UNIVERSIDAD TECNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERIA EN ALIMENTOS

INGENIERIA BIOQUIMICA
INGENIERÍA GENÉTICA

NIVEL: Octavo BQ PARALELO: “U”

TEMA:

Las levaduras son organismos importantes para el campo industrial como alimentos.
Hay alrededor de 350 especies reconocidas de levadura, pero solo los que tienen gran
importancia son Saccharomyces y Candida en costos.
En ingeniería genética de levadura ha ido avanzando mediante la técnica de ADN
recombinante, donde se produce vectores de clonación de ADN, lo cual a llevado
grandes ventajas como mejora las cepas que se utilizan en la fermentación, pueden
producir grandes proteínas que son comercialmente importantes. Para ello se debe
hacer técnicas o procesos para la clonación de genes de levadura como la
Transformación, que es un proceso en donde las moléculas de ADN se unen in vitro y
se insertan en las células vivas, que pueden mantenerse y replicarse. Para este proceso
se necesita de un ADN suplementado exógenamente y expresan genes de ADN para
cambiar o efectuar e fenotipo de la células receptoras. Este método depende de
métodos artificiales con el fin de introducir productos de manipulación de ADN in vitro
en células.
Las levaduras tienen una capa gruesa que, a compuesta de polisacáridos, manano y
glucano, componentes lipídicos, lo esferoblastos se preparan mediante la eliminación
de la pared celular con mezcla de β-glucanasas. Glusulasa ntro de los componentes
beneficiosos utilizar glusulasa y helicasa porque la digestión excesiva es prácticamente
imposible con estas enzimas. Otros componentes que se deben tener cuidado como la
zimolasa y liticasa para regular el metabolismo celular, lo que resulta mala regeneración
de los esferoblastos. Para sensibilizar la pared celular a la posterior degradación
enzimática se usa el tratamiento previo de células de levadura con un agente reductor
como el 2-mercaptoetanol, donde disminúyelos puentes disulfuro.
La coprecipitación de esferoblastos tratados con calcio y la transformación del ADN con
polietilenglicol promueve la absorción de ADN desnudo. Simultáneamente, incrustando
los esferoblastos en una matriz sólida compuesta de un 3% de agar y medio selectivo,
que permite solo el crecimiento de células transformadas, la regeneración de la pared
celular y la selección de colonias transformadas se realiza. Sobre la base del ADN
particular y la cepa de reclusión utilizada en la transformación, las colonias se producen
en el agar dentro de dos a siete días.

VECTORES DE CLONACIÓN DEL LEVADURAS

Entre dos huéspedes alternativos, la capacidad de mantener genes clonados beneficia

a los experimentadores aprovechando las propiedades particulares de cada huésped y
sus mutantes, los experimentadores realizan manipulaciones en el ADN clonado. Por lo
tanto, los vectores que se utilizan actualmente en la clonación de genes en levaduras
son hibridas. Estos híbridos están compuestos de un ADN de bacteriófago o de plásmido
bacteriano y secuencias de ADN de levadura. Para un segmento de ADN purificado
generalmente usa un sistema de plásmidos, ya que proporcionan alta purificación de las
secuencias de ADN clonadas y la simplicidad de la manipulación de ADN plasmídico y
es la mejor opción de vectores para eliminación de genes de levaduras

En los vectores de integración de levadura (generalmente llamados Ylp), está presente

un vector de clonación bacteriana. Este vector podría ser un plásmido, bacteriófago o
cósmido junto con un gen de levadura adecuado. Este vector de clonación puede
producir genes de levadura y eficiencias, siendo del orden de aproximadamente 1 a 10
transformantes por microgramo de ADN de vector.

Además, al co-transformar la levadura con un vector YIP y un vector de replicación

extracromosómica, la ficticia de la transformación puede aumentar. Si las secuencias de
ADN son comunes en el vector, entonces puede ocurrir una recombinación entre ellas.
Esto se traduce en una única molécula de replicación extracromosómica. Dentro de las
ventajas tenemos que entre los dos vectores solo se necesita tener marcadores
seleccionables de levadura, proporciona una manera fácil y adecuada de introducir
genes en levaduras. Para el análisis genético y la manipulación de genes en la levadura,
los vectores integradores de la levadura son herramientas de excepcional utilidad. Con
el fin de mapear los genes clonados y proporcionar la posibilidad de mutar genes
estructurales de levadura de una manera definida, se ha utilizado la integración
específica y el mecanismo de escisión de los vectores Ylp.

Los vectores de replicación extracromosómica en la levadura tiene la capacidad de los

vectores de clonación para replicarse de manera extracromosómica se confiere
mediante secuencias especiales de levadura. Estas secuencias se derivan de 2
micrones. El cirele de 2 micrones de levadura. ADN plasmídico o nuclear. Existen casos
como el de las cepas de S. cereulsiae en total no consisten en un plásmido endógeno
que se llama plásmido de 2 micras o Scp1. Se replica independientemente de los
cromosomas en cada una de las 50 a 100 copias de la célula del plásmido, y parece
que se replica bajo control nuclear y recientemente se han construido mini cromosomas
artificiales, este contiene un vector de levadura que consiste de un origen de replicación
cromosómico o plásmido, además de las secuencias de ADN que aparentemente son
derivado de centrómeros de levadura. Estos plásmidos se comportan como grupos de
enlace adicionales heredados de forma estable en la mitosis y la meiosis.

Otra aplicación es el diseño de los cósmidos de levadura donde logra una clonación
conveniente de grandes fragmentos de ADN en E. coli y su transferencia a la levadura.
Para establecer bibliotecas de genes de genomas eucarióticos complejos a partir de
microgramos de ADN, la recuperación de clones recombinantes que llevan grandes
inserciones de ADN es relativamente alta.

Dentro de las aplicaciones y una de las ventajas es que si al utilizar la tecnología de las
industrias de elaboración de cerveza y fermentación, la levadura se puede producir en
grandes cantidades y se puede obtener una gran cantidad de productos a bajo precio
con alta pureza

Bibliografía:

Ingeniería de levaduras. Capítulo 13.