TRABAJO 01: EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD LIPASA

1.-OBJETIVO:

Determinar la temperatura optima de actividad para la lipasa pancreática

2.-FUNDAMENTO TEÓRICO:

“La enzima lipasa cataliza la hidrolisis de los lípidos en glicerol y ácidos grasos. Los ácidos
grasos acidifiquen el medio en el que se encuentran, por lo que puede monitorizarse la
disminución del pH como medida de la actividad lipasa” Quille, R. (2019).

3.-MATERIALES:

 Balanza (±0.1 g)
 Sensor de pH (±0.1)
 Sensor de temperatura (±0.5)
 Pro pipeta (±0.1 ml)
 Hornilla
 Probeta (±0.1 ml)
 Luna de reloj
 Soporte universal
 Espátula
 Embudo
 Vaso precipitado
 Tubos de ensayo y gradilla
 Nueces
 Laptop
 Pinzas
 Agua destilada y normal
 NaOH 0.1 M
 Leche en polvo 10% w/v
 Lipasa 2% w/v

4.-METODOLOGIA:

1. Primero pesar las determinadas cantidades de lipasa (2 ml) y leche (5 ml) con ayuda
de la balanza, la luna de reloj, y otros materiales necesarios.

2. Posteriormente, utilizar el NaOH 0.1 M para neutralizar la solución de leche y agua

hasta llegar al pH 7.5-8.0 y agitarla.

3. Calentar agua a 37,5° para simular la temperatura del intestino. Luego sumergir los
tubos de ensayo que contienen la solución de leche y la lipasa que estuvieron debidamente
agitados.

4. Esperar a que estos se calienten alrededor de 45 minutos. Luego, mezclar las dos
soluciones en un solo tubo de ensayo.

5. Después, medir el pH final de la solución y anotarlo.

5.-PROCESO DE DATOS:
Los siguientes datos brutos fueron tomados a base de la experimentación realizada en el
laboratorio:

a) Datos brutos:

TEMPERATURA (±0.5) PH (±0.1)

12.8 7.2
12.8 7.1
12.8 7.0
12.8 6.9
13.0 6.8
13.1 6.7
35.8 6.6
36.0 6.5
37.3 6.4
39.0 6.3
39.6 6.2
39.0 6.1
37.3 6.0
36.2 5.9

b) Datos procesados:
 EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD DE LA
LIPASA
8.0

7.0

6.0

5.0
y = -0.0286x + 7.3212
PH (±0.1)

R² = 0.7542
4.0
Series1
3.0 Linear (Series1)
2.0

1.0

0.0
0.0 10.0 20.0 30.0 40.0 50.0
TEMPERATURA (±0.5)

Conclusión:

Después de finalizar todos los resultados se concluyó que la preparación de leche en polvo,
hidróxido de sodio y la enzima lipasa, esta al momento de poner al recipiente de agua con una
temperatura promedio a 37° va disminuyendo su valor de pH a medida que pasa el tiempo, es
decir, cumple con el objetivo esperado al inicio de la prueba. Tomando en cuenta los valores
obtenidos en la tabla N° 1 el pH inicial fue 7.2 y el último registro de pH fue 5.9, lo cual nos da
entender que la actividad de la lipasa fue influenciada por la temperatura reduciendo asi su
pH. Por otro lado, hemos comparado nuestros resultados con una fuente (Rúa et al., 1993;
Prazeres et al., 1996) nos aclara que el pH optimo se encuentra en la región acídica cuando
realiza la actividad lipasa en una temperatura promediado de los 30° y 50°, es decir, que
nuestro experimento se realizó eficazmente.

Biliografia:

https://revistas.unal.edu.co/index.php/biotecnologia/article/view/15574/38075