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Observación de la Cromatina

Christian Rivera Caicedo 1611359 - Laura Nataly Romero Bustos 1611141


-Yuder Camila Lázaro Jerez 1611176
Universidad Francisco de Paula Santander
Ingeniería Biotecnológica
Genética Molecular, Grupo C
Cúcuta, Norte de Santander, Colombia
Dirigido a: Jesús Arturo Ramírez Sulvaran

Fecha de realización: 20/03/2018


Fecha de entrega: 10/04/2018
RESUMEN
La sexo cromatina es un método diagnóstico clínico específico para determinar aberraciones
cromosómicas de tipo numérico ligadas a cromosoma sexual (Cromosoma “X); por lo tanto
se pueden determinar síndromes como Turner, Superhembra, Klinefelter entre otros. Para el estudio
de la cromatina sexual, se utiliza un tejido de fácil obtención (epitelio de carrillo bucal y frotis
sanguíneo), un ulterior tratamiento con un fijador, el cual tiene por objeto preservar las estructuras
con un mínimo de alteraciones, seguido del uso de un colorante mixto que permite teñir tanto las
estructuras cromosómicas de carácter ácido, como el citoplasma de carácter básico.
INTRODUCCION En las mujeres uno de estos dos
cromosomas X se inactiva y se condensa,
El desarrollo hacia ovarios o testículos está
convirtiéndose en lo que posteriormente se
determinado por la acción coordinada de una
conoce como “Corpúsculo de barr” a
secuencia de genes que conllevan a la
nombre del doctor Murray bar, este se
diferenciación gonadal femenina cuando no
observa en todas las células del cuerpo ,
existe el cromosoma Y, o el desarrollo
pero no en los casos de algunas
testicular cuando este cromosoma está
alteraciones genéticas, como por ejemplo
presente. En 1987 Affara y cols. Prueban.
(Barral J. 2013)
el síndrome de Turner( Que consiste en
que las mujeres que lo padecen carezcan
Está plenamente demostrado que el de un cromosoma X o sufren de una
corpúsculo de Barr resulta de la elección o forma de anillo del mismo)
Condensación e inactivación Parciales de (Tejada V., 2011) . En tal caso no se
todo cromosoma X en Exceso de uno. En observa la formación de un corpúsculo de
la década De 1950 este examen fue Barr el que si aparece en una mujer sana,
Utilizado para determinar el "sexo este procedimiento se realiza en el
genético" Con El advenimiento De las laboratorio de citogenética para fines de
técnicas para el estudio de los cromosomas diagnóstico.
humanos, se pudo establecer la buena
correlación existente entre la Cromatina de Para ello, se utiliza un tejido del epitelio de
Barr y los cromosomas carrillo bucal y frotis sanguíneo, tratamiento
X. (Vena D. 2010) con un fijador, para preservar las estructuras
con un mínimo de alteraciones, liego una
tinción por colorante mixto que permite teñir Método de Wright para tinción de palillos de
tanto las estructuras cromosómicas de tambor
carácter ácido, como el citoplasma de
carácter básico. Para obtener una muestra adecuada de sangre
METODO EXPERIMENTAL capilar: Calentar la yema de los dedos con fricción
ligera y limpiar con alcohol al 70%.
Tinción de células epiteliales

Enjuagar la boca repetidas veces con agua y


raspar la mucosa interna de la mejilla con el
Dejar secar la yema del dedo y con una lanceta
baja lenguas (desechar por el contenido alto
estéril, picar una sola vez firme y rápidamente. No
de bacterias)
presionar el dedo para sacar la sangre, ésta debe fluir
libremente.

Repetir operación y extender la muestra sobre


un portaobjetos
Eliminar las 2 primeras gotas de sangre y depositar
la tercera en el extremo de un portaobjetos.

Dejar secar al aire


Colocar el portaobjetos en una caja que
𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙 𝑎𝑐𝑖𝑑𝑜 𝑎𝑐𝑒𝑡𝑖𝑐𝑜 Consultar con su asesor.
contenga : para su fijación
3 1

Durante 20 minutos
Dejar secar al aire la preparación.

Dejar secar al aire


Añadir 3 a 5 gotas de colorante Wright, teñir durante
5 minutos sin dejar secar el colorante, si esto sucede,
Añadir de 3 a 5 gotas de colorante acetoorseina y teñir añadir otra gota de colorante.
durante 8 a 12 minutos sin dejar secar el colorante

Lavar la preparación al chorro de agua y dejar secar


Lavar la preparación al chorro de agua y dejar al aire
secar al aire

Observar en el microscopio a 10X, 40X y 100X Observar las preparaciones al microscopio a 10X, 40X
y 100X localizar los neutrófilos (polimorfo nucleares)
poniendo especial interesante en los palillos de
tambor (Drumstick)
Localizar las células epiteliales, poniendo
especial interés en la cromatina
Se obtuvo una muestra de un grupo donde se
puede observar apreciablemente células
epiteliales
La imagen 1 presenta 3 células epiteliales la
más notable ubicada hacia las 7 presenta lo que
parece ser un pequeño corpúsculo pegado a la
pared celular y un núcleo definido en el medio
de esta. Arriba de esta hacia las 10 se observa
una célula de menor tamaño con una tinción
más fuerte la cual no se aprecia claramente la
presencia de algún corpúsculo, pero si se
observa un pequeño núcleo.
La imagen 2 se observan dos células
Epiteliales juntas que presentan un núcleo
definido pero no hay presencia de alguna
estructura extra o corpúsculo.
Las pocas muestras obtenidas solo se pudieron
observar 3 células
CONCLUSIONES
.La práctica debe repetirse ya que los
resultaros no fueron los adecuados y las
muestras y montajes realizados no presentaron
presencia de las células a observar para la
práctica.
DISCUSIONES
Las malas muestras pueden deberse a que el
No se pudo obtener una muestra observable de
montaje o método no se realizar de forma
eritrocitos (Sangre) Al momento de montar la
correcta, esto pode ser por mala toma de frotis
placa e el microscopio no se pudo observar
de las paredes del epitelio bucal, mala
nada apreciable por lo que se determinó repetir
extensión de la muestra sobre el cubre objeto
la práctica en otro momento.
o perdida de muestra al fijar con el alcohol-
La observación de las células del epitelio bucal cetona o en el momento de lavar con gua luego
tampoco arrojo resultados favorables ya que de la tinción
no se observaron con claridad células que
Los microscopios presentan fallas técnicas
presentara tinción adecuada.
como problemas en los lentes de los objetivos
Los microscopios no presentaban un estado por lo cual se dificulto la observación de
adecuado en sus lentes de objetivos, por lo que muestras ya que varios d estos microscopios
en varias de las muestras se dificulto la presentan manchas y colores que hacen
observación ya que presentaban un color sepia difíciles de identificar las muestras, por ello
como filtro y algo borroso. también la práctica presento más obstáculos.
Se pudo observar lo que aparente mente es un
corpúsculo de barr, pero no puede afirmarse
que corresponda exactamente a uno, dado que
solo se observó en una sola célula y las demás
no presentaban esta característica en la imagen
1 (3 células en total) por tanto, debería
realizarse la prueba por replicado.

En la imagen 2 pueden observarse claramente


dos células con núcleos definidos , se puede
inferir que corresponde a las muestras del
epitelio bucal de un hombre ya que no
presentan corpúsculo, pero de igual forma la
poca cantidad de células observadas (solo 2)
no permiten hacer una afirmación clara.
Las muestras de sangre para observación d
eritrocitos no dieron resultado, esto puede
deberse a que al momento de extender esta no
se hizo de la forma correcta o se pierde la
muestra al momento de realizar la fijación o
tinción.

BIBLIOGRAFÍA

 Vena D.,Cecilia R.,Ronald R. Cromatina de barr: Análisis de su valor actual, Chile. Rev.
 Chil. Pediatr. 57(6): 506-509, (2010)
 Barral J.diferencias cereblrales entre hombre y mujer,Area 3 Nº 4 – Invierno2013
 Tejada V.,Mendez M.,Oliva L., Sindrome-palato-Digital tipo I( síndrome de taybi):
Apropsitode un caso,Am J Child. (28)12-57-36 (2011)
 Velasquez M., Descalleaux J., Cromatina sexual en escolares de Lima revista de ciencias
U.N.M.S.M., VOL 74,N°1, pp. 159-165 (2010)

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