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OBTENCIÓN DE INSECTICIDA ORGÁNICO PARA EL CONTROL

DE COCHINILLA HARINOSA (PSEUDOCOCCUS ELISAE), A


PARTIR DE ACEITES ESENCIALES DE CANELA (CINNAMOMUM
VERUM) Y ÁRBOL DE CLAVO (SYZYGIUM AROMATICUM).

STEVEN PERDOMO CRUZ, ALDEMAR VALDERRAMA VELEZ,


HOLMER EDUARDO GARZON, WILLIAN DAVID MERA

UNIVERSIDAD SANTIAGO DE CALI


FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
NÚCLEOS PROBLEMÁTICOS INVESTIGATIVOS I
SANTIAGO DE CALI. 2019
TABLA DE CONTENIDOS

RESUMEN .............................................................................................................. 3
PALABRAS CLAVE ................................................................................................. 3
INTRODUCCIÓN .................................................................................................... 3
ANTECEDENTES ................................................................................................... 4
MARCO TEÓRICO.................................................................................................. 4
PLAGAS Y ENFERMEDADES ........................................................................... 4
ACEITES ESENCIALES ..................................................................................... 5
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ..................................................................... 6
PREGUNTAS DE INVESTIGACIÓN ....................................................................... 7
JUSTIFICACIÓN ..................................................................................................... 8
OBJETIVOS ............................................................................................................ 8
OBJETIVO GENERAL ........................................................................................ 9
OBJETIVOS ESPECÍFICOS ............................................................................... 9
METODOLOGÍA ..................................................................................................... 9
BIBLIOGRAFIA .................................................................................................... 11
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RESUMEN

se llevó a cabo una revisión bibliográfica sobre las propiedades insecticidas de los
aceites esenciales de la canela y el árbol de clavos, encontrando que sus
componentes son muy usados como alternativas a insecticidas químicos sintéticos.
Debido a eso, se procede a plantear un tratamiento por el cual se puedan usar estos
compuestos para el control de la cochinilla harinosa. Por medio de destilación por
arrastre de vapor serán obtenidos los aceites esenciales de la canela (Cinnamomum
verum) y del árbol de clavos (Syzygium aromaticum), los cuales serán
caracterizados según su densidad, índice de refracción y espectro IR. La efectividad
del insecticida de Cinamaldehido y eugenol, será comprobada mediante pruebas in
vitro, aplicándolo directamente sobre la Pseudococcus elisae y se comparará con
SILEX™ 75 WG, utilizado por agricultores para el control de esta plaga.

PALABRAS CLAVE

Cinamaldehido, eugenol, canela, cochinilla harinosa, plaga, insecticida, aceite


esencial.

INTRODUCCIÓN

En la agricultura son implementado insecticidas para proteger y evitar el daño hacía


los cultivos generado por insectos, y así tener una óptima productividad y calidad
en las cosechas. Algunos de estos insecticidas son sintetizados a partir de
compuestos organoclorados, organosfosfatados y compuestos inorgánicos, pero
estos compuestos en su mayoría son de alta toxicidad y debido a su alta estabilidad,
tienen una vida útil muy larga, algunos hasta 20 años o más. Generando
enfermedades a la población humana, altas concentraciones de compuestos tóxicos
y en algunos casos altas concentraciones de metales pesados en los suelos de
cultivo y en la producción agrícola.
Otros contras de los insecticidas químicos sintéticos, es que las plagas pueden
generar resistencia genética, pueden alterar el ecosistema en el cual son aplicados,
provocar la aparición de nuevas plagas, se puede movilizar por medio del agua, del
suelo y del aire; Entre otros.
Debido a la alta peligrosidad, además del alto precio de algunos insecticidas
químicos sintéticos, se están implementando soluciones alternativas para combatir
los daños causados por las plagas. Los bio-insecticidas se han convertido en un
tema de investigación como solución a esta problemática, debido a que son

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biodegradables, de bajo costo, renovables, menor efecto negativo sobre enemigos


naturales y otros organismos benéficos. Entre otros.
La cochinilla harinosa (Pseudococcus elisae), es una plaga Pertenecientes al orden
de los hemípteros (chupadores), de la familia de los pseudococcidae. Su alimento
consiste básicamente en los fluidos que puedan extraer del tejido vegetal de
diferentes órganos de la planta, ya sea la hoja, la raíz, el pseudotallo, el pinzote o
las frutas.(César Guillén S., Alejandro Rodríguez M., Sergio Laprade C., Henry Valle
R., Rafael Segura M., Vernor Uva M., 2010)
La siguiente investigación tiene como objetivo la creación de un insecticida orgánico,
usando como principios activos los aceites esenciales de canela (Cinnamomum
verum) y del arbol de clavo (Syzygium aromaticum), con el cual se harán pruebas
in vitro probando su eficiencia insecticida sobre la cochinilla harinosa, comparando
los resultados obtenidos con el insecticida SILEX™ 75 WG.

ANTECEDENTES

Las plantas producen naturalmente compuestos bioactivos junto con muchos


metabolitos secundarios que sirven como productos químicos defensivos contra los
herbívoros, incluidas las plagas de insectos. Un grupo de estos fitoquímicos son los
"aceites esenciales", que poseen una amplia gama de actividad biológica,
especialmente insecticidas y repelentes de insectos. (Thanigaivel et al., 2018)
Los aceites esenciales son mezclas complejas de compuestos volátiles extraídos
de una gran cantidad de plantas. En general, representan una pequeña fracción de
la composición de la planta (menos del 5% de la materia seca vegetal) y
comprenden principalmente terpenos de hidrocarburos (isoprenos) y terpenoides.
Los primeros compuestos son monoterpenos (tienen 10 átomos de carbono y
representan más del 80% de la composición de aceites esenciales) y
sesquiterpenos (tienen 15 átomos de carbono). Podrían presentar estructuras
acíclicas de hidrocarburos, así como estructuras mono, bi o tricíclicas. Los
segundos, también llamados isoprenoides. Son derivados oxigenados de terpenos
hidrocarbonados como alcoholes, aldehídos, cetonas, ácidos, fenoles, éteres y
ésteres.(Asbahani et al., 2015)

MARCO TEÓRICO

PLAGAS Y ENFERMEDADES

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Desde mucho tiempo en la agricultura, se ha podido evidenciar una gran


problemática, que son las plagas y las enfermedades que atacaban los cultivos,
consumiéndose los productos cosechados.
Las plagas y las enfermedades de las plantas afectan los cultivos, lo que ocasiona
múltiples pérdidas a los agricultores generando inseguridad en los alimentos. Estas
pueden fácilmente multiplicarse a los cultivos y alcanzar grandes epidemias y
enormes descensos de los cultivos, colocando en peligro los medios de muchos
agricultores que son vulnerados, a esto se asemeja la seguridad alimenticia y
nutricional de millones de personas cada día.

ACEITES ESENCIALES

Investigaciones que se han realizado a lo largo del tiempo nos demuestran el


potencial y eficacia con el que cuentan algunos productos orgánicos como plantas,
frutos, cortezas, etc. En especial los aceites esenciales que se pueden obtener de
estos. Usados para erradicar cierto tipo de plagas, las cuales son una problemática
para cualquier agricultor y sus plantas. Una de estas plagas es la cochinilla harinosa
(Pseudococcus elisael), que se encuentra mayormente en la raíz y follaje de su
huésped, sean registrado infestaciones en cultivos de cítricos y raíces de cafetos.
Esta plaga se considera el cáncer de los cítricos y es considerada como una de las
plagas exóticas que ataca a la agricultura colombiana, el ICA ejecuta acciones de
vigilancia sobre material vegetal que ingresa a través de puertos, aeropuertos y
pasos fronterizos
Se ha podido verificar, que el aceite esencial de el clavo de olor posee compuestos
con una gran capacidad antimicrobiana como lo son bacterias, levaduras y mohos,
estas cualidades pueden ser muy útiles en distintos campos de investigación. Esta
actividad es causada por el eugenol presente en su aceite, El aceite esencial de
clavo de olor se extrae de las hojas, los tallos y los botones sin abrir. (Aguilar &
López, 2013). Entre sus propiedades se destaca su efecto antibacteriano; este se
debe en su mayoría a los compuestos fenólicos, ya que su concentración es
directamente proporcional a la efectividad antimicrobiana (Rahnama et al. 2012).
Estos compuestos desnaturalizan las proteínas y reaccionan con los fosfolípidos de
la membrana celular de las bacterias, cambiando su permeabilidad y produciendo
su muerte (Nonsee et al., 2011). Su composición es variada, pero en términos
generales, los compuestos principales son: eugenol (49-98%) y acetileugenol, alfa
y beta-cariofilenos, eugenil acetato, éster bencílico del ácido benzoico, éster
bencílico del ácido salicílico (Vaca, 2013) y pequeñas cantidades de ésteres,
cetonas, cariofileno, humuleno y alcoholes (Armas, Márquez, & Pretell, 2011).
El aceite esencial que se obtiene de las ramas de la canela puede contener una alta
cantidad de cinamaldehído (López y col., 2007), o mezclas de cinamaldehído y un
porcentaje considerable de eugenol (Ito, 2008). El cinamaldehído es el componente
mayoritario del aceite de las hojas de canela y produce ese aroma y sabor asociado
con la canela (Cheng y col., 2004). Recientemente diversas investigaciones han
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demostrado que ciertos compuestos oxigenados como citral, geraniol, eugenol y


cinamaldehído, tienen mejores propiedades antifúngicas que otros componentes
comunes (Lee y col., 2005).

Ilustración 1 Cinamaldehido Ilustración 2 Eugenol

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

A nivel mundial, se están investigando soluciones alternativas al uso de insecticidas


químicos sintéticos, debido a que está comprobado que su uso se relaciona con
efectos nocivos para la salud de los humanos, como lo son las enfermedades, en
muchos casos cáncer, también se han reportado casos mortales por intoxicación
provenientes del uso de insecticidas sintéticos. Otro aspecto negativo sobre el su
uso, es que pueden alterar el equilibrio de un ecosistema completo, debido a que
no son selectivos y afectan también a otros componentes claves para el buen
funcionamiento del ecosistema, un ejemplo de esto es la muerte de colonias de
abejas las cuales polinizan las plantas.
Además, en su estructura química, muchos de ellos contienen metales pesados
como mercurio y plomo, entre otros y no se descomponen rápidamente, dejando
trazas en el lugar donde se aplican, por lo cual cuando hay otras aplicaciones, hay
aumento en la concentración de estos compuestos tóxicos. El uso de estos
insecticidas puede contaminar fuentes hídricas y deteriorar significativamente la
calidad de los suelos de cultivo.
Actualmente, una de las una de las plagas más comunes que atacan cultivos y
plantas ornamentales es la cochinilla harinosa, pertenecientes al orden de los
hemípteros (chupadores), su alimento consiste básicamente en los fluidos que
puedan extraer del tejido vegetal de diferentes órganos de la planta, ya sea la hoja,
la raíz, el pseudotallo, el pinzote o las frutas. Durante su alimentación, estos insectos
excretan una sustancia melosa que facilita el crecimiento de la “fumagina” o capa
negruzca que se forma debido al crecimiento de un hongo del género Capnodium.
(César Guillén S., Alejandro Rodríguez M., Sergio Laprade C., Henry Valle R.,
Rafael Segura M., Vernor Uva M., 2010)
De acuerdo con la morfología de los Pseudococcus elisae, los machos adultos son
alados y de menor tamaño que las hembras, no forman parte de la problemática
sobre las plantas debido a que presenta atrofias en el aparato bucal, por lo cual su

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tiempo de vida es muy corto. La única función que tiene el Pseudococcus elisae
macho, es fecundar a las hembras.
Por otro lado, la Pseudococcus elisae hembra también llamada ninfas, es áptera
(sin alas), de forma ovalada. El tamaño de la hembra puede variar entre 3 y 4 mm y
su coloración puede variar entre tonalidades rosadas y amarillo pálido. Las ninfas
succionan la savia afectando el desarrollo de las plantas, atrofiando el crecimiento
de frutos, provocando caída de hojas y si no hay control, puede generar la muerte
de la planta. Se reproducen por
fecundación, las ninfas pueden poner de 300 a 500 huevos en un ovisaco 1 con el
aspecto de una bolsa de algodón. Después de la oviposición que dura entre 5 y 10
días, la hembra muere. Las larvas jóvenes, que son más móviles, se dispersan para
encontrar sitios adecuados para alimentarse. Hay tres estadíos ninfales. La
duración del ciclo de vida depende de la temperatura; dura 90 días a 18ºC y 30 días
a 30ºC. Las cochinillas segregan sustancias azucaradas -"mielecilla"- que
impregnan los frutos y permiten el desarrollo de hongos, además de crear un
ambiente de simbiosis con hormigas.
Los estados de crecimiento de las ninfas, son fácilmente diseminados a través del
transporte internacional. Después de que las personas visitan un campo infestado,
las ninfas son capaces de adherirse a la ropa y también a los vehículos. El transporte
de productos vegetales, como semillas, raíces, hojas, yemas, tallos, esquejes,
flores, frutas y plantas enteras, entre países, constituye una fuente muy importante
para la diseminación de estos insectos. El pequeño tamaño de sus individuos y los
hábitos crípticos de la familia, hacen que con frecuencia no sean detectados en las
inspecciones cuarentenarias vegetales. En el caso de las especies
partenogenéticas, una sola hembra juvenil puede ser el inicio de una infestación
importante si es introducida por accidente sin sus enemigos naturales.(Amalia,
2004)

PREGUNTAS DE INVESTIGACIÓN

¿En qué proporción de los aceites esenciales se obtendrá mayor eficacia


insecticida?

¿Cuál será la concentración en la cual el efecto insecticida del compuesto es


óptimo?

¿Cómo es el modo de acción del insecticida orgánico obtenido?

1Bolsa constituida por sustancias cerosas o filamentosas que se observa en la parte posterior
de las hembras de algunos hemípteros.

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¿Qué tipo de solventes se pueden usar para diluir los aceites esenciales obtenidos?

¿Cuál será el tiempo de vida útil del insecticida orgánico obtenido?

JUSTIFICACIÓN

Hoy en día el uso de plaguicidas tiene muchas problemáticas asociados a su uso,


en primer lugar, tiene efectos nocivos para la salud humana, los ecosistemas
agrícolas, el medio ambiente y la resistencia que generan los insectos perjudiciales
para la planta, dejando así efectos directos e indirectos a corto, mediano y largo
plazo. Es por esto que existe la necesidad de generar alternativas que ayuden al
ecosistema a reducir los contaminantes ambientales al generar un
plaguicida/insecticida biodegradable el cual actué directamente contra el insecto,
más no contra la planta. (plagasydesinfeccion, s.f.)
Una de las principales ventajas de tener un insecticida natural es la baja peligrosidad
o nula que estos tienen, ya que no son nocivos, además su degradación es muy
rápida sin alterar en absoluto la planta, se resalta también que lo patógenos e
insectos desarrollan menor resistencia en estos productos naturales, así pues, se
puede mantener el ecosistema en equilibrio; los plaguicidas naturales benefician
enormemente en el plano económico ya que, al tratarse de productos naturales, no
requieren industrialización alguna que encarezca su costo. Del mismo modo, su
aplicación resulta mucho más segura que los plaguicidas químicos ((Devine, Eza,
Ogusuku, & Furlong, 2008)
El uso de insecticidas sobre la cochinilla harinosa resulta complicado debido a la
protección que les proporciona la capa cerosa que la recubre, y a su tendencia a
esconderse en los lugares más inaccesibles de la planta, pero la cochinilla al tener
dichas resistencias contra plaguicidas químicos, su comportamiento con los
plaguicidas orgánicos funciona bien y más en su estado larval cuando la cochinilla
es más vulnerable y puede ser controlada fácilmente, llevando un control integrado
de plagas.

Para el año 2011 Colombia fue uno de los países con mayor uso de insecticidas a
nivel mundial. (CANNA Research, s.f.)
Lo cual da entender que Colombia es uno de los grandes consumidores en el mundo
de insecticidas químicos aumentando así cada año la demanda de dichos
plaguicidas, es por esto que es de importancia generar un plaguicida de bajo costo
y que ataque a la cochinilla harinosa.

OBJETIVOS

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OBJETIVO GENERAL

Desarrollar un plaguicida orgánico natural a base del aceite esencial de canela


(Cinnamomum verum) y aceite esencial de árbol de clavo (Syzygium aromaticum),
para la erradicación de la cochinilla harinosa.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

- Caracterizar los aceites esenciales obtenidos de la canela y el árbol de clavos


- Evaluar la efectividad del insecticida obtenido por medio de pruebas in vitro sobre
la cochinilla harinosa.
- Comprobar la efectividad del producto obtenido en comparación con uno de uso
comercial.

METODOLOGÍA

Será implementado el método por extracción por arrastre de vapor, debido a que
en la revisión bibliográfica se encontró que es uno de los métodos de mayor
rendimiento para obtención de aceites esenciales.

Ilustración 3 Montaje de destilación por arrastre de vapor

Tabla 1 Materiales para montaje de destilación por arrastre de vapor

USO MATERIAL
Generar vapor de agua Balón fondo plano de 1L
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Extractor Balón de destilación de 1L


Control de temperatura Termómetro digital
Generador de calor Mechero Bunsen
Condensador Condensador de bulbos
Recolectar Alargadera y probeta

Se tomarán 100 g de canela y 100 g de clavos, los cuales serán macerados.


Rompiendo las fibras para permitir facilitar el flujo de vapor por toda muestra una
vez esté en el balón de destilación.
Cuando el material este macerado, será introducido en el balón de destilación, se
harán las uniones con el condensador y se pondrá la probeta como recolector del
producto de destilación. En otro balón se agregarán 500 ml de agua destilada.
Ambos balones se conectarán por medio de una unión, la cual permitirá el paso de
vapor de agua a la muestra. Una vez el sistema este cerrado, se encenderá el
mechero bunsen, el cual elevará la temperatura hasta el punto de ebullición del
agua, generándose vapor de agua que hará su recorrido hasta la muestra. La
temperatura debe ser controlada a 100°C, el control de la temperatura se tomará de
acuerdo a la temperatura marcada por el termómetro.
Se determinará el rendimiento de la siguiente manera
𝐾𝑔 𝑑𝑒 𝑎𝑐𝑒𝑖𝑡𝑒 𝑜𝑏𝑡𝑒𝑛𝑖𝑑𝑜
%𝑅𝑒𝑛𝑑𝑖𝑚𝑖𝑒𝑛𝑡𝑜: ∗ 100
𝐾𝑔 𝑐𝑎𝑟𝑔𝑎 𝑣𝑒𝑔𝑒𝑡𝑎𝑙
Una vez obtenidos los aceites esenciales, se decantará para separar la fase acuosa
de la fase orgánica y se almacenará el producto en frascos ámbar debidamente
rotulados para evitar degradación de algunos terpenos por reacción con la luz.
Seguidamente se procederá a caracterizar los compuestos obtenidos por la
destilación, para ello se emplearán la determinación de la densidad, el índice de
refracción y se implementara espectroscopia IR.
La densidad se determinará usando un picnómetro de 5ml, con el fin de evitar
desperdicios de aceites esenciales.
El índice de refracción se medirá con un refractómetro, el resultado obtenido será
comparado con el índice de refracción definido como patrón.
Se implementará la técnica de espectrometría IR para hacer un análisis cualitativo
de los aceites esenciales obtenidos. Los espectros obtenidos serán comparados
con los patrones. Se tomará una gota de cada aceite esencial y se depositara en
entre una placa de KBr, seguidamente se hace una fuerte presión para que quede
una película delgada se coloca en su soporte y se realiza el registro del espectro.
Los aceites esenciales obtenidos, serán diluidos en alcohol etilico extraneutro (86%
concentración), en caso que el alcohol a esa concentración afecte por si solo la

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cochinilla harinosa, se procederá a disminuir su concentración hasta llegar a una


concentración inerte y que pueda diluir 3 g de los aceites esenciales, se buscara
que el solvente no afecte los resultados como insecticida de los aceites esenciales
de canela y árbol de clavos. Se tomará una muestra de 3 g entre ambos aceites
esenciales en diferentes concentraciones, se diluirán en el volumen de alcohol
necesario, con las anteriores especificaciones y esa muestra será aforada a 1 L de
agua, la eficiencia se llevará a cabo probando las diferentes diluciones aplicándolas
sobre una población de cochinilla harinosa almacenadas en cajas de Petri.
Tabla 2 Proporción en porcentaje de aceites esenciales

% CINAMALDEHIDO % EUGENOL
20 80
40 60
50 50
60 40
80 20

Paralelamente, se preparará una muestra de 3 g SILEX™ 75 WG, en 1 litro de agua.


Así lo recomienda el ICA para de las cochinillas de las raíces del café.
Se comprobará la eficacia de del insecticida a partir de cinamaldehido y eugenol, de
acuerdo a los resultados obtenidos con el SILEX™ 75 WG.

BIBLIOGRAFIA

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COCHINILLAS HARINOSAS (HEMIPTERA: PSEUDOCOCCIDAE) Andrea
Amalia Ramos Portilla 1 y Francisco Javier Serna Cardona 2
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César Guillén S., Alejandro Rodríguez M., Sergio Laprade C., Henry Valle R., Rafael
Segura M., Vernor Uva M., J. A. S. F. (2010). Biología y control de las cochinillas
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