RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS
GRUPO 02
PROCEDIMIENTO
1. Reacción de Fehling:
o Tomar la muestra que se quiera analizar (normalmente una cantidad de 3
cc.)
o Añadir 1 cc. de Fehling A y 1 cc. de Fehling B. El líquido del tubo de
ensayo adquirirá un fuerte color azul.
o Calentar el tubo al baño María o directamente en un mechero de
Laboratorio.
o La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo-ladrillo.
o La reacción será negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-
verdoso.
2. Reacción del Lugol: Este método se usa para identificar polisacáridos. El almidón
en contacto con unas gotas de Reactivo de Lugol (disolución de yodo y yoduro
potásico) toma un color azul-violeta característico.
o Poner en un tubo de ensayo unos 3 cc. del glúcido a investigar.
o Añadir unas gotas de lugol.
o Si la disolución del tubo de ensayo se torna de color azul-violeta, la reacción
es positiva.
Fundamento: La coloración producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre
las espiras de la molécula de almidón.
No es por tanto, una verdadera reacción química, sino que se forma un compuesto de
inclusión que modifica las propiedades físicas de esta molécula, apareciendo la coloración
azul violeta.
Basándote en esta característica te voy a proponer un pequeño juego de magia que te va a
sorprender:
Una vez que tengas el tubo de ensayo con el almidón y el lugol, que te habrá dado
una coloración violeta, calienta el tubo a la llama y déjalo enfriar. !Sorprendido¡
Vuelve a calentar y enfriar cuantas veces quieras.... ¿Dónde está el color?
Figura 2 Figura 3
Figura 1
Figura 4
Figura 5
INVESTIGACION DE POLISACARIDOS (ALMIDÓN)
Figura 6
Figura 7
Técnica:
https://www.academia.edu/30267094/LABORATORIO_10_RECONOCIMIENTO_DE_BI
OMOLECULAS
UNIVERSIDAD JORGE TADEO LOZANOKAROL TATIANA MEDINA TOVARLUISA FERNANDA LARA
ARDILABIOLOGIA GENERAL
INTRODUCCIÓNTodos los organismos vivos realizan actividades físicas como trabajar, estudiar correr etc. lascuales están
asociadas a funciones químicas en su organismo. La suficiente energía ysustancias necesarias para realizar dichas
actividades es sintetizada en algunos casos por elcuerpo y en otros casos es adquirida por medio de alimentos. Estos
compuestos químicos sedenominan biomoleculas orgánicas e inorgánicas las cuales están presentes en los seres vivospara
llevar a cabo procesos importantes como la conservación y producción de energía,construcción y mantenimiento de tejidos,
protección y sostenimiento de los órganos y elmetabolismo del organismo.En este laboratorio se identificó las proteínas,
lípidos, carbohidratos, ácidos nucleicos y salespresentes en muestras orgánicas e inorgánicas como agua, albúmina, leche,
extracto de papa,extracto de hígado, extracto de semilla, almidón glucógeno, algodón, bebida hidratante y sueropedialyte,
además se identificó la solubilidad de la mantequilla, el aceite de cocina y el aceiteoleico en muestras de agua, etanol, éter
de petróleo y diclorometano. Utilizando para estaidentificación y diferenciación de biomoleculas los reactivos de Benedict,
Molisch, Lugol y Biuretlas cuales arrojaron pruebas positivas o negativas para cada práctica realizada.MARCO
TEÓRICOLas biomoléculas, son moléculas que constituyen a todo ser vivo. Una célula viva esta formadabásicamente por
los cuatro bioelementos más abundantes C, H, O y N, que combinados entreellos de diferentes formas, originan una gran
cantidad de compuestos los cuales constituyen lamayor cantidad de masa en una célula. El agua, compuesto líquido
indispensable para la vida,está también conformada por bioelementos, su importancia radica en que la mayoría dereacciones
intracelulares se llevan a cabo en medio acuoso.Las biomoléculas se pueden dividir en biomoléculas orgánicas e inorgánicas.
Lasbiomoléculasinorgánicas, son fundamentales para la vida pero no son producidas por seres los vivos, en estegrupo se
encuentran, el agua y sales inorgánicas. Por otro lado, las biomoléculas orgánicas,son aquellas que poseen una estructura a
base de carbono y son sintetizadas por los seresvivos, estas a su vez se dividen en: Los Glúcidos o carbohidratos, compuestos
por carbono, hidrógeno y oxígeno, solubles enagua. Son la fuente más importante de suministro de energía en los seres
vivos, se dividen enmonosacáridos (azúcares simples), la unión de dos monosacáridos forman los disacáridos y launión de
3
Las Proteínas, constituidas por cadenas lineales de aminoácidos (formadas por un grupo(-NH2) y uno (-COOH)),son el tipo
de biomoléculas más diversa que existe. Sus funciones sonespecíficas en cada organismo vivo y varían de acuerdo al tipo
de estructura que posean, por locual existe un gran número de proteínas dentro de una célula. Existen dos clases de ácidos
nucleicos, el ADN (ácido desoxirribonucleico) y ARN (ácidoribonucleico), polímeros especializados en almacenar,
transmitir y expresar la informacióngenética en secuencias de aminoácidos, las cuales después de pasar por algunos
procesos,pueden conforman las proteínas de una célula. Las biomoléculas orgánicas se pueden identificar a partir de una
serie de reacciones químicas,las cuales pueden llevarse a cabo en el laboratorio; para ello necesitamos adquirir
conocimientofrente a los reactivos que hacen posibles desarrollar estos experimentos a cabalidad y conéxito#. La prueba
con el reactivo de Benedict sirve para identificar azúcares reductores tales como lalactosa, glucosa maltosa y celobiosa,
presentes en los carbohidratos los cuales a su vez, sonbiomoléculas orgánicas presentes en los seres vivos, esta biomolécula
es de gran importanciapara el organismo ya que es la fuente primaria de energía.El reactivo de Benedict esta formado
químicamente por:Sulfato cúprico, citrato de sodio, carbonato anhidro de sodio y NaOH para alcalinizar el medio. Al
mezclarse este reactivo con el azúcar se presenta una reacción de oxidación. El cobre II dedisolución acuosa y de color azul
se reduce a cobre I, el cual se precipita como óxido de cobre Ide color rojo.El reactivo de Molisch reacciona con los
carbohidratos efectuando una deshidratacióncatalizada la cual se produce por el ácido sulfúrico presente en este reactivo.
Este reactivo esuna disolución de alcohol al 15% de a-naftol en etanol, produce una reacción de condensaciónal reaccionar
con el furfural (es un aldehído que se obtiene de desechos agrícolas) paraproducir un compuesto de color púrpura.El reactivo
de Lugol es una disolución de Yodo y Yoduro de Potasio es utilizado como indicador de prueba de yodo, que permite
identificar polisacáridos como los almidones, glucógeno yalgunas dextrinas, sin embargo este no reacciona con moléculas
de azúcar simple como lafructosa o lactosa. En el caso de la identificación de almidón con el Lugol, al mezclase estanueva
solución toma un color azul intenso, el que manifiesta la presencia de almidón.El reactivo de Biuret está compuesto de
hidróxido de potasio y sulfato cúprico junto con tartratode sodio y de potasio, presenta un color azul y cambia a violeta
cuando se encuentranproteínas y tiende a rosa cuando se combinan polipéptidos de cadena corta.Las bebidas energizantes
básicamente están compuestas por taurina, carnitina, inositol ycafeína, cafeína, hidratos de carbono: sacarosa, fructosa,
glucosa, Glucoronalactona,isomaltulos, aminoácidos, Vitaminas: B1 y B2, B6, B12 C ; extracto de hierbas: guaraná,
yerbamate, ginseng y minerales. Lo cual es muy similar a la composición descrita en la bebidasenegizantes como el rodeo.
1) RESULTADOSRECONOCIMIENTO DE PROTEINAS
¿Qué cambio y evidencias presenta la muestra frente a la presencia de proteínasmediante la reacción de Biuret?
PROTEINASReactivo de Biuret 2ml+( Color violeta)Muestra (2ml) ResultadosAgua -Leche +Albumina + solucion
coloidalHígado +Papa +Semilla +
Inici
RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS
a-
Carbohidratos en general
MuestrasAdicionar Agregar 2 mlrespectivamente a3 gotas reactivode MolishMarcados conel nombre decada muestra8 tubos
de ensayoAgua, Albúmina, Leche,Extracto de hígado papay semillas, pedacitos depapel y AlmidónInici
SO
¿ Cuales cambios presentan las ocho muestras al revelar la presencia de carbohidratos,mediante la reacción de
Molish?Hipótesis: De acuerdo a la reacción de Molish y la composición química de las muestras, secomprobara la presencia
de carbohidratos en el hígado, leche, papa, semillas, pedacitos depapel y almidón.El experimento de carbohidratos muestra
todas las muestras de forma positiva, al presental uncolo azu-violeta, revelando la presencia de monosacáridos, disacáridos
o polisacáridos, conesta reacción no se puede especificar el tipo de carbohidrato ya que se utiliza para unreconocimiento
general, de esta forma se comprobó la hipótesis planteada en la preguntaproblema. Sin embargo obtuvimos positivo en la
muestra de agua a pesar de que no es uncarbohidrato, la composición química del reactivo de Molish y el agua se unen por
enlaceselectrostaticos que produce la interaccion de los O e H de ambos compuestos.
b-
Polisacáridos
CARBOHIDRATOS GENERALES
SO
¿En que muestras se encuentra la presencia de polisacáridos, a través de la reacción de Lugol?Hipótesis: De acuerdo a la
reacción de Lugol y la composición química de las muestras, secomprobara la presencia de polisacáridos en el glucógeno,
copitos de algodón y almidón.El experimento de Lugol, muestra un color azul intenso, mostrando positivo en las muestras
dealgodón, glucógeno y almidon, comprobando asi la hipótesis establecida. Estas muestras, estánformadas principalmente
por celulosa, glucosa ,amilosa y amilopectina, compuestas en sutotalidad por multiples uniones de monosacáridos, por tal
motivo forman polisacáridos y se pudocomprobar a través del reactivo de Lugol.
c- Carbohidratos Reductores
POLISACARIDOS
Reactivo de Lugol O.5 ml+( Color azul, café oscuro, negro)-( Color amarillo o color ladrillo)Muestra (2ml) ResultadosAgua
-Leche -Albumina -Higado -Papa -Glucogeno +Algodon +Almidon +
Fin
Cuales muestras revelan la presencia de carbohidratos reductores mediante la reacción deBenedict?Hipótesis: De acuerdo a
la reacción de Benedict y la composición química de las muestras, quepuedan tener glucosa, maltosa fructuosa o celobiosa,
se comprobara la presencia decarbohidratos reductores en la glucosa, leche, pedialite y bebida energizante.Deacuerdo a los
resultados obtenidos por la reacción de Benedict, se comprobó la hipótesis encuanto a la glucosa, leche y energizante, debido
a que están compuestos principalmente por glucosa, el carbohidrato reductor mas abundante en compuestos y el organiizmo.
Por otro ladoobtuvimos un resultado negatico, en la muestra de pedialite, debido a que esta compuesto enun alto porcentaje
por sodio, potasio, cloruro y en una pequeña proporción glucosa, lo que haceque esta no se manifieste como un carbohidrato
reductor.
SOLUBILIDAD DE LIPIDOS
CARBOHIDRATOS REDUCTORES
Reactivo de Benedict 1 ml. Calentarpor 10 min+( Color ladrillo)-( Color azul)Muestra (1ml) ResultadosAgua -Albumina -
Glucosa +Almidon -Glucogeno -Leche + Solucion coloidalPedialite -Energizante +
Fin
Observar y tomar resultadosMuestrasAgregar 3 mlrespectivamente acada tuboMarcados conel nombre decada muestra3
tubos de ensayoAgua, etanol,eter de petróleo,diclorometanoInici
¿Que reactivos permiten la solubilidad de los lípidos?Hipótesis: De acuerdo a la composición y propiedades químicas de
los lípidos, se demostrarasu solubilidad, en reactivos orgánicos como etanol, éter de petróleo y diclorometano.El
experimento de la solubilidad de lípidos, permitio evidenciar que la manqtequilla, el aceite decocina y el aceite oleico son
principalmente solubles en éter de petróleo, aunque algunas de lasmuestras son solubles en otros reactivos, el éter de petróleo
mostro la solubilidad de lasmuestras en diferentes grados, de esta manera si la muestra es incompatible con las muestrasse
forma una mezcla heterogénea; si la muestra es poco compatible, no se disuelve en sutotalidad y si la muestra es totalmente
compatible con los reactivos se forma una soluciónhomogénea. Es importante resaltar que el principal uso del éter de
petróleo es como undisolvente organico no polar y una de las propiedades de los lípidos es disolverse en esta clasede
reactivos, al igual que en cetonas, cloroformo, benceno.
Muestra (3ml) Mantequilla Aceite de cocina0.2 mlAceite oleico0.2 mlAgua - - -Etanol - + +Eter de petroleo ++ ++
+Diclorometano ++ - -
Insoluble
Poco soluble +Muy soluble ++Repetir todo elprocedimiento0.2 ml de aceite de cocina0.2 ml de acido oleicoInici
¿En que muestras se evidencia la presencia ácidos nucleicos mediante la reacción condifenilamina?Hipótesis: De acuerdo a
la reacción con difenilamina y la composición química de las muestras,se comprobara la presencia de ácidos nucleicos en
las tres muestras (ADN, levadura y extractode hígado).
ACIDOS NUCLEICOS
Difenilamina 1 ml. Calentar por 20min y reposar (hielo) 10 min.Muestra (1ml) ResultadosLevadura -No se
manifiestaExtracto de higado - Presipitado de colorverde (ARN)Patron de ADN + color azul (AND)
Adicionar acada tubo1ml susensión de levadura 1%Reposar 10 minPipetear por separado3 tubos de ensayoCalentar 20min1
ml difenilaminaObservar ytomar datos1ml extracto de hígado1ml patrón ADNFin
RECONOCIMIENTO DE SALES
y la composición química de las muestras, seobservara la presencia de sales en las cuatro muestras correspondientes (NaCl,
KCl, suero oraly bebida energizante)
SALES
5 gotas de AGNO
3.
Fin
5 gotas AgNO
Cambios
El experimento
con AgNO
3,
perimitio evidenciar la presencia de sales en NaCl , suero oral ybebida energizante, debido a que están conformados si no
en su totalidad, en su gran mayoríapor sales compuestas por elementos como sodio, potasio, cloruro.
Las proteínas corporales están compuesta por 20 aminoácidos, los cuales tienendiferentes funciones específicas el
organismo: #
FUNCIÓN PROTEÍNA
EJEMPLO
Enzimatica Enzimas
Insulina y el glucagón
Estructural
Glucoproteínas
Las histonas
Forman parte de las membranas celulares actúan como receptoresfacilitando el transporte de sustancias.
Reguladora
Ciclina
Transporte
Hemoglobina:Hemocianina:
Contractil
Actina:
Los lípidos son sustancias poco solubles y su función es la reserva de energía. Lasácidos grasos son insolubles en agua pero
muy solubles en compuestos orgánicos comoel éter, cloroformo y benceno.La vitamina E formada por los ácidos grasos
esenciales (linoléico,linolénico yaraquidónico) pertenece a la dieta humana, puesto que el cuerpo no puede sintetizar estos
lípidos. Dichos Ácidos grasos son insolubles en agua en metanol y diclorometano.Por otra parte los triglicérido y
diglicéridos (Aceites), están presentes en la dieta del ser humano con el fin de conservar energía. se caracterizan por ser
insolubles en agua.La lecitina perteneciente a los fosfolípidos es muy importante en la dieta humana puesesta es esencial
para las membranas celulares, el cerebro y nervios. son insolubles enagua y por tanto limitan el paso de agua a través de la
membrana celular.Los lípidos denominados CHYLOMICRONES son pertenecientes a la dieta humana, pues estos no son
c¡sintetizados por el cuerpo, son insolubles en agua pero solubles encompuestos orgánicos.La bebida hidratantes y
energizantes contienen alto grado de carbohidratos y proteínascomo se muestra a continuaciòn.
Nutriente
Por cada 100g
Agua
88.45g
Proteínas
0g
Lípidos
0g
Ceniza
0.27g
Hidratos de Carbono
11.25g
Información Nutricional
por 100 ml
Energia
Carbohidratos 11gAzúcares
11 g
Sodio 0.04g
Bebida energizante Burn
Nutrición 100mLEnergía
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