Вы находитесь на странице: 1из 37

МФК МГУ, 24.02.

2016
«Химия» мозга…, лекц. 2

«Электричество»
МОЗГА
Лектор: проф. Дубынин Вячеслав
Альбертович, биологический факультет
Потенциал покоя и потенциал действия
нервных клеток, их свойства. Проведение
потенциалов действия, местные анес-
тетики, электрические рыбы и др.
Электрические свойства нейронов.
Потенциал покоя и потенциал действия.

синапсы

аксон

клетка-
мишень

Сигнал по мембране нейрона передается в виде коротких элект-


рических импульсов – потенциалов действия (ПД).
Этот процесс можно сравнить с передачей информации с помощью
включения и выключения фонарика (ПД = «вспышка света»).
Но для того, чтобы фонарик работал, нужна батарейка – источник
электрической энергии. В случае нейрона таким источником слу-
жит постоянный внутриклеточный заряд –
потенциал покоя (ПП). 2
Потенциал покоя (ПП) нейрона – его постоянный
отрицательный заряд, равный в среднем -70 мВ.
Измерить ПП можно с помощью тончайшей, особым образом вытянутой
стеклянной трубочки-микроэлектрода. Его кончик имеет диаметр < 1 мкм,
что позволяет практически без повреждения проткнуть мембрану клетки.

показания
вольтметра, мВ
Микроэлектрод (в 0
т.ч. канал внутри
кончика) заполнен
раствором соли,
проводящим эл.
ток. Это позволяет
-70 ПП
сравнить заряд
цитоплазмы
нейрона с зарядом
межклеточной время,
среды). момент мин
вольтметр прокола
мембраны 3
Наличие ПП – результат жизнедеятельности нейрона,
совместного функционирования всех биополимеров и
органоидов клетки; погибший нейрон быстро теряет ПП.

Первопричина ПП – разность концентраций ионов K+ и Na+


внутри и снаружи нейрона. Эту разность создает работа
особого белка-насоса Na+- K+- АТФазы (Na+-К+-насоса).

межклеточная Na+
среда К+

АТФ
Na+- K+- АТФаза обменива-
ет находящиеся внутри АДФ
клетки ионы Na+ на захва-
ченные в межклеточной
Na+
среде ионы К+, затрачивая
значительное кол-во АТФ. К+ внутриклеточная
4
среда
В результате работы Na+-K+-АТФазы в нейроне оказывается
примерно в 10 раз меньше Na+ и в 30 раз больше К+, чем в
межклеточной среде.
К+out : К+in = 1 : 30 Na+out : Na+in = 10 : 1
Несмотря на все это, до момента созревания (происходит на 2-3
месяце эмбрионального развития) нейрон не имеет заряда, и
количество положительных (прежде всего, К+) и отрица-
тельных ионов в его цитоплазме примерно одинаково.
Признак созревания
нейрона – появле-
ние на его мембране
постоянно открытых
К+-каналов (опреде-
ляется включе-
нием соотв. гена).
В результате стано-
вится возможной
диффузия К+
из клетки. внутриклеточная
5
среда
Как долго идет диффузия К+ из нейрона?
Очевидный вариант («до выравнивания концентраций») неверен,
поскольку двигаются заряженные частицы, и выход К+ сопро-
вождается накоплением в цитоплазме отрицательного заряда.

Этот отрицательный ПП – это отрицате-


заряд мешает диф- льный заряд цито-
фузии и в конце плазмы, останавли-
концов останавлива- вающий диффузию
ет её. Возникает ионов К+ в межкле-
состояние «динами- точную среду.
ческого равновесия»:
число ионов К+,
покинувших клетку
благодаря диффузии
= числу ионов К+,
втянутых в клетку
отрицательным за-
рядом цитоплазмы.

внутриклеточная
6
среда
«Уравнение Нернста»: ПП ~ lg ( К+out / К+in )
коэффициент пропорциональности равен 61.5 мВ для Т=36.6°С;
логарифм равен -1.48 (для соотно-
шения концентраций 1/30). ПП – это отрицате-
С учетом этого ПП = -91 мВ льный заряд цито-
плазмы, останавли-
(«равновесный потенциал» для К+) вающий диффузию
ионов К+ в межкле-
точную среду.

Вальтер Нернст
внутриклеточная
7
(Ноб.пр. 1921) среда
Такой вход Na+ ведет к сдвигу заряда цитоплазмы вверх
и частичной потере ПП

ПП = -91 мВ
(«равновесный потенциал» для К+)

В реальной клетке ПП
находится ближе к нулю
(в среднем -70 мВ).
Причина: существование
небольшого количества
открытых каналов для
ионов Na+.

Избыток ионов Na+ в


межклеточной среде, а
также их притяжение к
отрицательно заряженной
цитоплазме приводят к
входу Na+ в клетку.
внутриклеточная
8
среда
Такой вход Na+ ведет к сдвигу заряда цитоплазмы вверх
и частичной потере ПП

Ограничивает вход Na+


(1) малое число откры-
тых в каждый момент
времени Na+-каналов;
(2) работа Na+-K+-
АТФазы, которая
«откачивает» Na+,
обменивая его на К+

В целом ПП зависит от 3-х


главных факторов:
- диффузии K+ из клетки;
- диффузии Na+ в клетку;
- работы Na+-K+-АТФазы. внутриклеточная
9
среда
Такой вход
Диффузия ведетиз
Na+калия
ионов к сдвигу
клетки заряда цитоплазмы
определяется вверх
разностью
и частичной потере ПП (отсюда название – «ток утечки» Na+).
концентраций К out и К in .
+ +

Если увеличить К+out , то разность концентраций станет меньше,


диффузия – слабее, и для ее остановки потребуется не столь
значительный ПП (произойдет сдвиг заряда цито-
плазмы вверх до достижения новой точки равновесия). Этот график
можно по-
Если снизить К out , то раз-
+
лучить в
ность концентраций станет эксперимен-
больше, диффузия – силь- показания
вольтметра, мВ те, но в ре-
нее, и для ее остановки по- альном мозге
требуется более значитель- в норме такого
ный ПП (сдвиг заряда цито- 0
не происходит
плазмы вниз).
В целом ПП зависит от 3-х
главных факторов: ПП
- диффузии K+ из клетки;
- диффузии Na+ в клетку; время,
мин
- работы Na+-K+-АТФазы. увеличение снижение
К+ out К+out 10
Такой вход
Диффузия ведет квсдвигу
Na+натрия
ионов клетку заряда цитоплазмы
зависит, вверх
прежде всего, от +
и частичной потере ПП (отсюда название – «ток утечки» Na ).
количества открытых Na+-каналов на мембране.
Это число, в свою очередь, является стабильным свойством
конкретного нейрона. Чем больше таких каналов, тем ПП ближе к
нулю, чем меньше – тем ПП ближе к уровню -91 мВ.
Чем ближе ПП к нулю, тем показания
вольтмет- А: нейрон с большим числом
возбудимее нейрон (такие ра, мВ открытых Na+-каналов
нужны, например, в центрах
Б: нейрон со средним
бодрствования);
числом открытых Na+-
чем ближе ПП к уровню -91 мВ, 0
каналов (ПП= -70 мВ)
тем ниже возбудимость
В: нейрон с малым числом
(минимальна в центрах,
открытых Na+-каналов
запускающих движения).

В целом ПП зависит от 3-х


ПП нейрона А
главных факторов: -60
ПП нейрона Б
- диффузии K+ из клетки; -70
- диффузии Na+ в клетку; -80
ПП нейрона В
- работы Na+-K+-АТФазы. 11
время, мин
Работа Na+-K+-АТФазы может быть наруше-
на химич. веществами, например, токсином
одной из тропических лиан строфантином.

В этом случае вход ионов


Na+ не будет полностью
компенсироваться и ПП показания
сместится в сторону нуля вольт-
(степень смещения зависит метра, мВ
Strophanthus
от дозы токсина = доля kombe
заблокированных насосов).
0

Большая доза токсина


настолько нарушает работу
В целом ПП зависит от 3-х
Na+-K+-АТФаз, что ПП теряется ПП
главных факторов:
(происходит «разрядка
батарейкиK
- диффузии фонарика»).
+ из клетки;

диффузии
-Аналогия: Na + в клетку;
Na -K -насос = «за-
+ +
время,
работы
-рядное Na+-K+-АТФазы.
устройство» нейрона введение мин
строфантина 12
Работа Na+-K+-АТФазы может быть наруше-
на химич. веществами, например, токсином
одной из тропических лиан строфантином.

Strophanthus
kombe

Строфантин: повышение силы и


скорости сердечных сокращений;
мышечные клетки обладают ПП и
генерируют ПД (для запуска
сокращений).
13
АНАЛОГИЯ ПП: лодка на поверхности водоема.
Уровень воды = нулевой уровень; уровень бортов лодки над
водой = ПП (зависит от «веса лодки» = разность
концентраций К+ во внешней среде и цитоплазме).

Вход Na+ = отверстия в Na+-K+-АТФаза – ковш, которым


лодке, через которые втекает вычерпываем воду, удерживая
вода и снижает абсолютное лодку на плаву («поломка ковша»
значение ПП (приближая его к 0). строфантином приведет к тому,
что лодка утонет).

ПП

   14
вход ионов натрия
мВ
+30 и более мВ
ПД – универсальный (вершина, овер-
шут: область
ответ нервной клетки положитель-
на стимуляцию ных значений)

измерение
и стимуля-
ция
порог запуска ПД 1-2 мс
-50

Подаем
через микро- -70
электрод время, мс
короткие
электрич. 20 мВ:
импульсы пороговый
нарастающей 10 15 20 стимул при
амплитуды мВ мВ мВ ПП= -70 мВ
15
мВ 30 мВ
При ПП=-80 мВ, пороговый стимул= …? +30 и более мВ
10 мВ (вершина, овер-
При ПП=-60 мВ, пороговый стимул= …? шут: область
положитель-
Чем ближе ПП к -90 мВ (чем < у нейрона ных значений)
открытых Na+-каналов), тем > пороговый
0
стимул, т.е. ниже возбудимость.
Чем ближе ПП к -50 мВ (чем > у нейрона
открытых Na+-каналов), тем < пороговый
стимул, т.е. выше возбудимость.
порог запуска ПД 1-2 мс
-50

-70
У некоторых клеток время, мс
так много открытых
Na+-каналов), 20 мВ:
что их «ПП» пороговый
стремится оказаться 10 15 20 стимул при
мВ мВ мВ ПП= -70 мВ
выше -50 мВ… (см. ниже)
16
Рассмотрим ПД подробнее.

Длительность ПД на схеме
составляет 1 мс. По ходу ПД
можно выделить восходящую
и нисходящую фазы (пример-
но по 0.5 мс каждая).
Восходящая фаза
(деполяризация):
вход в клетку вход Na+ выход К+
«порции» Na+.
Нисходящая фаза
(реполяризация):
выход из клетки
примерно такой
же «порции» К+.
ПП

17
В основе этих процессов – открывание
и закрывание электрочувствительных
Na+- и К+-каналов.

Эти каналы имеют створки, реагирую-


щие на изменение заряда внутри
нейрона и открывающиеся, если этот
заряд становится выше -50 мВ.

Восходящая фаза Если заряд внутри нейрона вновь ниже


(деполяризация): -50 мВ – створка закрывается, т.к. по-
вход в клетку вход Na+
ложительные выход К+
заряды, расположенные
«порции» Na+. на ней, притягиваются к отрицательно
заряженным ионам цитоплазмы.
Нисходящая фаза
(реполяризация):
Положительные заряды створки –
выход из клетки
это заряды аминокислот, входящих
примерно такой
же «порции» К+.
ПП соответствующей
в состав
молекулярной петли белка-канала.
18
Открытие электрочувствительного Na+-канала «разрешает»
В вход
основеNaэтих процессов
+ в клетку. – открывание
Открытие электрочувствительного
и закрывание электрочувствительных
К+-канала «разрешает» выход К+ из клетки.
Na+- +и К+-каналов.
Na -каналы открываются очень быстро после стимула и
самопроизвольно
Эти закрываются
каналы имеют створки, примерно через 0.5 мс.
реагирую-
щие на изменение
К+-каналы заряда медленно
открываются внутри – в течение примерно
нейрона и открывающиеся,
0.5 мс после если этот они в большинстве
стимула; закрываются
заряд
своемстановится
к моментувыше -50 мВ.
снижения заряда нейрона до уровня ПП.

Восходящая Именно разная скорость открытия


Если+ заряд внутри+ нейрона вновь ниже
Для закрытия
фаза: вход в Na+-кана- Na -каналов и К -каналов позволяет
-50 мВ – створка закрывается, т.к. по-
клетку возникнуть сначала восходящей, а
лов на пике ПД служит ложительные заряды, расположенные
«порции» Na+. створ- затем – нисходящей фазе ПД.
дополнительная на ней, притягиваются к отрицательно
ка (внутриклеточная, (сначала ионы
заряженным ионам вносят в нейрон
Na+цитоплазмы.
Нисходящая положительный заряд, а затем
«большая»,
фаза: выходинактива-
из ионы К+ выносят
Положительные его, возвращая
заряды створки –
ционная);
клетки при-основная клетку в исходное состояние).
это заряды аминокислот, входящих
створка («малая»,
мерно такой же акти-
в состав соответствующей
«порции» К
вационная) перекрывает
+.
молекулярной петли белка-канала.
проход внутри канала.
19
3

1
3
4
5
2
Именно разная скорость открытия
1 = 5закрытия
Для = ПП (большая
Na+-кана- Na+-каналов и К+-каналов позволяет
створка открыта, ма- возникнуть сначала восходящей, а
лов на пике ПД служит -50 мВ
лая створка закрыта); затем – нисходящей фазе ПД.
дополнительная створ-
2 = малая створка (сначала ионы Na+ вносят 4в нейрон
ка (внутриклеточная,
открылась, входит Na+; положительный заряд, а затем
3«большая», инактива-
= большая створка
ционная);
закрыла основная
канал;
ПП
ионы К+ выносят его, возвращая
клетку в исходное состояние).
створка
4 = малая(«малая»,
створка акти- 5
вернулась на
вационная) место;
перекрывает 1
5проход
= канал вернулся
внутри в
канала.
исходное положение. 20
К+-каналы: вход Na+ 3

1 = 2 = 5 = канал закрыт
3 = 4 = канал открыт
2 выход К+
Na+-каналы:

Именно разная скорость открытия


1 = 5 = ПП (большая Na+-каналов и К+-каналов позволяет
створка открыта, ма- возникнуть сначала +восходящей, а
-50 мВ К фазе
-ток ПД.
лая створка закрыта); затем – нисходящей
2 = малая створка Na +-ток
(сначала ионы Na+ вносят 4в нейрон
открылась, входит Na+; положительный заряд, а затем ио-
3 = большая створка ны ПП
К+ выносят его, возвращая
закрыла канал; клетку в исходное состояние.
4 = малая створка 5
вернулась на место; 1
5 = канал вернулся в
исходное положение. 21
Мы познакомились с общими принципами генерации ПД.
Следующие три вопроса:
[1]. Что будет, если заблокировать электрочувствительные
(«потенциал-зависимые») Na+-каналы?
[2]. Что будет, если заблокировать электрочувствительные
(«потенциал-зависимые») К+-каналы?
[3]. Если при каждом ПД в клетку входит Na+ и выходит К+,
то не произойдет ли через некоторое время
«разрядка батарейки», т.е. потеря ПП?

22
В результате действия токсина прекра-
щается генерация и проведение ПД:
сначала – по периферическим нервам
(«иллюзии» кожной чувствительности,
параличи, нарушения зрения и слуха),
позже – потеря сознания; смерть от
остановки дыхания (сэр Джеймс Кук).

электро-
чувствительный
Na+-канал

тетродотоксин –
яд рыбы фугу
(аминогруппа
работает как «пробка»
для Na+-канала) 23
В результате действия токсина прекра-
щается генерация и проведение ПД:
сначала – по периферическим нервам
(«иллюзии» кожной чувствительности,
параличи, нарушения зрения и слуха),
позже – потеря сознания; смерть от
остановки дыхания (сэр Джеймс Кук).
ТЭА ТЭА – тетраэтиламмоний:
работает как «пробка» по
отношению к К+-каналу.
В результате восходящая
фаза ПД изменяется мало,
нисходящая – затягивает-
ся до 50 и > мс (происходит
за счет постоянно открытых
К+-каналов, которых при-
мерно в 100 раз <, чем
электрочувствительных);
ТЭА вызывает глубокую
потерю сознания.

«затянутый» ПД на
фоне ТЭА: 50 мс

ПД в норме: 1 мс 25
Этот рисунок уже был. Он иллюстрирует не только вклад Na+-K+-
АТФазы в поддержание ПП, но и позволяет показать ее важнейшую
роль в «ликвидации последствий» ПД.

- электрочувствит.
Na+-каналы

- электрочувствит.
К+-каналы

Na+-K+-АТФаза постоянно
откачивает из клетки
избыток Na+ и
возвращает назад K+. Без
этого нейрон потерял бы
ПП уже через несколько
сотен ПД. Важно также,
что чем > проникло в
клетку Na+, тем активнее
работает насос.

внутриклеточная
26 26
среда
РАСПРОСТРАНЕНИЕ ПД.
Если ПД возник хотя бы в
одной точке мембраны ней-
рона – он распространяется
по всей мембране.

Причина: деполяри- стимул


зация в точке появ-
ления ПД играет
роль запускающего
(надпорогового,
около 100 мВ) сти-
мула по отношению
к соседним точкам.
Это сходно с «кру-
гами на воде», а
точнее – с горением
бенгальского огня.

27
Скорость такого распространения низка и не пре-
РАСПРОСТРАНЕНИЕ вышаетПД.
у человека 1-2 м/с (диаметр аксона 1-2 мкм).
Но чем толще проводник-аксон, тем < его электри-
Если ПД возник хотя бысопротивление
ческое в и легче идет запуск ПД.
одной точке мембраны ней- увеличивать скорость за счет
Это позволяет
рона – он распространяется
наращивания диаметра аксона. Рекорд – гигантский
по всей мембране.аксон кальмара (d=0.5-1 мм, V=10 м/с).

Причина: деполяри- стимул


ПД от исходной
зация в точке появ-
точки распрост-
ления ПД играет
раняется во все
роль запускающего
(надпорогового, стороны и, убе-
гая по аксону,
около 100 мВ) сти-
запускает вы-
мула по отношению
брос медиатора
к соседним точкам.
Это сходно с «кру-
гами на воде», а
точнее – с горением
бенгальского огня.
выброс
медиатора 28
Замена
аксоплазмы
на раствор,
Гигантский содержащий
аксон то же коли-
кальмара чество К+.
(d=0.5-1 мм) При этом
– классичес- форма ПД
кий объект практически
для не менятся.
изучения
ПД

29
Миелиновая оболочка (несколько десятков мемб-
ранных слоев) – хороший изолятор. В связи с этим
связанные с ПД электрические токи могут течь
только через перехваты Ранвье; электрочувстви-
тельные каналы также расположены только на
перехватах. В результате по миелинизированному
аксону ПД передается «скачками» с перехвата на
перехват.
«Радикальный» рост скорости
проведения – за счет миели-
низации аксонов, которая на
периферии обеспечивается
одним из типов глиальных
клеток – шванновскими кл.
Каждая шван-
новская клетка, Протяженность
наматываясь на перехват перехватов Ранвье
аксон, закрывает Ранвье = 1% от общей
область ~ 1 мм. длины аксона. В
Между клетками – итоге это приводит к
«голые» участки росту скорости
(пере-хваты проведения ПД до
Ранвье). 100-120 м/с.
Креветка – 200 м/с.
30
Миелиновая оболочка (несколько десятков мемб-
миелинизиро-
рованный
ранных слоев) – аксон хороший изолятор. В связи с этим
связанные с ПД электрические токи могут течь
только через перехваты Ранвье; электрочувстви-
олигодендро-
тельные каналы циттакже расположены только на
перехватах. В результате
миелиноваяпо миелинизированному
Диаметр миелини-
аксону ПД передается «скачками»
оболочка с перехвата
зированных на
аксонов
перехват. достигает 20 мкм;
аксон приблизительную
скорость проведе-
ния можно рассчи-
капилляр
Немного о глиальных клетках тать, используя
астроцит коэффициент 6 (4
мкм  24 м/с; 10
мкм  60 м/с и т.д.)
Каждая Шван-
новская клетка, Протяженность
наматываясь на перехватов Ранвье
= 1% от общей
аксон, закрывает длины аксона. В
область около 1 итоге это приводит к
мм. Между клет- росту скорости
ками – голые проведения ПД до
участки (пере- перехват Ранвье
100-120 м/с.
мембрана
хваты Ранвье). миелиновая оболочка аксона 31
миелинизиро-
рованный
аксон

олигодендро-
цит
миелиновая
оболочка

аксон

капилляр
астроцит Немного о глиальных клетках
А) олигодендроциты (в т.ч. шванновские клетки):
электроизоляции нейронов; в ЦНС один олигодендроцит
образует миелиновые оболочки на нескольких аксонах; миелин – липидно-
белковый комплекс, придающий белый цвет скоплениям аксонов («белое в-
во»); рассеянный склероз: на белки миелина развивается аутоиммунная реакция.

Б) астроциты: механическая защита и слежение за В) микроглия:


составом межклеточной среды; образуют гемато- фагоциты
энцефалический барьер (ГЭБ), задерживающий (макрофаги)
проникновение в мозг «посторонних» химических
веществ (учитывается при разработке лекарств).
нервной ткани
32
Что еще?

* нейроны-пейсмекеры
* местные анестетики
* батрахотоксин
* электрические
рыбы

33
деполяризация В ЦНС человека такими
за счет постоян- свойствами обладают
ного входа Na+ нейроны дыхательного
центра. Пейсмекерами
являются и клетки – во-
чем мощнее ток ионов дители сердечного ритма.
натрия, тем чаще ритм
«минимум»
Клетка-пейсмекер:
запись ПД при располо-
жении электрода в меж-
клеточной среде

Нейроны-пейсмекеры (водители ритма): у некоторых клеток


имеется много постоянно открытых Na+-каналов, в результате чего заряд
цитоплазмы не способен удерживаться на стабильном уровне и
медленно смещается вверх (деполяризация).
При достижении порога запуска ПД происходит генерация импульса,
после чего заряд нейрона отбрасывается к «минимуму» (около -60 мВ и
даже ниже). Затем вновь начинается деполяризация, запуск ПД и т.д.
Чем больше постоянно открытых Na+-каналов, тем чаще следуют ПД.
Регуляция частоты разрядов идет также за счет открывания особых
типов К+-каналов, реагирующих на гормоны, медиаторы и др. 34
Чем > таких каналов открыто, тем ниже «минимум» и реже частота ПД.
«Анестезия» (греч.) – потеря чувствительности.
Местные анестетики: проникают внутрь нервной клетки
(ее отростка) и связываются с «большими» створками в тот
момент, когда они закрыты. В результате электрочувствительные
Na+-каналы (и проведение ПД в целом) блокируются.

Местные анестетики наносят на слизистую;


их можно вводить в кожу или глубокие ткани,
а также по ходу нерва. При этом выключается
проведение по всем волокнам (сенсорным,
двигательным, вегетативным); возможно
развитие угнетающего действия на ЦНС
(вплоть до остановки дыхания).

зона ново-
каиновой
блокады
НОВОКАИН – гидрохлорид
диэтиламиноэтилового эфира
аминобензойной кислоты.
распростра-
нение ПД
35
Батрахотоксин: токсин кожи некоторых
лягушек-листолазов; модифицированный
стероидный гормон насекомых.
Токсин проникает внутрь клетки и связывается с
«большими» створками в тот момент, когда они
открыты. В результате электрочувствительные
Na+-каналы не закрываются. Начинается тотальный вход
Ионов натрия, проводящий к быстрой потере нейроном
Как ПП, так и способности проводить ПД (одна
лягушка – от 10 до 100 смертельных доз). 36
У электрических рыб
(например, электрического
угря) имеются особые
видоизмененные мышечные
клетки – электроциты.
Они собраны в «батарею»,
способную генерировать
разряд в сотни Вольт.
Этот разряд – суммарный
ПД электроцитов.

37