BUFFER FOSFATO SALINO

Las reacciones bioquímicas son sensibles al pH. Los fluidos dentro de las celular y las que rodean
a esta, tienen un pH característico prácticamente constante. Este valor de pH se mantiene de
diversas maneras y una de las más importantes a través de los sistemas buffers.

Buffer fosfato salino, pH 7.4. Es uno de los buffers más utilizados porque es isotónico y no tóxico
para las células. Se utiliza para diluir sustancias utilizadas para el cultivo y para “lavar” los
recipientes que contienen células a través de centrifugación. (Lodish & Berk, 2007)

La Solución de fosfato salino constituye una solución amortiguadora de pH comúnmente

empleada para procedimientos bioquímicos. Esta solución se prepara a partir de Cloruro de
Sodio, Fosfato de Sodio y, en algunas formulaciones, con Fosfato de Potasio. El buffer fosfato
salino es isotónica y no-tóxica para las células de los mamíferos. Los grupos fosfato mantienen
el pH estable. (Dulbecco & Vogt, 1954)

PREPARACIÒN

En los ensayos realizados en el laboratorio, para la obtención de buffer fosfato requirió el uso
de dos vasos de precipitado, a los cuales se les añadió diferentes cantidades de ácido y base
conjugada.

Ambos vasos con diferentes volúmenes de muestra se mezclan para formar una sola. Al calibrar
el potenciómetro, se procede a determinar el pH de la nueva solución; dicha determinación
proporciona el pH práctico. El pH teórico se determinara aplicando la ecuación de Henderson
Hasselbalch. Comparar las respuestas y calcular la diferencia entre los valores teóricos y
prácticos, para pasar a desarrollar las conclusiones correspondientes. (Montalvo & Sugahara,
2017, pág. 20)

Ph Teórico

Concentración de sal conjugada

0,1 mol  1000 mL

3,8 x 10-3 mol 38 mL

3,8x10-3 mol 40 ml

0,095 mol  1000 ml

Concentración de ácido

0,1 mol  1000 mL

2x10-4 mol  2 ml
2x10-4 mol  40 ml

5x10-3 mol  1000 mL

Se realizará las mismas operaciones para las siguientes muestras.

Se procede a determinar el pH teórico mediante la ecuación de Henderson Hasselbalch:

pH teórico = 7,2 + log (0.095 / 5x10-3) = 8,47

Se realizará las mismas operaciones para las siguientes muestras

REACTIVOS 1 2 3 4 5 6
K2PO4 0,1 (mL) 38 36 28 20 12 4
KH2PO4 0,1 (mL) 2 4 12 20 28 36
pH pràctico 8,36 8,02 7,4 6,93 6,61 5,94
pH teòrico 8,47 8,15 7,58 7,2 6,83 6.24
diferencia de pH 0,11 0,13 0,18 0,27 0.22 0,3

CUESTIONARIO

PREGUNTA 3

Describa la preparación de 5L de un tampón acetato 0,3 M pH 5 partiendo de acetato de sodio

trihidratado CH3COONa.3H2O (PM = 136) y ácido acético 2,5 M

pH= pKa +log [S]/ [A]

5=4, 74+log [S]/ [A]
0.26=log[S]/[A]
1.82= [S]/[A]
[B] = [S] + [A]
0.3 = 1.82 [A] + [A]
[A]=0.11
[S]=0.19
CONCENTRACION DE ÀCIDO CONCENTRACIÒN DE LA BASE
0.11 moles 1000ml 0,19moles  1000ml
X = 0,55 moles  5000ml X= 0,95moles  5000ml
PREGUNTA 4
¿Cuál será el pH de un buffer “X” si la concentración de ácido es de 0,225M y sal 0,550M con
un Ka 1,4x10-3 teniendo un volumen de 250 ml? y si ese volumen fuera la mitad. ¿Cuál sería el
nuevo pH?

Para el ácido Para la base:

0,225moles  1000ml 0,55moles 1000ml
0,06 moles  250ml 0,14 moles  250ml
pH =pKa +log[S]/[A]
2,85+log(0,14/ 0,06)
pH=3,21
Respuesta:
El pH sería 3,21, y si el volumen fuera la mitad, el nuevo pH no variaría.