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Alumna:
Cuarto semestre
BIOQUIMICA 4° Semestre 1
UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIAPAS
Facultad de ciencias químicas
Campus IV (Extensión Ocozocoautla)
INTRODUCCIÓN
Según Sierra en el 2013 nos dice que las células de la gran mayorías de los
organismos vivos llevan a cabo un conjunto de reacciones de óxido reducción
mediante la cual la gran cantidad de energía liberada a través de la degradación
de moléculas orgánicas es almacenada en moléculas de alto nivel energético
(ATP). La succinato deshidrogenasa es una enzima clasificada dentro del grupo
de las oxidorreductasas, cataliza una reacción muy importante en el metabolismo
oxidativo de la célula: la conversión del succinato en fumarato. Esta enzima se
localiza en eucariontes en la membrana mitocondrial interna. El H2 cedido por el
succinato puede ser transferido del FADH2 a un colorante susceptible como el
azul de metileno que al cambiar su estado redox pasa de coloreado a incoloro o
viceversa. Según Gonzalez en el 2010 nos dice la coloración de la oxidación y
reducción del azul de metileno al cambiar su estado redox.
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Figura 1.- Reacción del succinato deshidrogenasa del Manual de laboratorio. Bioquímica.
Facultad de Ciencias Químicas Extensión Ocozocoautla. UNACH, citado por Cañas en el 2015.
OBJETIVO
MATERIALES Y MÉTODO
MATERIALES
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Reactivos
NaOH
Azul de metileno al
0.1%
METODOLOGÍA
En el mortero molerlo
Pesar 1g de hígado con 3 o 4 ml de ácido Transferir en partes
de pollo. succínico, hasta obtener iguales a 2 tubos.
una masa.
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RESULTADO
Concentraciones:
(𝟗𝟎 % ) (𝟐𝟎𝒈 )
𝒈 𝒔𝒐𝒍𝒖𝒕𝒐: = 𝟏𝟖 𝒈 𝒅𝒆 𝒇𝒆𝒏𝒐𝒍
𝟏𝟎𝟎 %
(𝟑 % ) (𝟓𝟎 𝒈 )
𝒈 𝒔𝒐𝒍𝒖𝒕𝒐: = 𝟏. 𝟓 𝒈 𝒅𝒆 á𝒄𝒊𝒅𝒐 𝒔𝒖𝒄𝒄𝒊𝒏𝒊𝒄𝒐
𝟏𝟎𝟎 %
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DISCUSION DE RESULTADOS
Después de mezclar el hígado con ácido succínico, obtuvimos una masa que fue
repartida por partes iguales en dos tubos de ensayo; a uno de los tubos se le
añadió fenol (tubo 1), el cual ayudo a inhibir la actividad de la enzima ya que
ocurre una desnaturalización.
En este paso se observó que el tubo 1 (con fenol), separó la masa de hígado con
ácido succínico del fenol agregado.
Posteriormente, se agregó azul de metileno a los dos tubos, haciendo que el tubo
1 se coloreara de azul y el tubo 2 (sin fenol) se coloreara de café, este paso se
realizó, ya que el azul de metileno fue el aceptor de electrones del complejo
succinato-FADH2.
Después, se agregó aceite de bebé, ya que contiene aceite mineral, este se
encargó de aislar los dos tubos de ensayo del aire del ambiente y así prevenir la
oxidación temprana del FADH2. (Alberto, 2012)
Finalmente, se calentó a baño María por 10 minutos a 50°C con el fin de que la
enzima fuera liberada de la mitocondria.
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CONCLUSIÓN.
Se logró llegar al objetivo debido a que se obtuvo como se esperaba una
decoloración en el tubo 2, ya que hubo una reducción del azul de metileno que
fueron cedidos desde el FADH2 obteniendo FAD oxidado y azul de metileno
reducido, y en el tubo 1 no hubo una decoloración debido a la inhibición del
fenol, con la realización de esta práctica se comprobó la acción de la enzima
succinato deshidrogenasa.
CUESTIONARIO
1. ¿Cuáles son los colores del azul de metileno en sus estados oxidado y
reducido?
En estado reducido el color es azul y en su estado oxidado es incoloro.
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REFERENCIAS
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