.А. Зависимость поведения отчаяния в тесте Порсолт от пола
и гормонального статуса самцов и самок крыс / Н.А. Ломтева, Е.И.
Кондратенко, С.К. Касимова // В сборнике: Механизмы функционирования
нервной, эндокринной и висцеральных систем в процессе
онтогенеза материалы Международной научной конференции, посвященной
75-летию Адыгейского государственного университета. – 2015. – С. 92-95.
43. Ломтева, Н.А. Разработка компонентов функционального питания на
основе биофлавоноидов растительного происхождения / Н.А. Ломтева, Е.И.
Кондратенко, С.К. Касимова, Л.А. Яковенкова, Н.Е. Сороколетова, С.К.
Уркумбаева, Ю.А. Петрякова // Материалы VIII Московского
Международного Конгресса «Биотехнология: Состояние И Перспективы
Развития» 17-20 МАРТА 2015 г., С.432-433.
44. Ломтева, Н.А. Влияние биологически активных веществ лотоса
орехоносного на поведение отчаяния в тесте Порсолт / Н.А. Ломтева, Е.И.
Кондратенко, С.К. Касимова // Фундаментальные и прикладные проблемы
получения новых материалов: материалы X Международной научно-
практической конференции для молодых ученых. – Астрахань, 2016. – С.51-
54.
45. Lomteva, N.A. Changes in lipid profile by extract of lotus (Nelumbo nucifera)
seeds in rats / N.A.Lomteva, E.I. Kondratenko // Keystone symposia on Molecular
and Cellular Biology New Therapeutics for Diabetes and Obesity, 17 April, 2016,
California USA. – C.40.

Список сокращений и обозначений

БАВ – биологически активные вещества;
ВСР – вариабельность сердечного ритма;
ИЛ – интерлейкин;
ИН – индекс напряжения;
ЛО – лотос орехоносный;
ЛП – латентный период;
МДА – малоновый диальдегид;
 40
ПОЛ – перекисное окисление липидов;
СОД – супероксиддисмутаза;
СК – Суок-тест;
ТБК – тиобарбитуровая кислота;
ФАН – фагоцитарная активность нейтрофилов;
ФИ – фагоцитарный индекс;
ФЧ – фагоцитарное число;
ЧСС – частота сердечных сокращений;
ЭДЛ – экспериментальная дислипидемия;
ЭКЛ – экстракт коробочек лотоса орехоносного;
ЭЛеЛ – экстракт лепестков лотоса орехоносного;
ЭЛиЛ – экстракт листьев лотоса орехоносного;
ЭСЛ – экстракт семян лотоса орехоносного.