UN RETO PARA LA

CITRICULTURA ESPAÑOLA:
EVITAR HUANGLONGBING
(HLB), LA ENFERMEDAD MÁS
DESTRUCTIVA DE LOS
CÍTRICOS

MARÍA MILAGROS LÓPEZ

INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS (IVIA)

PROTECCIÓN DE LOS PAÍSES PRODUCTORES DE
CÍTRICOS DE LA U.E. FRENTE A LA
INTRODUCCIÓN DE NUEVAS ENFERMEDADES
(DIRECTIVA 200/29/EEC)
ü  PLANTAS O MATERIAL DE REPRODUCCIÓN:
  Prohibición de importación de plantas o material de
reproducción de países terceros.
  Importación autorizada con fines científicos (Directiva 77/93/
ECC), en España sólo a través de la Estación Nacional de
Cuarentena de Cítricos.
  Aplicación de las normas FAO/IPGRI, (análisis de virus,
fitoplasmas, bacterias y hongos).

ü FRUTOS:
  Inspecciones nacionales y locales de frutos importados de
países terceros
  Libre circulación entre los países de la U.E.

I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
 ENFERMEDADES DE LOS CÍTRICOS
CAUSADAS POR BACTERIAS DE
CUARENTENA SEGÚN LA DIRECTIVA
2000/29 DE LA UE.

ü  CANCROSIS: causada por

Xanthomonas citri subsp.citri

ü  CLOROSIS VARIEGADA: causada

por Xylella fastidiosa

ü HUANGLONGBING
(antes GREENING): causada por
Candidatus Liberibacter spp.
I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
 BACTERIAS DE CUARENTENA
DE LOS CÍTRICOS
ü Difícil evaluación de pérdidas a nivel mundial.
ü Bacterias de cuarentena de los cítricos consideradas
como factor limitante del cultivo. No detectadas en
ningún país de la UE, ni del Mediterráneo.
ü Se diseminan a largas distancias por el transporte de
material vegetal, con síntomas o con infecciones
latentes.

Cancrosis Clorosis variegada Huanglongbing

(CVC) (Greening)
HUANGLONGBING (GREENING)
Candidatus Liberibacter spp.
ü  HUANGLONGBING (HLB):
enfermedad del brote amarillo
(China).

ü  GREENING: coloración verdosa

de los frutos (Sudáfrica).

ü  CLOROSIS ASIMÉTRICA:

síntoma foliar.

I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
 IMPORTANCIA DEL HLB
ü  Afecta a más de 65 millones de cítricos en Ásia,
África y América.

ü  Factor limitante del cultivo de los cítricos.

ü Muy sensibles: naranjo dulce y mandarino.
ü  Elevado impacto económico en todos los países.
ü  Organismo de cuarentena en la UE. No presente en
países mediterráneos.

ü  Detección en 2000 en Brasil (6.000.000 plantas

erradicadas), en 2006 en Florida (grandes pérdidas) y
en Cuba (extendido por toda la isla).
I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
 AGENTE CAUSAL DEL
“HUANGLONGBING”

Candidatus Liberibacter asiaticus

Candidatus Liberibacter africanus
Candidatus Liberibacter americanus
ü  Enfermedad descrita en 1919 en China.
ü  Citada en 40 países de Asia, África,
Oceanía, América (Brasil y 3 estados en
EEUU).
ü  Bacteria limitada al floema.
ü  No cultivable hasta 2009, Gram-negativa.
I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
 DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA DEL HLB
ü  Cepas tolerantes a la temperatura: HLB asiático y HLB
americano. Transmitido por Diaphorina citri presente en Asia
y América.

ü  Cepas sensibles a la temperatura: HLB africano.

Transmitido por Trioza erytreae, presente en África.
Detectada en Canarias.

ü Ambos son organismos de cuarentena en la UE.: lucha

obligatoria.

I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
 RANGO DE HOSPEDADORES

ü  MUY SENSIBLES: NARANJO DULCE

MANDARINO
TANGELO
ü  MENOS SENSIBLES:LIMONERO
POMELO
LIMA DULCE
KUMQUAT
CIDRO
LIMÓN RUGOSO
ü  POCO SENSIBLES: LIMA MEJICANA
POMELO
ü  TOLERANTES: Poncirus trifoliata

I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
 SÍNTOMAS DE HLB

ü  ASPECTO GENERAL

  Árboles de menor tamaño
  Seca de ramillas
  Defoliación
  Amarilleamiento
  Infección sectorial
ü  HOJAS
  Moteados
  Carencia de zinc
  Amarilleamiento internervial
  Nervios prominentes
ü  FRUTOS
  Pequeños, deformados
  Sin coloración
  Ácidos, amargos
  Semillas abortadas
  Caída de frutos I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
 Clorosis
asimétrica
Sudáfrica

J. Bové, INRA, Bordeaux, France

São Paulo J. Bové, INRA, Bordeaux, France
Behai, CHINA

J. Bové, INRA, Bordeaux, France

Brote amarillo
Naranjo dulce
parcialmente afectado
por HLB
(África del Sur)

Foto: Prof. Joseph Bové

Naranjo dulce totalmente
afectado por HLB
(África del Sur)

Foto: Prof. Joseph Bové

I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
Octubre 1999 Sin control Enero 2005

J. Bové, INRA, Bordeaux, France

 TRANSMISIÓN DE HLB

ü  Material vegetal de propagación.

ü  Vectores (Psyllidae):
- Trioza erytreae (HLB africano)
- Diaphorina citri (HLB asiático y americano)
ü  Experimental:
- Injerto
- Cuscuta

I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
(Gottwald et al. 2007)
(Gottwald et al. 2007)
(Gottwald et al. 2007)
 Diaphorina citri, vector
de HLB asiático(Martinez &
Wallace, 1967; Capoor et al., 1967)

Primeras
identificaciones
Brasil U.S.A.
D. citri 1942 1998
HLB 2004 2005

J. Bové, INRA, Bordeaux, France

 Diaphorina citri,ninfas
y adultos en lima
mexicana

Las ninfas se infectan

en árboles enfermos y
al llegar a adultos
transmiten HLB.

J. Bové, INRA, Bordeaux, France

Trioza erytreae adulto en
hoja de limonero

J. Bové, INRA, Bordeaux, France

 Limonero Limonero
Huevos
en
limonero

Lower side Nidos Upper side Ampollas

Las ninfas de Trioza erytreae Todalia sp.

producen nidos en el envés que se
corresponden con ampollas en el
haz

Limonero

J. Bové, INRA, Bordeaux, France

 CONTROL DE HLB
ü  MEDIDAS PREVENTIVAS
ü  ERRADICACIÓN
ü  PAÍSES CON HLB:
- ELIMINAR ÁRBOLES INFECTADOS (280000 árboles en
2006 en Brasil)
- ANTIBIÓTICOS: INYECCIONES CON TETRACICLINA
Y PENICILINA

ü CONTROL DE VECTORES:
- TRATAMIENTO DEL SUELO CON DIMETOATO
- ELIMINAR CUBIERTA VEGETAL
- LUCHA BIOLÓGICA
T. erytreae controlado por Tamarixia dryi
Diaphorina citri controlada por Tamarixia radiata
ü  TERMOTERAPIA: TRATAMIENTO DEL MATERIAL A 49ºC (HLB
AFRICANO)
I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
 MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE HLB
UTILIZADOS EN EL IVIA
ü Diagnóstico:
- Sintomatología
- Microscopía electrónica
- Técnicas serológicas
- Técnicas moleculares: PCR a tiempo real

ü  Dificultad actual de detección de infecciones latentes.

ü Análisis de muestras: Laboratorio de Referencia.
October 26-30, 2008. Wuhan, China.

DIRECT METHODS OF SAMPLE PREPARATION FOR

QUANTITATIVE DETECTION BY REAL-TIME PCR OFVIRUSES
AND BACTERIA IN CITRUS PLANT MATERIALS AND VECTORS
E. Bertolini, A. Moreno, E. Vidal, S.A. Lópes,
J. Peñalver, J.M. Bové, M.M. López, and M. Cambra

mcambra@ivia.es
Centro de Protección Vegetal y Biotecnología.
Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias (IVIA).
Carretera Moncada a Náquera km 5, 46113 Moncada, Valencia, Spain. I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
 PREVENCIÓN DEL HLB
ü  En España podría producir pérdidas muy elevadas.
ü  La prevención es la única medida realmente efectiva:

o  Evitar la entrada y/o diseminación de sus

vectores (Directiva 2000/29).

o  Evitar la entrada y/o diseminación de la

bacteria (Directiva 2000/29):

- Prohibición de introducir material vegetal de cualquier

zona.

- Exclusivamente a través de la Estación de Cuarentena

de cítricos

o  Vigilancia intensiva de los vectores y de las

plantas con síntomas.

ü  Colaboraciones con: INRA, Burdeos, Fundecitrus y Servicio

de Sanidad Vegetal de Tenerife.
I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
 RIESGO DE INTRODUCCIÓN DE
CANCROSIS, CVC Y HLB
ü  Importaciones clandestinas.
ü  Importación de material controlado, pero de
zonas en las que estas bacteriosis son
endémicas.
ü  Diseminación de focos de Florida por
huracanes.
ü  Dificultad del diagnóstico y de la detección
de infecciones latentes.
ü  Necesidad de prospecciones en todas las
zonas de cultivo. Erradicación precoz en caso
de detección I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
JORNADAS DE TRANSFERENCIA TECNOLÓGICA
EN CITRICULTURA 2007
EVITAR EL HUANGLONGBING (HLB), UN RETO PARA LA
SUPERVIVENCIA DE LA CITRICULTURA ESPAÑOLA

http://www.ivia.es/nuevaweb/jornadas/jornada_hbl.htm
I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
PLAN DE VIGILANCIA FITOSANITARIA
DE LOS CÍTRICOS

ü  Decreto 120/2004 y 123/2005 del gobierno valenciano.

ü  Normativa para controles en zonas de cultivo,
producción, almacenamiento o comercialización de cítricos.
ü  Complementa las inspecciones realizadas en la entrada a
la U.E. de importaciones de países terceros.
ü  Inspectores entrenados en el reconocimiento de los
síntomas.
ü  Coste: 741000 € en 2004.
ü  Plan adoptado en 2006 en todas las comunidades
autónomas.

I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
 INSPECCIONES
EN CAMPO

ü  Cuadrículas de 5 x 5 km. (2500 ha):

inspección de 9 árboles y 4 puntos adicionales.
ü  Trampas para captura de agentes nocivos.
ü  Periodicidad de inspección quincenal.
ü  Síntomas sospechosos: creación de una
zona de cuarentena alrededor.

I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
INSPECCIONES DE FRUTOS

ü  Registro de operadores comerciales de

cítricos autorizados.
ü  Controles aleatorios en almacenes,
packing houses y comercios.
ü  En caso de síntomas sospechosos:
inmovilización de la fruta, precintado de la
cámara y desinfección.
ü  Confiramación de Xcc: destrucción de la
mercancía o envío a países terceros.
I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
 AGRADECIMIENTOS Y COLABORACIONES

ü Ministerio de Medio Ambiente, Medio Rural y Marino.

ü  Plan de Vigilancia Fitosanitaria de la Conselleria de Agricultura.
ü J. Bové, S. Eveillard, INRA, Burdeos.
ü S. Lopes, Fundecitrus, Brasil.
ü T. Gottwald, J. Graham, P. Parker, USA.
ü J. Cubero, INIA, Madrid.
ü P. Llop, M. Golmohammadi, J. Peñalver, P. Moya. C. Morente,
IVIA.

I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A
MUCHAS GRACIAS

I
V
N
S
T
I
T
U
T
O
A
L
E
N
CI
I
A
N
O
D
E
N
V
EA
S
T
I
G
A
C
I
O
N
E
SG
R
A
R
I
A