DETERMINACIÓN DE COMPONENTES EN BEBIDAS ALCOHOLICAS

MEDIANTE CROMATOGRAFIA DE GASES

Delgado, Samuel1 González, Karina2

4-799-917 4-797-2380

Curso de Química Analítica II (Qm 228), Escuela de Química, Facultad de Ciencias Naturales y
Exactas, Universidad Autónoma de Chiriquí, David Chiriquí, República de Panamá.

samuel131198@hotmail.com 1 Karinamichelle231998@hotmail.com 2.

RESUMEN:
Este laboratorio tuvo el objetivo de comprender el fundamento de cromatografía en gases
y aprender el manejo de un cromatógrafo de gases. Inicialmente se explicó de manera muy
clara y concisa el fundamente de la cromatografía a gas; las partes más importantes del
cromatógrafo y sus respectivas funciones. Posteriormente, se procedió a analizar muestras
de bebidas alcohólicas como lo fueron el ron y el whisky; el cual se inyectó 1 µL de
soluciones patrón de alcoholes de la serie homóloga aplicando la técnica espacio de
cabeza, para sólo recoger el sumo del alcohol ya que los mismos tienden a volatilizarse
rápidamente. El tiempo de retención para estos patrones fueron: Metanol 4.24, Etanol 4.31,
Propanol 4.86, Butanol 7.43, Pentanol 6.86 y otros patrones que destacan grupos en estas
bebidas alcohólicas como acetaldehído y acetato de etilo con tiempo de retención de 3.48
y 5.69 respectivamente. Seguidamente se inyectó la muestra de ron y posteriormente se
imprime su dicho cromatograma, el cual los picos con mayor área que destacaron fueron el
etanol, butanol con un tiempo de retención de 6.10 y 8.13 respectivamente. Continuando
se inyectaron las muestras de whisky (Chivas Regal y Teachers), en el cual el
cromatograma se destacó los picos de etanol y butanol con un tiempo de retención (5.93 y
8,03) y (6.28 y 8.13), para acetaldehído (3.52 y 3.63) y acetato de etilo (5.95). Concluimos
que la cromatografía de gases es una técnica que proporciona una alta eficacia al momento
de la separación de compuestos orgánicos e inorgánicos térmicamente estables y volátiles.
PALABRAS CLAVES: MARCO TEORICO:

Detector, columna, cromatograma, retención. La cromatografía de gases (GC) es una técnica

analítica de uso muy extendido. Empleado para
determinar la composición de una mezcla de
OBJETIVOS: productos químicos (muestra), un cromatógrafo
de gases utiliza diversos gases en su operación
 Comprender el fundamento de en función del analizador y del tipo de detector
cromatografía en gases. concretos. El uso del gas especial y el equipo
 Aprender el manejo de un cromatógrafo correctos cuando realice una cromatografía de
de gases. gases mejorará considerablemente la precisión
 Determinar contenido de distintas de sus resultados analíticos.
muestras alcohólicas. (Barquero,2006).
MATERIALES, EQUIPO Y REACTIVOS: Esquema No 1: Inyectar patrones.

Material Capacidad Cantidad

Microgeringuilla 10 μL 1
Hojas de - 8 Prepara patrones
papel
Equipo
Cromatógrafo - 1
abrir gases.
de gas
N,H, aire
Impresora - 1
encender cromatografo y
ordenador

seleccionar
determinar
metodo de
el flujo
trabajo

Reactivo Cantidad Concentración inyectar con

ajustar T del
Metanol Sumo Puro una
detertor, inyector
microjeringui
Etanol Sumo Puro y columna
lla
Propanol Sumo Puro
Butanol 1μL Puro repetir
tomar muestra de
Pentanol 1μL Puro con
metanol (solo
Acetaldehído Sumo Puro etanol y
sumo)
propanol
Acetato etilo Sumo Puro
Iso propanol Sumo puro
con muestra
de butanol y
cada ves que
pentanol
se cambie de
tomar 1 μL
muestra lavar
y llevar
jeringa
hasta atras
e inyectar

Muestras Cantidad concentración imprimir

identificar
cromato-
Whisky 1μL - componentes
gramas
Chivas
Regal lavar la
realizar gráfica log
Ron 1μL - jeringa con
de t de retencion vs
etanol al
Whisky 1μL - número de carbono
finalizar
Teacher`s

FASE EXPERIMENTAL:
Esquema No 2: inyectar muestras. Grafica No.1:Log de tiempo de retención Vs
número de carbonos.
Preparar el
cromatografo como Log de tiempo de retención vs
se menciona antes
Números de carbonos
inyectar 0.9

log del tiempo de retención

ajustar temperaturas de
con 0.8
inyecto, detector,
microjerin
columna 0.7
guilla
0.6
tomar 1μL de ron 0.5
y llevar hasta 2 inyectar 0.4
μL y = 0.0259x + 0.596
0.3 R² = 0.8981
0.2
identificar
imprimir 0.1
componentes en
cromato- 0 1 2 3 4
relacion con los
grama
patrones número de carbonos

Cromatograma No 1: Muestra de Whisky

RESULTADOS: Chivas Regal.
Cuadro No 1: Tiempo de Retención de los
patrones.
Tiempo de
Patrón
retención
Metanol 4.24, 5.65
Etanol 4.31
Propanol 4.86
Butanol 7.43
Pentanol 6.86
Acetaldehído 3.48
Acetato de etilo 5.69
Isopropanol 6.07

Cuadro No 2: Parámetros utilizados en la

cromatografía de gas
Parámetros
Temperatura
60°C
inicial
Tiempo inicial 1 min a 60°C
Temperatura rate 10°C/min
Temperatura final 200°C
Tiempo final 3 min
Detector (FID) 250°C
Inyector 250°C
 Cromatograma No 3: Muestra de Ron añejo
carta vieja.
Cromatograma No 2: Muestra de Whisky
Teacher`S

CUESTIONARIO:
1. ¿cuál es el punto de ebullición de los
hidrocarburos utilizados?
R/:

Alcohol Punto de ebullición

Metanol 64.7 °C
etanol 78.37 °C
propanol 97 °C
butanol 107.7 °C
pentanol 138 °C
Isopropanol 83ºC
 2. ¿investigar la viscosidad del helio y el
nitrógeno?

R/: Los gases a diferencia de los líquidos

aumentan su viscosidad con la temperatura.
Esto se debe principalmente a que se aumenta
la agitación o movimiento de las moléculas y
además los toques o roces con actividad y
fuerza a las demás moléculas contenidas en
dicho gas.

Gases Viscosidad
Helio 0,00019
Nitrógeno 0,00018

El whisky es una bebida alcohólica obtenida por

la destilación de la malta fermentada de
cereales como cebada, trigo, centeno y maíz, y
su posterior envejecimiento en barriles de
madera, tradicionalmente de roble blanco. Esta
bebida alcohólica se comercializa con un
contenido alcohólico de entre 40 y 62 % de
volumen.

3. Buscar los componentes principales

del whisky y el ron añejo
R/: El ron es una bebida alcohólica,
elaborada a partir de la caña de azúcar o de
melazas por fermentación. A continuación,
el producto es destilado a altas
temperaturas usando alambiques de cobre
o de acero inoxidable para obtener un alto
contenido de etanol. El destilado resultante
es diluido entonces con agua pura
desmineralizada hasta alcanzar una
concentración de etanol de entre el 35 y
40%. Posteriormente, de forma opcional, es
sometido a procesos de añejamiento,
generalmente en barricas de roble.
DISCUSIÓN:
Inicialmente se procedió a conocer el concepto
de la técnica, partes (importantes) y funciones
del cromatógrafo de gas. Según (Ozores, 2016).
En cromatografía de gases la muestra se
volatiliza y se inyecta en la cabeza de una
columna cromatográfica. La elución se produce
por el flujo de una fase móvil que es un gas
inerte, y a diferencia de la mayoría de los tipos
de cromatografía, la fase móvil no interacciona
con las moléculas del analito; su única función
es la de transportar el analito a través de la
columna.
Por esta razón, la cromatografía de gases se
emplea cuando los componentes de la mezcla
problema son volátiles o semivolátiles y
térmicamente estables a temperaturas de hasta
350-400ºC. En cambio, cuando los compuestos
a analizar son poco volátiles y/o termolábiles, la
técnica separativa adecuada suele ser la
cromatografía líquida de alta resolución (HPLC).
Hay dos clases de cromatografía de gases:
cromatografía de gas-sólido (de adsorción) y
cromatografía de gas-líquido (de partición). De
ellas, la más importante es la cromatografía de
gas-líquido (GLC, gas-liquid chromatography),
usada en la forma de una columna capilar.
(Moore, 1978).
Posteriormente se comenzó a explicar las
partres más importantes del cromatógrafo y por
las partes por la que la muestra pasaba.
Sistema del gas transportador:
Al gas de la fase móvil en la cromatografía de
gases se le llama gas transportador y debe ser
químicamente inerte. El helio es la fase móvil
más común, aunque también se utiliza argón,
nitrógeno e hidrógeno. Estos gases están
disponibles en tanques presurizados. Para
controlar la velocidad de flujo del gas se
requieren reguladores de la presión,
calibradores y medidores de flujo.(Harvey,
2000). Tradicionalmente, las velocidades de
flujo en los cromatógrafos de gases eran
reguladas controlando la presión de entrada del
gas. Se utilizaba un regulador de presión de dos
etapas en el cilindro del gas y algún tipo de
regulador de presión o regulador de flujo
montado en el cromatógrafo. Por lo general, las
presiones de entrada van de 10 a 50 psi (lb/in2)
por encima de la presión ambiental, dando
velocidades de flujo de 25 a 150 mL/min con
columnas empacadas y de 1 a 25 mL/min con
columnas tubulares abiertas. (Higson, 2007).
Sistema de inyección de muestra:
Para una alta eficacia de columna, una muestra
de tamaño adecuado debe ser introducida como
un “tapón” de vapor. Una inyección lenta o
muestras de gran tamaño provocan
ensanchamiento de banda y pobre resolución.
Se utilizan microjeringas calibradas, para
inyectar muestras líquidas a través de un
diafragma de goma o de silicón, o septo, en un
puerto calentado para la muestra localizado en
la parte superior de la columna. (Skoog et all,
2005).
Para columnas analíticas empacadas de
manera ordinaria, el tamaño de las muestras va
desde unas pequeñas décimas de microlitro
hasta 20 µL. Las columnas capilares requieren
muestras que sean menores por un factor de
100 o más. Para estas columnas, a menudo se
necesita un separador de la muestra para llevar
una fracción pequeña conocida (1:100 a 1:500)
de la muestra inyectada, mientras que el resto
es enviado a los desechos. (Christian, 2009).
Tipos de Columna: La que poseía el
cromatógrafo utilizado era una columna capilar.
Columna capilar: Las columnas capilares tienen
las ventajas de una alta resolución con máximos
muy delgados, tiempos de análisis cortos y gran
sensibilidad (con los detectores modernos),
pero se sobrecargan con facilidad cuando la
muestra es demasiada. Con inyectores con
derivación (para hacer circular sólo parte de la
muestra) se resuelve en gran parte el problema
de sobrecarga. Estas columnas se fabrican con
sílice fusionado delgado (SiO2) recubierto en el
exterior con un polímero de poliimida para
soporte y protección de la frágil capilaridad del
sílice, lo que permite que puedan enrollarse.
(Bolaños, 2003).
Las columnas pueden tolerar una cantidad
determinada de analito antes de sobrecargarse,
causando distorsión y ensanchamiento de los
máximos, y desplazamientos en los tiempos de
retención. El intervalo de capacidad de la
muestra va de unos 100 ng para una columna
de 0.25 mm de diámetro interno y una película
de 0.25 µm de espesor, hasta 5 µg para una
columna de 0.53 mm de diámetro interno con
una fase estacionaria de 5 µm de espesor,
aproximadamente. (Laitinen, 1982).
Fase estacionaria: Las fases se seleccionan de
acuerdo con su polaridad, teniendo en cuenta
que “lo semejante disuelve a lo semejante”.
Esto es, una fase estacionaria polar interactúa
más con los compuestos polares, y viceversa.
Se debe seleccionar una fase en que el soluto
tenga cierta solubilidad. Las fases líquidas no
polares en general no son selectivas, porque
hay pocas fuerzas entre el soluto y el disolvente,
y así las separaciones tienden a seguir el orden
de los puntos de ebullición de los solutos, y
primero se eluyen los de menor punto de
ebullición. Las fases líquidas polares presentan
diversas interacciones con los solutos, como
interacciones entre dipolos, enlaces de
hidrógeno y fuerzas de inducción, y no
necesariamente hay la misma correlación entre
elución y volatilidad. (Valcárcel, 1988).
Continuando el laboratorio se menciona a los
detectores para cromatografía de gases, siendo
el FID (detector de ionización de flamas)
utilizado en esta experiencia.
La respuesta (cantidad de iones recolectados)
depende de la cantidad de átomos de carbono
en la muestra y del estado de oxidación del
carbono. Aquellos átomos que se encuentran
oxidados por completo no se ionizan, y los
compuestos que tienen la mayor cantidad de
carbonos en estado de oxidación bajo producen
las señales más grandes. Este detector tiene
una sensibilidad excelente y permite medir
componentes en concentraciones de partes por
mil millones.
Sin embargo, el intervalo dinámico es más
limitado y la cantidad de muestra líquida se
restringe a 1 µL o menos. El gas acarreador
tiene poca importancia relativa. Los que se usan
con más frecuencia son el helio, el nitrógeno y
el argón. El detector de ionización de flama es
insensible a la mayor parte de los compuestos
inorgánicos. (Serrano, 1999).
Seguidamente, se realiza la selección de
temperatura (a temperatura programada).
Las separaciones se facilitan con la
programación de la temperatura, y la mayor
parte de los cromatógrafos de gas tienen
capacidad para programarla. La
temperatura se hace aumentar
automáticamente con una rapidez
predeterminada durante la corrida del
cromatograma; este aumento puede ser
lineal, exponencial, escalonado, etc. De
esta forma los compuestos eluidos con
mayor dificultad se pueden eluir en un
tiempo razonable sin forzar a los demás
para que salgan demasiado rápido de la
columna. (Burget et all, 1999).
Posteriormente se inyectaron los patrones
(alcoholes que iban del metanol al pentanol
y otros tipos de compuestos como esteres y
aldehídos; mismos que poseen el whisky).,
estos de manera de espacio de cabeza,
esto con el fin de poder identificar luego el
tipo de compuesto según el área y tiempo
de retención con respecto a sus patrones;
que dicho whisky o ron poseía y sus
impurezas.
Análisis espacio de cabeza: En éste se
permite que una muestra en una ampolleta
sellada llegue al equilibrio a una
temperatura fija, por ejemplo 10 min, y
entonces el vapor en equilibrio sobre la
muestra se extrae e inyecta al cromatógrafo
de gases. Se inserta en él la aguja de una
jeringa para sacar una porción de 1 mL, o
bien se deja que el vapor a presión se
expanda en un contenedor de muestra de 1
mL a presión atmosférica para después
barrer el contenido de éste con un gas
acarreador auxiliar hasta el inyector del
cromatógrafo de gases.(Cipren, 1973).
Análisis e interpretación del cromatograma
Cromatograma y su Interpretación
Según (Dabrio, 1971). Los siguientes
términos son los utilizados en un
cromatograma típico y recomendados por la
IUPAC:
 Line Base
 Pico Cromatográfico
 Base del Pico
 Área del Pico
 Altura del Pico
 Ancho del Pico
  Ancho del Pico a la mitad de la Altura  Corte y Pesada: Esta técnica
requiere recortar el pico del
Medida de la Altura ó Área de Pico cromatograma, luego pesarlo en
 Altura del Pico: Medida que se una balanza analítica. El recorte y
efectua, para cada pico de interés, pesada depende mucho de la
desde la línea base hasta el máximo habilidad del operdor. Pueden
del pico. introducirse errores por cambios en
Los errores de malas mediciones se pueden la humedad del papel, la grasa de
atribuir a: las manos del operador,
homogeneidad del papel.
 Insuficiente Resolución Generalmente se recomienda
 Variaciones en la línea base utilizar una fotocopia del
 Picos extremadamente pequeños cromatograma para no destruir el
 Las desviaciones en la línea base se original.
pueden compensar por interpolación  Integración Automática
de ésta entre el prinpio y el final del  Electromecánica
pico.  Electrónica

Área del Pico. Análisis Cualitativo

Según (Galen, 1969). Existen varias
técnicas para la determinación del Área de
un Pico Cromatográfico:
 Integración Manual
 Métodos Geométricos
 Triangulación: En esta
técnica se trazan líneas
tangentes a cada lado del
pico. La altura se mide
desde la línea base hasta la
intersección de las dos
tangentes. El ancho se mide
tomando la intersección de
las dos líneas tangentes con
la línea base. Luego se
utiliza la fórmula
A=1/2*Altura del Pico* Base
del Pico. Las limitaciones de
esta técnica estan en el
trazado de las líneas
tangentes, un pequeño error
al trazar las tangentes
puede afectar la medida de
la altura.
Altura por ancho a la mitad de la Altura:
Métodos Mecánicos
 Planimétricos
Según (Freemann, 1979). Los
procedimientos para identificación de los
picos cromatográficos podemos dividirlos
en dos categorías:
Identificación Cromatográfica
 Por Datos de Retención
 Por Serie Homólogas (Indices de
Retención de Kovacs)
 Identificación No Cromatográfica
 Análisis Clásicos
 Identificación por:
 Adición de Estándar
 Formación de Derivados
 Sustracción de un
Componente
 Identificación con Técnicas
Auxiliares: UV, IR, MS, RMN
Por otra parte, el tiempo de retención de las
muestras también se ve afectada por el peso
molecular de las mismas, a mayor peso
molecular mayor será su tiempo de retención
(Harris, 2003). Al construir el gráfico 1 de tiempo
de retención en función del número de
carbonos, podemos observar un
comportamiento lineal de la curva, lo que nos
corrobora el hecho de que la retención de la
muestra por la fase estacionaria guarda
estrecha relación con el número de carbonos y
por ende con el peso molecular.
CONCLUSIONES:
 Comprendimos que la cromatografía de
gases es una técnica que proporciona
una alta eficacia al momento de la
separación de compuestos orgánicos e
inorgánicos térmicamente estables y
volátiles.
 Determinamos que el tiempo de
retención de las muestras se ve
afectada por el peso molecular de las
mismas, ya que a mayor peso molecular
mayor será su tiempo de retención.
 Identificamos que la cromatografía de
gases tiene ciertas limitaciones para el
análisis cualitativo ya que sólo pueden
manipularse muestras volátiles y a
menudo en necesario eliminar
interferencias en la muestra.
 Concluimos que la columna es el
componente más importante en el
cromatógrafo ya que es donde se da la
separación de los componentes.
 Comprobamos que la separación de la
mezcla se realiza dentro de la columna,
por lo tanto, es la parte más importante
del cromatógrafo y su elección depende
de su capacidad de carga y los valores
de los flujos del gas portador.
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 Christian, G. (2009). Química Analítica.
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Editores, México.
 Higson, S. (2007). Química Analítica. 1ª
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 Harvey, D. (2000). Química Analítica
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Segunda edición. España.
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