DOCUMENTO DE TRABAJO Nº 5

El microscopio

I. Identificación curricular:

ASIGNATURA

Biología Celular

260BC01 SEMESTRAL
CÓDIGO PLAN DE ESTUDIO

NO TIENE 6 HRS

REQUISITO(S) HORAS SEMANALES

OBLIGATORIA
SEMESTRAL
DIURNA/VESPERTINA
TEÓRICO-PRÁCTICA
CARÁCTER
Elaborador: BQ. Johana Rivera P.

II. Aprendizajes Esperados:

 Reproduce principios de la organización de la materia, mediante la comparación de

distintas estructuras químicas de importancia biológica.

 Jerarquiza organismos vivos en distintos niveles de organización biológica.

III. Síntesis esquemática de Contenidos

EL MICROSCOPIO ÓPTICO

Figura 1: microscopio óptico mono-ocular.

IV. Actividades

1.- Previo a la actividad de laboratorio, investigue el nombre y función de las partes del
microscopio óptico mostradas en la figura 1.

R: 1-Lente Ocular: Son los sistemas de lentes más cercanos a la mira del observador. Son
cilindros huecos en la parte superior del microscopio provistos de lentes convergentes.
Dependiendo de si existe uno o dos oculares, los microscopios pueden ser monoculares o
binoculares

2- Brazo: La columna o el brazo, en algunos casos conocida por asa, es la pieza de la parte
posterior del microscopio. Sujeta al tubo en su parte superior y en la parte inferior se acopla
al pie del aparato.

3-Platina: La platina es la pieza metálica plana en la que se coloca la muestra a observar.

Tiene un orificio en el eje óptico del tubo que permite que pase el rayo de luz en dirección a
la muestra.

4-Tornillo macrometrico: El dispositivo enganchado a este tornillo hace que el tubo del
microscopio se deslice verticalmente gracias a un sistema de cremallera. Estos movimientos
permiten que se enfoque rápidamente la preparación:

5- Tornillo micrometrico: Este mecanismo ayuda a enfocar la muestra con un enfoque exacto
y nítido a través del movimiento casi imperceptible de la platina.

6- Base o Pie : Constituye la base del microscopio y su apoyo principal, puede tener distintas
formas, siendo las más habituales rectangulares y con forma de Y.

7-Fuente de luz: Este es un elemento esencial que genera un haz de luz dirigido hacia la
muestra. En algunos casos el haz de luz es primero dirigido hacia un espejo que a su vez lo
desvía hacia la muestra. La posición del foco en el microscopio depende de si se trata de un
microscopio de luz transmitida o de luz reflejada.

8-Condensador: Es un sistema de lentes convergentes que capta los rayos de luz y los
concentra en la muestra proporcionando mayor o menor contraste. Tiene un regulador para
ajustar la condensación a través de un tornillo. La localización de este tornillo puede variar
dependiendo del modelo de microscopio

9-Pinzas : Las pinzas tienen la función de mantener fija la preparación una vez esta se ha
colocado sobre la platina.

10- Objetivo: El objetivo es el conjunto de lentes que se encuentran más cerca de la muestra
y que producen la primera etapa de aumento. El objetivo suele tener una distancia focal muy
corta. En los microscopios modernos distintos objetivos están montados en el revólver. Este
permite seleccionar el objetivo adecuado para el aumento deseado. El aumento del objetivo
junto con su apertura numérica suele estar estar escrito en su parte lateral.

11- Revolver: El revólver es una pieza giratoria donde se montan los objetivos. Cada objetivo
tiene proporciona un aumento distinto, el revólver permite seleccionar el más adecuado a
cada aplicación. Habitualmente el revólver permite escoger entre tres o cuatro objetivos
distintos.

12- Tubo: Tiene forma cilíndrica y por dentro es de color negro para evitar las molestias del
reflejo de la luz. Al final del tubo es donde se colocar los oculares.

MATERIALES Y REACTIVOS:
Microscopio óptico
Portas y cubre objetos
Periódicos o revistas
Tijeras
Tórulas
Pisetas con agua destilada
Azul de metileno u otra tinción
Mechero de alcohol
Pinzas para portaobjeto
Papel absorbente.

En el laboratorio, el docente hará entrega de un microscopio óptico con el que realizará, de

manera grupal, las siguientes actividades:
2. Identifique las partes que componen el microscopio óptico: sistema mecánico, óptico y de
iluminación. Dibuje y rotule.

R:

3.- Preparación de muestras:

a. En un portaobjeto limpio coloque una letra recortada desde un diario o revista y cubra
con un cubreobjetos. Para una mejor manipulación puede pegar el cubreobjeto por el
contorno al portaobjeto con esmalte de uñas.
b. En un portaobjeto limpio, coloque una gotita de agua destilada. Con una tórula limpia
raspe la cara interior de su mejilla con el fin de obtener células de mucosa oral, luego
deposite el contenido en la gotita de agua del portaobjetos y deslice a lo largo de éste,
esparciendo la muestra. Para fijar las células al portaobjetos, tómelo con las pinzas
(IMPORTANTE PARA EVITAR QUEMADURAS) y con mucho cuidado deslice
por encima de la llama de un mechero hasta que el agua se haya evaporado. (OJO:
para asegurarse de cuál lado se encuentra su muestra biológica en el portaobjetos
puede marcarlo para evitar que pierda las células por incineración). Una vez frío el
portaobjetos agregue unas gotas de azul de metileno sobre la muestra y deje reposar
por 2-5 minutos. A continuación lave el exceso de tinción y deje secar (puede usar el
mechero nuevamente, recuerde el uso de las pinzas). Cuando la muestra esté seca
deposite un cubreobjetos sobre la muestra y péguelo al portaobjetos con esmalte de
uñas. Este proceso se llama montaje de la muestra.
4.- Observación de las muestras: Realice cada uno de los siguientes pasos, comenzando con
la muestra A, sólo una vez que haya terminado con ella puede pasar a la muestra B, las células
de la mucosa oral.

 Coloque el objetivo de menor aumento en posición de enfoque y bajar la platina

completamente. Observe con aumento menor e indique aumento del objetivo y
apertura numérica.
 Coloque la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas.
 Comience la observación con el objetivo de menor aumento, acercando la lente
objetivo a la preparación, empleando el tornillo macrométrico. Mientras desplaza la
platina hacia arriba mire por el ocular hasta que observe algo nítida la muestra. En
este momento gire el tornillo micrométrico hasta obtener un enfoque fino. Dibuje lo
que observe y rotule. Indique aumento ocular, aumento objetivo y aumento total.
 Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser
suficiente con mover un poco el tornillo micrométrico para lograr un enfoque fino. Si
al cambiar de objetivo se perdió por completo la imagen, es preferible volver a
enfocar con el objetivo anterior y repetir la operación.

IMPORTANTE: Anote cada una de sus observaciones en su cuaderno de laboratorio y

conteste las preguntas de la actividad complementaria para el laboratorio siguiente. Podría
ser interrogado posteriormente.

ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA

1. Averigüe sobre los diversos tipos de microscopios de luz.

 Microscopio de luz fluorescencia - Las lentes del objetivo, que habitualmente se

componen de vidrio se sustituyen por lentes de cuarzo, y la iluminación se produce
por lámparas de mercurio. No usa filtros, y se observa en placas fotográficas. La
variedad de fluorescencia sí usa filtros y la observación es directa.

 Microscopio de luz ultravioleta – La imagen en el microscopio de luz ultravioleta

depende de la absorción de esa luz por las moléculas de la muestra. La fuente de luz
ultravioleta tiene una longitud de onda de 200 nm, por lo tanto puede alcanzar una
resolución de 100 nm. La microscopia ultravioleta no es muy diferente del
funcionamiento de un espectrofotómetro pero sus resultados son registrados en
fotografías. La muestra no se puede observar directamente a través del ocular porque
la luz ultravioleta puede dañar la retina. El método sirve para detectar ácidos
nucleicos, proteínas que contienen determinados aminoácidos. Mediante longitudes
 de ondas específicas para la iluminación se puede obtener mediciones
espectrofotométricas para cuantificar el ADN y el ARN.

 Microscopio de luz transmitida: En este tipo de microscopio la luz atraviesa la

muestra. Para esta clase de microscopios es necesario preparar la muestra cortándola
en láminas muy finas. La muestra se ilumina desde debajo la platina. La preparación
de la muestra hace que esta sea semitransparente y parte de la luz pueda atravesarla y
llegar al objetivo para ser observada posteriormente a través del ocular. En general
este es el sistema de iluminación más utilizado entre los microscopios ópticos.

 Microscopio de luz reflejada: En este caso la luz ilumina la muestra y parte de esta
es reflejada y dirigida al objetivo. De este modo es necesario iluminar la muestra
desde la parte superior de la platina. Este tipo de microscopía es utilizada para
examinar materiales opacos como pueden ser estructuras metálicas, materiales
cerámicos, etc. Existen microscopios ópticos que permiten los dos tipos de
iluminación de modo que es posible observar tanto muestras semitransparentes como
opacas. Los microscopios estereoscópicos (permiten observar la muestra en tres
dimensiones) son siempre de luz reflejada.

2. Investigue cómo funciona y los usos de la microscopia electrónica.

FUNCIONAMIENTO: El microscopio electrónico utiliza electrones para iluminar un

objeto. Dado que los electrones tienen una longitud de onda mucho menor que la de la luz
pueden mostrar estructuras mucho más pequeñas. La longitud de onda más corta de la luz
visible es de alrededor de 4.000 ángstroms (1 ángstrom es 0,0000000001 metros). La
longitud de onda de los electrones que se utilizan en los microscopios electrónicos es de
alrededor de 0,5 ángstroms.

Todos los microscopios electrónicos cuentan con varios elementos básicos. Disponen de un
cañón de electrones que emite los electrones que chocan contra el espécimen, creando una
imagen aumentada. Se utilizan lentes magnéticas para crear campos que dirigen y enfocan
el haz de electrones, ya que las lentes convencionales utilizadas en los microscopios ópticos
no funcionan con los electrones. El sistema de vacío es una parte relevante del microscopio
electrónico. Los electrones pueden ser desviados por las moléculas del aire, de forma que
tiene que hacerse un vacío casi total en el interior de un microscopio de estas
características. Por último, todos los microscopios electrónicos cuentan con un sistema que
registra o muestra la imagen que producen los electrones.
USOS: Son ampliamente usados en la biología celular. Aunque permite una menor capacidad
de aumento que el microscopio electrónico de transmisión, este permite apreciar con mayor
facilidad texturas y objetos en tres dimensiones que hayan sido pulverizados metálicamente
antes de su observación. Por esta razón solamente pueden ser observados organismos
muertos, y no se puede ir más allá de la textura externa que se quiera ver. Los microscopios
electrónicos sólo pueden ofrecer imágenes en blanco y negro puesto que no utilizan la luz.

Este instrumento permite la observación y caracterización superficial de materiales

inorgánicos y orgánicos, entregando información morfológica del material analizado. A
partir de él se producen distintos tipos de señal que se generan desde la muestra y se utilizan
para examinar muchas de sus características. Con él se pueden realizar estudios de los
aspectos morfológicos de zonas microscópicas de diversos materiales, además del
procesamiento y análisis de las imágenes obtenida.

La microscopia electrónica se puede utilizar para explorar la naturaleza y los mecanismos

moleculares de la enfermedad, para ver la estructura 3D de tejidos o de células biológicos,
para determinar la estructura de proteínas y para observar virus en un contexto biológico.

3. Busque información acerca de la preparación de muestras para microscopía.

 R: El objetivo de la preparación de muestras para microscopía es permitir que las

estructuras de los materiales se revelen con suficiente contraste de modo que las
características de interés sean descritas, grabadas y caracterizadas en detalles
visibles a una escala menor que la agudeza visual del ojo humano. La escala última
de observación estará limitada por la resolución del sistema de imagen del
microscopio.
 Asegurar que la muestra a observar es representativa del material, objeto u
organismo de procedencia que se desea estudiar.
 Hacer que las características de interés sean accesibles al sistema de imagen del
microscopio.
 Cuando sea necesario, aumentar el contraste entre los elementos estructurales de los
materiales y el fondo.
 Proporcionar las condiciones suficientes para la estabilidad de las muestras, y
suficiente significa proteger las muestras de decaimiento, degradación, corrosión o
contaminación dentro de la escala de tiempo de la observación.
 Ajustar la muestra a los requisitos ópticos del sistema de imagen del microscopio
para proveer de las condiciones óptimas de contraste y resolución, y evitar
artefactos ópticos que pudieran aparecer y que oscurecerían la imagen o
incorporarían falsos detalles.
 V. Evaluación de la Actividades

La evaluación de la actividad es formativa. El alumno puede realizar la siguiente

autoevaluación de las actividades realizadas.

Descriptores Carla Mariana Maria Carolina

Moraga
contreras Torres Vassallo

Realicé las tareas que me fueron 4 4 4 4

asignadas puntual y responsablemente.

Investigué la información necesaria para 4 4 4 4

un correcto desarrollo de las actividades
de laboratorio

Respeté en todo momento las normas que 4 4 4 4

rigen el trabajo en laboratorio

Usé mi delantal de laboratorio 4 4 4 4

1: No cumplo con el descriptor

2. Cumplo con el descriptor de forma deficiente, con omisiones o errores

3. Cumplo con el descriptor con errores menores

4. Cumplo cabalmente con el descriptor

VI. Síntesis de los contenidos:

Los conceptos más importantes que aprendí esta semana son:

Célula: Unidad anatómica fundamental de todos los organismos vivos,

generalmente microscópica, formada por citoplasma, uno o más núcleos y
una membrana que la rodea.

El núcleo celular es una estructura membranosa que tiene la función de

ejercer un control sobre las actividades de las células y de conservar la
integridad de los genes.

Fibra: Filamento que entra en la composición de tejidos orgánicos animales o

vegetales o que presentan en su textura algunos minerales.

Lo que puedo aplicar en mi trabajo, o en mi rutina personal o familiar es:

En mi rutina personal aplicar más la observación, descubrir lo que nos rodea,

ver lo que los demás no ven a simple vista. Ver el mundo de forma nueva
cada día. El mirar mas haya de lo que nuestros ojos nos muestran, el querer
descubrir cosas nuevas.

Las actitudes que desarrollé esta semana son:

Paciencia para poder lograr encontrar algo a través del microscopio.

Compromiso y dedicación ya que requiere tiempo para la observación.

Confianza y respeto al compañero ya que teníamos que de obtener células de

mucosa oral de nuestras mejillas para poder verlas.
VII. Glosario

Microscopio: instrumento ampliamente utilizado en distintas ramas de las ciencias que

permite la observación de objetos diminutos de difícil observación a simple vista gracias a
un sistema de lentes que permiten el aumento de la imagen obtenida.

Tinciones: son colorantes utilizados con el fin de mejorar el contraste de la imagen

obtenida por microscopía. Presentan diferentes grados de afinidad por los componentes
celulares, de acuerdo a sus propiedades químicas, lo cual permite diferenciar entre ellos en
un preparado celular.

VIII. Links de interés

http://www.educar.org/inventos/elmicroscopio.asp

http://museovirtual.csic.es/salas/micros/m2.htm